MDR1、SOX4、WT1在急性髓系白血病中的作用及表达水平

目的 探讨多药耐药基因(MDR1)、SOX4、Wilms瘤基因1(WT1)与急性髓系白血病(AML)临床特征及预后的关系。方法 选取2020年1月至2021年8月该院收治的149例AML患者作为AML组,72例轻度贫血患者作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测骨髓组织中MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平。分析MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平与AML临床特征及预后的关系。结果 AML组骨髓组织中MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。白细胞计数≥40×10⁹/L、有器官浸润、治疗后非完全缓解AML患者骨髓组织中MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平均高于白细胞计数<40×10⁹/L、无器官浸润及治疗后完全缓解AML患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。MDR1 mRNA、SOX4 mRNA及WT1 mRNA高表达AML患者总生存率均低于MDR1 mRNA、S...     

中期因子在急性髓系白血病患者的表达及临床意义

为了探讨中期因子(midkine,MK)与急性髓系白血病(AML)患者预后的关系,本研究采用半定量RT-PCR方法检测65例AML患者与15例正常人骨髓单个核细胞(MNC)MK、bcl-2mRNA的表达,并对20例AML患者和5例正常人采用Westernblot检测MNC中MK基因的表达。结果显示:初治组、复发组和化疗缓解组MK基因表达水平分别为0.331±0.436,0.374±0.463和0.067±0.190,正常人MK基因表达阴性;MK基因表达阳性与表达阴性患者的首次完全缓解(CR)率分别为63.16%和93.55%(P=0.01),MK基因表达阳性患者的复发率(100%)明显高于表达阴性者(40%)(P=0.019);多药耐药组与药物敏感组MK基因的表达率分别为57.69%和25.64%(P<0.01);MK与bcl-2基因表达呈正相关(r=0.556,P<0.001)。结论:AML患者白血病细胞可以产生MK,且MK阳性率的高低与AML病期相关,是影响AML患者近期预后的重要因素之一。MK可能通过上调bcl-2的表达抑制白血病细胞凋亡。     

儿童急性髓细胞性白血病中SOX4表达水平及其临床意义研究

目的 研究儿童急性髓细胞性白血病(AML)中性别决定相关的高迁移率基因群4(SOX4)表达水平及其的临床意义。方法 前瞻性选择2014年4月至2017年12月期间在河北北方学院附属第一医院首次诊断为AML的45例患儿作为AML组,同期接受骨髓穿刺活检并证实为正常骨髓、一般资料与AML患儿匹配的20例儿童作为对照组。检测AML组和对照组骨髓组织中SOX4的表达;分析AML组中不同临床病理特征患儿骨髓中SOX4表达水平的表达。根据AML组中SOX4表达分为SOX4阳性组和SOX4阴性组,比较两组患儿增殖、侵袭基因[细胞周期蛋白D(Cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、神经性钙粘附蛋白(N-cadherin)、上皮性钙粘附蛋白(E-cadherin)]表达水平;随访AML患儿的生存情况。结果 AML组骨髓中SOX4的阳性表达率及mRNA表达水平均明显高于对照组(P <0. 05),且AML组外周血白细胞计数≥100×109/L患儿骨髓中SOX4的阳性表达率明显高于外周血白细胞计数<100×109/L患儿(P <0. 05);AML组中SOX4阳性表达患儿骨髓中cyclin D1、MMP9、N-cadherin的mRNA表达水平明显高于SOX4阴性表达患儿,p21、E-cadherin的mRNA表达水平明显低于SOX4阴性表达患儿,总生存时间短于SOX4阴性表达患儿(P <0. 05)。结论 儿童AML骨髓中SOX4高表达与增殖侵袭基因表达的变化、生存时间的缩短有关。     

