不同潮气量机械通气对大鼠肺组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶和转化生长因子β1的影响

目的 观察不同潮气量机械通气大鼠肺组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS)和转化牛长因子β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)mRNA及其蛋白表达水平,探讨氧化/抗氧化失衡在呼吸机相关性肺损伤(ventilator associated lung injury,Vau)中的作用.方法 24只雄性Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组、小潮气量组和大潮气量组(各组8只),测定其肺组织和血浆中MDA含量,并分别采用原位分子杂交技术和免疫组织化学染色法检测肺组织γ-GCS,TGF-β_1,mRNA及其蛋白表达水平,并进行相关性分析.组间差异比较采用方差分析法,各组均数间两两比较采用SNK-q检验,以P＜0.05表示差异有统计学意义,相关性分析采用Pearson直线相关分析法.结果 与对照组和小潮气量组比较,大潮气量组大鼠肺组织和血浆MDA含量、肺组织TGF-β_1mRNA及其蛋白表达水平明显升高(P＜0.01),而γ-GCS mRNA及其蛋白表达水平则明显低于对照组和小潮气量组(P＜0.01);小潮气量组与对照组各项指标比较,差异无统计学意义(P＞0.05).相关分析结果表明大潮气量组大鼠肺气道卜皮细胞γ-GCS和TGF-β_1 mRNA及其蛋白表达均呈负相关(r值分别为-0.96,-0.85,P＜0.01).结论 大潮气量机械通气町诱导肺组织TGF-β_1 mRNA及其蛋白高表达,使γ-GCS表达降低,谷胱甘肽合成减少,导致局部肺组织氧化/抗氧化系统失衡,是VALI发生的重要因素之一.     

不同潮气量机械通气对大鼠肺小窝蛋白-1及其相关信号链酶表达的影响

目的 研究小窝蛋白-1(cav-1)及其相关信号链酶在不同潮气量(VT)机械通气大鼠肺组织中的表达变化.方法 按随机数字表法将SD大鼠分为5组,每组8只.对照组(A组)仅切开气管保留自主呼吸;保护性机械通气1h、2h组(B1组、B2组)VT为6 ml/kg;大VT通气1h、2h组(C1组、C2组)VT为30 ml/kg.A组在气管切开即刻,通气组分别于通气1h或2h末处死大鼠,光镜下观察肺组织病理学改变;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测cav-1、eNOS的mRNA表达;免疫组化法检测肺组织中cav-1、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)及核转录因子-κB(NF-κB)p65的蛋白表达;比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性;计算肺湿/干质量比值(W/D);酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果 A组、B1组、B2组之间肺组织cav-1、eNOS的mRNA表达,cav-1、eNOS、IRAK4、NF-κBp65的蛋白表达,肺W/D比值,MPO和TNF-α水平差异均无统计学意义.与相应B1、B2组比较,C1、C2组cav-1 mRNA(A值比值)和cav-1、IRAK4、NF-κBp65蛋白表达(A值)明显增加(cav-1 mRNA:0.833±0.085比0.384 ±0.011,1.162±0.166比0.388±0.014;cav-1蛋白:0.188±0.011比0.140±0.052,0.210±0.013比0.125±0.014;IRAK4蛋白:0.181 ±0.009比0.150±0.008,0.205±0.085比0.155 ±0.012;NF-κBp65蛋白:0.294±0.011比0.236±0.015,0.304±0.012比0.239±0.005),eNOS的mRNA(A值比值)和蛋白表达(A值)明显减少(eNOS mRNA:0.174±0.016比0.278=0.021,0.107±0.014比0.262±0.045;eNOS蛋白:0.180±0.017比0.211±0.010,0.161±0.016比0.216±0.013),肺W/D比值、MPO活性(U/g)和TNF-α含量(ng/L)明显升高(W/D:5.64±0.42比4.63±0.12,6.73±0.83比4.70±0.15;MPO:1.86±0.26比0.85±0.11,2.14±0.24比0.88±0.18; TNF-α:386.53±29.12比50.57±10.98,455.77±37.78比52.11±9.92),差异均有统计学意义(均P＜0.05).随通气时间延长,C2组各指标较C1组改变更为明显(均P＜0.05).结论 cav-1及其相关信号链酶在机械通气中的表达参与了呼吸机相关性肺损伤.     

