SISH检测乳腺癌HER2基因及17号染色体倍体分析

目的:评价银增强原位杂交(SISH)用于乳腺癌患者人表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增状态检测的可行性和17号染色体多体的发生情况及其意义。方法:对90例手术后乳腺浸润性导管癌患者标本行全自动免疫组织化学(IHC)染色检测HER2蛋白表达,荧光原位杂交(FISH)和SISH检测HER2基因状态及17号染色体多体的发生率。结果:在IHC(3+)、(2+)、(1+/0)3组中,SISH检测与FISH检测在检测HER2基因扩增方面的总体符合率为96%。17号染色体多体的发生率在IHC(3+)、(2+)、(1+/0)3组中分别为44%,26%和0.02%,其总的发生率为18%。结论:SISH技术用于乳腺癌HER2基因状态检测结果与FISH相当,具有可行性和实际使用价值;17号染色体可能与乳腺癌患者的预后有关。     

荧光原位杂交技术在乳腺癌HER2的表达及其意义

目的 探讨荧光原位杂交（FISH）-5免疫组织化学（IHC）检测乳腺癌人表皮生长因子受体2（HER2）基因状态中的相关性和差异性。方法对40例原发性乳腺癌组织做石腊切片,分别用兀SH和IHC检测HER2基因扩增和HER2蛋白表达,以FISH检测结果为标准,评价IHC检测的基因扩增比率。结果IHC检测HER2蛋白表达（3＋）的基因扩增比率为88．9％（8／9）,1例无扩增者为17号染色体多体;IHC（2＋）的基因扩增比例为71．4％（5／7）,2例无扩增者中有1例为17号染色体多体;IHC（1＋和0）的无基因扩增。结论IHC可以做为HER2基因状态检测的初筛;IHC（2＋）与IHC（3＋）存在假阳性,与17号染色体多体有关,故应该做FISH检测确诊。     

乳腺癌HER2蛋白阳性表达的基因状态及其与P53蛋白相关性研究

目的研究乳腺癌HER2蛋白表达阳性的基因状态及其与P53蛋白相关性,探讨其与乳腺癌发生、发展的内在关系。方法选取257例HER2蛋白表达阳性的浸润性乳腺癌样本,分别应用荧光原位杂交（FISH）法和免疫组织化学EliVisionTMplus法对标本中的HER2基因和P53蛋白、ER和PR受体进行检测并做相关性分析。结果①HER2基因扩增率64．59％（166／257）;其中IHC（2＋）56．48％（109／193）,（3＋）89．06％（57／64）;HER2基因扩增和其蛋白阳性表达比较有显著相关性（P〈0．01）。②P53蛋白表达率52．92％（136／257）,P53蛋白表达率、HER2基因扩增率与ER、PR受体表达及腋窝淋巴结转移差异有显著性（P〈0．05）;与肿瘤大小、病理学类型、年龄无统计学意义（P〉0．05）。结论HER2基因扩增率与P53蛋白表达率呈正相关,两者指标的联合检测对乳腺癌的转移、预后评估具有重要的参考意义。     

乳腺癌17号染色体多体与HER2基因扩增及预后因素的相关性

目的 分析乳腺癌17号染色体多体与HER2基因扩增及预后因素的相关性,探讨其临床意义.方法 采用免疫组化(IHC)技术检测120例浸润性乳腺癌患者HER2蛋白表达情况,选择IHC结果为( + + )及( + + + )的患者92例行荧光原位杂交(FISH)检测其HER2基因扩增及17号染色体多体.结果 58.7%(54/92)的患者出现HER2基因的扩增,免疫组化( + + )、( + + + )的病例所占比例分别为72.8%(67/92)、27.2%(25/92);FISH与免疫组化检测在HER2蛋白( + + )、( + + + )的符合率分别为47.8%(32/67)、88%(22/25);20.7%的患者存在17号染色体多体,HER2基因扩增组出现17号染色体多体的概率比HER2基因无扩增组更高(P<0.01);存在17号染色体多体的患者其淋巴结转移率更高;17号染色体多体与肿瘤最大直径及组织学分级无相关性.结论 HER2免疫组化( + + )的患者建议行FISH检测.17号染色体多体与HER2基因扩增相关,且可能是导致HER2基因扩增的原因之一.17号染色体多体可能提示乳腺癌的预后.     

