全自动酶免分析仪检测HIV拖带阳性解决方法的探讨

【摘要】目的探讨全自动酶免分析仪检测人体免疫缺陷病毒（HIV）拖带阳性的解决办法。方法收集常规筛查中的HIV抗体强阳性标本4份,分别在不使用外部清洗液和使用外部清洗液的情况下．用TECAN150型4针全自动酶联免疫分析仪做阳性拖带模拟试验,观察增加外部清洗液在消除加样针拖带阳性中的作用及其对酶免试验的影响。结果拖带模拟试验中,以CDS—C清洗液作为系统清洗液时,在不使用外部清洗液的情况下,HIV抗体强阳性标本4例都出现了阳性拖带现象。以CLEANER2000清洗液作为外部清洗液的情况下,HIV抗体均无阳性拖带孔出现,并且在使用CLEANER2000清洗液作为外部清洗液的情况下与无外部清洗液比较．HIV的质控品和对照品的实验结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CLEANER2000清洗液作为外部冲洗液能够避免全自动酶免分析仪加样中HIV拖带阳性现象的发生,并且对酶免试验结果无显著影响。     

ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的对策分析

随着全自动加样设备在血液筛查中的广泛应用,其加样过程导致的拖带现象已引起高度关注。笔者在进行血液标本加样检测过程中,发现抗体强阳性标本,引起拖带现象(以抗-HIV为例)进行统计分析,现报告如下。1材料与方法1.1血清标本均来自我站街头无偿献血者。     

ELISA检测中全自动加样引起拖带污染现象的原因分析及对策

目的探讨ELISA检测中全自动加样引起拖带污染现象的原因及采取的对应措施。方法分别使用初检试剂检测初检标本,复检试剂检测复检标本,根据检测试剂说明书的要求,在STAR全自动样本处理系统控制微机上编辑初检、复检2个加样程序。2008年以前使用永久性钢针,加样过程中加样探针需冲洗后反复使用;2009年以后全部使用一次性加样探针,设定程序也相应取消了洗涤环节。当结果判读时发现ELISA微板上从A排至H排连续出现2孔或2孔以上阳性结果时,即怀疑是由拖带污染引起的假阳性。首先进行同一检测项目初、复检结果比对,然后重新取1份血袋导管标本,连同初、复检标本,分别用2种试剂进行3孔复试,从而判断是否为强阳性引起的拖带污染现象。结果以HIV检测为例,2008年10月至2008年12月的6142份血液标本检测中共出现2例拖带污染现象,而2009年1月至2011年4月共68073份血液标本检测中未发现1例拖带污染现象。结论使用一次性加样探针可有效避免拖带污染现象的发生。同时根据不同厂家试剂的实际情况,设置科学合理的加样参数;对仪器设备定期进行维护、校准和持续监控管理以及对血液标本进行全程质量控制等综合整治措施,可更好地发挥全自动检测设备的优势,进一步提高检测结果的准确性及血液使用的安全性。     

全自动加样仪一次性加样针在血液检测中的应用

目前，在采供血机构配置的全自动加样仪器所使用的加样针大部分为永久性钢针，其洗针残留液体导致试剂和样本稀释、以及加样导致的拖带污染问题等隐患和缺点，已引起人们高度关注。本站于2007年9月将STAR全自动加样仪配置成一次性加样针（Tip头）对血液进行检测，同时与永久性钢针加样和手工加样两种加样模式进行对比，现报告如下。     

消除Abbott AXSYM SYSTEM检测血清总β-HCG钩状效应

目的；消除血清总β—HCG钩状效应。方法：将血清梯度稀释到10000倍（用配套的稀释剂作为稀释剂），分别用试纸条法和仪器法检测。结果：血清标本随稀释度增加其试纸条HCG阳性程度越强，此时仪器检测的结果最为反映患者的实际情况；随着稀释度继续增加。试纸条HCG阳性程度变弱。结论：在检测高浓度HCG时，可以采用标本稀释法来检测，其最佳稀释度可以用试纸条的阳性程度来判定。     

梅毒TRUST滴度检测中的假阴性分析

目的 探讨如何杜绝梅毒患者甲基胺红不加热血清试验(TRUST)滴度检测中的假阴性.方法 利用酶联免疫吸附测定(EHSA法)检测585名梅毒患者,并同时对其血清进行TRUST滴度检测.结果 在585例中,原倍血清TRUST滴度阳性260例,原倍血清TRUST滴度阴性325例,在这325例中,将其血清倍比稀释后,滴度为1∶64的共8例,约占2.46％.可见,这8例原倍血清TRUST滴度阴性是假阴性.结论 梅毒患者做TRUST滴度检测时不能只做原倍血清的检测,要同时做倍比稀释后血清的滴度检测,只有这样才能杜绝TRUST滴度假阴性的情况.使梅毒患者尽早治疗,以免贻误病情.     