小窝蛋白-1和NF-κB在机械通气肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的通过观察小窝蛋白-l(cav-1)及NF-κB p65、IL-8在大潮气量机械通气大鼠肺组织中的表达变化,探讨cav-1在通过对NF-κB信号转导通路的影响而导致对肺组织的损伤作用。方法将雄性SD大鼠随机分为三组:对照组、大潮气量通气0.5 h组(H-VT0.5h组)和大潮气量通气2 h组(H-VT2h组)。光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变;免疫组织化学染色法检测肺组织中cav-1的蛋白含量;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB p65的m RNA表达;计算肺湿/干重比值(W/D);酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-8的含量,并对cav-1及NF-κB p65进行相关性分析。结果 H-VT2h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平及BALF中IL-8的含量均大于H-VT0.5h组,差异有统计学意义(均P<0.05);H-VT0.5h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平以及BALF中IL-8的含量均大于对照组,但差异无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析结果显示,各组大鼠肺组织cav-1蛋白表达水平与NF-κB p65 m RNA表达水平之间呈正相关(r=0.820,P<0.01)。结论 cav-1在机械通气导致肺损伤发生中可能起损伤作用。这种损伤作用可能与cav-1经过多种途径激活NF-κB炎症信号通路,使IL-8等细胞因子释放有关,最终导致炎症的加重和肺组织损伤。     

机械通气导致大鼠肺血管渗透性改变和肺细胞因子反应的关系

目的研究两种通气模式在不同时间点导致大鼠肺血管渗透性改变和细胞因子反应的关系。方法成年雄性SD大鼠96只,随机分为常规通气组(C组)和大潮气量组(N组)。每组分别在30 min、60 min、120 min和180 min放血处死大鼠,进行各种检测,每个时间点12只大鼠。实验结束时测定大鼠肺病理形态学评分、肺组织湿/干重比(W/D)、支气管灌洗液(BALF)炎性细胞、血管壁通透性、血浆里肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)浓度。结果与C组比,机械通气30 min时,N组肺病理形态学评分、W/D、EB含量升高(P＜0．05或P＜0．01);在60 min时,N组BALF中WBC显著升高(P＜0．01);在120 min时N组MIP-2才明显升高。两组TNF-α都没被检测到。结论大潮气量通气导致的肺损伤和肺通透性改变发生很早,最初不需要TNF-α和MIP-2参与,也与白细胞浸润无关。     

抑制小窝蛋白－1磷酸化对机械通气所致肺损伤的保护作用

目的：研究抑制小窝蛋白－1（ Cav－1）磷酸化对机械通气所致肺损伤的效应。方法50只健康雄性SD大鼠随机分为A、B1、B2、C1及C2五组（每组10只）。 A组为正常对照组,仅做气管切开;B1组为1 h大潮气量机械通气组;B2组为2 h大潮气量机械通气组;C1组为1 h大潮气量机械通气＋酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2（5 mg／kg）组;C2组为2 h大潮气量机械通气＋酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2（5 mg／kg）组。 C1和C2组在机械通气前1 h腹腔注射抑制剂。各组大鼠均连续监测平均动脉压（ MAP ）。光镜观察肺组织病理改变,并做弥漫性肺泡损伤系统（ diffuse alveolar damage, DAD）评分,比色法测定髓过氧化物酶（ myeloperoxidase, MPO）活性,计算肺湿／干比（W／D）,蛋白印迹检测磷酸化小窝蛋白－1[P －Cav －1（Y14）]和小窝蛋白－1（Cav－1）表达情况,免疫组织化学染色法检测肺组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和白细胞介素－1受体相关激酶4（IRAK4）表达情况,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠肺泡灌洗液TNF－α水平,伊文思蓝（ Evans blue）法检测肺血管通透性。结果 B1、B2、C1、C2组病理损伤评分、肺湿／干比、Cav－1、eNOS、IRAK4表达量、TNF－α水平、Evans blue渗出量、MPO活性、MAP及血气分析与A组比较差异均有统计学意义（均P＜0．05）;与A组比较,B1、B2、C1组P－Cav－1表达升高（均P＜0.05）,而C2组P－Cav－1（Y14）表达量差异无统计学意义（P＞0．05）;C1组与B1组比较,C2组与B2组比较,病理损伤评分、肺湿／干比,P－Cav－1（Y14）、eNOS、IRAK4表达量、TNF－α的水平、Evans blue含量、MPO活性、MAP、及血气分析差异均有统计学意义（均P＜0.05）;C1组与B1组比较,C2组与B2组比较,Cav－1表达量差异无统计学意义（均P＞0．05）。结论抑制Cav－1磷酸化能够降低肺毛细血管通透性,减少炎症因子和炎症细胞的迁移,从而对大鼠机械通气所致肺损伤起到保护作用。     

