酶联免疫吸附试验HBsAg后带现象的解决方法

在血清免疫学检验中 ,抗原抗体需有一定的比例才出现可见的反应 ,如果比例不适则发生抑制反应的现象 (抑制带 )。抗体过剩称抑制带为前带 ,抗原过剩则称后带 ［１］。现在酶联免疫吸附试验检测ＨＢｓＡｇ 的方法已广泛应用于临床 ,特异性、敏感性均很好 ,且方法更趋向快速简便 ,但也带来某些弊端 ,即出现高滴度ＨＢｓＡｇ标本表现假阴性结果 ,即后带现象［２］现探讨解决方法。１材料与方法１．１材料乙型肝炎Ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性伴乙型肝炎核心抗体（抗—ＨＢｃ）阳性血清标本２７８份 ,乙型肝炎Ｅ抗体（抗—ＨＢｅ）阳性血清标本１９…     

胶体金免疫层析法测定HBsAg不能同时判定HBeAg

近年来 ,随着金标法 胶体金免疫层析法乙型肝炎表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)测试条商品化 ,以操作简单 ,出结果快 ,特异性高等优点 ,被广泛采用。近来有人[1] 报道可用ＨＢｓＡｇ测试条同时判定乙型肝炎ｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ) ,为此笔者进行了对比研究 ,发现胶体金免疫层析法测定ＨＢｓＡｇ不能同时判定ＨＢｅＡｇ。现报道如下。1　资料与方法选择来本院就诊的乙肝患者的血清 2 4 0份 ,应用厦门英科新创科技有限公司生产的酶联免疫法(ＥＬＩＳＡ)测定乙肝两对半试剂盒检测后分为ＨＢ ｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｃ三项阳性 (俗称“大三阳”)的血清 …     

不同类型乙肝病毒感染者病毒复制状态与乙肝病毒标志物关系的研究

乙肝病毒 (ＨＢＶ)感染者的传染性常用乙肝病毒ｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ)、ＨＢｃＡｂ ＩｇＭ及ＰｒｅＳ2 Ａｇ等指标反映。随着分子生物学技术的发展 ,许多研究表明 ,即使上述指标均阴性 ,体内仍有病毒复制 ,具有传染性。我们采用灵敏的多聚酶链反应技术检测不同类型的ＨＢＶ感染者血清的ＨＢＶ ＤＮＡ ,以了解病毒复制状态 ,同时用ＥＩＡ法检测其血清中乙肝病毒表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)、乙肝病毒表面抗体 (ＨＢｓＡｂ)、乙肝病毒核心抗原 (ＨＢｃＡｇ)、ＨＢｅＡｂ ＩｇＭ、ＰｒｅＳ2 Ａｇ和ＰｒｅＳ2 Ａｂ等标志物 ,以此来评价各种标志物的意义…     

血清前－S_2蛋白检测的临床意义

采用ＥＬＩＳＡ法检测１０４例各类型乙型肝炎（乙肝）患者的血清前－Ｓ２抗原（Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｇ）及其抗体（Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｂ），结果表明，Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｇ的出现与ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ呈显著相关性（Ｐ值均＜０．００５），主要见于乙肝急性期及慢性乙肝患者，说明病毒复制活跃、传染性强。而Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｂ阳性仅见于急性乙肝恢复期。     

乙肝疫苗接种后儿童的HBV血清标志物检测

我所用酶联免疫吸附法 (ＥＬＩＳＡ)对 4738名接种过乙肝疫苗儿童血清标本进行乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)部分血清标志物检测 ,并对ＨＢｓＡｇ阳性儿童ＨＢＶ血清标志物模式进行了分析。1　材料和方法1.1　标本来源　 1999年 1月～ 2 0 0 0年 12月来我所作入托体检的 2～ 5周岁儿童血清样本 4738例 (男 2 5 0 8例 ,女 2 2 30例 )。1.2　仪器和试剂　采用Ｍｅｔｅｒｔｅｃｈ公司的∑ 96 0酶标仪。ＨＢｓＡｇ及其抗体(抗 ＨＢｓ)、ＨＢｅＡｇ及其抗体 (抗 ＨＢｅ)、乙肝核心抗体 (抗 ＨＢｃ)测定用试剂盒 ,均为上海实业科华生物技术有限公司提…     

