应用NMDA受体拮抗剂MK-801治疗局灶性脑缺血的实验研究

目的:研究N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801对大鼠局灶性脑缺血模型的治疗作用和治疗时窗,为临床治疗提供依据.方法:采用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制成局灶性脑缺血模型.以[3H]噻吩环己哌啶([3H]TCP)为配基,采用宏观和微观放射自显影术观察不同时间缺血组和给药组NMDA受体通道的活性变化.结果:缺血前及缺血2 h内给予MK-801(0.8 mg/kg体重)可有效拮抗NMDA受体的过度激活.而缺血3 h后给药则无此作用.结论:MK-801对局灶性脑缺血的治疗时窗在3 h以前.     

MK-801诱导出生早期大鼠精神分裂症模型的行为学研究

目的建立地卓西平马来酸盐(MK-801)慢性处理的出生早期大鼠精神分裂症(SZ)模型,探讨其神经行为学变化。方法 11只出生后6 d的SD仔鼠,腹腔注射0.3 mg/kg的MK-801(MK-801组),一天2次,连续注射2周;11只同龄的SD仔鼠腹腔注射等体积的生理盐水(NS组)。给药前称重1次,给药完毕后每隔2 d称重1次,直至实验结束。给药后1周,检测旷场和水迷宫等行为学的变化。结果与NS组比较,MK-801组大鼠体重显著降低(P<0.01),并至少持续至注射结束后4周。行为学检测结果显示,与NS组比较,MK-801组大鼠自发活动显著减少(P<0.01),其学习能力明显降低,学习速度减慢,空间记忆能力下降(P<0.05)。结论 MK-801诱导的出生早期SZ模型大鼠自发活动减少,能部分模拟SZ的阴性症状;其学习及记忆功能损害可以部分模拟SZ的认知功能损害症状。     

MK-801对视觉发育可塑性关键期内大鼠闪光视觉诱发电位的影响

目的在视觉发育可塑性关键期内,探讨MK-801对大鼠闪光视觉诱发电位（F-VEP）的影响。方法对出生后14d和28d正常和MK-801处理的大鼠进行F-VEP检查。结果正常组大鼠生后28d和14d相比较,F-VEP主波的潜伏期缩短、振幅增高（P〈0.05）;MK-801处理大鼠与同天龄正常组大鼠相比较,F-VEP主波的潜伏期较长（P〈0.05）。结论在视觉发育可塑性关键期内,MK-801影响了大鼠F-VEP的经验依赖性变化。     

MK-801对大鼠行为学及认知功能的影响

目的 观察非竞争性NMDA受体拮抗剂地卓西平马来酸盐(MK-801)对大鼠的行为活动和认知功能的影响.方法 实验组连续2周腹腔注射MK-801,对照组注射等容量生理盐水.分别评估注射后第1、5、10、14天大鼠的行为学改变;停药后第1、2、3、4天与停药后第12、13、14、15天分别进行Morris水迷宫实验,比较两组的定位航行和空间探索时间.结果 两组动物的运动量、共济失调、刻板行为评分均实验组高于对照组;停药后第1、2、3天,实验组大鼠逃逸时间高于对照组(P＜0.01),停药后第12、13、14天变化无统计学意义(P＞0.05);实验组大鼠在停药第4天空间探索时间低于对照组(P＜0.01),同时也低于停药后第15天(P＜0.01);第15天实验组与对照组之间的停留时间差异无统计学意义(P＞0.05).结纶 MK-801可诱发大鼠出现精神分裂症症状,且可致使大鼠的学习记忆功能下降,但此影响并非不可逆的.     

不同剂量MK-801对利血平诱导的行为性抑郁大鼠抑郁样行为的影响

目的:探讨不同剂量N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂MK-801对利血平诱导的行为性抑郁大鼠抑郁样行为的影响。方法:SD雄性大鼠(40只)随机分为正常对照组,利血平(4mg/kg)组,MK-801(0.1、0.3、0.5mg/kg)+利血平(4mg/kg)组,每组8只。采用开场实验和强迫游泳实验检测大鼠的抑郁样行为。结果:腹腔注射利血平(4mg/kg)1 h后,开场实验示利血平组总路程、中央活动路程较正常对照组显著减少(P<0.01),中央活动时间也较正常对照组减少(P<0.05)。MK-801+利血平组总路程均较利血平组显著增多(P<0.01),0.3、0.5mg/kgMK-801+利血平组中央活动路程和时间均较利血平组增多(P<0.05)。0.3、0.5mg/kgMK-801+利血平组中央活动路程较0.1mg/kgMK-801+利血平组增多(P<0.05)。开场实验中,0.5mg/kgMK-801+利血平组出现共济失调不良反应;强迫游泳实验示利血平组不动时间较正常对照组显著增多(P<0.01)。MK-801+利血平组不动时间较利血平组显著减少(P<0.01)。结论:提前给予MK-801可拮抗腹腔注射利血平(4mg/kg)诱导的行为性抑郁,这种效应与MK-801的剂量有一定关系。本实验中0.3mg/kgMK-801是一个较合适的剂量。     

