生姜HPLC-DAD指纹图谱的优化研究

目的优化生姜高效液相色谱指纹图谱,为其质量控制提供可靠依据。方法采用Aichrom Bond-AQ C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)和水(B)流动相,梯度洗脱(0~8min,25%A;8~20min,25%A→60%A;20~40min,60%A→70%A;40~70min,70%A→88%A;70~80min,88%A→90%A;80~85min,90%A),检测波长280nm,流速1ml/min,柱温40℃。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)"进行指纹图谱分析。结果分别优化色谱柱、检测波长、流动相和HPLC梯度洗脱条件,标定了15个共有指纹特征峰,指认了6-姜酚、8-姜酚、香兰素3个色谱峰,建立10个批次的生姜HPLC-DAD色谱指纹图谱,相似度均大于0.9。结论该方法经方法学考察符合指纹图谱技术要求,为有效地控制生姜的品质评价和质量控制提供参考依据。     

淫羊藿总黄酮胶囊指纹图谱研究

目的:建立淫羊藿总黄酮胶囊HPLC指纹图谱测定方法。方法:以淫羊藿苷为参照物,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速为1.0 m L·min~(-1);柱温为25℃;检测波长为270 nm。结果:建立了淫羊藿总黄酮胶囊的指纹图谱,确定了淫羊藿总黄酮胶囊中14个共有峰,10批成品指纹图相似度在0.95以上,同时指认了淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和宝霍苷Ⅰ各色谱峰。结论:建立的HPLC指纹图谱有较好的精密度、重复性和稳定性,适用于淫羊藿总黄酮胶囊的质量控制。     

金莲花茎叶的HPLC指纹图谱研究

目的建立金莲花茎叶HPLC指纹图谱分析方法。方法以荭草苷为对照品,采用Welch Materials Ultimate TMXB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.35%磷酸(B)梯度洗脱,0～25 min,15%A;25～60 min,15%～25%A;60～90 min,25%～30%A;90～110 min,30%～100%A;110～120 min,100%A;检测波长340 nm,体积流量为1.0 mL/min,柱温30℃;采用SPSS 19.0进行系统聚类分析。结果建立金莲花茎叶的HPLC指纹图谱,标定22个共有峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求;相似度和聚类分析结果表明,药材质量主要与其产地有关,同时与采集时间也有一定关系。结论此研究方法稳定、可靠、重现性好,可用来控制金莲花茎叶的质量。     

HPLC指纹图谱化学模式识别法评价淫羊藿药材质量一致性

目的:建立淫羊藿药材HPLC指纹图谱,采用相似度计算和化学模式识别的方法,评价淫羊藿药材质量的一致性。方法:采用高效液相色谱法。以Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-0.4%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0mL/min,柱温为30℃,进样量为20μL,检测波长为270nm,对淫羊藿指纹图谱进行相似度计算和化学模式识别分析。结果:淫羊藿药材指纹图谱测定方法精密度、稳定性、重复性良好,以13批淫羊藿药材建立指纹图谱共有模式,淫羊藿药材相似度均达到0.91,模式识别分析结果与其一致;标定其中18个共有特征峰,经对照,指认出淫藿定A、淫藿定B、淫藿定C、淫羊藿苷4种主要成分。结论:该方法稳定、易操作,可为科学评价和控制淫羊藿药材的质量提供参考。指纹图谱结合化学模式识别分析技术可以有效应用于淫羊藿药材质量的一致性评价,并为淫羊藿药材商品规格划分提供参考依据。     

人工虫草与冬虫夏草HPLC特征图谱研究

目的以人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草为研究对象,建立高效液相色谱(HPLC)特征图谱。方法采用超声法提取虫草中的水溶性成分,HPLC建立虫草的特征图谱。采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.04 mol/L磷酸二氢钾溶液(B),梯度洗脱(0~16 min,0%A;16~38 min,0%→10%A;38~58 min,10%→15%A;58~65 min,15%→0%A),流速1.0 m L/min,柱温25℃,检测波长260 nm,进样体积20μL。运用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A)》,建立人工虫草与天然虫草HPLC特征图谱,同时指认了7个核苷类成分,并进行比较研究。结果本方法精密度、重复性、稳定性良好。以腺苷为参照峰,对11批冬虫夏草、10批人工北虫草和12批发酵虫草菌粉进行指纹图谱分析结果显示,其指纹图谱相似度分别为0.889~0.982、0.781~0.980、0.502~0.970。结论天然虫草的指纹图谱相似度较高,人工北虫草和发酵虫草菌粉指纹图谱的相似度较低。本方法可作为评价人工虫草和天然虫草质量的参考依据。     