白血病干细胞抗原在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的:分析白血病干细胞(LSC)相关抗原在急性髓系白血病(AML)中的特点,探讨LSC特异性抗原与AML的类型、细胞遗传学及临床疗效的关系。方法:选取2013年1月-2016年3月在本院血液科住院的初诊急性髓系白血病(除外M3)患者61例,采用直接免疫荧光FCM进行白血病细胞的免疫表型及Tim-3、CD96、CD123检测,患者分为阳性组与表达阴性组,分析LSC抗原表达水平及与高白细胞计数、染色体、疗效的关系。结果:61例初诊AML(除外M3)患者中,Tim-3、CD96、CD123表达率分别为52.45%、44.26%、55.73%;在各亚型中的表达率与总体病例表达阳性率比较差异无统计学意义(P 0.05)。Tim-3、CD96、CD123表达阳性的患者更容易出现高白细胞计数,但与表达阴性的患者比较差异无统计学意义(P 0.05);Tim-3、CD96表达阳性的患者中检测出预后不良染色体核型比例较高,与表达阴性的患者比较差异有统计学意义(P 0.05); CD123表达阳性与阴性的患者中检测出预后不良染色体核型比例相差不大(P 0.05)。2个化疗疗程后Tim-3、CD96、CD123表达阳性的患者完全缓解率明显低于表达阴性的患者(P 0.05)。Tim-3、CD96表达阳性与阴性患者的总生存(OS)期比较,差异有统计学意义(P 0.05),CD123表达阳性与阴性患者OS期相差不大。结论:Tim-3、CD96、CD123在初诊AML(除外M3)各亚型中的表达水平与总体病例表达水平相差不大;Tim-3、CD96、CD123表达阳性的患者容易出现高白细胞计数,且2个化疗疗程后完全缓解率明显低于表达阴性的患者;Tim-3、CD96表达阳性患者中检测出预后不良染色体核型比例高,同时其总生存期也短于阴性患者。     

CAS在急性髓系白血病患者中的表达及临床意义

目的:探讨急性髓系白血病(AML)中的细胞凋亡易感蛋白(CAS)的表达及其与临床特征的相关性。方法:采用蛋白免疫印迹法和免疫组化法检测54例AML患者和24例非血液系统恶性疾病患者骨髓组织中CAS的表达,比较AML组和对照组CAS表达水平,并分析其在AML中的表达与性别、年龄、外周血白细胞数、血红蛋白及血小板计数、骨髓原始细胞比例、ki-67指数、细胞遗传学和分子生物学预后危险度分层、髓外浸润等临床特征的关系。结果:蛋白免疫印迹法结果显示,AML患者骨髓活检组织中的CAS蛋白表达显著高于对照组(P<0.05)。免疫组化法检测结果显示,AML组和对照组CAS均主要定位于胞浆。54例AML患者中,CAS高表达者14例(25.9%),对照组24例患者中CAS全部低表达,AML组中CAS高表达率明显高于对照组(P<0.05)。AML患者中CAS高表达组和CAS低表达组之间,预后危险度分层及首次化疗缓解率有差异,且差异有统计学意义(P<0.05)。CAS高表达组的高危患者和首次化疗后未缓解的患者所占比例明显高于CAS低表达组(57.1%vs 27.5%, 30.8%vs 7.9...     

IGFBP3在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的:探讨胰岛素样生长因子结合蛋白3(insulin-like growth factor binding protein3,IGFBP3)在急性髓系白血病的表达及临床意义。方法:以GAPDH为内参,应用SYBR-GreenΙ实时荧光定量PCR法检测IGFBP3基因在43例AML初治(de novo AML)患者、36例完全缓解(CR)患者、28例对照者的骨髓单个核细胞中的表达情况,比较三组基因表达的差异。结果:初治组的IGFBP3基因表达水平均低于CR组和对照组(P0.05),CR组与对照组之间无统计学差异(P0.05)。结论:IGFBP3可能作为一种抑癌基因在急性髓系白血病的发病中起到一定的作用,完全缓解后表达水平恢复,其可以作为一种评估临床疗效的指标。     

