NF-κBp65蛋白及ENA-78在子宫内膜异位症发病中的作用研究

目的探讨核因子κBp65(NF-κBp65)蛋白及中性粒细胞活化肽-78(ENA-78)在子宫内膜异位症(内异症)发病中的作用。方法选取2008年10月至2009年2月在山西医科大学第二医院手术切除的卵巢子宫内膜异位囊肿25例,留取异位内膜与在位内膜组织,分为异位内膜组和在位内膜组,选取同期正常的子宫内膜22例为对照组。不同浓度的白细胞介素1β(IL-1β)及IL-1β+二硫氨基甲酸肽吡咯烷(PDTC)分别干预体外传代培养至第3代的在位、异位及正常内膜基质细胞。免疫细胞化学方法及酶联免疫吸附实验(ELISA)检测3组子宫内膜基质细胞NF-κBp65蛋白活化程度及其培养上清液中ENA-78浓度。用IL-1β、IL-1β+PDTC检验各组内膜基质细胞分泌ENA-78及NF-κBp65蛋白的活化程度。结果在位及异位子宫内膜基质细胞培养上清液中ENA-78浓度明显高于正常子宫内膜基质细胞,差异有统计学意义(P0.01);在位及异位子宫内膜基质细胞之间比较,异位子宫内膜基质细胞培养上清液中的ENA-78浓度高于在位子宫内膜基质细胞,差异有统计学意义(P0.01),分别给予IL-1β、IL-1β+PDTC干预后,正常子宫内膜基质细胞上清液中的ENA-78浓度无明显变化(P0.05);而在位及异位内膜基质细胞的上清液中,ENA-78浓度在IL-1β干预后最高,明显高于未干预时及IL-1β+PDTC干预后,差异有统计学意义(P0.01)。3组中,在位及异位内膜基质细胞的NF-κBp65蛋白的活化程度显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);在位及异位子宫内膜基质细胞NF-κBp65蛋白的活化程度IL-1β干预后最高,显著高于未干预时及IL-1β+PDTC干预后,差异有统计学意义(P0.05)。结论 IL-1β可诱导在位及异位子宫内膜基质细胞NF-κBp65活化,使ENA-78的表达增高。PDTC可抑制此作用,说明NF-κBp65是关键性的调控因子,可能在内异症的发病过程中起到"闸门"的作用,对ENA-78以及其他细胞因子起到重要的调控作用。     

NF-κB p65对子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9表达及细胞侵袭性的影响

目的:探讨RNAi抑制核因子NF-κB p65对子宫内膜异位症(EMs)在位内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9表达及细胞侵袭性的影响。方法:采用NF-κB p65 siRNA基因沉默转染10例EMs患者在位内膜原代腺上皮细胞,由Western blot、Real-time PCR、Transwell等分别检测干扰前后OPN、NF-κB p65、MMP-9蛋白和mRNA表达及细胞侵袭性的变化。结果:与未干预组比较,NF-κB p65 siRNA干预后EMs腺上皮细胞中OPN蛋白及mRNA表达无明显变化,差异无统计学意义(P均0.05);NF-κB p65、MMP-9蛋白及mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P均0.05)。NF-κB p65 siRNA干预后,EMs腺上皮细胞的细胞侵袭性明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:揭示NF-κB可能通过下调MMP-9的表达进而改变细胞侵袭性诱导EMs的发生。     

NEK2在子宫内膜异位症的表达及意义

目的:研究子宫内膜异位症组织中NEK2 mRNA和蛋白的表达情况及意义。方法:利用real-time RT-PCR和Western Blot免疫印迹的方法,对子宫内膜异位症的在位内膜组织(在位内膜组)、异位内膜组织(异位内膜组)和非子宫内膜异位症的在位内膜组织(对照组)进行NEK2 mRNA和蛋白水平的半定量分析。结果:NEK2 mRNA和蛋白在异位内膜组、在位内膜组及对照组中均有表达(0.506±0.311、1.509±0.408、1.820±0.621;0.344±0.093、1.298±0.594、1.577±0.167),异位内膜组的表达均低于在位内膜组和对照组,差异均有统计学意义(P0.01);在位内膜组和对照组表达差异均无统计学意义(P0.05)。结论:NEK2在子宫内膜组织中均表达,且在异位内膜中表达下调。NEK2表达可能与子宫内膜异位症有关,但其低表达以何种方式影响子宫内膜异位症的病程发展还需进一步深入研究。     

