阿尔茨海默病人外周血中抗淀粉样蛋白抗体的特性

目的比较AD病人和健康老年人外周血中的抗Aβ抗体特性。方法随机选择AD患者45例和健康老年人51例,①用间接ELISA法测定血清中的抗Aβ抗体滴度,②免疫组织化学ABC法观察AD病人和健康老人血清中的抗Aβ抗体与Tg2576鼠脑内老年斑的结合情况;③不同抗体水平的AD病人和健康老人的血清分别与PC12细胞培养,用MTT法检测PC12细胞的存活率。结果①AD病人和健康老人血清中的抗Aβ抗体分别为(119.78±84.50)μg/ml和(200.44±216.78)μg/ml,差异有显著性意义(P<0.05);②免疫组化发现用AD病人血清作一抗,抗Aβ抗体不能很好地显示已经形成的老年斑;③虽然AD病人血清中抗Aβ抗体较高,对PC12细胞的保护作用反而下降,且与Aβ42的剂量无相关性;而健康老人的血清仍能表现出较强的PC12细胞保护作用。结论AD病人血清中抗Aβ抗体滴度下降,与老年斑结合能力和对细胞的保护能力也下降。     

接种Aβ42全肽疫苗恒河猴的特异性体液免疫应答

目的 观察恒河猴接种Aβ42肽疫苗后的特异性抗体的产生. 方法 将5只雄性恒河猴分别在0、 2、 6、 10、 14、 18、 22 wk肌内注射Aβ42肽疫苗; 用ELISA法检测恒河猴血清抗Aβ42抗体水平及IgG亚类; 用Western blot检测血清抗Aβ42抗体的特异性; 免疫组化染色法观察抗血清对Tg2576转基因小鼠脑组织中Aβ斑的识别. 结果 疫苗接种后第8周, 恒河猴血清中出现明显的抗Aβ42抗体, 抗体水平随着接种次数的增加而升高, 第24周达1∶ 4 320, 以后抗体水平开始下降.产生的抗Aβ42抗体以IgG1和IgG2为主(IgG2/IgG1>1).血清抗Aβ42抗体具有高度特异性, 可识别Tg2576转基因小鼠脑组织中的Aβ斑. 结论 Aβ42肽疫苗可有效地诱导恒河猴产生特异性体液免疫应答.     

阿尔茨海默病患者血清中抗淀粉样蛋白抗体的免疫耐受

目的:研究阿尔茨海默病(AD)血清中抗Aβ抗体与淀粉样蛋白结合的特性。方法:以AD患者和健康老人的血清作一抗,①用组织淀粉样斑块免疫反应(TAPIR)观察与Tg2576鼠脑内老年斑结合能力;②Western blot检测与Aβ42-GST融合蛋白的结合能力;③将Aβ42与PC12细胞培养,加入健康老人和AD患者的血清后,MTT法观察PC12细胞存活率。结果:AD患者的血清中抗Aβ抗体与成熟老年斑和Aβ42-GST融合蛋白的结合能力较弱;加入AD血清后,PC12细胞的A值较健康老人血清相比下降明显(P<0.01)。结论:AD血清中抗Aβ抗体对淀粉样蛋白可能存在着免疫耐受。     

人抗Aβ_(42)自身抗体的纯化及鉴定

目的纯化并鉴定正常人血清中抗Aβ42自身抗体。方法采集正常人血清标本,测定抗体含量,用饱和硫酸铵沉淀血清得到IgG粗品,用CNBr Sephrose 4B层析柱对粗品IgG进一步纯化,采用PAGE电泳和Western blot方法鉴定IgG纯度和免疫活性。结果用CNBr活化Sephrose 4B柱可纯化出较高纯度的抗Aβ42自身抗体,纯度可达到90%。结论 CNBr活化Sephrose 4B层析柱可有效地从人血清中纯化出较高纯度的抗Aβ42自身抗体,便于对自身抗体进一步研究,为AD的免疫治疗提供更多的信息。     

