抗凋亡因子XIAP和PED/PEA-15在前列腺癌(PC-3)中的表达及对细胞凋亡的影响

目的 检测抗凋亡因子XIAP与PED／PEA-15在前列腺癌细胞（PC-3）中的表达，探讨二者对前列腺癌细胞凋亡的影响。方法 应用半定量RT—PCR法检测前列腺癌细胞（PC-3）中PED／PEA-15和XIAP的表达。设计并构建PED／PEA-15和XIAP特异的siRNA载体，以脂质体法转染二者的siRNA载体至前列腺癌细胞（PC-3）中，半定量RT-PCR法检测特异siRNA载体对PED／PEA-15和XIAP转录的影响；光镜观察细胞形态改变；流式细胞法检测细胞凋亡的变化。结果 半定量RT-PCR显示PED／PEA-15和XIAP均在前列腺癌细胞（PC-3）中高表达。酶切和DNA测序证实XIAP和PED／PEA-15siRNA载体构建成功。共转染XIAP和PED／PEA-15siRNA载体入PC-3细胞，可导致XIAP和PED／PEA-15的转录抑制，并增加PC-3细胞对阿霉素的敏感性，凋亡明显增加，处理组凋亡率为79％，对照组为46％，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 PED／PEA-15和XIAP在前列腺癌的凋亡中可起重要作用。     

大鼠缺氧缺血后海马神经元凋亡及凋亡抑制蛋白XIAP表达的变化

目的 探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区神经元凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的变化规律.方法选择48例新生Wistar大鼠为HIBD组,并选择12只新生大鼠分为假手术组(n=6)和正常对照组(n=6).HIBD制模后3h、6h、12h、24 h、48 h、72 h、7 d、14 d处死取材,每次处死6只,采用流式细胞技术检测3组大鼠海马神经元的凋亡率,并应用免疫组织化学染色方法检测各组海马CA1区XIAP的表达变化情况.结果 与假手术组相比,HIBD组缺氧缺血后3h海马神经元凋亡率即开始升高,但差异无统计学意义(P＞0.05);于缺氧缺血后12h凋亡率显著升高(P＜0.05),48 h时达高峰,72 h时开始下降,7d时明显低于高峰水平(P＜0.05),而与假手术组无显著差异,14 d时基本恢复至假手术组水平.正常对照组和假手术组海马CA1区有极少量XIAP阳性表达细胞.HIBD组于缺氧缺血3h时XIAP阳性表达显著升高(P＜0.05),之后逐渐升高,在48 h时达到高峰,72 h时开始逐渐下降,7d时已明显低于高峰水平(P＜0.05),但仍明显高于正常对照组和假手术组水平,在14 d时略高于正常对照组和假手术组,但差异无统计学意义(P＞0.05).XIAP蛋白表达与HIBD后各时间点阳性凋亡细胞出现呈负相关(r=-0.564,P＜0.05).结论 XIAP蛋白的过度表达在脑缺氧缺血后细胞凋亡的调控过程中起着重要作用,对HIBD损伤的脑神经细胞具有保护作用.     

X-连锁凋亡抑制蛋白在子宫颈癌组织的表达

目的 探讨XIAPmRNA表达在子宫颈癌发生发展过程中的作用.方法 通过HE染色从组织病理学上确定子宫颈组织的良、恶性以及恶性组织的分级和分期.应用RT-PCR法检测43例子宫颈癌组织和15例慢性子宫颈炎组织中XIAP mRNA的表达情况.结果 子宫颈癌组织XIAPmRNA表达的阳性率为88.37%,明显高于慢性子宫颈炎组织(46.67%),两者差异显著(P＜0.01). XIAPmRNA表达随分化程度降低而升高(P＜0.01),有淋巴转移的患者高于无淋巴转移的患者(P＜0.05);子宫颈癌组织XIAP mRNA表达与患者年龄、病理分期无关(P＞0.05).结论 XIAP与子宫颈癌发生发展有密切关系;其表达水平的检测对子宫颈癌的病理诊断及其分级有参考价值.     

