STAT5b对套细胞淋巴瘤细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的研究信号转导和转录激活蛋白5b(STAT5b)对套细胞淋巴瘤增殖、凋亡及细胞迁移的影响。方法构建过表达与低表达STAT5b基因的套细胞淋巴瘤细胞及抑制剂抑制STAT5b的表达;用Western Blotting、RT-PCR检测STAT5b、p-STAT5b蛋白、STAT5b mRNA的相对表达量及相关凋亡基因,并通过MTT法和Transwell小室迁移实验检测细胞的增殖与迁移;流式检测细胞凋亡。结果过表达质粒组的STAT5b mRNA、STAT5b和p-STAT5b蛋白表达以及增殖率、迁移数显著高于空白组[3.79±0.17 vs 1.00±0.00; 1.53±0.07 vs 0.98±0.02; 1.45±0.10 vs 0.81±0.02; 1.89±0.05 vs 1.00±0.00;(261.99±21.35)%vs(168.12±19.28)%,P均0.05],凋亡率显著低于空白组[(4.62±0.13)%vs(5.96±0.28)%,P0.05];低表达质粒组的STAT5bmRNA、STAT5b和p-STAT5b蛋白表达以及增殖率、迁移数显著低于空白组[0.30±0.09 vs 1.00±0.00;0.36±0.09 vs 0.98±0.02;0.31±0.03 vs 0.81±0.02;0.62±0.11 vs 1.00±0.00;(102.47±10.13)%vs(168.12±19.28)%;P均0.05],凋亡率显著高于空白组[(14.93±0.35)%vs(5.96±0.28)%,P0.05]。STAT5b的抑制能够显著上调Bax、procaspase-3和procaspase-9的表达,并显著下调BCL-2的表达(1.39±0.05 vs 1.00±0.00;1.21±0.04 vs 1.00±0.00;1.33±0.02 vs 1.00±0.00;0.70±0.01 vs 1.00±0.00;P均0.05)。结论 STAT5b能影响套细胞淋巴瘤的增殖、凋亡及细胞迁移,促进套细胞淋巴瘤的癌变与发展。     

B细胞非霍奇金淋巴瘤患者细胞增殖和凋亡相关指标检测结果分析

目的:分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B cell non-Hodgkin's lymphoma,B-NHL)患者细胞增殖和凋亡相关指标的检测结果。方法:分别检测72例B-NHL患者的经病理诊断证实的病灶组织石蜡包埋标本(实验组)和50例淋巴结反应性增生患者的淋巴结石蜡标本(对照组)的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP)和B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukemia-2,BCL-2)表达情况,并分析其与病理因素的关系。结果:实验组PCNA阳性细胞百分率及XIAP、BCL-2阳性率均显著高于对照组(P0.05);Ⅲ-Ⅳ期B-NHL患者PCNA阳性细胞百分率显著高于Ⅰ-Ⅱ期患者(P0.05);不同病理因素B-NHL患者XIAP和BCL-2阳性率并无明显差异(P0.05);PCNA低阳性表达组无进展生存期显著长于PCNA高阳性表达组(P0.05);XIAP~+组与XIAP-组无进展生存期并无显著差异(P0.05);BCL-2~+组与BCL-2~-组无进展生存期亦无显著差异(P0.05)。结论:增殖因子PCNA与凋亡因子XIAP、BCL-2均参与了B-NHL的发生,其中PCNA阳性情况对临床分期有明显影响。     

