盐酸氨溴索、地塞米松产前用药对大鼠胎肺形态发育影响的对比

目的比较产前3d给盐酸氨溴索、地塞米松及单次给地塞米松对大鼠胎肺形态发育的影响。方法孕鼠12只随机分为9g／L盐水对照组和产前盐酸氨溴索3d治疗组、地塞米松3d及1d治疗组4组，每组3只。孕d19每只孕鼠取6只胎鼠肺组织，通过光镜观察及电镜技术比较2种药物及不同疗程对胎肺形态发育的影响。结果1．光镜下3个治疗组每视野肺泡计数、平均肺泡表面积均高于对照组（Pa〈0．01），平均肺泡间隔厚度均低于对照组（Pa〈0．01）。2．光镜下地塞米松3d治疗组每视野肺泡计数、平均肺泡表面积均高于地塞米松1d治疗组，平均肺泡间隔厚度低于地塞米松1d治疗组（Pa〈0．01）。3．光镜下地塞米松3d及1d治疗组每视野肺泡计数、平均肺泡表面积均高于盐酸氨溴索治疗组，平均肺泡间隔厚度低于盐酸氨溴索治疗组（Pa〈0．01）。4．透射电镜观察：治疗组Ⅱ型肺泡上皮内多见板层小体，尤以地塞米松3d治疗组更为多见，且染色深、致密，线粒体等细胞器多；对照组难见板层小体，少见细胞器。结论产前应用地塞米松、盐酸氨溴索均能显著促进胎肺发育；多次地塞米松优于单次地塞米松治疗；多次及单次地塞米松疗效均优于盐酸氨溴索治疗。     

轻度维生素A缺乏对大鼠肺发育中肺组织血小板源性生长因子A表达的影响

目的 观察轻度维生素A缺乏(MVAD)对大鼠肺发育中血小板源性生长因子A(PDGF-A)表达的影响.方法 32只清洁级SD大鼠,雌雄各半.雌鼠随机分为MVAD组(n＝10)和对照组(n＝6).MVAD组喂养维生索A(VitA)缺乏饲料,对照组喂养正常饲料.3周后雌雄鼠交配,建立MVAD孕鼠模型.高效液相色谱法检测2组雌鼠血清VitA水平和孕20d胎鼠肝脏VitA水平;测量出生1d乳鼠身长、尾长、体质量;取MVAD组和对照组出生1d乳鼠肺组织,反转录(RT)-PCR方法检测出生1d乳鼠肺脏PDGF-A mRNA的表达,免疫组织化学方法检测其PDGF-A蛋白的表达水平.应用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 MVAD组雌鼠毛色干枯,少食少动,孕鼠部分流产不孕.MVAD组雌鼠血清VitA水平显著低于对照组(P＜0.05).MVAD组孕20d胎鼠肝脏VitA水平亦显低于对照组(P＜0.05).MVAD组出生1d乳鼠身高、尾长及体质量数值均低于对照组(P,＜0.05).MVAD组出生1d乳鼠肺组织PDGF-A mRNA表达量显著低于对照组(P＜0.05);免疫组织化学检测出生1d乳鼠肺组织支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、血管内皮细胞内均可见PDGF-A蛋白表达,MVAD组PDGF-A蛋白表达量较对照组少(P＜0.05).结论 VitA在肺发育中起重要作用,MVAD引起PDGF-A的表达减少,可能是大鼠肺发育障碍的原因之一.     