脂氧素对机械通气所致肺损伤的实验研究

目的 研究脂氧素对机械通气致肺损伤的保护作用及相关保护机制.方法 36只健康雄性SD大鼠按随机数字表分组.采用大潮气量通气制作大鼠VILI模型.麻醉和气管切开及气管内插管后,对照组(Control组)保留自主呼吸;大潮气量组(HV组)采用大潮气量通气[潮气量(VT)30 mL/kg,呼吸频率(RR)40次/min];大潮气量组+脂氧素处理组(HV+LX组)于机械通气前5 min静脉注射脂氧素10 μg/kg,其余两组注射等量生理盐水.通气时间均为2 h.每组大鼠实验过程中监测血流动力学和动脉血气;通气2 h后处死大鼠取肺组织,测定肺湿/干质量(W/D)比值和髓过氧化物酶(MPO)活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺泡灌洗液(BALF)中核转录因子(NF-κB)和白细胞介素-8(IL-8)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变并进行肺泡损伤评分(DAD损伤评分).结果 与Control组相比,HV组和HV+LX组的动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、平均动脉压(MAP)均呈下降趋势;动脉血pH值呈上升趋势.HV+LX组MAP显著高于HV组(P<0.05).与Control组相比,HV组肺组织W/D比值、MPO活性、DAD评分、NF-κB、IL-8显著升高(P<0.05或P<0.01);与HV组相比,HV+LX组肺组织W/D比值、MPO活性、DAD评分及NF-κB和IL-8显著降低(P<0.05或P<0.01).结论 脂氧素在大鼠机械通气模型中可减少肺泡蛋白质的渗出,可抑制肺组织中NF-κB、IL-8的产生,减少中性粒细胞在肺泡内的浸润和黏附,从而减轻大容量机械通气造成的肺组织损伤.     

小窝蛋白-1、IL-8在机械通气致大鼠急性肺损伤中的作用研究

目的通过观察不同时间段肺组织中小窝蛋白-1(cav-1)及IL-8的表达水平,探讨二者在机械通气所致肺损伤(VILI)发生中的作用?方法雄性Wistar大鼠24只,按随机数字表法分为3组:对照组、大潮气量通气0.5 h组(H-VT0.5 h组)和大潮气量通气2 h组(H-VT2 h组)。在光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变,测定BALF总蛋白(TP)含量和肺湿/干重比值(W/D),采用免疫组织化学染色法测定肺组织cav-1及IL-8的表达水平,并进行相关性分析。结果 H-VT0.5 h组大鼠肺组织cav-1蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01),而BALF总蛋白含量、W/D比值及肺组织IL-8表达水平与对照组比较无统计学意义(P>0.05),且肺组织无明显病理损伤改变。H-VT2 h组大鼠BALF总蛋白含量、W/D比值及肺组织cav-1和IL-8蛋白表达量均明显高于对照组和H-VT0.5 h组(均P<0.01),同时肺组织可见明显病理损伤改变。相关性分析结果显示,各组大鼠肺组织cav-1蛋白表达水平与IL-8表达水平之间呈正相关(r=0.737,P<0.01)。结论 cav-1在VILI发生中的作用可能具有两面性,早期以保护作用为主,后期以损伤作用为主,而损伤作用可能与IL-8的释放激活中性粒细胞有关。     