基于多波长切换HPLC同时测定荆芥-防风药对9种化学成分及指纹图谱研究

目的建立多波长切换HPLC同时测定荆芥-防风药对中木犀草苷、橙皮苷、木犀草素、芹菜素、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、印枳树皮苷、亥茅酚苷含量的方法,并建立HPLC指纹图谱。方法采用Agilent SB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-甲醇(1∶1,A)-0.03%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0→19 min,12%→13%A;19→25 min,13%→14%A;25→40 min,14%→25%A;40→53 min,25%→45%A;53→70 min,45%→60%A;70→90 min,60%→80%A),多波长切换检测(0～61 min为283 nm,61～90 min为254 nm),流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果测定了20批荆芥-防风药对中9种成分的含量,建立了HPLC指纹图谱。方法学考察表明,仪器精密度良好,RSD均小于2.24%;方法重复性良好,RSD均小于3.14%;供试品溶液在48 h内稳定;9种成分的加样回收率为97.05%～102.64%,RSD均小于3.27%;9种成分在各自线性范围内均有良好的线性关系,相关系数为0.999 7～1.000 0。所建立的指纹图谱与特征图谱的相似度均大于0.9,标定了24个共有峰,各色谱峰分离度较好。结论本研究建立的方法操作简便,准确度高,灵敏度及重复性好,可用于荆芥-防风药对中9种成分及指纹图谱的测定,实现多指标质量控制。     

紫红参的HPLC指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立紫红参的指纹图谱。方法:色谱柱:Aglient Zorbax SB-Aq(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱0～25 min 20%～60%A;25～40 min 60%～90%A;检测波长203 nm;柱温:35℃;流速:1.0 mL/min;进样体积:10μL。结果:在选定的色谱条件下,通过相似度分析软件确定了紫红参指纹图谱有12个共有峰。10批紫红参样品整体相似度较高,相似度为0.885～1.000。结论:实验中所建立的方法稳定、可靠,为紫红参的质量评价与控制提供了依据。     

特征图谱结合化学计量学与灰色关联度的川产枳壳药材质量评价

目的：利用高效液相色谱法(HPLC)建立不同产地川产枳壳特征图谱，结合熵权法和灰色关联度对川产枳壳药材质量差异性进行分析与评价。方法：采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)，以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱(0～12 min,25%～33%A;12～21 min,33%～41%A;21～30 min,41%～42%A;30～40 min,42%～59%A;40～53min,59%～72%A;53～60min,72%A;60～65min,72%～100%A;65～70min,100%A;70～71min,100%～25%A;71～80min,25%A)，流速1.0 mL·min^-1，进样量10μL，检测波长330 nm。对50批不同产地(四川、重庆、江西、湖南)枳壳药材进行检测，利用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)生成特征图谱并指认色谱峰，进行相似度评价。采用IBM SPSS 19.0、SIMCA14.1等软件对50批枳壳药材结果进行多元统计分析，利用熵权法和灰色关联度计算川...     

基于指纹图谱结合多模式化学计量学方法评价补骨脂药材质量

目的采用指纹图谱并结合多种化学计量方法,筛选特征化学成分,区分不同来源的药材,综合评价中药的质量。方法采用HPLC法建立补骨脂药材指纹图谱,相似性分析(similarity analysis,SA)、聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)化学计量方法进行分析。色谱柱为Waters X Select HSS T3 xp(150mm×2.1 mm,2.5μm),流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,0～10 min,5%～10%A;10～15 min,10%～35%A;15～25 min,35%～60%A;25～35 min,60%～85%A;35～50 min,85%～95%A;体积流量0.3 mL/min,检测波长为246nm,柱温为30℃,进样量为1μL。以补骨脂素为参照,绘制11批样品的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年版)》进行相似性评价分析,确定共有峰,并采用SIMCA 13.0、SPSS 22.0软件进行HCA和PCA。结果 1...     