硼替佐米与吡喃阿霉素联合对T细胞淋巴瘤细胞系Hut-78细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨硼替佐米(BTZ)与吡喃阿霉素(THP)联合对人皮肤T细胞淋巴瘤细胞系Hut-78细胞的增殖抑制作用及其机制.方法 不同浓度的BTZ、THP单药或两药联合作用于Hut-78细胞48 h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,应用联合指数分析两药是否存在协同效应,在此基础上应用流式细胞术分析细胞周期分布和细胞凋亡情况,利用Western blot法检测细胞周期抑制蛋白P21的变化.结果 BTZ与THP单药对Hut-78细胞增殖具有显著的抑制作用,呈时间和剂量依赖性,两药联合时,BTZ序贯THP组的细胞增殖抑制率显著高于BTZ与THP同时组及THP序贯BTZ组(P值均＜0.01),当细胞增殖抑制率＞50%时,THP序贯BTZ呈拮抗效应,而BTZ与THP同时及BTZ序贯THP则表现为协同效应,随着增殖抑制作用的增加,仅BTZ序贯THP的协同作用更为显著.BTZ与THP单药能有效诱导Hut-78细胞凋亡,呈剂量依赖性,且BTZ序贯THP的细胞凋亡诱导作用较单药显著增强.BTZ单药可使细胞明显阻滞于G2/M期,上调P21蛋白的表达水平,序贯应用THP可显著增强BTZ对细胞周期的阻滞作用.结论 BTZ序贯THP可协同抑制Hut-78细胞增殖并诱导其凋亡,协同机制可能与序贯应用THP增强BTZ介导的P21表达上调及G2/M期细胞阻滞有关,提示BTZ与THP联合可能成为治疗T细胞非霍奇金淋巴瘤的新选择.

Abstract：

Objective To investigate the in vitro effect of bortezomib (BTZ) alone and in combination with pirarubicin (THP) on the growth inhibition of human cutaneous T-cell lymphoma cell line Hut-78.Methods Hut-78 cells were cultured with different concentrations of BTZ or THP alone and the two drugs combination for 48 h. Cell proliferation, cell cycle and apoptosis were evaluated. The cell cycle inhibitor P21 was determined by Western blot. Results BTZ or THP alone significantly inhibited the growth of Hut-78 cells in a time- and dose-dependent manner. In the combination groups, the inhibitory effect of BTZ followed by THP was the highest ( P ＜ 0. 01 ). When the inhibition rate was more than 50%, the combination index analysis showed significant synergistic if treated with BTZ followed by THP or the two at the same time, but antagonistic if treated with THP followed by BTZ. With the inhibition rate increasing, only the synergistic effect of BTZ followed by THP was further increased. The apoptosis rate of BTZ followed by THP was higher than that of single agent each(P ＜0. 01 ). BTZ alone significantly increased the proportion of cells in G2/M phase ( P ＜0. 01 ) in a dose-dependent manner and up-regulated the expression level of P21. Sequential THP notably enhanced BTZ-induced cell cycle arrest and apoptosis. Conclusions BTZ alone effectively induces growth inhibition and apoptosis of Hut-78 cells in vitro. BTZ followed by THP can synergistically enhance this cytotoxic effect. The mechanism may be that THP enhances BTZ-induced G2/M arrest and P21 up-regulation.     

套细胞淋巴瘤

自 196 6年Ｒａｐｐａｐｏｒｔ提出淋巴瘤较复杂的分类后 30多年中 ,套细胞淋巴瘤 (ｍａｎｔｌｅｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏｍａ)一直没有被人们认识清楚 ,直到最近几年才有了明确的全面了解。因为套细胞淋巴瘤具有明显的临床病理特点 ,及时而准确的病理诊断对临床的指导十分重要。因此 ,有必要予以介绍。1　名称变化在过去很长一段时间内 ,由于对套细胞淋巴瘤的认识不足 ,曾经有过许多不同的命名。在修改的Ｒａｐｐａｐｏｒｔ淋巴瘤分类系统中称“中度分化的淋巴细胞淋巴瘤” ,在Ｋｉｅｌ分类中 ,Ｌｅｎｎｅｒｔ采用“中心细胞淋巴瘤” ,并认为…     