microRNA-155在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的:探讨microRNA-155(miR-155)在急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达及其临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR方法检测miR-155在80例AML患者及11例阴性对照者BMMNC中的表达水平。结果:miR-155在AML患者初治组、缓解组的表达量与对照组相比均明显上调(P0.01),初治组明显高于缓解组(P0.05)。miR-155的表达水平与患者临床特征均无明显相关性。在AML患者不同细胞遗传学分组间,与预后良好组相比,miR-155表达水平在预后中等组及不良组均明显增高(P0.05、P0.05),但预后中等组与不良组相比差异无统计学意义(P0.05)。对初治AML患者诱导治疗后追踪结果显示,高表达组与低表达组初次诱导缓解率分别为59.09%和87.5%(X2=4.8,P0.05),且化疗后未完全缓解患者初治时的miR-155表达水平明显高于化疗后达完全缓解患者(P0.05)。结论:miR-155在AM L患者中呈高表达并降低AM L患者的完全缓解率,miR-155高表达是AML患者的不良预后因素。     

STAT3基因在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的:探讨STAT3基因在初诊急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达及其与临床特征的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR检测38例AML患者骨髓中STAT3 mRNA表达水平,分析其与临床特征及预后的相关性;利用Western blot检测AML患者骨髓中STAT3蛋白表达水平。选择15例正常人作为对照组。结果:在mRNA水平上,AML组的STAT3表达水平明显高于正常对照组(P0.05);AML组的STAT3表达水平与危险程度呈正相关(P=0.01,r=0.592),高危组的STAT3表达水平明显高于标危组及对照组,其差异均有统计学意义(P0.01,P0.01),其余各组间差异无统计学意义(P 0.05);M5组STAT3表达水平显著高于对照组,且有统计学差异(P=0.01);M2与M5及对照组之间STAT3表达水平无统计学差异(P=1,P=0.066)。STAT3低表达组患者的中位生存时间长于高表达组,但其差异无统计学意义(P=0.146)。在蛋白水平上,AML组STAT3表达水平高于对照组(P=0.017)。结论:STAT3基因在AML患者中存在高表达,且与患者免疫分型、危险度具有相关性。     

NRAS基因突变在成人急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的:探讨神经母细胞瘤RAS病毒致癌基因(NRAS)在急性髓系白血病患者中的突变率及分布情况。方法:提取骨髓基因组DNA,采用聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)扩增目的基因片段,应用基因测序分析NRAS基因突变情况。同时检测FLT3-ITD、DNMT3A、NPM1、CEBPA、TET2、IDH2、ASXL1及c-KIT基因突变情况,分析其与NRAS突变之间的关系。结果:108例初发急性髓系白血病患者中共发现NRAS突变11例,突变率为10.2%,其中G12D 6例、G13D 3例、G61K 2例。突变组患者外周血白细胞计数偏高(P0.05),突变更易发生在M4亚型中,而与M2亚型相互排斥(P0.05),突变组较未突变组更易表达CD13(P0.05),而在年龄、性别、血红蛋白水平、血小板计数、乳酸脱氢酶水平、骨髓原始细胞比例、细胞遗传学变化、与其他基因突变的关系以及完全缓解(CR)率和2年总生存(OS)率方面差异均无统计学意义(P0.05)。结论:NRAS基因突变对AML患者的预后无影响。     