元胡止痛片HPLC指纹图谱研究

目的建立元胡止痛片HPLC指纹图谱。方法采用Extent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸溶液(三乙胺调pH 6.5,A)-甲醇(B),梯度洗脱程序为:0～45 min,88%～40%A;45～70 min,40%～20%A;70～75 min,20%～10%A;75～80 min,10%～5%A;80～85 min,5%A;检测波长280 nm,柱温35℃,体积流量1.0 mL/min。结果在HPLC色谱指纹图谱中,确定了16个共有峰,建立了元胡止痛片的共有模式,在14批元胡止痛片样品中有10批样品的指纹图谱相似度在0.9以上。结论本法结果准确、重现性好,为元胡止痛片HPLC指纹图谱质量控制提供了参考。     

维吾尔药材菠菜子的DNA条形码鉴定及质量控制研究

目的:基于DNA条形码分子鉴定法建立维吾尔药材菠菜子的鉴定方法,并构建菠菜子HPLC指纹图谱和其指标性成分β-蜕皮甾酮的HPLC含量测定方法,为菠菜子的质量控制提供参考。方法:以核糖体DNA第二内部转录间隔区(ITS2)为主体条形码序列对菠菜子进行DNA条形码鉴定;采用Agilent ZORBAX SB-Aq C_(18)色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以甲醇(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相梯度洗脱(0～10 min,10%A; 10～20 min,10%→30%A;20～40 min,30%→40%A; 40～65 min,40%→80%A),检测波长240 nm,建立菠菜子的HPLC指纹图谱方法;采用Agilent ZORBAX SB-Aq C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相梯度洗脱(0～15 min,45%→40%A; 15～25 min,40%→80%A; 25～30 min,80%→45%A; 30～45 min,45%A),检测波长248 nm,建立指标性成分β-蜕皮甾酮的HPLC含量测定方法。结果:DNA条形码鉴定系统进化树显示,ITS2序列可将菠菜子与其近缘物种很好区分,且分支支持率达100%; HPLC指纹图谱标定7个共有峰,10批菠菜子药材与对照图谱的相似度均大于0.95;指标性成分β-蜕皮甾酮在6.115～122.304μg/m L范围内线性关系良好(r=0.9997),重复性试验RSD 2.0%,加样回收率为97.43%～103.59%,10批样品中β-蜕皮甾酮的含量为0.099%～0.241%。结论:DNA条形码可准确鉴定菠菜子的基原,HPLC指纹图谱专属性强,结合指标性成分β-蜕皮甾酮的含量测定可以控制菠菜子药材的质量。     

不同产地白术饮片HPLC指纹图谱研究

目的:通过对不同产地白术饮片研究，建立白术饮片高效液相指纹图谱。方法:采用HPLC法。色谱柱：Agilent C₁₈(5μm, 250 mm×4.6 mm);流动相：乙腈-水，梯度洗脱(0～10 min, 50%～70%A;10～20 min, 70%～80%A,20～30 min; 80%～92%A,30～38 min, 92%～100%A),流速为1.0mL·min^-1,柱温为25℃,白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ检测波长为220 nm,白术内酯Ⅱ检测波长为276 nm,进样量20μL。以2号峰白术内酯Ⅲ为参照，记录12批次白术饮片的HPLC图谱，然后将其导入《中药色谱指纹图谱相似度评价软件系统2012版》(国家药典委员会),采用指纹图软件确定共有峰。结果:建立12批白术饮片的HPLC指纹图谱，标定12个共有峰，相似度均大于0.90。经验证，与对照指纹图谱具有较好的一致性。结论:研究建立HPLC指纹图谱可用于白术饮片质量控制方法，同时也为白术饮片质量评价提供科学依据。     