HER2蛋白表达与乳腺癌预后关系的相关性研究

目的探讨HER2蛋白表达与乳腺癌预后的关系。方法应用免疫组织化学方法,检测115例乳腺癌组织中HER2蛋白,结合临床随访资料,分析HER2蛋白表达与乳腺癌预后的关系。结果115例乳腺癌切除标本中,HER2阳性表达率为58．26％,过表达率为38．26％;HER2分级中0、1、2、3级表达的生存率曲线之间比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。经单变量分析,HER2阳性表达与生存时间呈显著性负相关,是预后不佳的危险因素。结论HER2蛋白表达与乳腺癌患者生存期密切相关,是乳腺癌患者独立的不良预后因素,检测HER2蛋白表达可作为判断乳腺癌预后的参考指标。     

荧光原位杂交检测乳腺癌HER2基因的表达及其意义

目的：探讨荧光原位杂交（FISH）在检测乳腺癌组织HER2基因表达的临床意义。方法：应用FISH法对50例乳腺癌患者进行HER2基因检测,分析基因表达程度与临床特征之间的关系,比较基因和免疫组化（IHC）法蛋白表达的差异性。结果：FISH法与IHC法检测结果总符合率为88%,我院女性乳腺癌人群中HER2基因过表达率为44%,其过表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期之间差异无统计学意义（P〉0.05） 孕激素受体（PR）阳性组高于PR阴性组,差异有统计学意义（P〈0.01） 雌激素受体（ER）阳性组与ER阴性组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：HER2基因的过表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及ER无关,与PR成负相关。FISH法检测乳腺癌HER2基因敏感性及稳定性较高,可作为最终确诊HER2基因状态的方法。     

乳腺癌HER2、孕激素受体表达与生存期相关性的研究

OBJECTIVE: To investigate the relationship between the survival time and the expressions of progesterone receptor (PR) and HER2 in the tumor tissues of patients with breast cancer, thereby to explore the possibility of using the 2 indices as the indicator for the prognosis of the patients. METHOD: Immunohistochemical staining for PR and HER2 was performed on paraffin embedded tumor specimens obtained from 185 patients with breast cancer, and follow-up studies were conducted and the survival time of the patients recorded. RESULTS: In the 120 patients (64.9%) with complete followed-up data, 28 patients died (15%), with the record of the other 65 patients (35.1%) not available for this study. Immunohistochemical detection found that the positivity rates for HER2 and PR were 57.8% and 62.7% respectively in the total specimens examined, and HER2 and PR showed significant difference in their respective associations with the survival rate of the patients (P<0.01). Specifically, HER2 was inversely associated with the survival rate, to which PR was positively related. The univariant analysis suggested the hazards posed by HER2 expression to reduce the overall survival of the patients (P<0.01, OR=1.566), while PR, playing the protective role, was associated with a significantly longer overall survival time (P<0.01, OR=0.547). In the multivariate analysis, however, only PR expression was of significant prognostic value in the patients (P 0.012). CONCLUSION: Both HER2 and PR can be used as independent indicators for the prognosis of patients with breast cancer, and high HER2 expression may indicate poor prognosis, while PR is associated with a longer survival time and a higher survival rate.     

胃癌原发灶不同区域HER2的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌手术标本不同区域人类表皮生长因子受体2（HER2）的异质性及其临床意义,分析原发灶HER2表达与胃癌临床病理特征的关系。方法 收集2004至2012年胃癌根治手术标本70例,采用免疫组织化学（IHC）对每例胃癌3个不同区域的组织蜡块进行HER2蛋白表达检测,利用荧光原位杂交（FISH）检测HER2蛋白为2+的所有组织蜡块,参照2011年版的《胃癌HER2检测指南》中的判读标准将检测结果进行比较。结果70例胃癌手术标本3个不同区域HER2有差异表达11例（4例1+,4例2+,3例3+）,无差异表达59例（56例0,1例2+,2例3+）,结合FISH检测结果,HER2表达分别为63.6%（7/11）与5.1%（3/59）,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）;胃癌HER2表达与肿瘤Lauren分型及分化程度有关（均P＜0.05）。结论胃癌原发灶不同区域HER2表达存在明显异质性,多区域取材检测有助于全面可靠评估HER2表达,对于FISH检测无基因扩增的HER2蛋白为2+的患者应选取肿瘤其他部位再次进行FISH检测。     