对齐齐哈尔市建华区中,小学新生乙肝病毒携带情况的调查

1995年 9～ 10月 ,本站对管辖区的 2 3所学校的中、小学新生进行了乙型肝炎表面抗原 ,Ｅ抗原及抗 -ＨＢｓ的检测 ,现将有关结果报告如下。1　资料与方法1.1　对象　建华区 2 3所学校中、小学新生 412 3人 ,其中男性 2 0 90人 ,女性 2 0 33人。1.2　内容　检测乙型肝炎表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)、Ｅ抗原(ＨＢｅＡｇ)、抗体 (抗 -ＨＢｓ)。1.3　方法　清晨空腹采静脉血 2～ 3ｍｌ,分离血清。2　结果被检对象 412 3人 ,全部进行ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 -ＨＢｓ的检测 ,检测结果见表 1。其中ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＢｓ阳性率分别为2 .6 7%、2 7.89…     

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用ＰＣＲ法检测１６６例乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＥｂＡｇ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．２％、２８．６％、９３．５％、ＨＢｓＡｇ单项阳性者中，检出ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性７８例（孕妇占１９．２％），阳性率８１．３％。另外，在２０例血清标志物全部阴性对照组中发现ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１例，阳性率５．     

乙型肝炎血清学标志物阳性母亲初乳中HBV-DNA检测

目的探讨乙型肝炎血清学标志物阳性产妇的初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出与其血清中ＨＢＶ标志物携带状态的关系。方法对５１例乙型肝炎血清学标志物阳性产妇的血清及初乳，用酶免法检测ＨＢＶ－Ｍ，用ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与２０例正常组进行对照。结果发现母血中传播性大的３项标志物：乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、乙型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）及乙型肝炎核心抗体（抗－ＨＢＣ）中后两项易进入乳汁。３项阳性及ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ两项阳性产妇的初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率都高，而前者出现的例数更多（８／１０）。初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者母血中的ＨＢｅＡｇ均为阳性。结论对乙型肝炎血清学标志物阳性的产妇，最好直接检测其乳汁中的乙肝三项及ＨＢＶ－ＤＮＡ，以指导哺乳。     

服务性行业从业人员无症状HBsAg携带者血清、唾液、尿液中HBV-DNA情况调查及分析

我国是乙型肝炎高发区 ,无症状乙肝表面抗原携带者(ＡＳＣ)高达 2 0 % [1 ] ,对乙肝病毒感染和传染作出准确的诊断 ,是有效控制乙型肝炎流行的前提 ,在公共卫生学方面尤其重要。应用ＰＣＲ技术检测服务性行业从业人员ＨＢｓＡｇ携带者血清、唾液、尿液中乙肝病毒ＤＮＡ ,对检出情况进行分析。ＡＳＣ血清学感染标志物组合模式 ,Ａ型 :ＨＢｓＡｇ、Ａｎ ＨＢｅ、Ａｎ ＨＢｃ均阳性 ;Ｂ型 :ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、Ａｎ ＨＢｃ均阳性 ;Ｃ型 :ＨＢｓＡｇ、Ａｎ ＨＢｃ均阳性 ;Ｄ型 :ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ阳性[2 ] 。1　材料与方法1.1　材料　…     

乙肝患者HBsAg检测假阴性探讨

在应用ＥＬＩＳＡ法进行乙肝病毒标志物检测中 ,会出现ＨＢｓＡｇ阴性而ＨＢｅＡｇ和抗 -ＨＢｃ阳性的少见模式结果。我们选用了 30份该模式结果患者血清 ,将血清分别作 1∶2、1∶5、1∶10生理盐水稀释后 ,再做ＨＢｓＡｇ检测 ,其结果报告如下。1　材料和方法酶标仪ＢＩＯ -ＴＥＫ (美国 ) ;乙肝 5项试剂盒为上海科华生物技术有限公司生产 ;选我院住院及门诊患者 30例 ,乙肝 5项结果为ＨＢｓＡｇ阴性 ,ＨＢｅＡｇ和抗 -ＨＢｃ阳性。将所选用可疑标本用生理盐水作 1∶2、1∶5、1∶10稀释后 ,用ＥＬＩＳＡ方法再做ＨＢｓＡｇ检测。2　结果ＨＢ…     

乙型肝炎病毒DNA和血清标志物与肝癌相关性检测分析

目的 为了解乙型肝炎病毒ＨＢＶ ＤＮＡ和血清标志物与肝癌的关系。方法 对经影像及甲胎蛋白阳性诊断确诊的５８例肝癌患者，采用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ技术，分别进行了ＨＢＶ ＤＮＡ和血清标志物检测。结果 肝癌患者乙型肝炎标志物阳性为９４．８２％，标志物ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组占２２．４１５。ＨＢＶ ＤＮＡ检测８例全部阳性；ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ阳性组占５５．１７％，ＨＢＶ ＤＮＡ检测１５例，     

