多发性骨髓瘤患者血管内皮生长因子、碱性纤维母细胞生长因子、肝细胞生长因子血清浓度的临床意义

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)、碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)、肝细胞生长因子(HGF)与多发性骨髓瘤(MM)的关系，探索其临床意义。方法 用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法，检测32例MM患者不同时期的VEGF、bFGF、HGF和白细胞介素6(IL-6)血清浓度，观察其与MM分期和治疗效果的关系；以正常人为对照组。结果 MM患者治疗前的VEGF、bFGF、HGF血清水平比正常对照组明显增高，IL-6血清水平与正常对照组比较差异无统计学意义；MMI期、Ⅱ期的VEGF血清水平显著低于Ⅲ期，而Ⅰ、Ⅱ期之间的VEGF血清水平对比差异无统计学意义；MMI期、Ⅱ期、Ⅲ期的bFGF及HGF血清水平依次增高，对比差异有统计学意义；各期MM之问的IL-血清水平对比差异无统计学意义；MM治疗有效者，其血清VEGF、bFGF、HGF水平比治疗前明显降低，而治疗无效者，其血清VEGF、bFGF、HGF水平与治疗前比较差异无统计学意义。结论 管生成调控因子VEGF、bFGF和HGF的血清水平与MM的严重程度及治疗效果相关，可以作为判断MM严重程度和治疗效果的一个指标。     

多发性骨髓瘤MRI骨髓浸润模式与血管生成关系的研究

目的探讨多发性骨髓瘤（MM）MRI骨髓浸润模式与血管生成的相关性。方法以25例初诊MM患者为研究对象,进行传统影像学、血清肌酐、血清蛋白、β2微球蛋白、乳酸脱氢酶等检测,并根据Durie—Salmon分期系统进行分期。对骨髓瘤患者在初诊及治疗之前行脊柱T1WI、STIR和常规的T1WI增强扫描,分析骨髓瘤细胞在骨髓内的浸润模式。对照组包括非恶性血液病患者10例,其骨髓涂片及活检检查均证实为正常骨髓象。对研究组和对照组患者均进行骨髓活检及病理检查,免疫组化测定微血管密度（MVD）,以CD34单抗标记微血管内皮细胞。另外,采集骨髓后分离上层血浆,采用ELISA法测定VEGF蛋白浓度,对结果进行统计学分析。结果初治MM患者骨髓上清血管内皮生长因子（VGEF）水平及MVD高于健康对照组（P〈0．05）。MRI骨髓弥漫性浸润的MM患者骨髓上清VGEF水平及MVD高于MRI骨髓成像正常或局灶性浸润的患者（P〈0．05）。结论MRI骨髓弥漫性浸润模式与血管生成密切相关。     

多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞趋化相关因子基因表达异常

本研究探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓间充质干细胞(MSC)趋化相关因子HGF、SDF-1、MCP-1和IL-8的基因表达水平及临床意义。应用实时定量RT-PCR方法检测20例初发多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞HGF、SDF-1、MCP-1和IL-8的表达水平。结果显示,HGF mRNA在MMMSC的表达明显高于对照组,具有统计学意义(p<0.01),SDF-1 mRNA的表达较对照组低(p<0.05),MCP-1和IL-8 mRNA的表达在两组间无统计学差异(p>0.05)。结论:MM患者骨髓MSC均表达HGF、SDF-1、MCP-1和IL-8,MM患者骨髓微环境中MSC趋化相关因子表达存在异常。     

多发性骨髓瘤组织中WT1和VEGF表达及与血管新生的关系

目的:探究多发性骨髓瘤骨髓组织中WT1和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达及与血管新生的关系。方法:应用原位杂交及免疫组织化学SP染色技术检测62例多发性骨髓瘤患者及10例非恶性肿瘤和血液病对照患者骨髓组织中VEGF和WT1基因表达及微血管密度(MVD)。结果:正常对照组微血管密度(MVD)为(45±6)/视野,多发性骨髓瘤组MVD为(84±26)/视野,差异有统计学意义(P0.05);62例多发性骨髓瘤患者中VEGF的阳性率为51.6%(32/62),VEGF阳性组MVD显著高于阴性组MVD(P0.05);WT1的阳性率为30.6%(19/62),WT1阳性组MVD显著高于阴性组MVD(P0.05)。统计学分析显示,WT1的表达与VEGF的表达具有显著相关性(P0.05)。结论:多发性骨髓瘤骨髓组织中WT1的高表达可以上调VEGF的表达,促进血管新生。     

