心房颤动患者心房肌Ca2+调控蛋白基因的表达变化

目的:探讨心房肌细胞内Ca2 超负荷及Ca2 调控蛋白在心房颤动(AF)时心房肌电重构中的作用。方法:测定10例慢性AF患者和6例对照组心房肌细胞内Ca2 含量和细胞膜L型Ca2 通道、肌浆网钙泵、磷酸受纳蛋白、兰尼硷受体和肌集钙蛋白的mRNA和蛋白质表达。结果:与对照组比较,AF患者心房肌细胞内Ca2 含量提高4.4倍;细胞膜L型Ca2 通道mRNA表达下调33%;肌浆网钙泵mRNA和蛋白质表达分别减低34%和27%;兰尼硷受体mRNA下调21%(P<0.05～0.001);磷酸受纳蛋白mRNA和蛋白质表达及肌集钙蛋白的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:频率相关的细胞内Ca2 超负荷可能是AF电重构的始动因素,心房肌Ca2 调控蛋白异常是Ca2 超负荷的分子生物学机制,在AF的发生和发展中起重要作用。     

心房颤动对心房组织肌浆网钙调控蛋白mRNA表达的影响

目的 :探讨心房颤动 (房颤 )对心房肌浆网 (SR)钙调控蛋白mRNA表达的影响。方法 :36例风湿性心脏瓣膜病患者 ,心脏外科手术时取右心耳组织。通过逆转录 聚合酶链反应技术 ,以GAPDH为内参照 ,测量SR的钙调控蛋白mRNA表达量。结果 :与窦性心律和持续 6个月以内的房颤患者相比 ,持续 6个月以上的房颤患者心房组织SR的Ca2 + ATPase和兰尼碱受体的mRNA转录水平均明显降低 (P均 <0 .0 1) ,磷酸受纳蛋白和肌集钙蛋白的mR NA转录水平无显著改变 (P均 >0 .0 5 )。结论 :长期房颤可引起心房SR的Ca2 + ATPase和兰尼碱受体基因转录下调 ,这可能是心房电重构和房颤后心房功能不全的分子机制之一。     

心房颤动犬心房肌 Calpains mRNA 与蛋白表达改变的研究

目的观察长期心房快速起搏诱发房颤犬心房肌CalpainⅠ、CalpainⅡmRNA和蛋白表达情况。方法RT-PCR和Western-blot方法检测对照组及房颤组犬心房肌CalpainⅠ和CalpainⅡmRNA及蛋白表达情况;光镜、电镜下,观察心房肌病理组织学和超微结构改变。结果房颤组犬心房肌CalpainⅠmRNA和蛋白表达较对照组犬显著上调（P〈0.01,P〈0.05）;房颤组犬心房肌肌溶解明显。结论房颤组犬心房肌CalpainⅠmRNA和蛋白表达显著增加,可能通过引起心房肌肌溶解参与导致房颤心房结构重构。     

胆汁淤积时肝细胞膜转运蛋白转录及其转录后的调控

正常生理情况下，胆汁的形成有赖于肝细胞血窦面基底膜上的Na^＋-牛磺酸共转运多肽[sodium-taurocholate cotransporting polypeptide，NTCP／Ntcp（按国际统一标准NTCP为人类种属转运蛋白，Ntcp为啮齿类动物种属转运蛋白，下同）]，有机阴离子转运蛋白（organic anion transporting protein，OATP／Oatp），多耐药相关蛋白3（muhidrug resistance-associated protein3，MRP3／Mrp3），多耐药相关蛋白4（multidrug resistance-associated protein4，MRP4／Mrp4）和小胆管侧肝细胞毛细胆管膜上分布的胆盐输出泵（canalicular bile salt-export pump，BSEP／Bsep），多耐药相关蛋白2（muhidrug resistance-associated protein，MRP2／Mrp2），多耐药糖蛋白1（muhidrug resistance-1P-glycoprotein，MDR1／Mdr1），多耐药糖蛋白2（muhidrug resistance-2P-glycoprotein，MDR2／Mdr2），多耐药糖蛋白3（multidrug resistance-3P-glycoprotein，MDR3／Mdr3）等多种转运体来完成。转录、转录后调控失常引发的上述转运蛋白在胞膜上表达、定位的异常在胆汁淤积的发生中起了关键作用。     