改良梅毒螺旋体明胶颗粒凝集法在无偿献血者中的应用

目的 评价自行改良梅毒螺旋体明胶颗粒凝集法（TPPA）在无偿献血者中大批量检测梅毒螺旋体（Treponema Pallidum,TP）抗体的可行性.方法 改良传统经典TPPA法一系列倍比稀释为加样器自动加样稀释、添加试剂,静置2 h,采用酶标仪判读结果.并同时进行TP-ELISA法（TP-酶联免疫吸附实验）对比实验.结果 利用中国药品生物制品检定所的梅毒螺旋体抗体诊断试剂国家参比品进行考评,1～10号样本检测结果为阳性、11～30号样本检测结果为阴性,结果同标准符合率为100% 对卫生部临床检验中心及广东省临床检验中心的40例室间质评样本检测,结果同靶值的符合率为100% 对28 886例无偿献血者标本检测,检出有反应性145例（0.50%）与TP-ELISA法检出有反应性164例（0.56%）,P〉0.05无统计学差异.结论 改良TPPA法具有传统经典TPPA法的高准确性、灵敏度、特异性,且操作步骤简易,可以进行大批量标本的检测、实现结果标准化,可以在献血者检测TP中推广应用.     

脂血标本因吸样误差引起血脂结果异常的解决方法探讨

目的分析三种方法检测脂血标本的血脂结果的误差，提高血脂检测的准确度。方法将脂血标本以三种方式处理，不稀释，仪器自动稀释，手工稀释，然后检测血脂(TG，T-CHOL，APOAI，APOB，HDL-C)水平。结果未稀释标本与自动稀释标本的TG结果有显著差异(由检测标本中有一些结果不在线性范围而引起的误差)，其它四项(T-CHOL，APOAI，APOB，HDL-C)的结果无显著差异；未稀释标本与手工稀释标本的五项结果皆有显著差异；自动稀释标本与手工稀释标本的五项检测结果皆有显著差异。结论脂血标本检测血脂水平时，受粘滞度的影响，仪器的吸样系统会产生误差，于工稀释后的检测结果比未稀释及仪器自动稀释的结果更准确。     

联合检测TRUST和TPPA在梅毒诊断中的作用

目的由于TRUTS可能发生“前带”现象,如果临床仅做单项TRUST,不做TPPA,就会有部分梅毒患者可能漏诊。方法采用梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体抗体凝集法（TPPA）联合检测门诊病例中的300人次。结果门诊病例300人次中,梅毒急性期患者TRUST阳性滴度可达1：32以上,与TPPA抗体检测均为阳性,符合率100％;治疗后患者,TRUST可转为阴性,转阴率3％,但是TPPA抗体检测仍为阳性。TRUST阴性的患者或TRUST弱阳性可疑反应者,如果TPPA阳性,TRUST需稀释做滴度,从而避免“前带”现象的发生,导致强阳性样本出现假阴性的结果,滴检率5％。结论为了减少漏检,提高诊断率,两试验应同时做,以便及时发现漏检现象。     

检测甲型肝炎病毒抗体的敏感试验

作者应用改良的Abbott HAVAB试剂盒可检出甲型肝炎灭活疫苗免疫后2～3周的抗HAV IgG和/或IgM,其敏感度是原试剂盒的5～20倍。 改良的总抗体（IgG和IgM）测定法是将Abbott的HAVAB法中的10μl待检血清与200μl~(125)Ⅰ抗-HAV混合改为100μl待检血清与100μl~(125)Ⅰ抗-HAV混合。改良的抗HAV-IgM测定法（HAVAB-M）系将原方法的1:200稀释的待检血清改为直接加入10μl未稀释血清后再加200μl标本稀释液。其余均按原方法进行。 作者用改良的总抗体测定法测定不同稀释度的世界卫生组织（WHO）阳性标准品,最低可测到10mIU/ml,比原方法敏感20倍。为了确证该法的敏感性,作者用统计学方法计算了改良法17次检测免疫前的抗体滴度,平均为5.4mIU/ml,用50％抑制水平表示的敏感性为11.1。用8次试验确定改良法的变异性,结果显示出一个很宽的范围（5～     

鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中人类乳头状瘤病毒和EB病毒DNA表达的研究

目的：探讨鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤（IP）与人类乳头状瘤病毒（HPV）和EB病毒（EVB）的关系。方法：对28例鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的病理组织标本，用多聚酶链反应（PCR）进行HPV和EBV和DNA检测。结果：28例IP标本中10例HPV－DNA阳性（35．7％），4例EBV－DNA阳性（14．3％）。6例伴不典型增生的IP标本中HPV－DNA阳性4例（66．75），其中1例同伴伴EBV－DNA阳性；22例不伴不典型增生的IP标本中HPV－DNA阳性6例（27．3％），3例EBV－DNA阳性（13．6％）。IP伴不典型增生组和IP不伴不典型增生组的HPV－DNA检出的阳性率无显著性差异。结论：HPV感染在IP的发生过程中可能发挥一定的作用，EBV与IP的发生无明显关系。IP伴不典型增生与HPV感染无关。     

用带有弯曲进样管的程序升温汽化进样器进样CGC法测定注射液中丙二醇含量(英)

本文采用带有弯曲进样管程序升温汽化进样器进样，毛细管气相色谱（CGC）法测定注射液中丙二醇含量，实验结果表明：这种方法不仅比常规CGC中采用的分流方法能得到更为准确和精密的结果（回收率约99％，RSD＜2％），分析周期短（＜7分钟），测定时不需预处理直接进稀释样即可，不存在损伤毛细柱的可能；而且比迄今发表的程序升温汽化进样（PTV）方法也有优越之处。     

加样时差对竞争抑制法检测抗-HBc的影响因素探讨

目的：探讨加样时差对ELISA一步法试剂检测抗-HBc结果的影响。方法：选择抗-HBc阴性的标本分为A、B、D3组,选择抗-HBc阳性的标本设为C组。A组标本加入后放置室温不同时间再加入酶标试剂;B组标本加入后放置37℃水浴不同时间再加入酶标试剂;C组先加酶标试剂37℃水浴放置不同时间再加入标本;D组先将标本与酶标试剂混匀后加入放置室温不同时间。结果：A、B组加样方式对抗-HBc检测结果影响明显,且加标本与加酶标试剂的间隔时间越长,反应温度越高,标本的假阳性越多;C组加样方式对抗-HBc检测结果影响明显,且加酶标试剂与加标本的间隔时间越长,标本的假阴性越多;D组加样方式对抗-HBc检测结果无影响。结论：A、B、C3组实验的加样时差导致的不公平竞争可对ELISA一步法检测试剂的结果产生影响,出现抗-HBc假阳性、假阴性增多;D组加样方式可最大限度地减少抗-HBc假阳性和假阴性,保证检验质量。     

产前筛查梅毒螺旋体的三种方法在梅毒诊断中的研究

目的：探讨三种不同检测方法在梅毒诊断中的应用价值。方法选取本院2014年7~12月收治的500例孕妇作为研究对象,分别通过TPPA法、胶体金法和TRUST进行筛查,比较其检测结果。结果在500例妊娠期孕妇中,梅毒阳性52例,阴性448例。三种检测方法的敏感度、特异度、阴性预测值和阳性预测值比较,差异无统计学意义(P跃0.05)。56例TPPA阳性标本中,53例TRUST滴度阳性,3例血清原倍为阴性,通过血清64倍稀释后为假阴性。结论三种检测方法在产前筛查梅毒螺旋体检测中各有优势。     

金标法与 CLEIA 联合应用提高 HBsAg检测的准确性

目的：观察金标法与化学发光酶免分析（ CLEIA）一步法联合应用,消除CLEIA检测HBsAg假低值结果。方法 CLEIA检测出HBsAg阳性的标本用金标法筛选出质控线明显低于检测线的10例标本,再用纯水做稀释剂稀释原标本血清,用CLEIA法检测稀释后的结果乘以稀释倍数作为最终HBsAg结果。结果经筛选的10例标本经稀释后结果明显高于原倍检测结果。结论金标法能够筛选CLEIA法中钩状效应的标本,用纯水作为稀释剂稀释原标本能很好的消除钩状效应带来的假低值,提高科美Chemclin 600检测HBsAg的准确性。     

ELISA法检测乙肝表面抗原出现假阳性结果分析

目前临床检测乙肝表面抗原（HBsAg）常用的方法为酶联免疫吸附试验（ELISA），该试验方法自1971年间世以来，以敏感度高、特异性强、操作简便、记录易保存等特点，被广泛应用。但由于ELISA法操作过程中要求较高，一旦操作不规范，常常会出现拖带污染，从而导致假阳性结果。     

