儿童急性淋巴细胞性白血病MRL与mdr 1基因表达动态监测

目的　探讨儿童急性淋巴细胞性白血病 (ALL)中 ,微小残留白血病 (MRL)与mdr 1基因表达动态监测的临床意义。方法　对 35例ALL患儿不同病期骨髓标本进行PCR或巢式PCR检测IgH和TCRVδ2 Dδ3 基因重排 ,同时应用半定量RT PCR检测mdr 1基因表达。结果　随着完全缓解期延续 ,IgH或 /和Vδ2 Dδ3 基因重排检出率逐渐下降 ,而mdr 1基因阳性表达检出率增加 ,IgH或 /和Vδ2 Dδ3 基因重排持续检测阳性或mdr 1表达水平增高者易复发。结论　动态监测MRL和mdr 1基因表达可判断疗效和预知复发 ,且较一次单独检测更为重要。当IgH或 /和Vδ2 Dδ3 转阴后检测mdr 1基因表达可作为预知复发的一个辅助指标     

儿童急性淋细胞性白血病MRL与mdr1基因表达动态监测

目的 探讨儿童急性淋巴细胞性白血病（ALL）中，微小残留白血病（MRL）与mdr1基因表达动态监测的临床意义。方法 对35例ALL患儿不同病期骨髓标本进行PCR或巢式PCR检测IgH和TCR Vδ2Dδ3基因重排，同时应用半定量RT－PCR检测mdr1基因表达。结果 随着完全缓解期延续，IgH或／和Vδ2Dδ3基因重排检出率逐渐下降，而mdr1基因阳性表达检出率增加，IgH或／和Vδ2Dδ3基因重排持续检测阳性或mdr1表达水平增高者易复发。结论 动态监测MRL和mdr1基因表达可判断疗效和预知复发，且较一次单独检测更为重要。当IgH或／和Vδ2Dδ3转阴后检测mdr基因表达可作为预知复发的一个辅助指标。     

急性淋巴细胞白血病微量残留病的PCR监测

①目的探讨急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）微量残留病（ＭＲＤ）检测的临床意义。②方法应用筑巢式多聚酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）对３２例ＡＬＬ进行Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖδ２Ｄδ３基因重排检测。③结果１８例Ｂ系ＡＬＬ中有１５例（７２．２％）、４例Ｔ系ＡＬＬ中有１例（２５．０％）存在ＴＣＲＶδ２Ｄδ３基因重排。同时对１６例进行３９例次微量残留病动态监测，其中６例ＭＲＤ－ＰＣＲ阴性病人随访５．１７～１６．１７年，无１例复发；１０例ＭＲＤ－ＰＣＲ阳性者，２例分别于阳性后０．２５，１．００年骨髓复发，１例有复发倾向，余７例随访４．３３～６．２５年无复发。④结论ＭＲＤ－ＰＣＲ阴性者预后良好，可望长期生存，治疗时应以ＭＲＤ－ＰＣＲ转阴为停止化疗的可靠指标，对ＭＲＤ－ＰＣＲ阳性者应定期监测ＭＲＤ变化，结合病人情况进行综合评价。     

急性淋巴细胞性白血病残留细胞的检测及其意义

用聚合酶链式反应检测了１２例急性淋巴细胞性白血病患者完全缓解期骨髓标本；５例有基因重排，临床随访均在２￣３月内复发；７例未发现基因重排，其中２例分别在缓解后３月、８月复发，可能为白血病基因重排发生了变异，其余５例未复发。提示检测白血病残留细胞有助于提前预测白血病的复发，指导治疗。     

急性淋巴细胞白血病微量残留病的PCR监测

探讨急性淋巴细胞白血病微量残留病检测的临床意义。方法：应用筑巢式多聚酶链反应对３２例ＡＬＬ进行了Ｔ细胞受体Ｖδ２Ｄδ３基因重排检测。结果 １８例Ｂ系ＡＬＬ中有１５例，４例Ｔ系ＡＬＬ中有１例，存在ＴＣＲＶδ２δ３基因重排。同时对１６例进行３９例次微量残留病动态监测，其中６例ＭＲＤ－ＰＣＲ阴性病人随访５．１７－１６．１７年，无１例复发，１０例ＭＲＤ－ＰＣＲ阳性者，２例分别于阳性后０．２５，１．００年骨     