表皮生长因子与地塞米松对早产大鼠肺发育的影响

目的 探讨表皮生长因子(EGF)和地塞米松(DEX)对早产大鼠呼吸窘迫综合征的防治作用.方法 将72只胎鼠随机分为EGF、DEX 2个干预组和9 g/L盐水对照组,于孕19 d剖腹取胎鼠,称取胎鼠体质量;通过光镜、图像分析观察胎鼠肺的形态结构;用免疫组织化学方法检测胎鼠肺组织表面活性蛋白A和B(SP-A及SP-B)的表达,并通过计算免疫组织化学平均灰度值比较各组SP-A及SP-B的表达.结果 EGF组胎鼠体质量与对照组比较无明显差异[(1.398 60±0.073 05)g,(1.386 30±0.037 27)g],DEX组胎鼠体质量明显低于对照组[(1.319 20±0.053 26)g,(1.386 30±0.037 27)g].光镜下EGF组与DEX组胎肺可见到明显的肺泡腔结构,对照组肺泡腔尚未发育;图像分析表明EGF组与DEX组胎肺的肺泡腔与肺泡间隔面积之比均大于对照组(Pa<0.01).SP-A及SP-B在3组中均有表达,与对照组比较,SP-A及SP-B在EGF组和DEX组中的表达强度均显著增强(Pa<0.01).结论 EGF和DEX在SD大鼠妊娠第16-18天作用于母体,均能促进胎鼠肺的形态发育和表面活性物质的合成,对早产大鼠呼吸窘迫综合征的发生具有防治作用.二种药物对胎鼠肺的影响程度无明显不同,但产前应用DEX会降低胎鼠体质量,EGF无此不良反应.     

宫内生长受限大鼠肝脏糖异生酶的表达增加与胰岛素抵抗

目的：宫内生长受限（IUGR)和成年胰岛素抵抗密切相关,但其发生机制不清楚,该研究通过检测IUGR子鼠肝脏中糖异生关键酶及可促进糖异生的转录因子的表达,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制。方法：通过孕期全程蛋白质营养不良方法建立大鼠IUGR模型,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot技术检测IUGR子鼠幼年和成年肝脏中PGC-1α mRNA和蛋白表达变化,同时检测磷酸烯醇丙酮酸羧激酶（PEPCK）和葡萄糖6-磷酸酶（G6-P酶）的mRNA表达变化。结果：①IUGR组子鼠平均出生体重4.97±0.83 g明显低于正常对照组6.54±0.52 g （P<0.01）,4周时IUGR组平均体重达到对照组平均水平,8周时IUGR组体重为152.03±13.57 g超过正常对照组的136.05±12.24 g （P<0.05）;②IUGR子鼠幼年（3周）空腹血糖和胰岛素水平与对照组没有差异,成年（8周）后IUGR子鼠出现高胰岛素血症(P<0.01),胰岛素抵抗指数（IRI）增高（P<0.05）;③与对照组相比,IUGR组3周和8周龄子鼠肝脏PGC-1α mRNA和蛋白表达明显增高（P<0.05）;同时肝脏PEPCK和G6 P酶的mRNA水平也明显高于对照组(P<0.01)。结论：IUGR鼠自幼年至成年肝脏中糖异生的关键调控因子PGC-1α的mRNA和蛋白表达增加,诱导糖异生关键酶的表达,可能增加肝脏糖异生,促进胰岛素抵抗发生。     

产前使用盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺血小板源性生长因子-A表达的影响

目的探讨产前给盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺血小板源性生长因子-A（PDGF-A）表达的影响。方法9只孕鼠随机分为盐酸氨溴索治疗组、地塞米松治疗组和9g/L盐水对照组,每组3只。分别于孕16、17、18d连续腹腔注射给药,孕19d每只孕鼠取4只胎鼠肺组织用反转录酶-聚合酶链反应（RT-PCR）检测PDGF-AmRNA表达水平,每只孕鼠取5只胎鼠肺组织用免疫组织化学法检测PDGF-A蛋白水平表达。结果1.盐酸氨溴索治疗组、地塞米松治疗组PDGF-AmRNA和蛋白表达水平均显著高于对照组（Pa〈0.01）。2.盐酸氨溴索治疗组PDGF-AmRNA和蛋白表达水平显著低于地塞米松治疗组（Pa〈0.01）。结论PDGF-A表达于胎肺组织。产前给盐酸氨溴索、地塞米松均能显著促进PDGF-A表达,PDGF-A高表达可能是盐酸氨溴索、地塞米松促胎肺成熟重要机制之一。     