HIF-1α对K562细胞血管生成相关因子的影响

目的:通过在K562细胞过表达和干扰HIF-1α后检测K562细胞分泌血管生成相关因子的水平,探讨慢性白血病血管生成的机制。方法:应用携带和干扰HIF-1α基因的慢病毒转染K562细胞,将转染携带和干扰HIF-1α基因的K562细胞分别纳入过表达组、干扰组,同时以空载病毒转染K562细胞纳入对照组。3组细胞在常氧状态下培养72 h后收集细胞,通过荧光显微镜观察3组转染效率,采用RT-PCR法检测HIF-1α和血管相关生成因子mRNA表达水平,ELISA法检测培养上清中血管相关细胞因子的浓度。结果:慢病毒转染K562细胞最佳转染复数(MOI)为10,转染效率为50%左右;经过嘌呤霉筛选后转染阳性细胞达90%以上。干扰组ANG-I、ANG-II、TGF-α和VEGF mRNA表达均低于过表达组,而干扰组TGF-β1 mRNA表达高于过表达组。干扰组ANG-I、VEGF mRNA表达低于对照组;培养上清中未检测到TGF-α,干扰组ANG-I和TNF-α水平低于过表达组,而干扰组VEGF水平高于过表达组;过表达组和干扰组TGF-β1水平均低于对照组,过表达组VEGF水平低于对照组,干扰组VEGF水平高于过表达组和对照组,上述差异具有统计学意义(P 0.05)。结论:通过嘌呤霉素筛选获得慢病毒转染K562细胞阳性细胞,HIF-1αmRNA正向调控K562细胞ANG-1、ANG-2、TGF-α、VEGF mRNA的表达,促进ANG-I和TNF-α自身分泌的能力,而不刺激TGF-α的自分泌,HIF-1α上调可抑制K562细胞TGF-β1的表达并抑制TGF-β的自分泌。     

蛋白酶体抑制剂对多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞迁移能力及其肝细胞生长因子表达的影响

本研究探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米对多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓间充质干细胞(MSC)迁移能力及其肝细胞生长因子(HGF)基因表达水平的影响。应用Transwell模型观察MM患者骨髓MSC经2.5 nmol/L硼替佐米处理前后的体外迁移能力,实时定量PCR检测MSC的HGF mRNA的表达水平。结果表明,经2.5 nmol/L的硼替佐米作用48小时后,MSC的迁移能力明显低于对照组,并且HGF mRNA在MSC的表达与对照组相比也明显降低,两者结果均具有统计学意义(p<0.05)。结论:硼替佐米可抑制MM患者骨髓MSC的迁移,同时可下调其趋化相关因子HGF的表达。     

成人恶性血液病患者血管内皮生长因子的血清水平分析

目的　探讨急性髓细胞白血病和多发性骨髓瘤患者的血清VEGF水平与疾病发展的关系。方法　应用酶联免疫吸附技术和Envision免疫组化二步法 ,分别检测 4 1例次成人急性髓细胞白血病和 19例次多发性骨髓瘤患者的血清VEGF水平 ,以及部分患者的骨髓血管生成情况。分析治疗前后血清VEGF水平的差异性 ,及其与患者骨髓微血管数、部分实验室检查指标、患者临床疗效的相关性。结果　AML和MM患者血清VEGF水平在经过化疗获得缓解或部分显效后显著低于初发时水平 (P <0 0 1)。AML各亚型M2、M3、M4和M5患者的血清VEGF水平差异无统计学意义(P值 =0 12 6 ) ,但均显著低于MM初发患者的血清VEGF水平 (P <0 0 1)。AML、MM初发患者血清VEGF水平与初发时的骨髓微血管数之间无显著相关性。结论　血清VEGF水平与疾病的活动性相关 ,可能在一定程度上反映疾病的状态。有效的化疗可能通过抑制白血病细胞增殖 ,下调VEGF的分泌。     