肌浆网钙泵在心房颤动患者心房肌中的表达

目的研究肌浆网钙泵在调节心房颤动(AF)患者心房肌细胞内Ca2+稳态中的作用.方法慢性AF患者10例(AF组),对照组6例.采用三电极直流等离子体原子发射光电直读光谱法测定二级心房肌细胞内Ca2+含量,采用免疫组化和Western blot技术测定心房肌肌浆网(SR)钙泵(Ca2+-ATPase)蛋白质表达的变化.结果AF组心房肌细胞内Ca2+含量较对照组高4.4倍以上[(1329.63±796.57)μg/ml vs(301.67±30.89)μg/ml,P＜0.01];SR Ca2+-ATPase蛋白质的相对含量明显低于对照组(0.74±0.07 vs1.02±0.04,P＜0.05).结论慢性AF患者心房肌细胞内Ca2+超载,SR Ca2+-ATPase功能减低是细胞内Ca2+超负荷的重要因素.     

ELISA方法检测慢性心房颤动患者心房肌中SK2蛋白的表达

目的探讨慢性心房颤动患者与窦性心律患者心房组织SK2蛋白表达水平的差异。方法将22例接受体外循环手术患者常规切除的右心耳组织作为研究对象,根据心房颤动的定义将标本分为2组:窦性心律组(n=12)、心房颤动心律组(n=10),提取患者心房组织的总蛋白,采用二辛可宁酸(BCA)方法检测总蛋白浓度,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心房组织SK2蛋白水平。结果每孔上样量总蛋白为0.1mg的条件下,窦性心律组患者心房组织SK2蛋白浓度为(1.13±0.12)ng/mL,心房颤动心律组患者心房组织SK2蛋白浓度为(3.98±0.48)ng/mL,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性心房颤动患者心房肌组织SK2蛋白的表达水平明显高于窦性心律患者。     

葡萄糖转运蛋白的调控与疾病

葡萄糖转运蛋白(Glut)是红细胞上参与葡萄糖代谢并与葡萄糖代谢调控有重要关系的一个蛋白质家族。Glut介导葡萄糖入细胞的机制、限速步骤已较清楚。新近研究还表明,此家族与多种疾病,特别是与内分泌及代谢性疾病的关系尤为密切。     

慢性心房颤动对人心房肌钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ表达的影响

目的探讨慢性心房颤动对人心房肌细胞内游离Ca2 浓度、心房肌组织钙调蛋白(calmodulin,CaM)及钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calmodulin dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)表达的影响。方法用激光共聚焦显微镜技术,对急性分离的慢性风湿性心脏病伴慢性房颤或窦性心律患者的心房肌细胞内游离Ca2 浓度进行测定,同时用West-ern blot法检测心房肌组织CaM及CaMKⅡ表达的变化。结果慢性风湿性心脏病伴慢性房颤患者心房肌细胞内游离Ca2 浓度显著高于窦性心律患者[(276.38±38.12)nmol/Lvs(122.28±45.63)nmol/L,(P<0.05)]。慢性风湿性心脏病伴慢性房颤患者心房肌CaM及CaMKⅡ的表达明显强于窦性心律患者。结论慢性房颤患者心房肌细胞内存在钙超载,Ca2 /CaMKⅡ通路可能是慢性房颤心房肌的信号转导途径之一。     

心房颤动与心房肌缝隙连接蛋白变化的关系研究

目的　探讨心房肌缝隙连接 (GJ)蛋白变化与心房颤动 (房颤 )间的关系。方法　收集风湿性瓣膜病患者 2 7例 ,先心病对照 3例 ,分对照、无房颤 (NAF)、阵发性房颤 (PAF)和持续房颤 (AF)组 ,术中取右心耳组织 ,采用Westernblot方法在纤维膜上显示Cx43和Cx40特异性条带 ,分析条带显色强度判断Cx含量 ,进行组间t检验。结果　Cx43在NAF组和AF组间差异无统计学意义 (P =0 76)。Cx40在膜上的显色比Cx43浅 ,在NAF组和AF组间显示出差异有统计学意义 (P =0 0 0 1 ) ,在PAF组显示出升高趋势。Cx40在左房径 >5 0mm者与左房径≤ 5 0mm患者相比无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　Cx40在房颤患者中减低 ,其重构参与房颤的产生和维持     