血管淀粉样变性相关脑出血复发的相关因素研究

目的探讨血管淀粉样变性相关的脑出血复发的危险因素。方法收集我院2006.7～2010.1经病理证实的41例血管淀粉样变性脑出血患者的临床资料,分析影响血肿复发的危险因素。结果 CAA相关脑出血的复发率为36.6%,单因素和多因素分析显示高血压病史是血管淀粉样变性相关脑出血复发的唯一危险因素(χ2=9.22 P=0.002,OR 6.74;95%可信区间为,1.12-39.72)。结论高血压病史是CAA相关脑出血复发的重要危险因素,对CAA患者高血压的预防,早期的积极治疗有着重要的意义。     

Aβ1-15疫苗免疫接种成年恒河猴的体液免疫效应

目的：观察Aβ1-15疫苗免疫接种成年恒河猴的特异性体液免疫应答。方法： 5只雄性成年恒河猴分别在0、2、6、10、14、18、22周肌肉注射法接种Aβ1-15疫苗；ELISA法检测恒河猴血清抗Aβ1-42抗体及其IgG亚型的水平；Western blot法检测血清Aβ1-42抗体的特异性；免疫组化方法观察抗血清与Tg2576转基因鼠脑Aβ斑的识别。结果： 疫苗接种后第8周，恒河猴血清中出现明显的抗Aβ1-42抗体，抗体滴度随接种次数的增加而升高，第24周达1∶3 840，疫苗停止接种后抗体水平开始下降；血清抗Aβ1-42IgG以IgG1为主；血清Aβ1-42抗体具有高度特异性；抗血清可识别结合Tg2576转基因鼠脑组织的Aβ斑。结论： Aβ1-15疫苗可有效诱导成年恒河猴产生特异性体液免疫应答。     

Alzheimer患者血清中抗Aβ42自身抗体的纯化及鉴定

目的:纯化并鉴定阿尔茨海默病(AD)患者血清中抗Aβ2自身抗体.方法:选择AD患者做为研究对象,采集血清标本,测定抗体含量,用饱和硫酸铵沉淀血清得到IgG粗品,Aβ42免疫亲和柱层析对粗品IgG进一步分离纯化,采用PAGE电泳和Western blot方法鉴定IgG纯度和免疫活性.结果:用CNBr活化Sephrose 4B柱层析纯化出较高纯度的抗Aβ42自身抗体,纯度可达到90%.结论:CNBr活化Sephrose4B层析柱可有效地从人血清中纯化出较高纯度的抗Aβ42自身抗体,便于对自身抗体进一步研究,为AD的免疫治疗提供更多的信息.     

人抗Aβ42自身抗体的纯化及鉴定

目的纯化并鉴定正常人血清中抗Aβ42自身抗体。方法采集正常人血清标本,测定抗体含量,用饱和硫酸铵沉淀血清得到IgG粗品,用CNBr Sephrose 4B层析柱对粗品IgG进一步纯化,采用PAGE电泳和Westernblot方法鉴定IgG纯度和免疫活性。结果用CNBr活化Sephrose4B柱可纯化出较高纯度的抗AB42自身抗体,纯度可达到90％。结论CNBr活化Sephrose4B层析柱可有效地从人血清中纯化出较高纯度的抗A％自身抗体,便于对自身抗体进一步研究,为AD的免疫治疗提供更多的信息。     

微创血肿清除术治疗高血压脑出血的时机研究

目的 探讨在高血压脑出血病程中不同时期行微创颅内血肿清除术治疗的疗效差异.方法 根据高血压脑出血患者入院时病程长短不同将78例脑出血患者分为三组,分别在不同时机予以微创颅内血肿清除术治疗,对其治疗结果采用ADL分级并进行统计学检验.结果 超早期治疗组再出血发生率及死亡率高于其它组,但总体疗效优于其它组;延迟治疗组再出血发生率最低,但疗效明显差于其它组;早期治疗组疗效可,再出血发生率及死亡率较低;各组疗效差异具有显著性(P<0.05).结论 高血压脑出血病程中不同时期行微创颅内血肿清除术治疗各有利痹,根据患者的病情进展情况选择超早期或早期微创术治疗.     