血管内皮细胞生长因子-A及肿瘤相关巨噬细胞在多发性骨髓瘤中的研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是一类浆细胞恶性克隆性疾病,发病机制复杂.MM的发生、发展与新生血管形成及骨髓微环境密切相关.新生血管形成受血管内皮细胞生长因子(VEGF)等血管形成调节因子调节,可促进MM细胞增殖、迁移.肿瘤相关巨噬细胞(TAM)活化后,亦可产生VEGF等促血管生成因子,从而促进骨髓新生血管形成,促进MM发展.笔者拟就VEGF-A、TAM在MM发病中的研究进展进行综述.     

初诊多发性骨髓瘤患者血管新生的研究

1994年Vacca等首次研究证实，多发性骨髓瘤（MM）患者骨髓血管新生明显增加，与疾病进程及不良预后有关，提示血管新生在MM的发病机制中可能具有重要的作用。我们在本研究中通过测定新诊断MM患者骨髓微血管密度（MVD）及骨髓、血浆中血管新生因子与基质金属蛋白酶（MMP）的浓度，分析血管新生与MM之间的关系，以探讨血管新生在其发病机制中的意义。     

血管新生对多发性骨髓瘤预后的判定意义

目的：探讨骨髓微血管密度（microvesseldensity，MVD）对多发性骨髓瘤（multiplemyeloma，MM）预后判定的意义。方法：选取57例新诊断MM患者，在治疗前接受骨髓活检，应用免疫组化法测定骨髓MVD；同时对患者进行随访43以上。结果：新诊断MM患者的骨髓MVD与疾病国际预后分期（ISS）相关，Ⅲ期〉Ⅱ期〉Ⅰ期（P〈0.01）；高MVD者预后显著差于低MVD患者。结论：提示血管新生旺盛的MM患者预后不良；通过测定骨髓MVD可以初步评价患者预后。     

中期因子及血管内皮生长因子在多发性骨髓瘤患者骨髓中的表达及意义

本研究旨在探讨多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）患者中期因子（midkine,MK）、血管内皮生长因子（Yascula Fendothelial growth factor,VEGF）的表达水平及其与血管新生、临床预后的关系。应用实时荧光定量PCR检测31例MM患者和20例对照组骨髓单个核细胞MK和VEGF mRNA的表达。结果表明：MM患者骨髓MNC中MK和VEGF表达量均明显高于对照组（P〈0．05,P〈0．01）,且MK和VEGF的表达之间有显著相关性（r=0．692,P〈0．01）。MK和VEGF的表达在Ⅰ期和Ⅱ期患者之间无显著差异（P〉0．05）,而Ⅲ期患者MK、VEGF表达均较Ⅰ期和Ⅱ期显著升高（p〈0．05,P〈0．01）,治疗前后骨髓MNC中MK、VEGFmRNA表达水平存在显著差异（P〈0．05,P〈0．01）。结论：MK、VEGF高表达可能与MM血管新生、病情进展有关,且二者存在一定的协同作用,因此监测MK和VEGF表达水平可能对指导MM治疗和估计预后有一定意义。     

垂体腺瘤VEGF、bFGF和内皮抑素mRNA表达与血管生成的关系

【目的】检测垂体腺瘤组织中的血管内皮细胞生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和内皮抑素mRNA的表达，探讨其与垂体腺瘤血管生成的关系及临床意义。【方法】应用逆转录PCR（RT—PCR）方法检测30例垂体腺瘤组织标本中VEGF、bFGF和内皮抑素mRNA的表达，以Ⅷ因子相关抗原（FⅧ-Rag）血管内皮细胞标记法作为MVD计数的方法，分析上述血管生成相关因子与垂体腺瘤血管生成的关系。【结果】VEGF、bFGF mRNA表达与MVD之间呈显著正相关（r=0．36，r=0．45，均P〈0．05），内皮抑素表达和MVD之间无显著相关性（r=-0．17，P〉0．05）。【结论】垂体腺瘤血管生成与促血管生成因子VEGF、bFGF基因水平表达的上调有关。     