PCR扩增T细胞受体δ基因监测儿童急性淋巴细胞白血病微量残留病

应用巢式聚合酶链反应技术拉增Ｔ细胞受体基因检测了小儿急性淋巴细胞白血病骨髓标本，２８例初治的Ｂ前体细胞白血病中有２１例检出ＴＣＲ－δ基因克隆重排带，检出率迷７５％。１８例缓解６个月以上ＰＲ仍阳性者接受大剂量化疗，１５例化疗后ＰＣＲ转阴者随访８－３０个月仍处持续缓解状态，３例ＰＣＲ未能转阴者中２例最终复发，另１例在此次化疗前已有半年未行化疗，本化疗后ＰＣＲ未阴转，继续化疗并随访一年，现ＰＣＲ转阴并持     

wt1定量联合FCM在急性髓细胞白血病MRD监测中的临床应用

目的 探讨在急性髓细胞白血病(AML)中Wilms瘤基因1(wt1) mRNA定量联合多参数流式细胞术(FCM)分析监测微小残留病灶的临床应用.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(qRT-PCR)检测35例AML患者的wt1表达水平;将患者根据不同亚型分组检测;并且对9例缓解和4例复发患者进行随访,检测wt1表达水平.采用FCM分析AML中微小残留病灶(MRD)水平.结果 与对照组比较,AML病例组wt1表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).在初诊的各种AML亚型中,M2亚型wt1表达水平最高,M6亚型wt1表达水平最低.9 例随访患者提示在达到完全缓解时wt1表达水平下降,而4例随访复发患者在复发时再次升高.FCM检测MRD在不同阶段异常髓系细胞比例明显不同.联合qRT-PCR和FCM技术对MRD检测的敏感性和特异性大大提高,两者具有一致性;利用ROC曲线对复发病例进行分析得到的监测阈值为3.33%.结论 在急性髓细胞白血病中wt1 mRNA定量联合多参数流式细胞术分析可用于监测MRD、评估治疗效果、预后及预测疾病复发风险.     

多聚酶链反应检测淋巴细胞白血病微小残留分析

根据ＩｇＨ、ＴＣＲ克隆性基因重排原理，用半重叠ＰＣＲ和单轮ＰＣＲ技术分别同一份ＡＬＬ患儿的骨髓标本进行检测，并对两法的检出率进行了比较。结果：半重叠ＰＣＲ阳性检出率为８０％，单轮ＰＣＲ阳性检出率５２％，前者较后者提高了２８％，尤其对ＡＬＬ－ＭＲＤ组的检测，半重叠ＰＣＲ的阳性检出率有显著提高。     

半重叠PCR检测急性淋巴细胞白血病微小残留病的临床意义

目的 用半重叠多聚酶链反应（PCR）检测免疫球蛋白重链（Ign）、T细胞受体γ链（TCR7）克隆性基因重排，研究急性淋巴细胞白血病（ALL）微小残留白血病（MRD）的动态变化和消长规律，预测复发，判断预后。方法 选择14例完全缓解（CR）的AI上患者，采集CR后不同时期骨髓标本，用半重叠PCR检测Ign、TCR7克隆性基因重排。结果 经过正规化疗的14例ALL患者在CR后不同时期，MRD水平不同；MRD的消长规律为波浪式7例，呈直线下降3例，持续阴性2例，复发2例中1例为MRD持续阳性、1例MRD由阴性转为阳性。结论 一次MRD-PCR检测不足以说明体内残留白血病细胞水平，连续PCR检测及动态观察对于预测复发、判断预后、评价骨髓移植（BMT）效果、研究白血病化疗方案及停药时间更有临床价值。     