PCR热启动及稀释法与常规法检测血清HBV—DNA的结果比较

采用常规ＰＣＲ、热启动ＰＣＲ、稀释后热泪动ＰＣＲ三种方法，对经ＥＬＩＳＡ检测为ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ或抗ＨＢｅ阳性的血清标本，检测其乙型肝炎病毒ＵＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）。结果显示热启动ＰＣＲ、稀释后热启动ＰＣＲ能提高ＨＢＶ－ＤＮＡ的阳性检出率。     

PCR 法检测 HBV DNA 及其与乙肝病毒标志物关系

目的：了解乙型肝炎患者血清中乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）的检出情况，探讨其与乙肝病毒标志物的关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２５６例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，同时用ＥＬＩＳＡ法检测乙肝病毒五项标志物，即ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、抗 ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｅ。结果：ＨＢＶＤＮＡ的检出率在肝炎患者各临床类型之间无明显差异，而在乙肝病毒五项标志物不同组合存在状态之间有差异，以伴有ＨＢｅＡｇ（＋）的组合形式即ＨＢｓＡｇ（＋），抗 ＨＢｃ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）者、ＨＢＶＤＮＡ检出率最高（９４３４％），乙肝病毒五项标志物中出现抗体及其五项全阴者仍有ＨＢＶＤＮＡ检出。结论：ＨＢｅＡｇ确是ＨＢＶ活动性复制的重要标志，但仅靠乙肝病毒五项标志物的检测来判定ＨＢＶ的复制是不够准确的，同时用ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ能更准确反映体内ＨＢＶ复制情况。     

应用立可读ELA检测乙肝标志物出现假象原因的探讨

我们应用立可读ＥＬＡ在对 5 2 0 0例患者血清标本进行乙型肝炎标志物 (ＨＢＶＭ)检测时 ,发现其中有 30 0例ＨＢｅＡｇ阴性而ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ、抗 -ＨＢｅ及抗 -ＨＢｃ阳性的病例 ,现报告其血清学检验结果 ,并对这一结果出现的原因进行初步分析。1　材料和方法30 0例血清标本来自我院门诊和住院患者。所有仪器为芬兰ＤＥＮＬＥＹ洗板仪 ,芬兰ＤｅｎｌｅｙＤｒａｇｏｎＭＫ2 酶标仪。试剂为洛阳华美生物工程公司的立可读一步法试剂盒。操作严格按试剂盒说明书进行 ,样品孔的ＯＤ值≥阴性对照平均ＯＤ值× 2 .1时 ,该孔样品ＨＢｓＡｇ…     

健康人群中乙型肝炎病毒感染状况分析

我们于1998年5～11月对在我站健康体检520例人员用ＥＬＩＳＡ法检测乙肝五项标志的结果进行综合分析,报告如下。1　对象与方法11　对象　市区来我站进行健康检查的饮食服务及公共场所从业人员。12　方法　ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ均采用ＥＬＩＳＡ法,试剂(上海华泰生物工程实业有限公司提供),按全国检验技术统一操作规程进行。2　结果与分析ＥＬＩＳＡ法检测乙肝五项标志中ＨＢｓＡｇ阳性检出率为7.88%(41/520),抗ＨＢｓ28.68%(149/520),ＨＢｅＡｇ0.3%(2/520),抗ＨＢｃ9.42%(49/520)。检出率以ＨＢｓＡｇ最高…     

PCR法检测HBVDNA及其与乙肝病毒标志物关系探讨

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测２５６例乙型肝炎患者血清中乙肝病毒ＤＮＡ （ＨＢ－ＶＤＮＡ），同时用ＥＬＩＳＡ法检测乙肝病毒标志物，即ＨＢｓＡｇ，抗－ＨＢｓ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，结果表明ＨＢＶＤＮＡ的检出率与肝病临床类型无明显关系，而与乙肝病毒标志物的存在状态有关。乙肝五项病毒标志物不同组合状态，血清ＨＢＶＤＮＡ检出率不同，以ＨＢｓＡｇ（＋），抗－ＨＢｃ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）的组合形式检出率     