孕鼠叶酸缺乏对新生大鼠肺发育及其表面活性蛋白C的影响

目的 寻找叶酸缺乏对大鼠肺发育影响的形态学证据,探讨肺表面活性蛋白C(SP-C)在孕鼠叶酸缺乏引起新生大鼠肺发育障碍中的作用.方法 采用去叶酸RHAA配方饲料喂养大鼠,建立叶酸缺乏大鼠模型.叶酸缺乏组和对照组各18只大鼠,孕早期及孕晚期分别测定其血清叶酸水平;取各组出生14 d新生大鼠右肺,常规石蜡包埋切片,用HE染色及免疫组织化学染色分别比较2组肺组织及SP-C阳性细胞的病理改变.结果 叶酸缺乏组孕鼠孕早期及孕晚期血清叶酸水平均显著低于对照组(Pa<0.05),表明叶酸缺乏孕鼠模型建立成功.HE染色显示新生大鼠叶酸缺乏组肺组织结构明显被破坏;免疫组织化学染色显示,叶酸缺乏组与对照组比较,SP-C阳性的Ⅱ型细胞明显减少,黄色染色较淡,特异性显色区域较少.出生14 d叶酸缺乏组新生大鼠SP-C阳性的Ⅱ型肺泡细胞免疫组织化学染色平均吸光度显著低于对照组(P<0.05).结论 孕期叶酸缺乏对新生大鼠肺发育造成一定影响,其机制可能是通过减少胎鼠肺组织SP-C的表达,进而影响肺表面活性物质的生成.     

汉防己甲素对于膈疝模型大鼠胎肺中血管内皮生长因子表达的影响北大核心CSCD

目的研究血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）在大鼠膈疝模型胎肺中的表达特点及规律,以及汉防己甲素（Tet）干预后的变化。方法20只健康怀孕的SD大鼠雌鼠在孕9．5d时用随机数字表法随机分为3组：即正常对照组（C组）6只;膈疝组（D组）7只;膈疝汉防己甲素组（DT组）7只。D组和DT组灌胃给予除草醚（Nitrofen125mg／只,溶于2ml橄榄油中）,C组接受等量的橄榄油,DT组于孕11--13d每天给予30mg·kg^-1·d^-1Tet灌胃,C组和D组仅给予生理盐水。分别于第16d、18d和21d麻醉下剖宫取胎鼠双肺,应用组织学观察及原位杂交方法研究VEGF在膈疝模型不同时段胎鼠肺的表达特点及规律,及应用汉防己甲素后VEGF在膈疝模型不同时段胎鼠肺的表达特点及变化规律。结果本组实验中D组18d（D18）和21d（D21）的膈疝发生率为85．2％和DT组18d（DT18）和21d（DT21）的膈疝发生率为76．7％,差异无统计学意义（P〉0．05）。C组16d（C16）、18d（C18）和21d胎龄胎鼠（C21）胎肺VEGFmRNA分光光密度（integralopticaldensity,IOD）分别为7493．4±3167．9、4024．7±2204．9和8697．4±1466．8。D组16d（D16）、18d（D18）和21d胎龄胎鼠（D21）ga肺VEGFmRNAIOD分别为15269．2±5307．5、5670．5±1588．5和8061．3±2245．7。DT组16d（DT16）、18d（DT18）和21d胎龄胎鼠（DT21）胎肺VEGFmRNAI（）D分别为10742．8±4803．5、5626．4±3231．3和11687．7±11628．7。D18与D16和D21与D16的IOD比较差异有统计学意义（P〈0．05）。VEGFmRNA阳性表达的分布特点：C16、D16与DT16的胎肺VEGFmRNA阳性表达位于呼吸道内皮细胞胞浆,尤以远端呼吸道出芽区域更为显著。C18、D18、DT18、C21、D21与DT21的胎肺支气管壁黏膜和血管壁内皮细胞、血管壁肌层可见VEGFmRNA的阳性表达。C21胎肺VEGFmRNA阳性表达部位主要位于肺泡壁和肺问质,呈网状,而D21胎肺肺泡壁和肺间质处VEGFmRNA阳性表达不明显。DT21胎肺VEGFmRNA阳性表达部位主要位于肺泡壁和肺间质,呈网状与C21近似。结论①Nitrofen可能通过抑制VEGF的表达阻碍CDH模型大鼠胎肺晚期肺泡及其血管的发育。②应用汉防己甲素对CDH大鼠进行产前干预后,可使其实验胎鼠肺内VEGFmRNA的阳性分布恢复正常。提示汉防己甲素可能通过调节VEGF的表达而改善肺的发育。③汉防己甲素可能不能阻止Nitrofen诱导大鼠膈疝形成。     