小儿急性淋巴细胞性白血病微小残留病免疫治疗的初步研究

目的：研究利用体外培养的激活脐血造血干细胞（activated cord blood stem cell,ACBSC）,对急性淋巴细胞性白血病（ALL）患儿微小残留病（MRD）进行免疫治疗的疗效。方法：无菌枸橼酸（ACD）抗凝脐血收集,经Percoll单个核细胞分离与植物血凝素（PHA）培养,采用桥联免疫组化（APAAP）方法进行PHA激活前后CD3、CD4、CD8抗原测定;应用双抗体夹心ELISA法进行肿瘤坏死因子（TNF－α）检测;利用PCR方法对克隆性重排的T细胞受体（TCR）基因进行测定,检查外周血中ALL MRD。结果：①脐血单个核细胞以一定浓度PHA（20mg/L) 培养激活后,其中表达CD3、CD4、CD8抗原的淋巴细胞数增高。②未经PHA激活的单个核细胞TNF－α分泌呈一过性,72h后检测＜10pg/ml;经PHA激活48h,分泌维持在一个较高水平,达600pg/ml。③6例ALL患儿输注前骨髓和外周血中MRD测定全部阳性,4例经多次输注,半年后MRD检测为阴性,骨髓中MRD明显减少,其余2例骨髓和外周血中MRD检测均为阴性。结论：ACBSC能够分泌抗肿瘤细胞因子及可能具有细胞毒T淋巴细胞（CTL）样作用;可望通过利用脐血免疫治疗方法,对小儿ALL的MRD进行彻底清除;利用ACBSC移植,可能是治疗小儿ALL MRD安全有效的免疫治疗方法。     

定量监测AML1-ETO融合基因表达水平在急性髓系白血病治疗中的临床价值

目的 探讨急性髓系白血病治疗过程中AML1-ETO融合基因表达水平的变化规律.方法 采用基于TaqMan探针的RQ-PCR技术,以AML1-ETO融合基因为靶分子,定量监测15例急性髓系白血病患者初诊和随访时融合基因的表达水平,分析该基因表达水平的变化与临床特征的相关性.结果 患者初诊时,AML1-ETO融合基因的表达...     

儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型与生存期的探讨

目的 探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）免疫表型与无病生存期（EFS）的关系。方法 对48例初发末治疗的儿童ALL,用免疫酶标法测其骨髓肿瘤细胞的免疫表型。治疗采用1993年北海会议制定的《小儿白血病诊疗建议》。结果 40例为My^-BL,其首次诱导完全缓解（CR）率97．5％,化疗2年内EFS82．5％,3年内EFS72．5％。4例My^ BL,首次诱导CR率50％,化疗2年内EFS25％。3例My^TL首次诱导均CR,但EFS与My^ BL基本类似。结论 目前儿童ALL的免疫表型测定在判断其疗效与预后方面有着重要作用。     

PCR扩增IgH和TCR_β基因重排在检测淋巴细胞白血病微小残留病中的应用

利用ＩｇＨ和ＴＣＲ＿β克隆性基因重排原理，用多聚酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ．ＰＣＲ）技术检测小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）骨髓和外周血共１３例。结果：ＡＬＬ初治的２例患儿ＰＣＲ检测全部呈现阳性特异性单带。ＡＬＬ完全缓解（ＣＲ）的１１例患儿中阳性７例，阴性４例，其中２例骨髓移植（ＢＭＴ）患儿移植前ＰＣＲ阳性，移植后转为阴性。１例自体骨髓移植（ａｕｔｏ－ＢＭＴ）患儿于移植后２个月时ＰＣＲ检测又重新出现阳性，但临床无复发现象。４例对照者ＰＣＲ均为阴性。结果表明ＰＣＲ技术具有简便、快速、敏感、特异性强等优点，在检测微小残留（ＭＲＤ）中具有广阔前景。     

微小残留病灶(MRD)监测在慢性淋巴细胞白血病(CLL)中的应用进展

 慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)是西方国家最常见的成人白血病,在我国的发病率也日益增加。近年来针对CLL的新药层出不穷,微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)监测逐渐成为评估疗效的重要手段。本文总结了目前常用的MRD检测方法,包括流式细胞学和基于PCR法的分子学检测,并介绍了其在初治CLL疗效评价、预后评估和在移植后CLL复发预警方面的应用进展。     