多发性骨髓瘤治疗的新靶点——血管内皮生长因子

近二十年来血管新生（Angiogesis）在肿瘤发生、转移中的作用日益受到重视。同实体瘤一样，多发性骨髓瘤（MM）骨髓微血管密度（MVD）被认为是有力的预后指标。血管内皮生长因子（VEGF）是众多调节血管新生的细胞因子中的重要一员，近年来对VEGF在MM中的病理生理作用的研究越来越多，我们就此作一综述。     

慢性粒细胞白血病患者血管新生及相关因素研究

目的 观察慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓血管新生情况,探讨骨髓微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在CML患者的表达及意义.方法 采用免疫组化染色(S-P)法检测32例CML患者和10例对照组骨髓活检组织中MVD及VEGF,bFGF的表达率.结果 24例CML慢性期患者骨髓MVD与对照组比较,差异有非常显著性意义(t=14.03,P<0.01);5例CML加速期患者骨髓MVD与对照组比较差异均有非常显著性意义(t=9.76,P<0.01);CML慢性期、加速期、急变期骨髓中VEGF,bFGF的阳性表达率均明显高于对照组,而CML加速期与急变期比较VEGF的阳性表达率差异无统计学意义(t=1.12,P>0.05),bFGF的阳性表达率差异无统计学意义(t=1.15,P>0.05).结论 CML患者存在骨髓血管新生,血管新生及其调控因素的异常在CML患者的发生、发展中有着重要作用.     

多发性骨髓瘤中PTEN 蛋白及血管新生调控因子的表达及意义

目的 探讨多发性骨髓瘤（MM）患者瘤细胞中第10号染色体磷酸酶和张力蛋白同源缺失性基因（PTEN）蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及转化生长因子β1（TGF-β1）的表达,分析其在疾病中的意义。 方法 用免疫组化SP法测定49例MM患者、30例对照及26例化疗有效患者PTEN、VEGF、bFGF及 TGF-β1的表达,应用卡方检验分析。 结果 MM 患者PTEN及TGF-β1的表达显著低于对照组及化疗有效组（P<0.05）,而VEGF、bFGF的表达显著高于对照组及化疗有效组（P<0.05）;MM Ⅰ+Ⅱ期组VEGF、bFGF表达率显著低于Ⅲ期组（P<0.05）,而Ⅰ+Ⅱ期组PTEN、TGF-β1显著高于Ⅲ期组（P<0.05）。 结论 PTEN、VEGF、bFGF及TGF-β1的异常表达可能在疾病的发展中起一定的作用,三者联合检测有助于判断疾病分期及预后。     

急性髓系白血病患者治疗前后血管内皮生长因子及其受体的变化

目的　探讨急性髓系白血病 (AML)中血管生成的作用。方法　用ELISA法检测AML骨髓单个核细胞培养上清血管内皮生长因子 (VEGF)的表达 ;应用免疫组化技术检测 2 8例初治AML患者治疗前后的骨髓活检标本VEGF及受体Flt 1、KDR和微血管密度 (MVD)的变化。结果　AML患者骨髓细胞VEGF的分泌量 (42 5 .31ng L)大于对照组 (14 0 .12ng L)。初治AML患者骨髓病理组织中VEGF、KDR和Flt 1的表达 (分别为 78.6 %、78.6 %和 7.1% )高于对照组 (分别为 10 .0 %、5 .0 %和 5 .0 % ) (P值均 <0 .0 5 ) ;VEGF与MVD及KDR呈正相关 ;化疗后完全缓解组骨髓组织的VEGF、KDR阳性率及MVD明显下降 (P <0 0 5 ) ,化疗后未完全缓解组的VEGF、KDR阳性率及MVD与治疗前相比无显著性下降(P >0 .0 5 ) ;Kaplan Meier分析显示治疗前VEGF阳性组和MVD高表达组的生存时间分别大于VEGF阴性组和MVD低表达组 (P <0 0 5 ) ,但治疗前KDR表达情况与生存时间无关 (P >0 .0 5 )。结论　AML骨髓组织中存在血管生成 ,VEGF KDR信号传导通路在急性白血病血管新生中起主要作用 ,VEGF的表达与AML的预后有关。     