丹参与甲基泼尼松龙联用对急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白-1表达的影响

目的:观察联合应用丹参和甲基泼尼松龙对急性肺损伤(AII)大鼠肺组织水通道蛋白-l(AQP-1)表达的影响及其机制.方法:使用内毒素(LPS)3 mg/kg气管内滴入建立大鼠LPS吸入性ALI模型.50只大鼠随机分为:生理盐水对照组、LPS损伤组、甲基泼尼松龙组(LPS+甲基泼尼松龙)、丹参组(LPS+丹参)、联合用药组(LPS+甲基泼尼松龙+丹参).观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织湿/干重(W/D)比、肺脏病理改变,免疫组化法测定AQP-1表达.结果:经气管滴入LPS可致大鼠发生ALI.与LPS损伤组相比,单用甲基泼尼松龙或丹参组BALF中蛋白含量、肺组织W/D比值均明显降低(P＜0.01),肺组织AQP-1表达则明显升高(P＜0.01),以联合用药组更为明显(P＜0.01).结论:联合应用甲基泼尼松龙和丹参对ALI大鼠具有良好的治疗作用,其机制可能与促进肺组织AQP-1高表达有关.     

不同潮气量机械通气过程中呼吸机相关性肺损伤的病理学变化

目的：观察不同潮气量机械通气下大鼠肺组织的病理学变化. 方法：实验于2006-05/2007-02在解放军第四军医大学唐都医院呼吸科实验室完成.①实验分组：SD大鼠60只按随机数字表法分为4组：对照组（未行机械通气）,常规潮气量组（潮气量10 mL/kg）,过度通气小潮气量组（潮气量20 mL/kg）,过度通气大潮气量组（潮气量40 mL/kg）,每组15只.②实验方法：除对照组外,其余各组大鼠均通过胶管与动物人工呼吸机相连接,行机械通气.各组大鼠的通气参数除潮气量外,其余参数均相同,即频率为60次/min,吸/呼比为1∶3,吸入氧的体积分数为0.21.各通气组分别于机械通气结束后采集相关组织标本.③实验评估：大鼠麻醉处死后,分别在肉眼和光镜下观察各组大鼠肺组织的病理学改变;测定肺湿/干质量比值. 结果：①大鼠肺组织大体观察和病理学观察：常规潮气量组大鼠肺组织在肉眼和光镜下观察与对照组相比较均无明显差别;过度通气小潮气量组在光镜下可见肺间质水肿及炎性细胞浸润;过度通气大潮气量组大鼠肺组织有明显的损伤表现.②肺湿/干质量比值：过度通气大潮气量组和小潮气量组的肺湿/干质量比值高于对照组和常规潮气量组,差异均有显著性意义（P均＜0.05）,常规潮气量组与对照组之间的差异无显著性意义（P＞0.05）. 结论：呼吸机相关性肺损伤的发生与机械通气的过度通气潮气量大小有密切关系,而常规潮气量通气对正常肺组织结构无明显影响.     