解脲支原体三种检测方法的比较研究

目的：研究PCR－微板杂交检测解脲支原体感染，方法：用支原体培养法，普通PCR和华美生物工程公司提供的PCR－微板杂交试剂盒对临床132份尿道或宫颈试子进行了检测，对这些方法检测结果进行了比较分析，结果：132例标本中，PCR微板杂交33（26％）例阳性，99例（74％）阴性；普通PCR38（29％）例阳性，94（71％）例阴性，培养法19例阳性，113例阴性，将此三种方法的结果分析两两进行X2统计，培养法与微板杂交和普通PCR的X2分别为4．69，8．08，P＜0．05，均有显差异。同时普通PCR和微板杂交的XC2为0．48，P＞0．05，无显性差异，结论：PCR－微板杂交具有快速，灵敏度高，特异性强，抗污染能力强的优点，适用于检测可疑UU感染，具有临床使用价值。     

肝素浓度影响i-STAT和9180分析仪电解质分析的对比研究

目的：了解i-STAT血液分析仪和9180电解质分析仪测定不同浓度肝素钠溶液抗凝时全血样品电解质的变化。方法：随机采集ASAⅠ-Ⅱ级择期妇科手术患静脉血液标本20份，分为两组（Ⅰ组和Ⅱ组，每组各10例），并采用0．9％氯化钠溶液，将肝素钠溶液（2ml:12500u)分别稀释5倍，10倍，20倍，50倍，100倍和200倍，采用i-STAT血液分析仪（分析Ⅰ组血液标本）和9180电解质分析仪（分析Ⅱ组血液标本），对液标本和标准液在不同浓度肝素钠溶液抗凝时K^ ,Na^ ,Cl^-或iCa^2 等测定值的变化进行测定。结果：i-STAT分析仪测定显示,血标本电解质和标准液电解质随肝素钠浓度的逐渐增大呈逐渐降低趋势。9180电解质分析仪测定显示，血标本和标准液采用纯肝素钠溶液抗凝时其电解质均显降低。结论：用i-STAT分析仪分析血标本时，其标本应不用肝素的钠溶液抗凝，如用9180电解质分析仪分析血标本时，其标本可用肝素钠溶液抗凝，但不宜用纯肝素钠溶液。     

转铁蛋白／血红蛋白双联胶体金法检测胃内容物潜血分析

目的：研究转铁蛋白（TF）／血红蛋白（Hb）双联胶体金法（简称双联法）检测胃内容物潜血,为临床确诊上消化道出血提供依据;同时探讨检测过程中对于不同性状的胃内容物标本如何确定稀释倍数。方法对820例胃内容物标本同步使用双联法检测TF／Hb;单抗法检测Hb。查阅病历资料,以临床诊断为标准,比较两种方法的灵敏度;同时观察标本在不同的稀释倍数时潜血检验结果的变化。结果双联法检测TF／Hb阳性例数（其中任何一项为阳性即为阳性）342例,检出率为41．7％,单抗法检测人Hb阳性例数301例,检出率为36．7％,检出率双联法优于单克隆抗体法（ P ＜0．05）。双联法的假阳性例数14例,比例为4．1％;而单抗法的假阳性例数为8例,比例为2．7％,差异无统计学意义（ P ＞0．05）。黏稠及半黏稠标本分别有半数标本应在检验前做1：10或1：5稀释。结论双联法可同时检测胃内容物中TF、Hb,提高阳性检出率,与单抗法互为补充,是筛检上消化道出血性疾病更理想的新方法,同时部分标本需要达到合适的稀释倍数才能得到阳性结果。     

头孢他美体外抗菌活性的研究

本文采用琼脂二倍稀释法测定最低抑菌浓度（ＭＩＣ）和采用试管稀释法测定最低杀菌浓度（ＭＢＣ）,对比研究了头孢他美与其他４种头孢菌素的体外抗菌活性。结果表明：头孢他美对革兰阳性球菌中的肺炎链球菌,无乳链球菌抗菌活性很强,与头孢克洛相似或略强,而比其他对照药头孢拉定,头孢呋辛、头孢噻肟要强,对葡萄球菌属和肠球菌属抗菌作用较差。对革兰阴性杆菌中的变形杆菌属、福氏志贺菌、大肠埃杀菌,肺炎克雷伯菌、伤寒沙门菌