环磷酰胺联合泼尼松治疗老年性SLE对患者血清各指标影响及其疗效观察

目的分析环磷酰胺联合泼尼松治疗老年性SLE对患者血清各项指标的影响,并探讨其临床疗效及安全性。方法选取我院于2012年4月至2015年4月收治的64例老年性SLE患者,在患者自愿的前提下随机分成对照组(泼尼松治疗)和观察组(环磷酰胺联合泼尼松治疗),每组32例。检测治疗前后两组患者血清免疫球蛋白A、G、M(Ig A、Ig G、Ig M)、补体C_3、C_4及抗ds-DNA抗体水平变化情况,分析两种治疗方法对上述各指标的影响,并对比两组患者的疗效及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗3个月后两组患者血清Ig A、Ig G、Ig M及抗ds-DNA抗体水平显著低于治疗前(P<0.05),补体C_3、C_4水平显著高于治疗前(P<0.05);且观察组血清各免疫球蛋白、抗ds-DNA抗体水平降低程度及补体C_3、C_4水平升高程度显著大于对照组(P<0.05);同时观察组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);治疗期间,两组患者不良反应情况比较无显著差异(P>0.05)。结论环磷酰胺联合泼尼松治疗老年性SLE能显著降低血清各免疫球蛋白及抗ds-DNA抗体水平,同时升高补体C_3、C_4水平;且其疗效显著,安全可靠,值得在临床上推广应用。     

四环素对侵袭性牙周炎血清抗牙龈卟啉菌IgG抗体亲和力影响的研究

目的：评价结合四环素的牙周非手术治疗对侵袭性牙周炎（AgP）患者牙周附着水平（AL）和血清抗牙龈卟啉菌（Pg）抗体亲和力水平的影响。 方法:研究对象由25名侵袭性牙周炎患者、20名牙周健康者（HS）组成。AgP患者在接受机械性牙周治疗后给服四环素(0.5 g/d)，3个月疗程结束后对病人进行评估。牙周治疗前及治疗3个月、6个月和12个月后常规临床检查、记录牙周附着水平，通过硫氰酸铵分离试验测定血清抗牙龈卟啉菌脂多糖（LPS）的抗体亲和力。 结果:牙周治疗后，牙周附着水平有显著改善(P<0.01);AgP患者血清抗Pg抗体亲和力明显下降(P<0.01)。 结论:结合四环素的机械性牙周治疗能显著降低AgP患者血清抗Pg抗体的亲和力对侵袭性牙周炎可获得满意的疗效。     

高血压性脑出血的治疗策略与临床疗效分析

目的：探讨保守治疗、开颅血肿清除术和微创颅内血肿清除术三种不同方法治疗高血压性脑出血的临床效果,以供临床参考。方法回顾性分析我院于2012年1月~2014年1月收治的120例高血压性脑出血患者的临床资料,根据治疗方法的不同将其分为三组,每组各40例。A组给予保守治疗,B组行传统开颅血肿清除术,C组则实行微创颅内血肿清除术,对比分析三组患者的治疗效果。结果C组(微创组)患者的临床疗效明显优于A组(保守治疗组)和B组(传统开颅组),其中C组的总有效率为34例(85.00%),A、B组的总有效率分别为21例(52.50%)、20例(50.00%),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论施行微创颅内血肿清除术治疗高血压性脑出血效果显著,明显优于保守治疗和传统开颅术,同时微创手术创伤小、安全性高、恢复快,值得在临床上推广应用。     