聚合酶链反应与ELA法检测560例HBV结果分析

我院用ＰＣＲ和ＥＩＡ法同时对 5 6 0例血清进行ＨＢＶ测试 ,进行两种方法敏感度的可行性论证。1　材料和方法5 6 0份标本来自门诊及住诊患者 ,其中 96份以前ＥＩＡ法测定为ＨＢｓＡｇ阳性 ,46 4份为随机标本。ＨＢＶＥＩＡ试剂盒购于上海科华公司 ,批号 981 1 1 7,灵敏度Ｉｎｇ/ｍｌ;为合格部颁标准 ;乙肝病毒基因检测试剂盒购于上海复华公司。ＨＢＶＥＩＡ法、ＨＢＶ -ＤＮＡＰＣＲ法均按试剂说明书进行操作。2　结果34例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 -ＨＢＣ ,阳性 ,2 8例ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＢｅ、抗 -ＨＢｃ ,阳性 ,2 3例ＨＢｓＡｇ、抗 …     

乙肝病毒标志物阳性产妇母乳喂养的研究

目的：探讨乙型肝炎（ 乙肝） 病毒携带孕妇胎儿宫内感染率和乳汁中乙肝病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） 阳性率的相关性,分析研究乙肝血清学指标阳性产妇是否适于哺乳。方法：对５２ 例乙肝血清学指标阳性的产妇,应用酶联免疫吸附法和斑点杂交法分别检测脐血和初乳中的 Ｈ Ｂ Ｖ 标志物（ Ｈ Ｂ Ｖ Ｍ） 以及 Ｈ Ｂ Ｖ 脱氧核糖核酸（ Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ） ,并对比分析。结果：孕妇 Ｈ Ｂ Ｖ 阳性与相应的脐血和初乳中的 Ｈ Ｂ Ｖ Ｍ 阳性率以及 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 的检出率呈高度的一致性（ Ｐ ＞ ００５） 。５２ 例 Ｈ Ｂ Ｖ Ｍ 阳性的孕妇中,脐血和初乳中 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 的检出率均以乙肝表面抗原（ Ｈ Ｂｓ Ａｇ） 、乙肝ｅ 抗原（ Ｈ Ｂｅ Ａｇ） 及乙肝核心抗体（ Ａｎｔｉ Ｈ Ｂｃ）３ 项阳性者最高（８５７１ ％ 和９２８６ ％ ） , Ｈ Ｂｓ Ａｇ 、 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 双项阳性者次之（８０ ％ ） , Ｈ Ｂｓ Ａｇ 单项阳性者最低（２０ ％ ） 。结论： Ｈ Ｂ Ｖ 宫内传播以及初乳排毒率与母亲的 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 和 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 状态密切相关。直接检测初乳中 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 为指导哺乳的最可靠方法。血中 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 、 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 和 Ａｎｔｉ Ｈ Ｂｃ３ 项阳性以及 Ｈ Ｂｓ     

HBsAg阴性乙肝型炎临床与发生机理

乙型病毒性肝炎以ＨＢｓＡｇ阳性而诊断。近年发现由于宿主免疫应答亢进或乙肝病毒(ＨＢＶ)变异等原因形成ＨＢｓＡｇ阴性乙型肝炎,现将其临床与发生机理概述如下。1　ＨＢｓＡｇ阴性乙型肝炎的诊断ＨＢＶ感染标志物(ＨＢＶＭ)包括ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ及抗ＨＢｃ等,多项或单项阳性表示ＨＢＶ感染,ＨＢｓＡｇ阳性肝炎称为乙型病毒性肝炎。Ｗａｎｇ等[1]报告206例ＨＢｓＡｇ阴性献血员,抗ＨＢｓ阳性21例(102%)、抗ＨＢｃ阳性10例(49%)、抗ＨＢｓ及抗ＨＢｃ皆阳性141例(684%)、抗ＨＢｓ及抗ＨＢｃ皆阴性34例(165%),其中…     

ELISA一步法检测HBsAg漏检分析

目的：一步法检测ＨＢｓＡｇ的漏检分析。方法：运用ＥＬＩＳＡ二步法、稀释后一步法、一步法对乙肝“两对半”如下模式①ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ②ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ③ＨＢｅＡｂ④ＨＢｃＡｂ阳性的ＨＢｓＡｇ进行检测。结果：在１７０例标本中,二步法ＨＢｓＡｇ检出率为２１．１％,稀释后一步法为１０％。结论：一步法受ＨＯＯＫＳ效应影响明显,敏感性低,ＨＢｓＡｇ阳性漏检明显,ＨＢｓＡｇ检测宜用二步法。