卡托普利对慢性房颤实验犬心房肌Ca2+调控蛋白基因表达的影响

目的探讨卡托普利对慢性房颤(atrial fibrillation,AF)实验犬心房肌Ca2+调控蛋白基因表达的影响.方法随机将26只健康杂种犬分为3组对照组(6只)饲养8周,未作其他处置;起搏组(11只)及治疗组(9只)安置埋藏式高频率心脏起搏器(400 bpm),快速起搏犬右心耳8周,治疗组于起搏前3 d至起搏8周,每日给予卡托普利50 mg 2次/d.然后从右心房取材,测定心房肌细胞内Ca2+浓度,RT-PCR方法检测细胞膜L型Ca2+通道及肌浆网钙泵(SR Ca2+-ATPase)mRNA表达.结果8周后,对照组、起搏组、治疗组心房肌细胞内Ca2+浓度(μg·ml-1)分别为24.06±3.51、35.32±4.88、25.44±4.19,起搏组细胞内Ca2+浓度明显增加(P＜0.01);三组细胞膜L型Ca2+通道mRNA表达量分别为0.27±0.03、0.20±0.03、0.33±0.04,起搏组mRNA表达量减少,而治疗组mRNA表达量明显增高,与对照组及起搏组比较P＜0.05～0.001;三组SR Ca2+-ATPase mRNA表达量分别为0.21±0.01、0.24±0.07、041±0.08,治疗组mRNA表达明显上调(P＜0.001).结论实验犬快速起搏8周后,心房肌细胞内Ca2+超负荷,细胞膜L型Ca2+通道mRNA表达明显下调,SR Ca2+-ATPase mRNA表达无明显变化;卡托普利干预治疗可使细胞膜L型Ca2+通道及SR Ca2+-ATPase mRNA表达明显上调,从而抑制细胞内Ca2+超载.     

慢性房颤患者心房肌L型钙通道α1c亚基mRNA表达的观察

目的比较慢性房颤与窦性心律心房肌L型钙通道α1c亚基mRNA的表达改变,探讨房颤心房肌L型钙通道的离子重构特点.方法选择43例接受心脏瓣膜置换的风心病患者,慢性房颤者24例,窦性心律者19例,于体外循环建立初采集右心房游离壁组织,应用半定量RT-PCR测定α1c 亚基Ⅰ-Ⅱ跨膜区连接对应的mRNA片段表达.结果慢性房颤心房肌L型钙通道α1c亚基mRNA的表达较窦性心律心房肌无明显差异.结论房颤心房肌L型钙通道的离子重构可能与α1c亚基的亚型表达改变有关.     

慢性心房颤动降低Junctophilin-2在心房中的表达研究

目的 明确在慢性心房颤动(AF)中Junctophilin-2 (JPH2)表达变化及意义.方法 从心脏外科体外循环手术中获取21例窦性心律(SR)患者和30例慢性AF患者右心房肌组织,采用免疫组织化学方法测定心房肌组织JPH2蛋白的分布;实时荧光定量PCR法检测心房肌JPH2 mRNA水平;Western blot测定人心房肌JPH2蛋白水平.结果 免疫组织化学实验发现SR组与AF组心房肌组织上均存在JPH2蛋白表达,SR组着色更明显;AF组心房肌JPH2 mRNA水平和蛋白水平均明显低于SR组(P＜0.01).结论 慢性AF患者心房肌JPH2的表达下调可能与心房肌细胞内钙紊乱密切相关.     

房颤患者CX40基因单核苷酸多态性研究

目的探讨缝隙连接蛋白40 基因（GJA5）单核苷酸多态性在房颤发生中的作用。方法选择2012 年6～12 月南华大学附属第一医院心血管内科住院患者200 例,分为房颤组98 例（持续性发颤）及对照组102 例（窦性心律）。收集患者一般临床资料并通过经胸心脏彩超采集患者左房内径值,静脉采血提取DNA,经聚合酶链反应（PCR）及电泳法检测SNP 的位点,PCR 扩增产物纯化后直接测序查看SNP 位点;哈德温伯格平衡检验后,比较各组间基因分型和基因频率,就房颤危险因素非条件Logistic 回归分析。结果GJA5 基因rs10465885 存在A/G 多态性,房颤组等位基因A、G频率分别为0.54 和0.46。对照组等位基因A、G频率分别为0.45 和0.55。哈德温伯格平衡检验显示组间均符合其平衡,房颤组AA基因型高于对照组,AA 、GG基因型以及等位基因频率差异无统计学意义。GJA5 基因（rs10465885）AA 基因型（OR =2.49)和左房直径（OR =1.29）是房颤的危险因素, GJA5基因（rs10465885）基因型和左房直径无关。结论GJA5基因rs10465885 位点存在基因多态性, AA基因型与左房直径是房颤的危险因素。     