老年痴呆噬菌体抗体库的构建及抗Aβ肽单链抗体的筛选

目的: 构建人源性的老年痴呆(AD)噬菌体抗体库,筛选1株人源性的β-淀粉样蛋白(Aβ)特异性单链抗体(scFv).方法: 利用噬菌体展示技术,用20个AD患者的外周血B细胞首次构建了AD患者的单链可变区噬菌体抗体库.以Aβ40为靶,挑选出77个阳性抗体克隆,从中筛选出一个抗Aβ scFv-H1,并对其重链和轻链可变区基因进行测序分析.利用预吸附实验及竞争性ELISA测定该抗体对Aβ40的特异性及结合位点. 结果: 成功构建出AD患者的单链可变区噬菌体抗体库,库容量为1.5×106.从库中筛选出1株抗Aβ40的单链噬菌体抗体-H1,DNA测序结果证实了其抗体的基因结构及氨基酸序列.预吸附及竞争性ELISA证实该抗体对Aβ40的结合表位位于蛋白氨基端的1到16个氨基酸内. 结论: 利用噬菌体抗体库技术可成功制备Aβ肽特异性scFv,为AD患者的临床诊断和被动免疫治疗提供了一种新的可供选择的途径.     

5例脑出血外科治疗体会

目的 探讨高血压脑出血患者的治疗方案,总结治疗体会.方法 对5例高血压脑出血患者,根据患者的意识状况、出血部位、出血量参考全身情况,分别采用小骨窗开颅血肿清除术、钻孔穿刺血肿尿激酶注射术治疗,观察治疗效果.结果 5例高血压脑出血患者预后良好.结论 对不同患者采用恰当的手术方式,能够降低死亡率及致残率,减少并发症.     

5例脑出血外科治疗体会

目的探讨高血压脑出血患者的治疗方案,总结治疗体会。方法对5例高血压脑出血患者,根据患者的意识状况、出血部位、出血量参考全身情况,分别采用小骨窗开颅血肿清除术、钻孔穿刺血肿尿激酶注射术治疗,观察治疗效果。结果 5例高血压脑出血患者预后良好。结论对不同患者采用恰当的手术方式,能够降低死亡率及致残率,减少并发症。     

Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠对脑内淀粉样斑块沉积和行为学的影响

目的探讨Aβ亚单位疫苗接种对Tg2576鼠淀粉样斑块沉积和行为学损害的影响。方法24只Tg2576鼠随机分为Aβ1-15组、Aβ36-42组、Aβ42组和对照组,9月龄时开始分别接种相应的疫苗,间接ELISA法检测血清和脑匀浆上清液特异性抗体的滴度;免疫组织化学染色观察脑内淀粉样斑块沉积;Morris水迷宫测试行为学变化;组织染色观察脑、肝、脾、肺和肾的组织学变化。结果第2次接种后各实验组即明显有抗Aβ42抗体产生,抗体滴度随接种次数的增加而增加。停止接种,抗体滴度下降。脑匀浆上清液中也检测出低滴度的抗Aβ42抗体;疫苗接种6个月后,Aβ42、Aβ1-15和Aβ36-42组鼠皮层和海马淀粉样斑块沉积量与对照组相比均明显减少（P〈0．01）,其认知能力显著高于对照组（P〈0．01）。Aβ1-15组和Aβ42组相比差异无显著性（P〉0．05）,但优于Aβ36-42组（P〈0．01）;各组鼠的脑、肝、脾、肺和肾均未发现病理变化。结论邯亚单位疫苗接种能有效阻抑Tg2576鼠淀粉样斑块形成和认知功能退化,未发现不良反应。提示用Aβ1-15疫苗替代其全肽疫苗而用于AD免疫治疗,值得进一步研究。     