低剂量MK-801对小鼠焦虑、抑郁及学习记忆的影响

目的观察非竞争性NMDA受体拮抗剂地艹卓西平马来酸盐（MK-801）在低剂量时对小鼠焦虑、抑郁以及学习记忆能力的影响。方法将昆明小鼠随机分成对照组和MK-801组,采用高架十字迷宫、强迫游泳实验、悬尾实验、开场实验以及Morris水迷宫等方法,检测药物对小鼠行为的影响。结果与对照组相比,MK-801组抑郁模型中的不动时间减少（P〈0.01）;焦虑模型中在入开臂次数及停留时间的百分比增加（P〈0.01）,入臂总次数与总时间也增加;开场实验中运动能力增加（P〈0.01）;Morris水迷宫中小鼠学习记忆能力下降（P〈0.01）。结论低剂量MK-801并未对小鼠产生抗焦虑以及抗抑郁的效果,但可降低学习记忆能力。     

MK-801并胚胎脊髓移植促进大鼠脊髓损伤后功能恢复的实验研究

目的研究胚胎脊髓移植同时应用NMDA受体拮抗剂MK-801观察其是否能够促进半切洞脊髓损伤运动功能恢复.方法将成年大鼠分为三组,A组单纯脊髓半切洞损伤组.B组脊髓半切洞损伤+胚胎脊髓移植组,C组脊髓半切洞损伤+胚胎脊髓移植+MK-801组.手术后应用联合行为评分(CBS)、感觉诱发电位(SEP)、运动诱发电位(MEP)检查.结果三组CBS得分A组＞B组＞C组,SEP和MEP潜峰时A组＞B组＞C组,统计学分析有显著差异性.结论通过分析CBS、SEP、MEP结果表明胚胎脊髓移植和NMDA受体拮抗剂MK-801能够促进脊髓损伤后功能恢复.     

大剂量甲基强的松龙联合MK-801治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究

目的观察大剂量甲基强的松龙（MP）联合MK-801（地卓西平马来酸盐）对大鼠急性脊髓损伤的治疗效果。方法采用Allen的重物坠落法建立大鼠急性脊髓损伤模型,将72只致伤大鼠一次性随机分为4组,每组18只大鼠（其中每组又包括24h、72h、15d三个亚组,每个亚组6只大鼠）。对照组伤后0．5h腹腔注射5mL生理盐水;MP组伤后0．5h腹腔注射甲基强的松龙30mg／kg体重;MK-801组伤后0．5h腹腔注射2．5％MK-801（地卓西平马来酸盐）5mg／kg体重;联合组伤后0．5h腹腔注射甲基强的松龙和MK-801（剂量、浓度同前）。分别在伤后24h、72h、15d处死动物,观察受损部位脊髓的病理形态和细胞凋亡,其中15d组分别于第1、3、5、7、10、15天做Gales评分和斜板试验。结果甲基强的松龙、MK-801及联合组治疗大鼠急性脊髓损伤,在Gales评分、斜板试验及病理形态上、细胞凋亡检测与对照组相比都有很大提高,但三个治疗组在上述方面却处于同一水平。结论甲基强的松龙、MK-801及两药联合对大鼠急性脊髓损伤的治疗作用在目前的实验条件下无明显差异。     

MK-801对局灶性脑缺血再灌注大鼠细胞增殖的影响

目的 研究MK-801对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经干细胞增殖的影响.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为正常时照组(n=6)、假手术组(n=6)、手术组(n=12)和手术MK-801不同浓度干预组(0.2、0.4、0.6、0:8、1.0和1.2 mg/kg n=36).用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,在模型制作前30 min按照不同浓度组的剂量腹腔注射MK-801,假手术组和手术对照组腹腔注射等量的生理盐水.在模型建立后第7天,通过免疫组化技术标记大鼠梗塞区大脑皮质的Brdu阳性细胞数目.结果 MK-801浓度为0.4mg/kg时,可以明显抑制内源性神经干细胞的增殖,0.8ms/ks剂量以上有显著的抑制作用,并且随着浓度升高抑制作用呈递增趋势.结论 NMDA受体拮抗剂MK-801在局灶性脑缺血后对大鼠内源性神经干细胞的增殖有抑制作用,并且随浓度的增加抑制作用增强.     