盐酸氨溴索和倍他米松对大鼠胎肺形态发育影响的对比研究

目的 探讨产前注射盐酸氨溴索和倍他米松对大鼠胎肺形态发育的影响.方法 12只孕鼠随机分成4组:盐酸氨溴索组、倍他米松1d组、3d组及对照组,每组3只大鼠.盐酸氨溴索组、倍他米松3d组从妊娠第16天起分别腹腔注射3d盐酸氨溴索100mg/(kg·d)、倍他米松O.2mg/(kg·d);倍他米松1d组在妊娠第16、17天注射生理盐水,第18天注射倍他米松0.2mg/(kg·d);对照组在同样时间连续3d注射生理盐水.在妊娠第19天将孕鼠处死后立即剖腹取仔鼠,每只孕鼠取6只胎鼠肺组织,通过光镜观察、图像分析及电镜技术比较2种药物、不同疗程对孕鼠的胎仔肺组织形态结构影响.结果 光镜下各治疗组与对照组相比肺泡间隔薄(P<0.001),呼吸膜周径及肺泡表面积均增大(P相似文献   

地塞米松对大鼠胎肺形态结构及Wnt信号转导途径的影响

目的 比较产前给予不同剂量地塞米松对大鼠胎肺形态结构及Wnt信号转导途径的影响.方法 孕鼠12只,于孕16、17、18 d,连续3 d给孕鼠腹腔注射药物,随机分为3组,每组4只.地塞米松小剂量组：地塞米松0.4 mg/(kg·d),地塞米松大剂量组：地塞米松0.8 mg/(kg·d),均用生理盐水稀释至0.5ml;对照组：生理盐水0.5 ml/d;取孕19 d胎鼠肺组织,HE染色观察肺病理学改变;RT-PCR、Western-Blot方法检测Wnt信号转导途径中Wnt7b、GSK-3β、β-catenin基因mRNA和蛋白表达.结果 (1)肺脏病理学改变：HE染色可见：地塞米松小剂量组肺泡数目为(15.6±2.1)个;大剂量组(13.2±1.6)个,对照组(20.8±2.0)个;肺泡间隔厚度：地塞米松小剂量组(11±5)μm;大剂量组(11±4)μm;对照组(13±7)μm;肺泡腔结构：地塞米松小剂量组(2483 ±1336)μm2;大剂量组(2924 ±1705)μm2;对照组(1913±764)μm2;以上各指标地塞米松组与对照组差异均有统计学意义(P均＜0.01),地塞米松大剂量组较小剂量组肺泡数目明显减少(P＜0.01).(2)地塞米松组胎肺Wnt7b及β-catenin基因mRNA的表达量均高于对照组,GSK-3β表达量低于对照组(1.1±0.6)(P均＜0.05);地塞米松组胞浆GSK-3β蛋白表达量低于对照组,大剂量组低于小剂量组;地塞米松小剂量组胞浆β-catenin的表达高于对照组,大剂量组低于对照组;胞核β-catenin蛋白表达量高于对照组.结论 产前使用地塞米松,肺泡数目减少,肺泡腔结构变大,肺泡间隔厚度变薄,周围结缔组织减少,影响胎肺形态发育;Wnt7b、β-catenin和GSK-3β基因表达异常;胎肺形态发育异常可能是通过地塞米松所致的Wnt信号转导途径障碍而发生.     