急性髓系白血病细胞p16基因结构及转录水平表达

目的：了解ｐ１６基因在急性髓系白血病（ＡＭＬ）发病中的意义。方法：用聚合酶链反应－单链ＤＮＡ构象多态性、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法分析１６例ＡＭＬ细胞ｐ１６基因结构及转录水平表达。结果：１６例均无ｐ１６基因的缺失、突变。初治和复发的１２例ＡＭＬ的ｐ１６ｍＲＮＡ表达水平明显低于４例长期缓解者及正常对照。１例ｐ５３基因突变ＡＭＬ的ｐ１６ｍＲＮＡ有明显升高。结论：ｐ１６基因在ＡＭＬ发病中可能不占重要地位，而在ＡＭＬ病态造血的维持中起一定作用，在ｐ５３突变时其表达反馈性升高，显示一种反馈环路失衡，提示在研究单个基因的基础上观察细胞周期检测点功能具有重要意义。     

CD200在急性髓系白血病中的表达特点及其临床意义

本研究探讨急性髓系白血病（acute myelocytic leukemia,AML）中CD200的表达率与临床特征的关系,分析CD200在AML预后判断中的价值。应用流式细胞术检测CD200及免疫表型,用R显带技术分析染色体核型,FISH技术检测AM L1/ETO、PM L/RARa和inv（16）,PCR方法检测AM L1/ETO和PM L/RARa融合基因。结果表明：在54例初诊患者中CD200抗原表达阳性率为57.41%（31/54）;CD200抗原表达在性别与年龄方面差异无统计学意义（P〉0.05）;CD200抗原表达在CD34和CD117之间具有显著的统计学意义（P〈0.05）;CD200抗原表达在染色体核型差异方面无统计学意义（P〉0.05）;核心结合因子（core binding factor,CBF）阴性的AML中CD200抗原表达在CD34和CD117表达方面均具有显著的统计学意义（P〈0.05）。结论：CD200的表达与AML预后不良相关。     

HOXB4、PRDM16及HOXA9在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的:检测HOXB4、PRDM16及HOXA9在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达水平,探讨其临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR方法,检测40例初治或复发AML患者、9例完全缓解患者和19例对照者(非恶性血液病患者及健康供者)骨髓细胞HOXB4、PRDM16及HOXA9 mRNA表达水平,分析其与疾病特征、临床疗效之间关系。结果:初治或复发AML患者骨髓细胞中HOXB4、PRDM16和HOXA9表达水平均明显高于非恶性血液病患者(P0.05);初治或复发AML患者HOXB4基因表达水平与骨髓白血病细胞比例成正相关(r=0.39),HOXB4、PRDM16和HOXA9基因的表达水平两两之间具有相关性;AML不同病程阶段(初诊、复发、缓解)HOXB4、PRDM16基因表达水平差异具有统计学意义;按预后危险度分层将初治及复发AML患者分为高、中、低危3组,3组之间HOXB4、PRDM16、HOXA9表达水平的差异无统计学意义;经2个疗程正规化疗,缓解组(CR/PR)患者治疗前的3个基因表达水平均低于未缓解组治疗前水平(P0.05);上述3个基因低表达组缓解率均高于高表达组(P0.05)。结论:HOXB4、PRDM16、HOXA9基因表达水平与AML患者肿瘤负荷、疗效和预后存在一定的关系。在初治和复发的AML患者骨髓细胞高表达,缓解后其表达水平下降,表达高者化疗效果差,缓解率低。     

急性髓细胞白血病淋系分化抗原表达及临床意义

为了探讨淋系分化抗原在急性髓细胞白血病(AML)的表达及其临床意义，采用淋系和髓系单克隆抗体，用间接免疫荧光法对62例原发性AML进行免疫表型分析。结果表明：11例除表达髓系抗原外尚有淋系抗原表达(Ly^ AML)。Ly^ AML初诊时肝脾结肿及血像特点与Ly^ AML组无显著差异，用标准诱导化疗仅有1例获长期缓解。结论：Ly^ AML对常规诱导缓解方案不敏感，选择兼顾ALL ANL的方案可望提高治疗效果：Ly^ AML患者长期生存率低可能与CD34^ 高表达有关。     