TWEAK在子宫内膜异位症在位和异位内膜上的表达

目的:探讨肿瘤坏死因子样凋亡的微弱诱导剂(TWEAK)在子宫内膜异位症(EMs)发病的关系。方法:采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)和免疫组化、Western Blot方法检测EMs患者在位内膜、异位病灶中TWEAK mRNA和蛋白的表达,并与正常对照子宫内膜比较。结果:TWEAK蛋白表达于子宫内膜的腺上皮细胞和间质细胞的胞浆内。与正常对照组内膜和在位组内膜相比,TWEAK mRNA和蛋白在异位内膜上表达量下调(P<0.05),且无论是EMs在位内膜还是对照组内膜,其增生期TWEAK mRNA表达明显低于分泌期(P<0.05)。结论:TWEAK在子宫内膜中表达,表达量在分泌期明显升高。EMs患者异位子宫内膜TWEAK表达降低,可能导致子宫内膜细胞的凋亡水平下降,参与EMs的发生发展过程。     

NF-κB、MIF在子宫内膜异位症的表达及意义

目的:探讨NF-κB、MIF与子宫内膜异位症(EMs)发病的关系,及在子宫内膜异位症表达的相关性。方法:采用免疫组化(SABC法)分别检测NF-κB、MIF在35例EMs在位内膜、60例EMs异位内膜及30例正常子宫内膜(对照组)中的表达;ELISA法检测TNF-α、PDTC+TNF-α干预后子宫内膜基质细胞(ESC)上清液中NF-κB、MIF的浓度,并统计分析检测结果。结果:(1)NF-κB、MIF在3组内膜中均有表达,以异位内膜的表达最强;(2)NF-κB、MIF的表达与月经周期无关,其在3组内膜的表达有相关性,相关系数为0.875、0.882、0.927;(3)NF-κB、MIF在经TNF-α、PDTC+TNF-α处理过的ESC上清液中有表达,TNF-α促进二者表达,而PDTC可抑制此作用,且两者表达有相关性,相关系数为0.947。结论:NF-κB、MIF在EMs内膜高表达,MIF可能通过NF-κB途径在EMs发病机制中起作用。     

子宫内膜异位症中子宫内膜间质细胞血管生成能力的研究

目的:研究子宫内膜异位症(EMs)患者子宫内膜间质细胞环氧化酶2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白分泌及m RNA表达。方法:收集EMs患者的在位及异位病灶子宫内膜组织和子宫肌瘤患者在位内膜组织,原代消化培养子宫内膜细胞,取纯化的子宫内膜间质细胞进行研究,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白的分泌,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测COX-2、PGE2和VEGF的m RNA的表达。结果:EMs和子宫肌瘤患者分泌期在位子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白分泌及m RNA表达与增殖期比较差异均无统计学意义(P0.05);EMs患者在位及异位的子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白分泌及m RNA表达比子宫肌瘤患者在位细胞均升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);EMs患者异位的子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白分泌及m RNA表达比其在位细胞均升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:EMs患者在位及异位子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF的蛋白分泌及m RNA表达均升高,且异位病灶间质细胞升高更明显,提示在EMs发病中异位病灶子宫内膜间质细胞血管生成能力更强。     

HOXA10基因在子宫内膜异位症不孕患者内膜组织中的表达及意义

目的:探讨HOXA10基因在子宫内膜异位症(EMs)不孕中的作用及作用机制。方法:以行腹腔镜手术并经病理确诊为EMs合并不孕症的患者为研究对象(18例,A组),以同期行腹腔镜手术的输卵管性不孕患者(18例,B组)、正常生育组(15例,C组)为对照。分别应用荧光定量PCR、免疫组织化学和Western blotting等方法从mRNA及蛋白质水平检测HOXA10基因在EMs不孕症患者在位、异位子宫内膜以及对照组在位子宫内膜的表达。结果:HOXA10 mRNA及蛋白表达水平在C组的内膜较高;B组稍低于C组,但两者相比差异无统计学意义(P>0.05);A组的在位及异位内膜表达水平较C组明显降低(P<0.01);但A组的在位内膜与异位内膜基因和蛋白的表达水平均无统计学差异(P>0.05)。结论:HOXA10基因在EMs不孕患者在位子宫内膜中的表达显著降低,可能是EMs不孕患者子宫内膜容受性降低,进而引起不孕的重要因素之一。     