大黄对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良的影响

目的 探讨大黄对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良（BPD）的影响。方法 将64只生后4 d大鼠随机分成空气对照组、大黄对照组、高氧模型组和高氧+大黄组（n=16）。大鼠暴露于60%氧浓度中构建BPD模型。造模同时,两个大黄干预组每天给予600 mg/kg大黄提取物混悬液灌胃1次。各组大鼠于生后14 d、21 d,苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织形态学改变;分光光度计法检测丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性;RT-PCR、Western blot法检测肺组织中TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白表达水平。结果 高氧模型组大鼠肺组织出现肺泡数目减少、体积增大、结构简单化等发育受阻的表现,并随高氧暴露时间的延长损伤加重;高氧+大黄组大鼠肺组织病理改变明显减轻。大鼠生后14 d及21 d,与两对照组相比,高氧模型组放射状肺泡计数（RAC）明显减少,肺组织中SOD活性降低,MDA水平、TNF-α mRNA及蛋白水平、IL-6 mRNA及蛋白水平均升高（P < 0.05）。与高氧模型组相比,高氧+大黄组RAC明显增加,肺组织中SOD活性升高,MDA水平、TNF-α mRNA及蛋白水平、IL-6 mRNA及蛋白水平均降低（P < 0.05）。结论 大黄可能通过抑制炎症和氧化应激反应对高氧致新生大鼠BPD发挥保护作用。     

Effect of maternal vitamin-A administration on fetal lung vitamin-A stores in the perinatal rat

Vitamin A (retinol) is essential for normal differentiation and integrity of developing respiratory epithelium and its deficiency has been linked to an increased susceptibility to lung injury. Because significant vitamin-A storage occurs in the fetal lung near term in the perinatal rat, prematurely born animals deprived of adequate stores in their lungs may be susceptible to the adverse effects of vitamin-A deficiency. It would be desirable if lung vitamin-A stores could be augmented with maternal administration, but the feasibility of this strategy has not been reported. We therefore conducted this study in rats to determine whether maternal administration of vitamin A could increase the lung stores of vitamin A in the offspring. Vitamin-A-sufficient pregnant rats were given a single dose of either vitamin A (50,000 IU retinyl palmitate) or 0.9% saline solution on gestational day 16 (term = 21 days) by the intragastric route. High-performance liquid chromatography was used to measure concentrations of vitamin A and its esters in fetal and neonatal lungs and livers at times ranging from gestational day 17 through 21, and from postnatal day 1 through 14. The concentrations of vitamin-A esters in the lungs of fetuses and newborn pups of the vitamin-A-treated animals were significantly (1.7- to 7.1-fold) higher than those of the control group. This increase in the lung vitamin-A ester concentrations was seen within 24 h of maternal administration and persisted throughout the 14-day postnatal period.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