谷氨酸及MK-801对大鼠伏核痛兴奋神经元电活动的影响

目的 研究谷氨酸(Glu)及其NMDA受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸(MK-801)对大鼠伏核(NAc)痛兴奋神经元(PEN)痛诱发放电反应的影响。方法 电刺激坐骨神经作为伤害性刺激，通过玻璃微电极记录NAc内PEN放电。结果 伤害性刺激可使NAc内PEN电活动增加；脑室注入Glu可使NAc内PEN痛诱发放电频率增加；NAc内注入MK-801可阻断脑室注入Glu引起的NAc内PEN诱发活动加强的作用。结论 脑室注入G1u可使大鼠NAc内PEN对伤害性刺激的反应加强，NMDA受体参与介导这种疼痛易化的作用。     

水杨酸钠对幼年豚鼠螺旋神经节GAD蛋白表达和ABR阈值的影响

目的:观察水杨酸钠给药对幼年豚鼠螺旋神经节谷氨酸脱羧酶(GAD)蛋白表达和听性脑干诱发电位(ABR)阈值的影响.方法:将48只出生7 d的幼年健康豚鼠分为4组,每组12只.A组:对照组;B组:低剂量水杨酸钠给药组(200 mg/kg·d-1);C组:中剂量水杨酸钠给药组(300 mg/kg·d-1);D组:高剂量水杨酸钠给药组(450 mg/kg·d-1).给药前和给药15 d后检测ABR阈值,然后处死动物采用免疫组织化学染色方法检测豚鼠螺旋神经节GAD蛋白表达.结果:①给药15 d后B、C、D 3组ABR阈值较对照组均有明显提高(P<0.05), B、C、D 3组以D组ABR阈值提高最为明显,C组次之,B组ABR阈值改变最小;②B、C、D 3组GAD蛋白表达积分光密度值较对照组显著降低(P<0.01);B、C、D 3组以D组GAD蛋白表达积分光密度值降低最为明显,C组次之,B组GAD蛋白表达改变最小.结论:水杨酸钠可显著提高豚鼠ABR阈值并使豚鼠螺旋神经节GAD蛋白表达降低,其改变豚鼠螺旋神经节GAD蛋白表达以及ABR阈值与给药剂量有关.     

水杨酸钠对豚鼠体内庆大霉素代谢产物毒性的抑制作用

目的 观察庆大霉素及其代谢说物对体外短期培养的豚鼠耳蜗外毛细胞活性的影响,以及水杨酸钠对庆大霉素代谢产物毒性的抑制作用。方法 预先用豚鼠肝细胞匀浆与庆大霉素性的抑制作用。方法 预先豚鼠肝组织匀浆与庆大霉素孵育,使庆大霉素经酶转化后产生毒性物质（庆大霉素素代谢产物）,将分离的豚鼠耳蜗外毛细胞置于含不同成分的Ｈａｎｋ液中短期培养,即置于庆大霉素代谢产物、水杨酸钠、水杨酸钠＋庆大霉素代谢产物、以及单纯Ｈ     

MK-801诱发的小鼠精神分裂症样症状与脑内Parvalbumin异常表达的关系

目的 以中等剂量的MK-801腹腔注射制作小鼠精神分裂症样模型,检测小鼠脑内钙结合蛋白Parvalbumin（小白蛋白,PV）的异常表达部位,探讨与已知精神分裂症相关脑区的关系,为深入研究精神分裂症的发病机制提供形态学和神经化学依据.方法 雄性成年昆明小鼠,随机分为生理盐水组和MK-801组.用Sams-Dodd刻板行为评分和一次性被动回避反应（OPAR）检测小鼠的行为学改变;用免疫组织化学染色法检测各组小鼠脑内PV蛋白的表达情况.结果 ① MK-801组小鼠刻板行为评分明显增高（P＜0.01）,记忆能力显著下降（P＜0.01）,符合精神分裂症样模型小鼠的表现.②MK-801组小鼠在前额皮质、海马、纹状体、杏仁核及丘脑网状核等脑区PV蛋白的表达明显减少.结论 隶属边缘系统的前额皮质、海马、纹状体、杏仁核及丘脑网状核等脑区内的PV阳性神经元数量的减少可能与精神分裂症的病理生理学机制密切相关.     