乳腺癌组织中HER2和Topo IIα的表达及其临床意义

目的：检测人类表皮生长因子受体(human epidermal growth factor 2,HER2)和Topo IIα在乳腺癌组织中的表达情况,并分析二者的表达对蒽环类药物新辅助化学治疗(化疗)的临床意义。方法：采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和免疫组织化学(免疫组化)方法对189例临床资料完整的浸润性乳腺癌组织样本进行HER2和Topo IIα基因和蛋白表达检测,并对乳腺癌患者接受TAC新辅助化疗后的客观有效率(objective response rate,ORR) 和病理完全缓解率(pathological complete rate,pCR)进行统计和分析。结果：在189例乳腺癌患者组织中,经免疫组化检测的HER2蛋白表达46例(24.3%)3+,Topo IIα蛋白表达55例(29.1%) 3+;FISH检测,HER2蛋白表达阳性49例(25.9%),Topo IIα蛋白表达阳性94例(49.0%)。HER2阴性患者ORR为47.4%,pCR为20.3%;阳性患者ORR为32.7%,pCR为16.3%,两者差异均有统计学意义(均P<0.05)。Topo IIα阳性患者ORR为69.1%,pCR为36%;阴性患者ORR为28.4%,pCR为2.2%,两者差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：FISH和免疫组化检查HER2和Topo IIα对于乳腺癌治疗具有重要指导意义,Topo IIα基因扩增可以有效改善蒽环类药物辅助治疗效果。     

HER2阳性乳腺癌病人TOPOⅡa蛋白表达的相关因素分析

目的:探讨DNA拓扑异构酶Ⅱa(TopoⅡa)蛋白在人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌病人中的表达及其与临床病理因素的关系.方法:收集我院2004年1月至2008年2月资料完整的HER2阳性乳腺癌组织标本103例,所有病例均有病理证实为乳腺癌,术前均未行新辅助化疗、放疗或内分泌治疗.应用免疫组织化学方法检测标本...     

Intratumoral heterogeneity of HER2 gene amplification in occult breast cancer

Occult breast cancer （OBC） is an uncommon type of breast cancer, with palpable masses in the axillary area as the initial symptom. We report a case of OBC with HER2 genetic heterogeneity and discuss the impact of an unusual HER2 amplification pattern.A 56-year-old female was discovered a palpable mass in the right axillary area. She underwent a lymph node excisional biopsy at another hospital approximately one month before referral to our hospital service for further evaluation. The biopsy showed lymph tissue with tumor cell infiltrating in the form of sheets or nests. The tumor cells were larging in size, obviously atypical, and showed prominent nucleoli and intracellular keratosis. Mammography, chest X-ray, chest computed tomography （CT）, abdominal ultrasonography （US）, and positron emission tomography- CT （PET-CT）, which were also performed at the initial hospital, showed no abnormal findings.     

采用色素原位杂交法检测HER2蛋白弱阳性表达乳腺癌患者的基因扩增状态

目的应用色素原位杂交法(chromogenic in situ hybridization,CISH)检测HER2蛋白弱阳性表达乳腺癌患者的HER2基因扩增状态,为乳腺癌的临床诊治提供依据。方法收集HER2蛋白弱阳性()表达乳腺癌患者石蜡切片标本187例,采用Invitrogen公司的HER2CISHTM检测试剂盒,根据美国临床肿瘤学会/美国病理医师学会推荐标准,分析标本HER2基因状态及其与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的相关性。结果乳腺癌HER2蛋白弱阳性表达标本HER2基因扩增阳性率为53.48%(100/187),基因扩增阳性者ER、PR阳性表达率分别为44.00%、46.00%;HER2基因扩增阴性率为46.52%(87/187),基因扩增阴性者ER、PR阳性表达率分别为70.73%、78.05%。HER2基因扩增结果与性激素受体(ER、PR)表达明显负相关(P<0.01)。结论 HER2蛋白弱阳性表达乳腺癌患者有必要进一步明确其基因扩增状态,CISH可有效检测此类患者的HER2基因扩增状态。     

IHC与FISH检测乳腺癌HER2状态一致性的对比研究及其临床意义

目的:对比研究免疫组织化学方法(IHC)检测乳腺癌HER2蛋白表达和荧光原位杂交技术(FISH)检测HER2基因状态的一致性,并评价其临床意义.方法:采用IHC法及FISH法分别检测77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本的HER2蛋白表达和HER2基因状态,并进行对比分析.结果:77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本用IHC检测H...     