黔产钩藤药材茎枝和叶的HPLC指纹图谱比较

目的:比较黔产钩藤带钩茎枝和叶的HPLC指纹图谱,分析二者化学成分的差异,为钩藤叶的后续研究提供实验依据。方法:采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版计算钩藤带钩茎枝和叶各10批样品的HPLC指纹图谱的相似度,以钩藤碱和异钩藤碱为指标成分进行指纹图谱比较,色谱条件为Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0.02%氨水(B)梯度洗脱(0~45 min,30%~60%A;45~75 min,60%~64%A;75~90 min,64%~70%A;90~95 min,70%~70%A),流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长245 nm,进样量10μL。结果:确定了16个共有峰构成10批钩藤茎枝药材的特征指纹图谱,各批样品的相似度均>0.87;16个共有峰构成10批钩藤叶特征指纹图谱,各批样品的相似度均>0.80。结论:钩藤叶中异钩藤碱含量高于钩藤茎枝,但二者含有的钩藤碱含量相差不大。建立的指纹图谱条件能用于比对钩藤茎枝和叶中主要化学成分,为钩藤叶的药用研究提供参考。     

金乌骨通胶囊HPLC指纹图谱研究

目的:建立金乌骨通胶囊的高效液相色谱指纹图谱分析方法,为金乌骨通胶囊药品质量评价积累数据。方法:采用反相高效液相色谱方法,以安捷伦Eclipse plus C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈(A)-1%冰醋酸水溶液(B),梯度洗脱程序为:0~15min,9~10%A,流速1.0ml/min;15~65min,10~40%A,流速1.0ml/min;65~115min,40~70%A,流速1.5ml/min;115~125min,70%A,流速1.5ml/min;检测波长为0~60min为254nm,60~85min为380nm,85~125min为254nm;洗脱总时间为125min;柱温30℃;进样量20μl,进行指纹图谱研究。结果:建立金乌骨通胶囊高效液相指纹图谱,以淫羊藿苷色谱峰为参照峰,确定13个共有峰,共测定29批样品,样品指纹图谱的相似度均大于0.985。结论:本方法分离效果好,精密度、稳定性、重现性等指标均良好,可用于金乌骨通胶囊的产品质量控制及市场真伪品鉴别。     

基于中药煮散研究淫羊藿与狗脊配伍合煎对化学成分的影响

目的:建立同时测定淫羊藿苷与金丝桃苷的HPLC法,结合指纹图谱技术评价淫羊藿配伍狗脊煮散对二者化学成分的影响。方法:采用HPLC测定淫羊藿苷与金丝桃苷的含量,采用中药色谱指纹图谱相似度软件评价两种溶媒的提取效果,分析合煎液主要色谱峰的来源。结果:淫羊藿与狗脊水合煎液中淫羊藿苷与金丝桃苷溶出量降低,50%乙醇合煎液中两种成分溶出量基本不变。结论:淫羊藿与狗脊配伍合煎后指标成分发生了量变,但未产生新成分;50%乙醇的提取效果优于水。     

经典名方苓桂术甘汤HPLC指纹图谱的建立及3种成分含量测定

目的建立经典名方苓桂术甘汤HPLC指纹图谱及3种成分含量测定方法,为经典名方苓桂术甘汤物质基准的研究提供参考。方法色谱柱为CNW Athena C18(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,5%～10%A;10～20 min,10%～15%A;20～50 min,15%～30%A;50～75 min,30%～40%A;75～95 min,40%～50%A;95～111 min,50%～95%A),体积流量为1.0 mL/min,进样量为10μL,柱温30℃。指纹图谱及甘草苷、甘草酸铵含量测定的检测波长为230 nm,桂皮醛为290 nm。采用国家药典委员会出版的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012年版),建立10批苓桂术甘汤指纹图谱,并使用HPLC法同时测定3种指标成分含量。结果对10批苓桂术甘汤进行研究,其指纹图谱相似度均大于0.9,标定了24个共有峰,各峰分离度较好。含量测定结果表明其甘草苷、甘草酸铵含量较高。经方法学考察,3种成分在一定浓度范围内呈良好的线性关系;精密度RSD值均小于1.0%;甘草苷、桂皮醛、甘草酸铵的平均加样回收率分别为98.35%、101.51%、102.59%,RSD均小于2.5%;样品在48 h内稳定;方法的重复性良好。结论建立的经典名方苓桂术甘汤指纹图谱及3个成分的含量测定方法简便、稳定、准确可靠,可用于苓桂术甘汤物质基准的质量控制。     