脂蛋白(a)在评估慢性房颤患者左心房血栓形成中的临床价值

目的 :探讨脂蛋白 (a) [Lp(a) ]在慢性房颤患者左心房血栓形成中的价值。方法 :对 6 2例慢性房颤患者实施经食道超声检查 (TEE)或二尖瓣置换术探查左心房血栓 ,同时检测血Lp(a)、D 二聚体 (D Dimer)和纤溶酶原活性 (PIg)等凝血指标 ,并对其结果进行对照性分析。结果 :(1)高Lp(a)水平患者左心房血栓检出率为 5 6 %明显高于低Lp(a)水平者血栓检出率 13 % (P =0 .0 0 13)。 (2 ) 45例慢性房颤患者经TEE检查发现左心房自发显影 (SEC)≥ 2级者 2 8例。其中 ,高Lp(a)水平者 5例 ,血栓发生率占 10 0 % ;低Lp(a)水平者 2 3例 ,发生血栓者 4例 ,血栓发生率占 17% (P =0 .0 0 135 )。 (3)血栓组D Dimer、Lp(a)水平明显高于非血栓组 ;高Lp(a)水平组D Dimer水平明显高于低Lp(a)水平组。结论 :高Lp(a)水平与左心房血栓形成高度相关 ,是慢性房颤患者左心房血栓形成的危险因子     

Polymorphisms of angiotensin-converting enzyme 2 gene confer a risk to lone atrial fibrillation in Chinese male patients

Background Growing epidemiologic evidence has indicated that genetics can predispose individuals to the occurrence of lone atrial fibrillation （AF）. The angiotensin-converting enzyme 2 （ACE2） gene has been established to be associated with hypertension and left ventricular hypertrophy. The objective of our study was to investigate the association of ACE2 gene polymorphisms with lone AF. Methods A total of 265 consecutive lone AF patients and 289 healthy controls were successfully investigated. The polymorphisms rs2106809 and rs2285666 were genotyped by polymerase chain reaction （PCR） and direct sequencing. A Logistic regression model was used to determine the odds ratio （OR） and 95% confidence intervals （CO of variations of ACE2 for lone AF. Results The T allele of rs2106809 conferred an increased risk for lone AF （OR 1.24, 95% CI 1.01-1.52, P=0.03） in males after adjustment for conventional risk factors. SNP at rs2285666 in males was not significantly different between AF patients and controls. No association was found between the two polymorphisms in the female population with lone AF. After （36.3±4.5） months of follow-up, the end point data were obtained： death （cardiac and noncardiac）, ischemic stroke, and heart failure. In the male subgroup, the associations between rs2106809 T male carriers and combined end points including ischemic stroke, heart failure, and death in our study were of significance （OR 3.6, 95% CI 1.0-13.1, P=-0.04）. Conclusions The results indicate that polymorphism at ACE2 gene is associated with male lone AF in a Chinese Han population. Lone AF males who c.arrv the. rs2106809T alle.le, are. associate.d with adverse cardiac, e.ve.nts     

Caveolin-3在心房纤颤组织中的表达

目的 探讨犬心房纤颤(atrial fibrillation,AF)模型中微囊蛋白-3(Caveolin-3)蛋白表达情况.方法 建立犬房颤(AF)模型,通过免疫荧光染色和Western blot技术检测心房快速起搏建立的犬AF模型及AF患者心房肌的Caveolin-3蛋白表达情况.结果 在犬和人房颤的心房组织,Western blot结果显示Csveolin-3蛋白表达明显降低,与非房颤组织相比P＜0.05.在犬假手术组和窦性心律的患者,免疫荧光结果显示位于心房组织细胞膜上Caveolin-3蛋白表达明显,并均匀分布在细胞膜表面;而在AF状态下,人和犬心房肌Caveolin-3蛋白表达显著降低.结论 Caveolin-3参与了AF这一临床复杂病症的发生和发展.     

慢性快速心房纤颤患者的房室结消融

目的探讨慢性快速心房纤颤(简称房颤)患者的房室结消融+心脏起搏+药物能否有效控制心室率问题.方法将3例顽固性慢性快速房颤患者均给予房室结消融,放电中出现一过性快、慢速交界性心律,说明消融有效.若消融15～60 s未出现Ⅱ度Ⅱ型或Ⅲ度房室传导阻滞(AVB)、R-R长间期≥3 s、心室率≤40次/min时,停止消融观察,如果出现上述任何一种情况,则安装心脏起搏器.结果1例患者完全阻断房室传导,心室率在38～40次/min,给予植入心室起搏(VVI)的起搏器.另2例患者未出现AVB及R-R长间期,心室率降至90～120次/min,适当用减慢心室率及强心甙药物效果显著.结论慢性快速顽固性房颤患者,用消融改良房室结+心脏起搏+药物的综合治疗方法有明显效果.