多功能蛋白聚糖及其相关分子在多发性骨髓瘤患者中的表达及其临床意义

目的:探讨多功能蛋白聚糖及其相关分子在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达及其临床意义。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离25例多发性骨髓瘤患者治疗前、后骨髓单个核细胞,并通过实时定量PCR检测细胞中VCAN及其相关分子m RNA的表达水平,采用Western blot法测定其蛋白表达。结果:MM患者治疗有效后,VCAN、FAK、FN的表达量较治疗前均明显下降(P0.05),而MK及HAS治疗前、后差异无统计学意义(P0.05);未缓解组VCAN、FAK、FN、MK、HAS的表达量较正常对照组均明显升高(P0.05),未缓解组FAK、FN较初诊组表达量均明显升高(P0.05);VCAN mRNA相对表达量在ISS分期Ⅲ期较正常对照组显著升高(P0.05),较Ⅰ期明显升高(P0.05),但较Ⅱ期无明显差异(P0.05)。Spearman相关分析结果显示,初诊MM患者骨髓单个核细胞中VCAN与FAK(r=0.69)、MK(r=0.67)、FN(r=0.67)的相对表达水平均呈正相关(P0.05),而VCAN与HAS相关性无统计学意义(r=0.259,P0.05)。生存分析结果显示,VCAN mRNA相对表达水平与患者的总生存期(OS)(P0.05)及无进展生存期(PFS)(P0.05)相关。结论:VCAN及其相关分子在多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中高表达,其在多发性骨髓瘤的发生、发展及预后中可能起重要作用。     

酞咪哌啶酮联合地塞米松治疗多发性骨髓瘤的疗效及机制

目的 观察酞咪哌啶酮联合地塞米松治疗多发性骨髓瘤(MM)的疗效、机制及不良反应.方法 反应停起始剂量150 mg/d,每周增加50～100 mg/d,直至200～300 mg/d;地塞米松40 mg/d,第1～4天,第9～12天,第17～20天,28 d为1疗程.用免疫组化染色方法检测治疗前后患者骨髓微血管密度(MVD),用ELISA方法测定患者治疗前后血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)的浓度.结果 18例MM患者中部分缓解5例,进步9例,无效4例,无完全缓解患者,总有效率77.8%,无不能耐受的不良反应.治疗前MVD(74±29)显著高于治疗后MVD(57±18)(P＜0.05),两组均明显高于正常对照组MVD(31±12)(P＜0.01).治疗后血清VEGF水平为(72±20)ng/L,显著低于治疗前(181±26)ng/L(P＜0.01),两组与正常对照组(56±16)ng/L比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 MM患者MVD和VEGF明显增高,经酞咪哌啶酮联合地塞米松治疗后两者均明显下降.反应停联合地塞米松治疗多发性骨髓瘤(MM)有效、安全.     

多发性骨髓瘤患者巨噬细胞感染蛋白1α表达的研究

溶骨性骨质破坏为多发性骨髓瘤（MM）的突出临床表现，然而MM及其骨病的发病机制仍不清楚。巨噬细胞感染蛋白1α（MIP-1α）为肿瘤细胞、淋巴细胞等分泌的一种可溶性因子。近年来的研究表明它与MM的发病有关。我们检测了30例MM患者骨髓单个核细胞（MNC）培养上清液的MIP-1α水平和24例MM患者骨髓基质细胞（BMSC）培养上清液的IL-6水平，以探讨MIP-1α与MM和MM骨病发病的关系。     

多发性骨髓瘤血管内皮细胞生长因子表达的临床意义

血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)是目前已知作用最强、特异性最高的血管新生正性调控因子,在肿瘤发生与发展中起着重要的作用.为了研究VEGF在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)发病机制中的作用,我们应用原位杂交染色技术检测多发性骨髓瘤患者骨髓组织VEGFmRNA转录情况,探讨VEGF在多发性骨髓瘤发病中的作用及其与预后的关系.