乙酰肝素酶和血管内皮生长因子C mRNA的表达与肺癌侵袭和转移的分子生物学

目的研究乙酰肝素酶(HPSE)和血管内皮生长因子(VEGF)-C mRNA的表达是否与肺癌的侵袭性生长和淋巴结转移有关。方法应用RT-PCR技术检测HPSE和VEGF-C mRNA在65例肺癌组织中的表达,并与癌旁组织和正常肺组织对比,同时结合肺癌的临床病理学特征及预后进行分析。结果肺癌组织中HPSE和VEGF-C mRNA的阳性表达率明显高于正常肺组织和癌旁组织(P<0.05);不同病理类型肺癌组织中HPSE和VEGF-C蛋白阳性表达率均无显著性差异(P>0.05);不同分化程度肺癌组织中HPSE和VEGF-C蛋白阳性表达率均无显著性差异(P>0.05);Ⅲ期和Ⅳ期肺癌组织中HPSE和VEGF-C蛋白阳性表达率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05);生存3年以下的肺癌组织中HPSE和VEGF-C蛋白阳性表达率明显高于生存3年以上者(P<0.05)。结论肺癌的发生、发展可能与HPSE促血管生成和VEGF-C促淋巴管生成的协同作用有关;HPSE和VEGF-C基因表达可作为判断肺癌生物学行为和患者预后的一个参考指标。     

非小细胞肺癌组织中凋亡抑制蛋白Livin的表达及意义

目的 研究肺癌相关Livin基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达以及与p53基因的关系.方法 采用RT-PCR方法检测48例NSCLC组织Livinα mRNA的表达,用免疫组化SABC法检测livin和p53蛋白在48例NSCLC患者肺癌组织切片中的表达.结果 48例NSCLC中15例检测到Livinα mRNA表达,其阳性表达率为31.3%,而正常肺组织和癌旁及良性疾病肺组织均未检测到Livinα mRNA表达.Livin蛋白在腺癌、低分化癌、有淋巴结转移者中的表达阳性率明显高于鳞癌和大细胞癌、高中分化癌和无淋巴结转移者(P＜0.01),而癌旁组织和良性疾病肺组织未检出阳性表达.Livinα mRNA表达与p53呈正相关(r=0.457,P＜0.01);livin蛋白表达与p53呈正相关(r=0.563,P＜0.01).结论 Livin在NSCLC组织中高表达,可能成为肺癌诱导凋亡治疗的新靶点.     

下调XIAP表达增强化疗药物诱导胃癌细胞凋亡的作用

目的:观察下调X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因表达对胃癌细胞化疗敏感性的影响.方法:构建XIAP基因反义真核表达载体,稳定转染胃癌细胞株MKN-45,RT-PCR和Western blot法检测癌细胞XIAP基因表达.选用顺铂、丝裂霉素分别处理转染前后的胃癌细胞,采用MTT比色法、克隆形成抑制实验检测癌细胞体外生长活性:透射电镜、流式细胞术、TUNEL检测癌细胞凋亡及比率;Western blot和比色法检测细胞内caspase-3蛋白表达和活性水平.结果:RT-PCR和Western blot证实,稳定转染反义XIAP基因的胃癌细胞MKN-45的XIAP mRNA和蛋白表达水平分别降低84.75%(P<0.01)和89.75%(P<0.01),各浓度顺铂、丝裂霉素处理24 h后,转染反义XIAP基因的MKN-45细胞生长抑制率分别增加7.3%-25.3%(P<0.01),12.3%-16.3%(P<0.01).透射电镜下可见部分细胞发生典型的凋亡形态学改变,凋亡率分别为34.12%和32.5%,显著高于未转染对照组MKN-45细胞的凋亡率(14.2%,P<0.05).与MKN-45细胞比较,稳定转染反义XIAP基因的MKN-45细胞内caspase-3表达水平增高2.45倍(P<0.01),活性水平提高3.68倍(P<0.0 1).结论:通过反义RNA技术下调XIAP基因表达,能提高癌细胞中caspase-3的表达和活性,增强化疗药物对癌细胞的诱导凋亡作用.     

P16、P15基因蛋白与葡萄胎恶变关系探讨

目的探讨P16、P15基因蛋白与葡萄胎恶变的关系.方法采用免疫组化PV9000方法对40例葡萄胎和25例早孕患者绒毛P16、P15蛋白进行检测.结果早孕绒毛组织中P16、P15基因蛋白表达均阳性.葡萄胎中P16、P15基因蛋白阴性表达率分别为42.5%、30%,与早孕绒毛组织相比,差异有显著性(P均＜0.05).葡萄胎恶变组(7例)P16、P15基因蛋白表达均阴性者4例,占57.1%,高于无恶变组的18.2%(6/33),差异有显著性(P＜0.05);恶变组中,清宫前子宫大于妊娠月份,同时发生黄素囊肿且囊肿＞6cm,清宫后人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)持续2个月后消退者,其P16、P15基因蛋白联合阴性率高于非恶变组,差异有显著性(P＜O.05).结论葡萄胎的发生、发展与P16、P15基因蛋白缺失有关.P16、P15基因蛋白缺失有望成为预测葡萄胎恶变的指标.     