Nitrofen对膜受体STRA6在先天性膈疝大鼠模型中表达的影响

目的 研究STRA6基因在先天性膈疝胎肺中的表达特点并探讨其在CDH肺发育不良发生机制中的可能作用.方法 采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,QPCR)方法检测在妊娠D 15.5、D 17.5、D21.5的Nitrofen诱导CDH大鼠模型胎肺及正常对照组大鼠胎肺中的STRA6基因mRNA相对表达量.结果 control组:STRA6 mRNA相对表达量呈下降趋势,各时期的相对表达量分别为14.800±5.155,4.061±2.765,1.000±0.449,D 15.5与D 17.5和D 21.5相比有统计学意义(P=0.000＜0.01);Nitrofen组:STRA6 mRNA相对表达量波动.各时期的相对表达量分别为1.191±0.351、7.552±3.716、0.951±0.942、D17.5表达升高,D17.5与D15.5和D21.5相比差异有统计学意义(P=0.000＜0.01);在D 15.5,controls组与Nitrofen诱导组相比有统计学意义(P=0.000＜0.01).结论 在实验动物模型胎鼠肺发育早期(D15.5),Nitrofen干扰肺细胞表面RBP受体STRA6的表达.可能引起肺细胞吸收Vit A障碍而导致CDH肺发育不良的发生;在实验动物模型胎鼠肺发育中期(D 17.5),STRA6的表达增高,这可能是维A酸信号途径对肺细胞内的VitA水平低下的一种负反馈反应.     

Retinoic acid fails to reverse oligohydramnios-induced pulmonary hypoplasia in fetal rats

All-trans retinoic acid (ATRA) stimulates platelet-derived growth factor (PDGF)-A expression and enhances alveolarization in rat lungs. On d 16 of gestation, pregnant Sprague-Dawley rats were randomly assigned to either a retinoic acid group (intragastric ATRA at 10 mg/kg body weight) or a vehicle group. We punctured each amniotic sac, and fetuses in the opposite uterine horn served as controls. On d 21 of gestation, the fetuses were delivered by cesarean section. Rats subjected to oligohydramnios exhibited significantly lower lung weights and lung/body weight ratios, and ATRA had no effects on the body or lung weights of oligohydramnios-exposed rats. Lung PDGF-A and -B mRNA expression was significantly lower in oligohydramnios-exposed rats compared with control littermates of maternal vehicle-treated dams. Maternal retinoic acid treatment significantly increased PDGF-A and -B mRNA expression in control and oligohydramnios-exposed rats compared with all rats and oligohydramnios-exposed rats of maternal vehicle-treated dams, respectively. Rats exposed to oligohydramnios exhibited a significantly lower generation of alveolar saccules than did control rats in the maternal retinoic acid- and vehicle-treated groups. In this model, maternal retinoic acid treatment showed no positive effects on oligohydramnios-induced pulmonary hypoplasia in the pseudoglandular stage.     

高氧对新生大鼠肺caspase-3和p53基因表达及肺细胞凋亡的影响

目的探讨高氧对新生大鼠肺caspase3和p53基因表达及肺细胞凋亡的影响。方法采用SpraqueDawley新生大鼠95%氧气暴露建立高氧肺损伤模型。应用RTPCR技术检测肺组织caspase3mRNA和p53mRNA水平,凝胶电泳条带用成像系统照相分析结果。计算目的基因PCR产物条带与内参照βactin条带光密度值的比值,作为p53基因的相对表达量,结果以x±s标记,而caspase3mRNA表达量则以阳性表达或阴性表达为标记。应用脱氧核糖核酸转移酶介导的细胞凋亡标记技术(TUNEL)原位检测细胞凋亡。光镜下随机计算5个视野中500个肺细胞中的阳性细胞数,结果以x±s标记。结果新生大鼠暴露于95%氧浓度环境中24h后肺组织中p53mRNA表达中度增加(q=3.2305,P>0.05),48h后表达显著增加,与空气对照组相比差异有统计学意义(q=7.2941,P<0.05)。新生鼠高氧处理72h、96h后,肺组织p53mRNA表达又恢复到正常水平。在各空气对照组和各高氧处理组中个别新生鼠肺的caspase3mRNA有微量表达,绝大多数新生鼠肺的caspase3mRNA没有表达,差异无统计学意义。95%氧暴露7天的新生鼠肺细胞凋亡水平明显高于空气暴露组新生鼠肺细胞凋亡水平,两者比较差异有极显著的统计学意义(F=100,P<0.001)。结论在高浓度供氧下,肺组织通过暂时上调p53基因的表达,介导细胞周期停滞,阻止G0/G1期细胞进入S期,抑制细胞分裂、增殖,同时p53促进细胞凋亡,从而导致肺生长发育受阻和肺损伤。新生鼠暴露于95%氧环境中,肺组织caspase3基因基本上不表达,因此推测高氧肺细胞凋亡可能存在不经过caspase3的凋亡途径。     