骨肉瘤组织中HER2、P-糖蛋白的表达与预后的关系

大多数骨肉瘤均有HER2及P-糖蛋白(P—gp)的表达。P—gp介导的多药耐药性(MDR)是骨肉瘤化疗不敏感的重要原因，也是影响预后的重要因素，而致癌基因HER2的表达与否则提示肿瘤恶性程度高低及转移能力的强弱。作者拟对HER2及P-gp的表达及其与骨肉瘤预后的关系作一综述。     

HER2基因扩增和蛋白表达与胃癌临床病理因素的相关性

目的:探讨HER2基因扩增和蛋白表达与胃癌不同临床因素的相关性。方法:回顾性分析河南省肿瘤医院2012年5月至2013年10月收治的1 002例胃癌患者术后肿瘤组织病理标本,应用免疫组化技术(IHC法)和双色银染原位杂交技术(SISH法)检测HER2基因扩增和蛋白表达情况,比较不同临床特点的胃癌患者亚组间HER2表达阳性率的差异。结果:1 002例术后肿瘤组织病理标本中HER2阳性208例(20.8%)。HER2蛋白过表达与Lauren分型、病理分化程度和浸润深度有明显的相关性,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在肠型胃癌、分化较好的胃癌、胃癌全层浸润时HER2阳性率明显提高。     

HER2基因的克隆及其在MCF-7细胞中的表达

目的 克隆人表皮生长因子受体(HER2)基因,建立共表达HER2基因和雌激素受体(ER)基因的MCF-7细胞模型。方法 从高表达HER2的人乳腺癌细胞株SKBR-3中,用RT-PCR技术克隆HER2基因全长cDNA,将其插入载体pcDNA3.1中构建重组真核表达载体pcDNA3.1-HER2。测序鉴定后,利用阳离子脂质体介导将其转染ER阳性的乳腺癌MCF-7细胞,经G418筛选阳性克隆。用免疫细胞化学、流式细胞术及Westernblotting等方法检测HER2基因在MCF-7细胞中的稳定表达情况。结果 DNA测序证明,获得的HER2基因序列与GenBank中报道序列完全一致。将其转染MCF-7细胞,经流式细胞术、Westernblotting及免疫细胞化学等方法检测证实,转染细胞内有HER2基因高表达。结论 成功克隆HER2基因并获得共表达HER2基因和ER基因的MCF-7细胞株。     

HER2阴性乳腺浸润性导管癌p53蛋白表达的临床意义

目的：检测p53 蛋白在人类表皮生长因子受体2 (human epidermal growth factor receptor 2,HER2) 阴性乳腺浸润性导管癌中的表达,探讨其在HER2 阴性乳腺浸润性导管癌中的临床意义。方法：利用免疫组织 化学检测p53 在HER2 阴性的乳腺浸润性导管癌中的蛋白表达,同时免疫组织化学常规检测雌激素受体(estrogen receptor,ER) 和孕激素受体(progesterone receptor,PR) 的蛋白表达。结果：p53 蛋白在乳腺浸润性导管癌III 级中的阳性表达率高于乳腺浸润性导管癌I 级(P<0.05),但其表达与患者的年龄、临床分期、淋巴结转移状况 无明显相关。ER 阳性的乳腺浸润性导管癌的p53 蛋白的表达率低于ER 阴性的表达率(P<0.01),ER 和PR 共同 阳性的乳腺浸润性导管癌的p53 蛋白的阳性表达率明显低于ER 或PR 阴性的表达率(P<0.05)。p53 蛋白阳性患 者的5 年生存率显著低于p53 阴性患者(P<0.01),而且是HER2 阴性乳腺浸润导管癌的一个独立预后因素。结论： p53 蛋白表达与HER2 阴性的乳腺浸润性导管癌预后相关,并且是其独立的预后预测分子标志物。     

实时荧光PCR法检测HER2基因扩增方法的建立

目的探讨应用双标准曲线的实时荧光PCR法检测原癌基因人类表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增在临床乳腺癌诊治中的可行性。方法收集500例乳腺癌术后新鲜组织标本,抽提组织DNA进行实时荧光PCR检测,采用双标准曲线法定量,通过计算目的基因浓度和内标基因浓度的比值来判断HER2基因的扩增情况。选择灵敏度和特异度均较高的荧光原位杂交方法作为对照方法。结果检测阳性标本72例,阴性样本419例。该方法检测的灵敏度为85.9%,特异度为98.79%,准确度为96.74。与荧光原位杂交法(FISH)检测结果相比,二者具有较好的一致性。结论双标准曲线的实时荧光PCR法用于检测HER2基因扩增相对准确可靠,有较好的临床应用前景。