X连锁凋亡抑制蛋白在肝细胞癌中的表达及其对患者术后复发的影响

目的 探讨肝细胞癌组织中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达及其对患者术后复发的影响.方法 应用免疫组织化学方法检测72例肝细胞癌组织及其癌旁组织中XJAP的表达,分析其表达与肝细胞癌临床病理因素的关系及在患者术后复发中的意义.结果 HCC组织中XIAP阳性表达率明显高于癌旁组织(x2=7.03,P＜0.01).XIA...     

非小细胞肺癌中WWOX蛋白的表达及意义

目的 研究抑癌基因WWOX在非小细胞肺癌中的蛋白表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学二步法检测40例非小细胞肺癌石蜡标本及21例癌旁正常肺组织中WWOX蛋白的表达.结果 ①癌旁正常肺组织中WWOX蛋白阳性表达率高于非小细胞肺癌组织(85.71％ vs 37.50％,P＜0.05),鳞癌中WWOX蛋白阳性表达率与腺癌差异无统计学意义(34.62％ vs 42.86％,P＞0.05);②男性非小细胞肺癌患者癌组织中WWOX蛋白阳性表达率低于女性非小细胞肺癌患者(25.00％ vs56.25％,P＜0.05),吸烟指数≥400的患者癌组织中WWOX蛋白阳性表达率低于吸烟指数＜400的患 者(19.05％ vs 57.89％,P＜0.05),而WWOX蛋白呈阳性表达的患者年龄与阴性表达者之间差异无统计学意义(P＞0.05);③分化不良的非小细胞肺癌组织中WWOX蛋白阳性表达率与中等分化和分化良好者相近(P＞0.05);④Ⅰ+Ⅱ期非小细胞肺癌患者癌组织中WWOX蛋白阳性表达率与Ⅲ+Ⅳ期患者相比差异无统计学意义(P＞0.05),转移病例的非小细胞肺癌组织中WWOX蛋白阳性表达率与无转移病例相近(P＞0.05).结论 WWOX蛋白在非小细胞肺癌组织中表达较癌旁正常肺组织降低,且与患者性别及吸烟指数密切相关,而与年龄、病理类型、组织分化程度、临床分期以及有无转移无明显关系.     

ERCP and MRCP--when and why

Since the introduction of endoscopic retrograde cholangiopancreatography (ERCP) in the 1970s, gastroenterologists have a wide spectrum of diagnostic and therapeutic options in the biliopancreatic ductal system at their disposal. With its arrival in the 1990s, magnetic resonance cholangiopancreatography (MRCP) developed as a potent diagnostic tool in biliopancreatic pathology. Currently, MRCP is widely replacing diagnostic ERCP and thereby avoiding complications related to endoscopic technique.We summarize evidence-based data and demonstrate indications and differential indications for MRCP and ERCP in pancreatic disease. Complications related to the procedures and possible medical prevention are discussed. The feasibility of interventional endoscopy in pancreatic disease is reported in detail. The role of gastroenterologists in performing MRCP is outlined on the basis of practical examples.     

Micronutrients and infection: interactions and implications with enteric and other infections and future priorities

Symposium presentations have focused on the elegant molecular science and the biologic mechanisms by which micronutrients play critical roles in cellular and humoral immune responses, cellular signaling and function, and even in the evolution of microbial virulence. The concluding session examined the practical issues of how best to evaluate the nutritionally at-risk host, especially in the areas of greatest need-an analytical model of nutrient-immune interactions, implications of nutritional modulation of the immune response for disease, and the implications for international research and child health. This overview illustrated how malnutrition may be a major consequence of early childhood diarrhea and enteric infections, as enteric infections may critically impair intestinal absorptive function with potential long-term consequences for growth and development. The potentially huge, largely undefined DALY (disability-adjusted life years) impact of early childhood diarrheal illnesses demonstrates the importance of quantifying the long-term functional impact of largely preventable nutritional and infectious diseases, especially in children in developing areas.