血清SE-CAD与Matriptase在急性髓系白血病患者中的表达水平及其临床意义

目的:通过分析急性髓系白血病(AML)患者血清可溶性E钙粘蛋白(SE-CAD)与Matriptase表达水平,评估2种指标联合检测对患者病情及预后的预测价值。方法:将我院治疗的110例AML患者分为:初治组(38例)、缓解组(40例)和复发组(32例)。收集3组患者骨髓标本,应用Western blot法检测Matriptase表达水平,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清SE-CAD水平。随访一年,根据预后结局分为:生存组与死亡组,比较2组Matriptase及血清SE-CAD表达水平。应用多元Logistic回归分析Matriptase及血清SE-CAD表达水平与生存率的相关性。绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估Matriptase联合血清SE-CAD检测对AML患者短期预后的判断价值。结果:3组AML患者的血清Matriptase及SE-CAD表达水平均存在显著差异(均P0.05);其中缓解组血清Matriptase及SE-CAD表达水平最低(P0.05),初治组与复发组之间无显著差异(P0.05)。多元Logistic回归分析显示,Matriptase(OR=3.157,P=0.016)及血清SE-CAD(OR=2.426,P=0.027)表达水平是影响AML患者预后的危险因素。随访一年,死亡组血清Matriptase及SE-CAD表达水平均显著高于生存组(P0.05)。ROC曲线显示,血清Matriptase截断值为0.73及SE-CAD截断值为3.42 ng/ml,预测AML患者预后不良发生的AUC为0.849(P=0.029),灵敏度为85.6%(95%CI:0.810～0.924),特异度为89.6%(95%CI:0.849～0.941)。结论:血清Matriptase及SE-CAD联合检测能较好地评估AML患者的病情及短期预后。     

FoxO3a在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

本研究旨在探讨叉头框蛋白O3a(forkhead box protein O3a,FoxO3a)在急性髓系白血病(acute myeloidleukemia,AML)中的表达及其临床意义。收集44例急性髓系白血病初诊患者骨髓标本,5例正常人骨髓作为对照,应用Western blot方法检测骨髓细胞FoxO3a蛋白的表达,其中14例患者在完全缓解后复测骨髓FoxO3a的表达。结果表明:AML患者骨髓细胞FoxO3a蛋白表达上调,平均表达量(灰度值)为0.43±0.19,显著高于正常对照组0.19±0.06(P<0.001);化疗缓解后FoxO3a蛋白水平下降,与正常对照组比较无显著性差异(P>0.10)。相关分析显示,FoxO3a蛋白表达与AML患者外周血白细胞数呈正相关(r=0.48,P=0.012);尽管FoxO3a表达量对缓解率无明显影响,但高表达者缓解时间短。结论:FoxO3a在AML中可能是一种原癌蛋白,初诊时高表达者预后差。     

ID1基因在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

目的 探讨分化抑制因子1(ID1)基因在急性髓系白血病(AML)患者中的表达及其临床意义.方法 采用实时定量PCR(RQ-PCR)方法 检测114例初发成人AML患者ID1基因的表达,并分析其临床意义.结果 114例AML患者均检测到ID1基因表达,中位表达水平8525(57～11 233 238);AML不同核型预后组之间ID1基因表达水平有明显差异,预后不良组明显高于预后中等组[中位表达水平分别为36 840(336～11 233 238)和6630(66～1 840798)](P=0.006);ID1基因表达水平与年龄[≥60岁患者明显高于<60岁患者(P=0.002)]和WBC[≥10×109/L患者明显高于<10×109/L患者(P=0.005)]相关;在年龄<60岁AML患者中,第1个疗程结束后未获得完全缓解(CR)患者伴有ID1基因高表达(CR与未CR患者中位表达水平分别为1268和9537,P=0.010).结论 ID1基因高表达多见于AML核型预后不良和高龄患者,与AML不良预后相关;ID1基因可能是成人AML患者不良预后的分子标志.     