探讨NR2B受体参与拮抗水杨酸钠引起离体培养螺旋神经节细胞Caspase-3mRNA上调的实验研究

目的：探讨NR2B受体参与拮抗水杨酸钠引起离体培养螺旋神经节细胞Caspase-3mRNA上调的作用。方法：将培养的耳蜗螺旋神经节细胞随机分为3组,分别为谷氨酸组：培养液中仅加入1mm谷氨酸,水杨酸钠组：培养液中加入1mm谷氨酸和5mm水杨酸钠,艾芬地尔组：培养液中加入10μm艾芬地尔、1mm谷氨酸和5mm水杨酸钠。上述三组细胞需培养24h后,再加药物干预3h。收集细胞并采用实时荧光定量PCR技术检测Caspase-3mRNA的转录情况,以研究应用艾芬地尔特异性阻断NR2B受体对水杨酸钠引起离体培养螺旋神经节细胞Caspase-3基因上调过程的影响情况。结果：艾芬地尔组螺旋神经节细胞中的Caspase-3 mRNA转录水平显著高于谷氨酸组螺旋神经节细胞和水杨酸钠组螺旋神经节细胞（P值均＜0.01）,而水杨酸钠组螺旋神经节细胞中的Caspase-3mRNA转录水平又显著高于较谷氨酸组螺旋神经节细胞(P<0.01)。结论：NR2B受体能够拮抗水杨酸钠引起的离体培养螺旋神经节细胞Caspase-3mRNA的上调。     

MK-801在大鼠糖尿病神经病理性疼痛中的作用及其对p38 MAPK的影响

[摘要] 目的 研究MK－801在大鼠糖尿病神经病理痛中的作用以及对p38MAPK的影响。方法 Wistar大鼠,月龄3个月,体重180～220 g,单次腹腔注射链脲菌素65 mg/kg制备糖尿病大鼠神经病理性痛模型。模型制备成功大鼠96只,随机分为3组（n=32）：糖尿病神经病理性痛组(D组)、p38MAPK抑制剂组（I组）和MK－801组(M组),另取32只正常大鼠作为对照组（C组,n=32）。模型制备成功后每周一上午,I组和M组分别腹腔注射p38MAPK抑制剂SB203580 1 mg/kg、MK-801 1 mg/kg,1次/周,直至处死大鼠。各组分别于模型制备成功后第1,3,5,7 周（T1～4）末随机取8只大鼠,采用von Frey纤维丝测定双后足机械缩足反应阈值(MWT),采用肌电图仪测定左侧坐骨神经传导速度（NCV）后处死大鼠,取L3-6的背根神经节和脊髓,采用免疫组化法和Western blot 法检测p38MAPK磷酸化水平, 采用RT-PCR法检测NMDA受体NR1 mRNA表达。结果　与C组比较,D组、I组和M组T1～4时MWT降低、NCV减慢,p38MAPK磷酸化水平升高、NR1 mRNA表达上调（P＜0.05）;与D组比较, I组和M组MWT升高、NCV加快（P＜0.05）;与D组比较,T2～4时 I组和M组p38MAPK磷酸化水平降低、M组NR1 mRNA表达下调(P<0.05)。结论　MK－801通过阻断NMDA受体而抑制神经系统p38MAPK信号通路的激活从而对糖尿病神经病理性疼痛有治疗作用。     

MK-801诱导的精神分裂症发育模型大鼠脑组织DA,DOPAC,Glu和GABA浓度的变化

目的:通过对MK-801诱导的精神分裂症（schizophrenia,SZ）发育模型大鼠和慢性给药模型大鼠脑组织多巴胺（dopamine,DA）、二羟苯乙酸（dihydroxy-phenyl acetic acid,DOPAC）、谷氨酸盐(glutamate,Glu)和γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric aci...     