硼替佐米对淋巴瘤细胞增殖、凋亡及SHP-2基因表达的影响

目的:研究硼替佐米对淋巴瘤细胞株Jurkat细胞和Raji细胞的增殖、凋亡及SHP-2基因表达的影响。方法:用MTT(噻唑蓝)实验观察不同浓度硼替佐米对Jurkat细胞和Raji细胞增殖的作用;利用细胞形态学检查、流式细胞仪检测细胞凋亡;用RT-PCR的方法检测硼替佐米处理淋巴瘤细胞株前后SHP-2基因的mRNA表达水平。结果:硼替佐米对Jurkat细胞和Raji细胞有抑制增殖,诱导凋亡的作用,并呈剂量和时间依赖性。在5-100 nmol/L硼替佐米处理后,Jurkat细胞株和Raji细胞株中SHP-2 mRNA的表达水平上调。结论:硼替佐米明显抑制Jurkat细胞株和Raji细胞株增殖,诱导其凋亡,上调细胞株SHP-2 mRNA的表达水平,表明SHP-2基因很可能参与了硼替佐米诱导Raji细胞和Jurkat细胞凋亡的调控。     

雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察雷公藤内酯醇对入淋巴瘤细胞系Raji细胞体外增殖和细胞凋亡的影响。方法：实验于2005—04／11在华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所实验室完成。①入淋巴瘤细胞系Raji（中国科学院上海生物细胞研究所）。雷公藤内酯醇（Sigma公司）分子式C20H25O6，相对分子量360．4，纯度99％，用二甲基亚砜稀释，微孔滤膜（0．22μm）除菌，等量分装，-20℃保存，使用前解冻。②将Raji细胞放入RPMI—1640培养基中常规培养，每48h换液传代1次。实验前24h半量换液，取处于对数生长期、细胞活性大于98％的细胞进行实验。③采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的影响。将Raji细胞按2&;#215;10。L“接种于96孔培养板，200μl／孔。实验共分5组：雷公藤内酯醇12．5，25，50，100nmol/L浓度组分别加入适量雷公藤内酯醇使其终浓度为12．5，25，50，100nmol/L，空白对照组未加入雷公藤内酯醇，5个平行孔／组。分别于培养12，24，48，72h后每孔加入5g／L的四甲基偶氮唑蓝20μL继续培养。用全自动酶标仪测定490nm波长处吸光度值。细胞增殖抑制率（％）=（1-雷公藤内酯醇各浓度组吸光度值／空白对照组吸光度值）&;#215;100％。④采用Annexin V／PI双标流式细胞术检测雷公藤内酯醇对Rafi细胞凋亡的影响。将Rajj细胞按2&;#215;10^8L^-1接种于6孔培养板，实验分组同上，分别于孵育24，48h后收集细胞，调整各组细胞数为2&;#215;10^8L^-1。取195μL细胞悬液，加入异硫氰酸荧光素标记的Annexin V室温孵育，洗涤后加入碘化丙锭5μL，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：①雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的影响：不同浓度的雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji的增殖均具有抑制作用，且呈时效和量效关系。与空白对照组比较，培养12，24，48，72h后雷公藤内酯醇12．5，25，50，100nmol／L浓度组的细胞增殖抑制率均明显升高（f=18．314～77．366，P均〈0．01），培养24h时的半数抑制浓度为43．06nmol／L。②雷公藤内酯醇对Raji细胞凋亡的影响：经雷公藤内酯醇作用后，随着药物浓度的增加和作用时间的延长，Raji细胞凋亡率逐渐增高，且呈时效和量效关系。与空白对照组比较，培养24，48h后雷公藤内酯醇12．5，25，50，100nmol／L浓度组的细胞凋亡率均明显升高（f=-23．657～-37．895，P均〈0．05）。结论：雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji细胞具有明显的生长抑制作用及诱导凋亡发生，且存在浓度和时间依赖关系。提示雷公藤内酯醇可能通过诱导细胞凋亡来有效抑制人淋巴瘤细胞的增殖，从而有望为治疗淋巴瘤提供新的策略。     

雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji细胞体外增殖和细胞凋亡的影响。方法:实验于2005-04/11在华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所实验室完成。①人淋巴瘤细胞系Raji(中国科学院上海生物细胞研究所)。雷公藤内酯醇(Sigma公司)分子式C20H24O6,相对分子量360.4,纯度99%,用二甲基亚砜稀释,微孔滤膜(0.22μm)除菌,等量分装,-20℃保存,使用前解冻。②将Raji细胞放入RPMI-1640培养基中常规培养,每48h换液传代1次。实验前24h半量换液,取处于对数生长期、细胞活性大于98%的细胞进行实验。③采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的影响。将Raji细胞按2×108L-1接种于96孔培养板,200μL/孔。实验共分5组:雷公藤内酯醇12.5,25,50,100nmol/L浓度组分别加入适量雷公藤内酯醇使其终浓度为12.5,25,50,100nmol/L,空白对照组未加入雷公藤内酯醇,5个平行孔/组。分别于培养12,24,48,72h后每孔加入5g/L的四甲基偶氮唑蓝20μL继续培养。用全自动酶标仪测定490nm波长处吸光度值。细胞增殖抑制率(%)=(1-雷公藤内酯醇各浓度组吸光度值/空白对照组吸光度值)×100%。④采用AnnexinV/PI双标流式细胞术检测雷公藤内酯醇对Raji细胞凋亡的影响。将Raji细胞按2×108L-1接种于6孔培养板,实验分组同上,分别于孵育24,48h后收集细胞,调整各组细胞数为2×108L-1。取195μL细胞悬液,加入异硫氰酸荧光素标记的AnnexinV室温孵育,洗涤后加入碘化丙锭5μL,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:①雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的影响:不同浓度的雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji的增殖均具有抑制作用,且呈时效和量效关系。与空白对照组比较,培养12,24,48,72h后雷公藤内酯醇12.5,25,50,100nmol/L浓度组的细胞增殖抑制率均明显升高(t=18.314～77.366,P均<0.01),培养24h时的半数抑制浓度为43.06nmol/L。②雷公藤内酯醇对Raji细胞凋亡的影响:经雷公藤内酯醇作用后,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,Raji细胞凋亡率逐渐增高,且呈时效和量效关系。与空白对照组比较,培养24,48h后雷公藤内酯醇12.5,25,50,100nmol/L浓度组的细胞凋亡率均明显升高(t=-23.657～-37.895,P均<0.05)。结论:雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji细胞具有明显的生长抑制作用及诱导凋亡发生,且存在浓度和时间依赖关系。提示雷公藤内酯醇可能通过诱导细胞凋亡来有效抑制人淋巴瘤细胞的增殖,从而有望为治疗淋巴瘤提供新的策略。     

套细胞淋巴瘤研究进展

套细胞淋巴瘤（mantelcelllymphoma，MCL）是一种近年来确定的一种特殊类型B细胞淋巴瘤，过去曾将该肿瘤命名为中间淋巴细胞性淋巴瘤（Rappaport），中心细胞性淋巴瘤（Kiel），弥散小裂细胞淋巴瘤（WF）。WH0（2001）淋巴造血肿瘤新分类将MCL列为一种具有独特的形态学，免疫表型，分子遗传学及临床特点B细胞淋巴瘤。本文对MCL的临床、病理和分子研究以及最新进展作一介绍。     

抑制Skp2基因表达对NK/T细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究抑制Skp2基因表达对NK/T细胞淋巴瘤细胞系HANK1细胞增殖和凋亡的影响,探讨抑制Skp2基因表达治疗NK/T细胞淋巴瘤的潜在应用价值。方法:用RNA干扰(RNA interference,RNAi)方法抑制HANK1细胞Skp2基因表达,实时定量RT-PCR和Western blot检测Skp2基因表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡。结果:Skp2-shRNA表达载体明显抑制HANK1细胞Skp2基因表达,细胞增殖受抑,细胞周期G1期停滞,凋亡细胞增多。结论:抑制Skp2蛋白功能可能是治疗NK/T细胞淋巴瘤的好方法,值得深入研究。     