WT1基因在急性髓系白血病的表达及临床意义

ＷＴ1基因 (Ｗｉｌｍｓ’ｔｕｍｏｒｇｅｎｅ)是最早发现的与Ｗｉｌｍｓ’肿瘤发生、发展有关的基因。近年来文献报道在部分白血病细胞系及白血病细胞 ,尤其是急性髓系白血病 (ＡＭＬ)中 ,ＷＴ1表达增高[1 4 ] 。我们应用逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)方法测定了 30例ＡＭＬ患者化疗前后ＷＴ1ｍＲＮＡ的表达并对部分ＷＴ1 者进行了随访观察 ,探讨ＷＴ1基因在ＡＭＬ发病中的作用及其在检测微小残留病 (ＭＲＤ)方面的意义。对象和方法1　研究对象1.1　白血病细胞系 :Ｋ5 6 2细胞系 (慢性粒细胞白血病红白血病变细胞系 )作为阳性对照。1.…     

急性髓系白血病患者白血病干细胞WT1基因表达水平及其临床意义

目的 探讨急性髓系白血病(AML)患者WT1基因高表达是否发生在白血病干细胞(LSC)阶段及其意义.方法 采用流式细胞术分选AML患者CD34~+ CD38~- CD123~+细胞,实时荧光定量RT-PCR方法 检测其总WT1、+17AA、+KTS异构体的表达,计算出WT1(+/+)、wT1(+/-)、WT1(-/+)、WT1(-/-)四种异构体的比例,并与来源于正常人和AML患者骨髓的CD34~+ CD38~- CD123~-干细胞比较;同时分析AML患者LSC WT1表达水平与缓解率、生存期的关系.结果 AML患者骨髓CD34~+CD38~-CD123~+细胞WT1相对表达水平最高(0.034±0.034),AML患者骨髓CD34~+CD38~-CD123~-细胞群表达次之,来源于正常人的骨髓CD34~+ CD38~- CD123~- 细胞表达最低,三组之间比较差异有统计学意义(P<0.05);三群细胞中均以+17AA为主,组间比较差异无统计学意义.+KTS异构体比例在正常干细胞中最高,为0.57±0.04,在AML患者CD34~+ CD38~- CD123~- 细胞群中所占比例最低,为0.50±0.12,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);三种细胞群中四种异构体的表达比例各组之间比较差异无统计学意义(P>0.05),均以WT1(+/+)为主,WT1(-/-)最少.CD34~+ CD38~- CD123~+ LSC中WT1表达水平与患者性别、年龄、FAB分型及骨髓中原始细胞比例无明显相关性,但AML患者WT1高表达组原始细胞群CD34~+ 细胞比例明显高于WT1低表达组(P<0.01).WT1高表达组患者CR率为21.1%,低表达组CR率为59.1%,差异有统计学意义(P<0.05).对41例患者跟踪随访118(3-290)d,WT1 mRNA高表达组中位生存时间77[95%可信区间(CI)45-108]d,较低表达组中位生存时间158(95% CI 100-215)d短,差异有统计学意义(P= 0.041).结论 AML患者WT1高表达发生于LSC阶段,其异构体比例与正常干细胞比较差异无统计学意义.干细胞阶段WT1高表达常导致患者缓解率低、生存期短.     

XIAP基因在慢性髓系白血病中的表达及临床意义

本研究旨在检测慢性髓系白血病(CML)患者XIAP基因mRNA的表达情况,以探讨其在CML病情进展及预后中的意义。应用染色体R显带技术及实时PCR技术对71例CML患者和10名健康者进行染色体核型分析及XIAP mRNA检测。结果表明,XIAP mRNA在CML的加速期和急变期的平均表达水平明显高于慢性期(p<0.01)。XIAP基因在不同核型组的平均表达水平无显著性差异。结论:CML患者加速期和急变期XIAP基因表达明显增高,XIAP基因与CML的病情进展密切相关。