水杨酸钠对庆大霉素耳毒性拮抗作用的机制研究

目的：探讨水杨酸钠（sodium salicylate,NaSA）对庆大酶素（gentamicin,GM）耳毒性作用的影响及其机制。方法：豚鼠随机分为对照组、GM组、NaSA组和GM＋NaSA组,每组9只。采用听性脑干反应（acoustic brainstem response,ABR）、耳蜗铺片及透射电镜技术,观察用药前后听反应阈及形态变化,检测血清尿素氮、肌苷以及GM浓度,同时测定组8kHzABR平均阈移达55dB,GM NaSA组平均阈移为23dB,差异显（P＜0．05）。形态学改变与听力变化一致。GM＋NaSA组耳蜗组织丙二醛和秩离子较GM组明显减少（P＜0．05）,GM＋NaSA组和GM组超氧化物岐化酶活性明显高于另两组（P＜0．05）,GM＋NaSA组和NaSA组前列环素水平显低于另两组（P＜0．05）。NaSA对GM血药浓度没有影响。结论：自由基和铁离子在GM的耳毒性中起重要作用,NaSA能有效减轻GM耳毒性,有望成为临床庆大霉素耳毒性的预防药物。     

MK-801诱导的精神分裂症发育模型大鼠脑组织DA,DOPAC,Glu和GABA浓度的变化

目的：通过对MK-801诱导的精神分裂症（schizophrenia,SZ）发育模型大鼠和慢性给药模型大鼠脑组织多巴胺（dopamine,DA）、二羟苯乙酸（dihydroxy-phenyl acetic acid,DOPAC）、谷氨酸盐（glutamate,Glu）和γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）浓度的比较研究,探讨围产期N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartate,NMDA）受体阻断致SZ的神经生化机制。方法：60只新生雄性SD大鼠于出生后6天按批次随机分为SZ发育模型组（MK-801F）、SZ慢性给药模型组（MK-801M）和正常对照组（Control）;SZ发育模型大鼠于出生后7~10d皮下注射MK-801（0.1mg/kg,Bid）,SZ慢性给药模型大鼠于出生后47~60d腹腔注射MK-801（0.2mg/kg,Qd）,对照组大鼠于相应时段注射0.9%的生理盐水。出生后第60天分批进行行为学测试,出生后第63天取各组大鼠大脑内侧前额叶皮质（medial prefrontal cortex,mPFC）和海马组织并匀浆,以高效液相色谱-库仑阵列电化学法检测组织匀浆中的DA,DOPAC,Glu和GABA水平,并计算分析DA和Glu的利用率。结果：SZ发育模型大鼠mPFC和海马DA及DOPAC的浓度较正常对照组明显降低（P〈0.05）;mPFC区GABA浓度和Glu利用率较正常对照组明显降低（P〈0.05）;mPFC区DA浓度较SZ慢性给药模型组明显降低（P〈0.05）;海马DOPAC浓度及DA利用率较SZ慢性给药模型组明显降低（分别P〈0.01,P〈0.05）。结论：SZ发育模型成年大鼠mPFC区DA,Glu和GABA系统功能减退,海马DA系统功能减退。     

MK－801对脑缺血大鼠神经功能缺损及脑NGF表达的影响

目的：观察MK－801对脑缺血大鼠神经功能缺损及脑神经生长因子（ NGF）表达的影响,探讨MK－801治疗脑缺血的机制。方法采用线栓法制做脑缺血大鼠模型,将大鼠分为三组：假手术组、模型组和药物组,每组各24只。药物组腹腔注射MK－801（0.6mg／kg／d）,其余注射同容积生理盐水。于注射后3天、7天、14天每组各取8只进行神经功能缺损评分及处死取脑,应用酶联免疫吸附试验（ ELISA法）测定NGF含量。结果神经功能缺损评分在第3天模型组和药物组没有显著差异,第7天、第14天药物组较模型组有显著差异（ P ＜0.01）;NGF表达在第3天模型组和药物组没有显著差异,但与假手术组有显著差异（ P ＜0.001或P ＜0.05）,第7天、第14天药物组较模型组有显著差异（ P ＜0.001或P ＜0.05）。结论MK－801通过提高脑内NGF的表达,改善运动功能状况可能是其治疗缺血性脑血管疾病的机制之一。     

水杨酸钠抑制大鼠螺旋神经节神经元电压门控钠通道的研究

目的：研究大鼠螺旋神经节神经元电压门控钠通道在水杨酸钠致听力下降过程中所起的作用。方法：采用全细胞记录膜片钳技术研究水杨酸钠对急性分离大鼠螺旋神经节神经元电压门控钠通道的影响。结果：水杨酸钠（10～1000μmol／L）作用于大鼠螺旋神经节神经元电压门控钠通道后,钠电流（Ina）的电流幅度随着浓度的增加而减小,该作用具有可逆性。水杨酸钠不改变INa的电压门控特性和稳态激活曲线。结论：水杨酸钠对大鼠螺旋神经节神经元INa具有可逆性抑制作用,但不改变钠通道激活的电压依赖特性,这可能与水杨酸钠致听力下降有关。