三氧化二砷诱导套细胞淋巴瘤细胞株凋亡及机制研究

本研究旨在探讨三氧化二砷(ATO)诱导套细胞淋巴瘤(MCL)细胞株凋亡的效应及其机制。以不同浓度的ATO处理细胞,再通过MTT法检测细胞MCL细胞株(jeko-1,mino,JVM-2)增殖;用AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测jeko-1细胞的凋亡;用DiOC6(3)染色流式细胞术检测jeko-1细胞的线粒体跨膜电位丢失;用Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及凋亡相关蛋白MCL-1,BCL-2,PUMA,NOXA,cCaspase-3,cCaspase-9,cPARP在ATO处理前后的表达变化。结果表明:ATO抑制MCL细胞增殖,诱导MCL细胞凋亡,并且引起MCL细胞线粒体跨膜电位丢失,引起MCL-1,PUMA,cyclin D1蛋白表达水平降低,cPARP,cCaspase-3,cCaspase-9表达水平增加,不影响BCL-2,NOXA表达。结论:ATO能有效抑制MCL细胞增殖,诱导MCL细胞株凋亡,其中细胞凋亡的线粒体途径起着重要的作用。     

硼替佐米诱导Burkitt淋巴瘤Raji细胞凋亡的研究

本研究探讨硼替佐米对Burkitt淋巴瘤Raji细胞是否具有凋亡诱导作用及其机制。以硼替佐米处理Raji细胞,观察细胞增殖抑制作用的时间效应和剂量效应,在光学显微镜下观察药物作用前后细胞的形态变化,用流式细胞术检测药物孵育前后细胞凋亡率（AP）,用RT—PCR法检测药物孵育前后NF—κB和p53基因的表达水平。结果表明,在一定剂量和时间范围内硼替佐米能抑制Raji细胞生长;硼替佐米能诱导Raji细胞凋亡并显示时间和剂量效应;在硼替佐米诱导Raji细胞凋亡过程中,NF-κB及p53基因的袁达水平下调。结论：硼替佐米能诱导Raji细胞凋亡,NF—κB基因和p53基因很可能参与了硼替佐米诱导Raji细胞凋亡的调控。     

套细胞淋巴瘤诊断研究进展

套细胞淋巴瘤(MCL)是一种侵袭性较强的非霍奇金淋巴瘤,通过细胞形态学及组织病理学检查可初步诊断该病,CyclinD1蛋白对诊断此病有较高的特异性,对于不能单纯依靠形态学及病理学诊断的MCL,可采用一些适当的分子遗传学方法 ,研究表明70%～80%的MCL可检测到t(11;14)(q12;q32)染色体易位,故本文主要从细胞形态学、组织病理学、免疫表型及分子遗传学等方面对MCL作一综述.     

B细胞非霍奇金淋巴瘤凋亡拮抗机制的研究进展

细胞凋亡抑制是淋巴瘤的发生机制之一，拮抗Fas凋亡途径是大部分B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)的共同特征，构成该类肿瘤发生的重要原因。凋亡拮抗的主要机制有：①拮抗Fas凋亡途径的分子，如c-FLIP蛋白和IAPs家族蛋白，通过抑制caspases的活性来阻断凋亡通路；②关键基因的突变使蛋白功能丧失或降低，如Fas基因、bax基因。B-NHL凋亡拮抗机制的研究对肿瘤发生机制的阐明和临床治疗的改进有着重要的意义。     