p38信号通路参与呼吸机所致肺损伤大鼠高迁移率族蛋白B1的表达

目的 研究p38信号通路在呼吸机所致肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)大鼠肺组织表达高迁移率族蛋白BI(high mobility group box 1 protein,HMGB1)中的作用.方法健康sD大鼠24只随机分为3组:对照组(A组)不行机械通气,保留自主呼吸;常规通气组(B组)潮气量(Vt)为8mL/kg;大潮气量通气组(C组)Vt为40 mL/kg.机械通气4 h后处死动物,测定支气管肺泡灌洗液中总蛋白水平、白细胞计数以及肺湿干重比值(W/D)和中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性.采用Western blot方法检测肺组织HMGB1蛋白和p38激酶活性变化,采用RT-PCR方法检测HMGB1 mRNA的表达.应用单因素方差分析进行不同组别间的比较.结果 通气4 h后,与A组相比,C组总蛋白水平(1.77±0.68)g/L、白细胞计数(106.55±28.17)×10~7 L~(-1)、肺W/D比值(7.16±1.02)、MPO活性(3.94±1.21)U/g、HMGB1蛋白(0.64±0.17)和mRNA(1.17±0.45)表达以及p38激酶活性(0.51±0.12)均明显增加(P<0.05),而B组上述各项指标的变化均无统计学意义(P>0.05).结论大潮气量机械通气可引起大鼠急性肺损伤,p38参与了机械牵张诱导肺组织HMGB1的表达.     

雌激素对海水淹溺型肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白表达影响的研究

目的 观察雌激素对海水淹溺型肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白表达的影响.方法 90只健康雄性SD大鼠随机分为三组,即对照组、海水淹溺组及雌激素治疗组.海水淹溺组用气管吸入海水法建立模型;对照组除不吸入海水外,其他处理同海水淹溺组;雌激素治疗组在海水吸入后30 min给予腹腔注射17β-雌二醇5 mg/kg.分别于海水致肺损伤后1、2、4 h时间点取大鼠颈动脉血做血气分析观察动脉血氧分压(PaO2)的变化,测肺组织湿重/干重(W/D)比值,光镜下观察肺组织病理变化情况,采用RT - PCR方法检测AQPs mRNA的表达.结果 成功复制了大鼠海水淹溺型肺损伤模型:海水淹溺组在吸入海水后PaO2显著下降,各时间点PaO2显著低于对照组.雌激素治疗组PaO2显著上升,各时间点均高于海水淹溺组.海水淹溺组W/D比值显著高于正常对照组及雌激素治疗组.光镜下可见海水淹溺组肺组织有灶性出血,肺泡腔内渗出增多、少量中性粒细胞浸润和肺泡间质稍有增厚;对照组未见明显病理变化;雌激素治疗组肺组织充血、水肿有所减轻.海水淹溺组肺组织AQP1 mRNA及AQP5 mRNA表达高于对照组,AQP3 mRNA及AQP4 mRNA无明显变化;雌激素治疗组AQP1 mRNA及AQP5 mRNA表达减少.结论 吸入海水可引起大鼠肺组织AQP1 mRNA及AQP5 mRNA表达增加,但对AQP3 mRNA及AQP4 mRNA表达无明显影响.雌激素通过抑制海水吸入引起的大鼠肺组织AQP1 mRNA及AQP5 mRNA表达上调,影响大鼠海水淹溺型肺损伤时肺组织水的转运.     

不同潮气量机械通气对肺损伤的影响及其针对性护理

目的 研究不同潮气量机械通气对肺损伤的影响,探讨机械通气时的针对性护理措施.方法 将24只健康SD大鼠随机分为对照组（n=8）、小潮气量通气组（n=8,VT=8 ml/kg）和大潮气量通气组（n=8,VT=40ml/kg）.通气时间均为4 h.检测肺组织总蛋白、肺湿干重比（W/D）、白细胞计数和中性粒细胞髓过氧化物酶（MPO）含量以及肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白和mRNA的含量.结果与对照组比较,大潮气量通气组肺组织总蛋白、W/D、白细胞计数和MPO含量以及TNF-α蛋白和mRNA含量均显著增加（P〈0.05）,而小潮气量通气组上述指标的变化无统计学意义（P〉0.05）.结论 大潮气量机械通气可导致呼吸机所致肺损伤,临床上应加强对机械通气患者的护理防护.     