特发性膜性肾病患者血清抗磷脂酶A2受体抗体与尿中IgG4检测的临床意义

目的：探讨特发性膜性肾病（IMN）患者血清抗磷脂酶A2受体（PLA2R）抗体及尿IgG4检测的临床意义。方法：将90例膜性肾病（MN）患者按照病理类型分为特发性膜性肾病（IMN）组（52例）和继发性膜性肾病（SMN）组（38例）;另选同期体检健康者35例作为对照组。检测各组血清抗PLA2R抗体表达和尿IgG4水平;分析治疗后不同转归的IMN患者之间的血清抗PLA2R抗体阳性率及尿IgG4水平差异。结果：IMN组的血清抗PLA2R抗体阳性率及尿IgG4水平均明显高于SMN组和对照组（P＜0.05）;SMN组的尿IgG4水平明显高于对照组（P＜0.05）,而血清抗PLA2R抗体阳性率与对照组差异无显著统计学意义（P＞0.05）;治疗后,IMN缓解组的血清抗PLA2R抗体阳性率明显低于未缓解组（P＜0.05）,治疗后尿IgG4水平较本组治疗前及未缓解组治疗后均降低（P＜0.05）,而治疗后未缓解组的尿IgG4水平较治疗前不降反升（P＜0.05）;IMN复发患者的血清抗PLA2R抗体阳性率及尿IgG4水平均明显高于无复发者（P＜0.05）。结论：IMN患者血清抗PLA2R抗体阳性率和尿IgG4水平明显升高,其变化与IMN的病情及远期结局均有关,二者联合检测有助于IMN的诊断、病情活动及预后评估。     

β-淀粉样蛋白特异性单链抗体的制备及鉴定

目的制备1株人源性的β-淀粉样蛋白(Aβ)特异性单链抗体(scFv),并进行性能鉴定。方法利用噬菌体展示技术,用20个AD病人的外周血B细胞首次构建了AD患者的单链可变区噬菌体抗体库。以Aβ1-40为靶,挑选出77个阳性抗体克隆,从中筛选出一株抗Aβ单链抗体H1,对其重链和轻链可变区基因进行测序分析。通过表达载体pET28a(+)对目的蛋白进行大量表达,并利用Western-blot对单链抗体H1的免疫活性进行鉴定。结果成功构建出AD患者的单链可变区噬菌体抗体库,库容量为1.5×106。从库中筛选并表达出一株抗Aβ1-40的单链抗体H1,DNA测序结果证实了其抗体的基因结构及氨基酸序列。Western-blot检测证实该抗体可特异性结合Aβ1-40。结论利用噬菌体抗体库技术可成功制备Aβ肽特异性单链抗体,为AD患者的临床诊断和被动免疫治疗提供了一种新的可供选择的途径。     

30例高血压性脑出血行微创颅内血肿清除术治疗疗效探讨

目的：观察分析临床面对高血压性脑出血患者时,对其实施微创颅内血肿清除术治疗后的临床疗效。方法择取我科室在近期内接诊的60例高血压性脑出血患者,按照患者治疗内容的不同对患者进行分组,其中A组30例患者实施内科保守治疗、B组30例患者实施微创颅内血肿清除术进行治疗。结果 B组患者的临床治疗有效率为90%,明显高于A组患者的70%(P<0.05)。结论临床面对高血压脑出血患者时,给予其实施微创颅内血肿清除术进行治疗后的疗效是理想的,值得临床广泛应用。     

神经内镜结合神经导航与显微手术治疗高血压脑出血患者的应用效果对比

目的神经内镜结合神经导航与显微手术治疗高血压脑出血(HICH)患者的临床应用效果对比分析。方法选择2016年6月～2019年5月于我院手术治疗的74例HICH患者作为研究对象,按照随机数字法将其分为A、B两组,每组37例。A组患者进行经神经内镜结合神经导航手术治疗,B组患者进行显微手术治疗。对比两组患者手术时间、住院时长、术中出血量及血肿清除率以及半年预后情况。结果 A组患者手术时长、住院时长、术中出血量及血肿清除率均显著优于B组(P0.05);术后半年A组患者总预后良好率为91.89%,显著高于B组72.97%(P0.05)。结论高血压脑出血患者采用神经内镜结合神经导航手术治疗,患者手术时间、住院时间均明显缩短,术中出血量少,血肿清除率高,预后佳,值得临床推广。