骨肉瘤中细胞凋亡和细胞增殖的关系

目的探讨骨肉瘤组织中细胞凋亡与细胞增殖的关系。方法利用原位末端转移酶法和免疫组织化学技术分别检测骨肉瘤和良性骨肿瘤中凋亡细胞密度和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果 4种亚型骨肉瘤组织中凋亡细胞密度均明显低于良性骨肿瘤组织 ,而PCNA阳性细胞密度明显高于良性骨肿瘤组织 ;在 4种亚型骨肉瘤中凋亡细胞密度和PCNA阳性细胞密度呈明显负相关 ,而在良性骨肿瘤中两者呈线性正相关。结论在骨肉瘤的发生中可能普遍存在细胞凋亡机制的紊乱 ,可能以低凋亡高增殖表现为多 ,并认为细胞凋亡检测尚难以作为一种独立的预后判断指标     

B细胞非霍奇金淋巴瘤凋亡拮抗机制的研究进展

细胞凋亡抑制是淋巴瘤的发生机制之一,拮抗Fas凋亡途径是大部分B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)的共同特征,构成该类肿瘤发生的重要原因。凋亡拮抗的主要机制有:①拮抗Fas凋亡途径的分子,如c-FLIP蛋白和IAPs家族蛋白,通过抑制caspases的活性来阻断凋亡通路;②关键基因的突变使蛋白功能丧失或降低,如Fas基因、bax基因。B-NHL凋亡拮抗机制的研究对肿瘤发生机制的阐明和临床治疗的改进有着重要的意义。     

套细胞淋巴瘤的治疗进展

套细胞淋巴瘤(MCL)占全部成人非霍奇金淋巴瘤的4%～6%.发病高峰年龄为54～68岁,60%～70%的患者确诊时已为Ann ArborⅣ期.MCL虽诱导化疗敏感,但多在短时间内出现疾病进展,中位存活时间仅3～4年,尚无有效的治愈方法.MCL预后很差,迫切需要探索新的方法来提高其治疗效果.以下就套细胞淋巴瘤治疗的研究进展作一综述.     

套细胞淋巴瘤的治疗进展

套细胞淋巴瘤（MCL）占全部成人非霍奇金淋巴瘤的4％～6％。发病高峰年龄为54～68岁,60％～70％的患者确诊时已为Ann ArborⅣ期。MCL虽对诱导化疗敏感,但多在短时间内出现疾病进展,中位存活时间仅3～4年,尚无有效的治愈方法。MCL预后很差,迫切需要探索新的方法来提高其治疗效果。以下就套细胞淋巴瘤治疗的研究进展作一综述。     

套细胞淋巴瘤的生物学研究进展

套细胞淋巴瘤(MCL)是一种侵袭性较强的非霍奇金淋巴瘤,具有特殊的组织病理学、免疫表型和分子遗传学特点.了解MCL的生物学研究进展有助于该病的诊断、鉴别诊断及治疗.现从组织病理学、免疫表型及分子遗传学对MCL进行综述.     

套细胞淋巴瘤的综合诊断

目的：探讨以组织病理为基础,以骨髓或外周血标本检测为重要补充的多种检测方法在套细胞淋巴瘤（MCL）综合诊断中的价值。方法：回顾性分析2009年5月至2022年9月就诊于本院血液科的153例初诊套细胞淋巴瘤患者临床及实验室资料。结果：149例初发时行骨髓或外周血IGH/CCND1间期FISH检查的MCL患者中144例（96.6%）检测阳性,其中36例（24.2%）表现为低比例阳性。115例行流式细胞免疫分型检查,免疫表型符合MCL者89例（77.4%）,初步诊断为B淋巴细胞增殖性疾病（B-LPD）23例（20.0%）。75例行骨髓病理检查,50例（66.7%）形态及组化特点符合MCL,15例（20.0%）归为B-LPD,另有10例未见明显异常。77例行组织病理检查,73例（94.8%）符合MCL典型特点,包括2例CCND1阴性MCL,2例多形性MCL,5例MCL母细胞变异型,4例诊断为其它淋巴瘤白血病。153例MCL中,128例为经典MCL(cMCL),25例（16.3%）诊断为白血病性非淋巴结型MCL(lnnMCL)。IGHV突变、TP53突变、CD23阳性3项指标在cMCL与lnnM...