D2-40 is expressed on the luminal surface of pulmonary airspaces in normal developing and adult lung but is lost in conditions associated with intra-alveolar infiltrates

The D2-40 antigen is a glycosylated sialomucin that is strongly expressed by lymphatic endothelial cells. Recently we observed the expression of D2-40 on the luminal surface of pulmonary airspaces in lung sections. The aim of the study was to assess the expression of D2-40 antigen in normal lung development and in various pathologic conditions in which abnormal alveolar infiltrates were present. Formalin-fixed lung tissue was selected from 42 fetal/neonatal autopsy cases ranging in gestational age from 12 to 41 weeks and from 10 adult lungs. In the fetal/neonatal group, 22 cases were histologically normal, whereas 20 were abnormal (including cases of pneumonia, alveolar hemorrhage, meconium aspiration, pulmonary hypoplasia, and pulmonary interstitial emphysema). In the adult group, 5 cases were histologically normal and 5 had pneumonia. Immunohistochemical staining was performed on all cases using antibody to D2-40. All cases of normal fetal/neonatal lung and normal adult lung showed diffuse strong expression of D2-40 on the luminal surface of the alveolar lining cells. D2-40 expression was also noted on the bronchiolar lining cells of normal fetal/neonatal lung. In all cases in which there was an abnormal infiltrate or foreign material within the airspaces, expression of D2-40 was lost in the alveolar lining. The production of the D2-40 antigen in the alveolar lining occurs as early as 12 weeks gestation and continues to be present throughout all other stages of lung development, as well as in adult lung. These results suggest that D2-40 may have a cell membrane protective function.     

外源性抗转化生长因子-β1抗体对新生大鼠高浓度氧致肺纤维化的影响

目的 观察不同剂量的外源性抗转化生长因子-β1（TGF-β1）抗体作用下，TGF -β1在新生SD大鼠高浓度氧（高氧，>95%O2）致肺纤维化中的表达，了解不同剂量的外源性抗TGF -β1抗体在高氧致肺纤维化中的作用。方法 将120只足月新生SD大鼠随机分为6组：空气对照组（Ⅰ组），高氧组（Ⅱ组），高氧+抗TGF -β1抗体 0.1 mg·kg-1组（Ⅲ组），高氧+抗TGF -β1抗体 0.2 mg·kg-1组（Ⅳ组），高氧+抗TGF -β1抗体 0.4 mg·kg-1组（Ⅴ组），高氧+抗TGF -β1抗体 0.8 mg·kg1组（Ⅵ组），每组20只。观察及检测高氧暴露3、7、14和28 d各组大鼠肺组织病理改变以及TGF -β1免疫组化染色。结果 Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组3和7 d时表现为明显的急性炎症改变，肺组织水肿、渗出、出血和肺泡间隔轻度增厚，14 d时急性炎症减轻，而肺组织中TGF -β1表达呈强阳性；28 d时出现明显的胶原沉积，形成纤维化。Ⅴ、Ⅵ组3、7、14和28 d时相点TGF -β1的表达明显减弱，与Ⅰ组差异无统计学意义；病理改变示早期有轻度炎症反应， 14和28 d无明显成纤维细胞增生及胶原生成，未形成肺纤维化。结论 新生SD大鼠连续吸入高氧后可导致急、慢性肺损伤。高氧暴露可刺激肺部产生过量的TGF -β1，TGF -β1是与纤维化关系最密切的TGF-β亚型，可促进成纤维细胞分化、生长和增殖。高氧暴露时给予适当剂量外源性抗TGF -β1抗体可减轻新生SD大鼠急性肺损伤，从而减轻肺纤维化。应用外源性抗TGF -β1抗体干预对高氧致肺纤维化损伤有保护作用。     