淫羊藿茎叶中5种黄酮类成分分析及质量评价

目的测定不同品种和产地淫羊藿茎叶中朝藿定A、B、C、宝藿苷I、淫羊藿苷5个黄酮类成分的量,分析结果差异,并依照《中国药典》2010年版进行质量评价。方法建立HPLC方法,色谱条件为HederaTM ODS-2 C18柱(300 mm×4.6 mm,5μm),乙腈(A)-水(B)梯度洗脱,0～8 min,17%A;8～32 min,27%A;60～70 min,85%A;70～80 min,90%A。检测波长270 nm。结果 5种黄酮类化合物在48.0～2 197.5μg线性关系良好,r值均大于0.999 0(n=8);平均回收率为97.8%～100.35%,RSD为1.37%～2.48%(n=6)。27批淫羊藿叶中有20批淫羊藿苷的量低于《中国药典》规定,16批淫羊藿茎中只有4批检出淫羊藿苷。结论淫羊藿中各黄酮量随品种、部位和产地不同而不同,药用部位叶中的量是茎的10倍至数10倍,品种差异是各黄酮量变化的主要因素。     

指纹图谱评价和多元统计分析不同产地朝鲜淫羊藿药材质量

目的 采用高效液相色谱法建立朝鲜淫羊藿药材指纹图谱,并通过化学模式识别和多元统计分析,探析表征不同产地朝鲜淫羊藿质量差异的标志物。方法 采用高效液相色谱法建立9个产地朝鲜淫羊藿药材指纹图谱,通过对照品比对和高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱技术对共有峰进行指认,并利用相似度评价结合聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析等统计分析方法探析不同产地朝鲜淫羊藿药材的差异性成分。结果 9个产地朝鲜淫羊藿指纹图谱共标定11个共有峰,与对照指纹图谱的相似度均在0.977以上。聚类分析将9个产地朝鲜淫羊藿样品分为3类,主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析结果与聚类分析一致,并筛选得到6个产地差异标志物,分别为色谱峰1(金丝桃苷)、色谱峰9(朝鲜淫羊藿苷B)、色谱峰6(淫羊藿苷)、色谱峰4(朝藿定B)、色谱峰7[Anhydroicaritin-3-O-rhamnoside(1-2)-furanacid-7-O-glucoside]和色谱峰11。结论 朝鲜淫羊藿在不同产地之间存在一定的质量差异,建立的朝鲜淫羊藿指纹图谱可为药材质量评价提供依据。     

不同品种淫羊藿药材的指纹图谱研究

目的建立淫羊藿药材的HPLC指纹图谱测定方法,对不同品种的淫羊藿药材进行研究。方法色谱柱为Agilent ZORBAX XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长270 nm,柱温为25℃。结果测定了不同品种淫羊藿药材的指纹图谱,淫羊藿苷含量差异较大。结论建立了淫羊藿药材的指纹图谱测定方法,为鉴别及有效控制不同品种淫羊藿药材质量提供了依据。     

昆仙胶囊HPLC特征指纹图谱和多成分定量测定研究

目的 建立昆仙胶囊HPLC特征指纹图谱结合多成分含量测定的方法,为其质量控制提供参考。方法 采用Agilent Zorbax SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,柱温33℃,检测波长270 nm。以朝藿定A为参照峰,建立15批昆仙胶囊特征指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012A版）、聚类分析及偏最小二乘法-判别分析方法进行评价,同时测定金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷以及宝藿苷I的含量。结果 建立了昆仙胶囊特征指纹图谱,共标定了21个共有峰,并通过对照品指认了其中的15个成分,各批次样品的相似度均大于0.9。金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷I在各自范围内线性关系良好（r>0.999）,15批昆仙胶囊样品中上述6个成分的质量分数分别为2.817～7.527、7.287～9.103、8.730～18.675、33.377～70.371、35.297～50.291、4.059～9.079 mg/g。结论 建立了昆仙胶囊特征指纹图谱结合多成分同时测定的方法,简便、准确、重现性好,可用于昆仙胶囊的质量控制。