外周血微小残留白血病细胞的定量检测及临床应用

目的: 探讨定量检测急性白血病患者外周血微小残留白血病细胞的临床价值。方法: 采用极限稀释定量PCR法对25例初诊急性白血病患者及1个疗程化疗后外周血标本进行Fms样酪氨酸激酶3（FLT3）基因表达进行检测，并定量计算体内残留的白血病细胞数，10例门诊健康体检者为对照组。结果: ①25例初诊急性白血病患者外周血标本FLT3基因表达阳性率为80.0%（20/25），其中急性髓细胞白血病（AML）88.2%（15/17），急性淋巴细胞白血病（ALL）62.5%（5/8）。②20例FLT3基因表达阳性的白血病初诊患者外周血DNA含量为（2.36±1.25）×10⁸ μg•L^-1，外周血含有的白血病细胞数为（18.66±8.79）×10⁶•μL^-1。经过1个疗程化疗后，1例未缓解者，外周血DNA含量为1.69×10⁷μg•L^-1，残留的白血病细胞数为1.01×10⁶•μL^-1；3例部分缓解者，外周血DNA含量为（0.57±0.24）×10⁶ μg•L^-1，残留的白血病细胞数为（1.82±0.19）×10³•μL^-1；16例完全缓解者，其中FLT3基因表达阴性9例，FLT3检测阳性7例，其外周血DNA含量为（0.16±0.06）×10⁶ μg•L^-1，残留的白血病细胞数为（1.86±1.31）×10²•μL^-1。健康对照组FLT3基因表达均为阴性。结论: 定期、定量检测急性白血病患者治疗后体内残留的白血病细胞数，有助于临床观察白血病治疗效果及时调整治疗方案。     

急性早幼粒细胞白血病中白血病细胞CD_(117)的表达

为观察CD117分子在急性早幼粒细胞白血病 (APL)中的表达及探讨其意义 ,采用三色流式细胞术对 2 2例APL骨髓白血病细胞表面CD117的表达进行分析。结果 :CD117在APL中的表达率为 1 9/2 2 ,在急性粒细胞白血病(AML M1)和AML M2 中的表达率分别为 2 /2和 1 8/2 1。 1 9例CD117+ 的APL患者中 ,1 8例CD34 - 、HLA DR- ,1例部分细胞HLA DR+ 。提示 :APL患者有较高水平的CD117表达 ,CD117与CD34 、HLA DR联合进行多色流式细胞术分析 ,可用于APL微小残留病灶的检测。     

非同位素的PCR-RNA转录本分子杂交法检测急淋微小残留病

以T细胞抗原受体γ链重排基因（TCRγ）为标志,运用分别与V区和J区片段的保守序列一致,并带有T_7RNA聚合酶启动子序列的引物,将急性淋巴细胞白血病（ALL）初诊期的骨髓标本进行PCR（聚合酶链反应）.并将其产物转录成为RNA,以该RNA为探针,与ALL缓解期骨髓标本DNA的PCR产物所转录的 RNA杂交,杂交体用RNA酶消化,消化产物行聚丙烯酰酰凝胶电泳（PAGE）,尔后硝酸银染色观察检测结果。实验表明:该方法特异性强.灵敏度可达10~(-5)水平.具有快速、经济、没有同位素污染的优点,便于临床运用。     

伊马替尼作为老年性Ph阳性急性淋巴细胞白血病一线治疗与化疗的对照研究

1文献来源 Ottmann OG, Wassmann B, Pfeifer H, et al. Imatinib compared with chemotherapy as front-line treatment of elderly patients with Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia （Ph＋ALL） [J]. Cancer, 2007,109（10）：2068-2076.     

实时荧光定量PCR检测急性髓系白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的：应用实时荧光定量PCR（real time quantitative PCR,RQ-PCR）检测WT1基因表达水平,探讨其在监测白血病微小残留病（minimal residual disease,MRD）中的临床意义。方法：采用RQ-PCR检测70例急性髓系白血病（AML）患者、20例正常对照者骨髓细胞WTl基因拷贝数及内参基因（ABL）拷贝数,以NQ比值=WTl基因拷贝数/内参基因拷贝数计算基因表达水平。结果：初诊组与复发组WT1表达水平分别与完全缓解组及对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）,而对照组与完全缓解组之间比较及初诊与复发组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）,即初诊急性白血病患者WT1表达水平明显高于完全缓解组及对照组,复发时同样高于完全缓解组及对照组。在初诊的各种白血病亚型中,M3亚型WT1表达水平最高（平均值为3.44）,M5亚型WT1表达水平最低（平均值为0.25）。4例短期随访提示在达到完全缓解时WT1表达水平下降,而复发时再次升高。结论：用RQ-PCR测定WT1基因的表达,可以作为白血病MRD的一项监测指标。