新生大鼠高氧肺损伤血管内皮生长因子蛋白及其mRNA表达变化研究

目的：血管内皮生长因子（VEGF）参与肺的发育和损伤修复,VEGF具有促进肺泡和肺血管增殖以及预防新生儿支气管肺发育不良（BPD）的作用。该研究的目的是探讨新生大鼠高氧肺损伤后肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达的变化。方法：新生Sprague-Dawley大鼠48只随机分为高氧实验组和空气对照组,高氧实验组吸入95%以上高氧建立高氧肺损伤模型。分别采用免疫组化法和逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测新生大鼠3 d,7 d,14 d肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达变化。结果：空气对照组新生大鼠生后随着肺发育,肺组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达逐渐增加。高氧实验组新生鼠吸入高氧3 d,肺VEGF蛋白表达出现降低,在7 d,14 d明显降低与对照组比较差异有显著性（VEGF 蛋白:12.67±3.82 vs 7.79±5.23; 15.10±8.91 vs 5.85±3.37, 均P<0.01）;高氧实验组VEGF mRNA表达在3 d,7 d,14 d均明显低于对照组（VEGF mRNA: 1.19±0.63 vs 0.78±0.22, 1.52±0.47 vs 0.53±0.18, 1.89±0.81 vs 0.48±0.12, 均P<0.01）。结论：VEGF能促进新生大鼠肺发育,VEGF蛋白及VEGF mRNA表达与新生大鼠肺发育有密切关系。高氧可抑制VEGF蛋白及VEGF mRNA在新生大鼠肺内的表达,VEGF在新生鼠肺发育和高氧肺损伤发病机制中起重要作用。     

维生素D调节坏死性小肠结肠炎新生大鼠肠道上皮occludin蛋白表达的研究

目的：检测坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)新生大鼠肠道上皮occludin蛋白的定位及表达情况,探索维生素D处理对NEC新生大鼠的保护作用及对occludin蛋白表达的影响。方法 SPF级不同窝别新生48 h的Wistar大鼠60只,采用随机数字表法随机分为4组：母乳喂养＋对照组10只,母乳喂养＋维生素D组10只,NEC＋对照组20只,NEC＋维生素D组20只。 NEC模型：将生后48 h的仔鼠与母鼠隔离,采用鼠乳代乳品人工喂养＋缺氧＋寒冷刺激处理;维生素D处理：分别于NEC造模前30 min,造模后1 d、2 d腹腔注射活性维生素D(帕立骨化醇)。各组大鼠分别在实验72 h后处死取材,选取回肠组织采用HE染色观察肠腔结构改变并做Nadler病理评分,采用免疫荧光染色观察occludin蛋白在肠上皮的定位和表达情况,采用Western blot方法检测肠道黏膜组织occludin蛋白的表达量并做统计学分析。结果 HE染色可见NEC大鼠的肠腔组织结构破坏,黏膜下或肌层分离,部分绒毛脱落,甚至肠绒毛消失,肠上皮脱落伴肠坏死,Nadler病理评分为(2.90±0.23)分;维生素D处理的NEC大鼠上述病理表现较NEC大鼠减轻,Nadler病理评分为(1.70±0.21)分,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。免疫荧光显示NEC大鼠肠道上皮细胞间occludin表达明显减少、稀疏,呈现不连续或点状表达,维生素D处理的NEC大鼠肠道上皮细胞间occludin表达较NEC对照组大鼠明显增多,基本呈均匀、连续的表达。 Western blot显示NEC大鼠肠道黏膜组织的occludin表达明显减少,维生素D处理可以明显增加 occludin的表达( P <0.01)。结论 NEC 模型大鼠肠道上皮紧密连接相关蛋白occludin表达明显降低,维生素D处理可以通过上调肠道上皮occludin的表达来抑制NEC的发生发展。