乌司他丁对大鼠"失血性休克-内毒素"二次打击肺组织水通道蛋白表达的影响

目的 观察乌司他丁对大鼠"失血性休克-内毒素"二次打击肺组织AQP-1和AQP-5表达的影响.方法 SD大鼠36只,随机分为三组:假手术对照组(C组)、二次打击组(HS组)、乌司他丁治疗组(UIT组),每组12只.建立"失血性休克-内毒素"二次打击大鼠模型,二次打击30 min后UTI组给予静注乌司他丁50 kU/kg,HS组给予等容量生理盐水代替.随后两组均回输全部失血及足量林格液进行复苏,复苏后继续观察5 h.实验结束前测定肺泡灌洗液蛋白(BALFpro)、肺通透指数(PPI)及肺组织湿/干质量比(W/D);采用RT-PCR法分别测定肺组织AQP-1和 AQP-5 mRNA表达;HE染色光镜下观察肺损伤程度.结果 与C组比较,HS组及UTI组PPI、BALFpro、W/D等指标均不同程度增高,肺组织AQP-1和 AQP-5的表达下调(P<0.01);与HS组比较,UTI组PPI、BALFpro、W/D等指标均不同程度降低,AQP-1 mRNA和AQP-5 mRNA的表达增加(P<0.01),肺组织损伤程度减轻并显著提高大鼠存活率.结论 乌司他丁通过上调AQP-1和AQP-5的表达,有助于减轻失血性休克所致急性肺损伤.     

"失血性休克-内毒素"二次打击所致肺损伤水通道蛋白的表达

目的 探讨水通道蛋白（AQP）-1和AQP-5在失血性休克一内毒素二次打击所致大鼠肺损伤中的表达。方法 30只SD大鼠随机分为两组：假手术对照组（C组）、二次打击组（HS组），每组15只。建立“未控制性失血性休克-内毒素”二次打击大鼠模型，并按院前期90min、院内复苏期60min、院内观察期三期进行实验。实验结束前采血测动脉血气并比较两组大鼠存活率。测定肺泡灌洗液蛋白（BALFpro）、肺通透指数（PPI）及肺组织湿／干质量比（W／D）；HE染色光镜下观察肺损伤程度；采用免疫组化法分别测定肺组织AQP-1和AQP-5的蛋白表达。结果 与C组比较，Hs组MAP、lac、PaO2、pH、BE、PPI、BALFpro、W／D等指标均明显恶化，肺组织损伤严重，大鼠存活率降低；与C组比较，HS组肺组织AQP-1和AQP-5的表达显著降低（P〈0．01）。结论 二次打击所致大鼠肺损伤时AQP-1和AQP-5表达均明显降低，这可能是失血性休克后肺损伤肺水肿形成的重要原因之一。     

动态通气参数对急性呼吸窘迫综合征犬肺损伤的作用机制

目的 探讨机械通气动态通气参数对ARDS犬肺内肺炎症介质的影响及其作用途径.方法 取36条健康杂种犬,采用气管内盐酸吸入法建立ARDS模型,随机(随机数字法)分为对照组,ARDS模型组及实验犬组,实验犬组随机分成A,B,c,D四组,每组6条.A组:小潮气量(6 mL/kg),低吸气流速[6mL/kg·s)],高通气频率(30次/min);B组:大潮气量(20mL/kg),高吸气流速[20mL/(kg·s)],高通气频率(30次/min);C组:大潮气量(20 mL/kg),高吸气流速[17 mL/(kg·s)],低通气频率(15次/min);D组:大潮气量(20 mL/kg),低吸气流速[10 mL/(kg·s)],低通气频率(15次/min).机械通气4 h后处死动物,留取肺组织标本行免疫组化、Western blotting检测TNF-α,IL-8,p38 MAPK蛋白的变化,RT-PCR测定TNF-α,IL-8 mRNA的表达,流式细胞仪检测NF-κB活性.结果 B组IL-8蛋白表达明显较A,D组高,c组IL-8蛋白表达较B组有下降趋势,但B,C组之间差异无统计学意义;B组TNF-α的灰度比值明显较其他组高(P<0.01),但与C组比较差异无统计学意义(P>0.05);B组p38 MAPK表达明显较A,D组高(P<0.01);A,D组之间的p38 NAPK表达差异无统计学意义(P>0.05).B组NF-κB p65(33.56±2.85)%表达较A(10.35±0.6)%,D(7.11±0.47)%两组差异有统计学意义,B组与C组(30.87±1.16)%之间差异无统计学意义.结论 在相同的大潮气量基础上,高吸气流速和高通气频率可以激活肺组织p38 MAPK及NF-κB通道,炎症介质的释放增加,导致呼吸机相关性肺损伤,小潮气量机械通气可减轻炎症反应.     

脂多糖诱导大鼠DIC模型水通道蛋白5的表达与肺水肿的关系

目的研究对Wistar大鼠滴注LPS造成DIC后,肺细胞膜表面水通道蛋白5（AQP5）的表达变化与肺水肿的关系。方法清洁级,雄性Wistar大鼠随机分为：对照组（滴注生理盐水组）;实验组（滴注LPS后4h、6h、8h、10h组）。各组取血检测PLT计数、PT、APTT、FIB含量、DD水平;取各组大鼠左肺测量其肺湿／干重比值;取各组肺组织进行HE染色,观察肺组织中微血栓形成情况及组织病理损伤（结合血液学指标与组织病理损伤判断DIC病程）;提取大鼠肺组织细胞总RNA,RT-PCR方法检AQP5mRNA水平的表达。采用SNK—q及直线相关方法对结果进行统计学分析。结果各实验组PLT计数、PT、APTT、FIB含量、DD水平与对照组相比P〈0．01;滴注LPS后6h在肺组织中可见微血栓,滴注LPS后8h、10h肺组织结构紊乱,肺泡中有大量渗出液;滴注LPS后4hAQP5的mRNA表达下调,与对照组相tLP〈0．01;滴注LPS后4h～10h肺湿／干重比值增加。经直线相关分析肺湿／干重比值与AQP5的mRNA呈负直线相关,P〈O．01。结论DIc时肺水肿的程度与肺细胞表面AOP5的表达相关．有望通过调节肺细胞表面AOP5的表达干预DIG时肺水肿的形成或消除。     

机械通气对急性胰腺炎大鼠肺组织病理及巨噬细胞炎性介质的影响

目的探讨保护性机械通气对急性坏死性胰腺炎(ANP)-肺损伤大鼠肺组织病理和肺泡炎性细胞介质的影响。方法 45只SD大鼠预处理诱导ANP-肺损伤模型,按照ANP和机械通气干预随机分成三组(每组15只):A组,对照组;B组,ANP组;C组,ANP加机械通气;观察时间均2h,连续观察平均动脉压(MAP)、SpO2、体温变化和血气分析,并保持动脉血PaCO2在35～45mmHg。实验开始即刻和实验结束时(除对照组外)抽取动脉血,处死大鼠后取肺叶组织观察肺组织病理和肺湿/干重比值;进行支气管肺泡灌洗液(BALF)提取,分析BALF中细胞变化,检测BALF中巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)和TNF-α浓度水平。结果 HE染色切片B、C两组均出现明显病理性改变,B组和C组肺湿/干重比值大于A组(P<0.05);B组和C组比较无明显变化;C组细胞聚集数较A组和B组明显(P<0.05)。各组BALF和血清炎性细胞因子比较,BALF和血清中MIP-2水平C组高于其他两组,C组与B组比较有统计学差异(P<0.05);各组TNF-α水平比较,BALF和血清中B组和C组高于A组,B组与C组BALF中TNF-α水平比较有统计学差异(P...     

机械通气对大鼠肺组织TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的影响

目的探讨机械通气对大鼠肺组织转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路相关蛋白的影响。方法30只健康大鼠随机分为3组,每组10只。对照组插管后不进行机械通气,另两组进行机械通气,小潮气量组(L-VT)VT8 ml/kg,大潮气量组(H-VT)VT25 ml/kg,通气24 h。观察各组大鼠实验后肺病理变化,实验前(T1)、实验后6 h(T2)、实验后12 h(T3)、实验后24 h(T4)大鼠动脉血氧分压(Pa O2)变化及肺组织相关蛋白(TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7)水平变化。结果对照组及小潮气量组的肺组织未见明显的充血及水肿,大潮气量组可见肺间质水肿,肺内炎性细胞浸润。L-VT组各时间点Pa O2与对照组无显著差异(P0.05);而H-VT组Pa O2在12 h后出现下降趋势(P0.05)。随着机械通气潮气量的增加,TGF-β1、Smad2、Smad3表达呈现上调趋势,Smad7表达呈下降趋势。结论TGF-β/Smad信号通路相关蛋白可能作为呼吸机相关性肺损伤发病的重要参考指标。     

机械通气动态通气参数对急性呼吸窘迫综合征犬肺损伤的影响

目的观察机械通气动态通气参数对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)犬肺损伤的影响,评价机械通气参数对肺损伤的保护作用。方法36条健康杂种犬,按照随机数字表法分为正常对照组(N组)、模型组(M组)及机械通气A～D组。采用气管内盐酸吸入法建立ARDS模型,按下述方案机械通气。A组:小潮气量(6ml/kg)、低吸气流速(6ml·kg-1·s-1)、高通气频率(30次/min);B组:大潮气量(20ml/kg)、高吸气流速(20ml·kg-1·s-1)、高通气频率(30次/min);C组:大潮气量(20ml/kg)、高吸气流速(17ml·kg-1·s-1)、低通气频率(15次/min);D组:大潮气量(20ml/kg)、低吸气流速(10ml·kg-1·s-1)、低通气频率(15次/min)。分组机械通气后0、1、2和4h各时间点分别记录呼吸力学各值。4h后处死动物,取肺脏测肺湿/干重(W/D)比值;光镜下观察病理组织学变化,并进行弥漫性肺泡损伤(DAD)评分及高倍镜下中性粒细胞计数;流式细胞仪检测肺组织核转录因子κB(NFκB)p65活性。结果B组肺W/D比值为9.95±0.99,高于A组6.78±0.56、D组7.11±0.47(P均<0.01),但与C组9.22±1.19差别不大(P>0.05)。肺组织病理DAD评分:B组为(12.80±1.47)分,明显高于A组(7.67±1.20)分和D组(8.83±1.17)分(P均<0.01),但与C组(11.50±1.87)分比较差异无显著性(P>0.05)。B组NFκBp65表达为(33.56±2.85)%,较A、D两组〔(10.35±0.60)%、(10.79±1.02)%〕表达增强(P均<0.01),与C组(30.87±1.16)%间比较差异无显著性(P>0.05)。结论大潮气量、高吸气流速、高通气频率机械通气可导致严重的呼吸机相关性肺损伤(VILI),降低通气频率可适当减轻这类损伤;在大潮气量基础上,降低通气频率及吸气流速,对损伤的肺组织可起到一定的保护作用。     

海水淹溺急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5表达变化的研究

目的 观测海水淹溺急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达变化.方法 100只健康雄性Wistar大鼠随机分为两组,即海水淹溺组和对照组.海水淹溺组用气管吸入海水法建立模型,对照组除不吸入海水外,其他处理同海水淹溺组.分别于致伤后0.5、1、2、4及8 h时点,取大鼠颈动脉血做血气分析,观察动脉血氧分压(PaO2)的变化;光镜下观察肺组织病理变化情况;采用免疫组织化学法检测肺组织表达与分布;采用RT-PCR方法检测AQP5 mRNA表达.结果 成功复制了大鼠海水淹溺ALI模型:海水淹溺组在吸入海水后血PaO2明显下降,海水淹溺组各时点血PaO2显著低于对应时点对照组(P<0.01).光镜下可见海水淹溺组各时点肺组织有毛细血管充血、肺间质、肺泡水肿和灶性出血;对照组未见明显病理变化.免疫组化显示,海水淹溺组肺间质的毛细血管内皮AQP5的阳性表达,积分光密度值显著高于对照组的表达(P<0.05);海水淹溺组大鼠肺组织AQP5 mRNA表达也显著高于对照组(P<0.01).结论 海水淹溺ALI时肺组织AQP5蛋白及mRNA表达增加,AQP5在ALI/ARDS海水的转运中可能起着重要作用.