RANTES在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜的表达及其意义

目的:探讨调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜的表达及在子宫内膜异位症发病中的作用.方法:以2010年1～10月因子宫内膜异位症在我院行手术治疗的30例患者的在位内膜及异位内膜为研究组,以同期在我院就诊取IUD的30例患者的正常子宫内膜作为对照组,检测3组标本中RANTES mRNA表达及蛋白水平.并检测3组培养上清液对单核细胞趋化活性的影响.结果:①IL-1β刺激48小时,异位内膜组细胞RANTES mRNA表达及蛋白水平均增加,与在位内膜组和正常内膜组细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).IL-1β刺激72小时,异位内膜组、在位内膜组细胞RAN-TES mRNA表达及蛋白水平均增加,异位内膜组细胞与在位内膜组和正常内膜组细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);在位内膜组细胞与正常内膜组细胞比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).②异位内膜组及在位内膜组单核细胞趋化指数明显高于正常内膜组(P＜0.05).结论:子宫内膜异位症患者的在位内膜及异位内膜RANTES mRNA表达及蛋白水平均增加.RANTES通过促进单核细胞的趋化活性,可能在子宫内膜异位症的发病中发挥作用.     

VEGF在子宫内膜异位症发病机制中的作用

目的:探讨血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)组织中的表达及其在EMs发生发展中的作用。方法:采用ELISA法检测30例EMs患者(研究组)和16例子宫肌瘤患者(对照组)血清和腹腔液中的VEGF水平,免疫组化和RT-PCR检测并比较VEGF蛋白、VEGF mRNA在EMs异位内膜、在位内膜和对照组正常内膜的表达及其相关性。结果:EMs患者腹腔液、异位内膜、在位内膜VEGF蛋白及mRNA均明显高于对照组(P<0.05),但与EMs临床分期无关。EMs患者血清VEGF与对照组相比无明显的差异(P>0.05)。EMs患者异位内膜和在位内膜的微血管密度(MVD)明显高于对照组内膜(P<0.05)。结论:VEGF在EMs患者的高表达,说明其通过促血管生成在该病发生发展中起着重要作用。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子、基质金属蛋白酶9及P38丝裂原活化蛋白激酶在子宫内膜异位症中的表达及相关性

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和P38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)中的表达及相关性。方法收集2008年5-12月重庆医科大学附属第一医院收治的EMs患者44例(异位内膜44例,在位内膜38例),对照组为同期非EMs患者在位内膜34例。应用免疫组化SABC三步法检测各组织中EMMPRIN、MMP-9、P38及磷酸化P385(p-P38)蛋白的表达,并对各蛋白表达水平进行相关性分析。结果 EMMPRIN、MMP-9、P38、p-P38蛋白在EMs异位内膜表达均高于EMs在位内膜组及对照组在位内膜,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析显示,在EMs异位内膜中各蛋白表达呈正相关(P<0.05)。在EMs异位内膜组中各蛋白表达Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期,差异均有统计学意义(P<0....     

Akt和NF-κB在子宫腺肌病中的表达及其意义

目的:研究Akt和NF-κB在子宫腺肌病病灶中的表达,探讨其在子宫腺肌病发生发展中的意义。方法:采用免疫组化SP法检测子宫腺肌病病灶(30例)、在位内膜(27例)、正常子宫内膜(20例)标本中Akt、P-Akt及NF-κB蛋白的表达并进行比较。结果:Akt、P-Akt蛋白在子宫腺肌病异位内膜的腺上皮细胞中的表达强度显著高于在位内膜(P<0.05)和正常子宫内膜(P<0.01),其在位内膜腺上皮细胞中的表达强度显著高于正常子宫内膜(P<0.01);间质细胞中Akt、P-Akt蛋白的表达,异位和在位内膜明显高于正常内膜,异位内膜和在位内膜中两者的表达无显著性差异。NF-κB蛋白表达于胞核和胞浆中,在腺上皮细胞中的表达,异位内膜显著高于在位内膜,在位内膜显著高于正常子宫内膜(P<0.05);间质细胞中,NF-κB蛋白的表达各组间无显著性差异。NF-κB与P-Akt在子宫腺肌病病灶、在位子宫内膜和正常子宫内膜中的表达呈正相关(r=0.626,P<0.01)。结论:NF-κB与Akt在子宫腺肌病病灶中呈高表达,其可能参与子宫腺肌病的发生与发展过程。     

PTN和MK在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的:探讨pleiotrophin(PTN)和midkine(MK)mRNA在子宫内膜异位症(EMs)中的表达及意义。方法:采用病例对照研究方法,以35例EMs患者在位和异位子宫内膜(研究组)以及25例非EMs妇女子宫内膜(对照组)为样本,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PTN、MK mRNA的表达。结果:研究组在位内膜中PTN和MK表达均明显高于对照组(P<0.01);异位内膜PTN mRNA表达高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。EMs在位内膜中PTN、MK mRNA表达与内异症的临床期别呈正相关。无论增殖期或分泌期,EMs在位内膜中PTN、MK表达均高于对照组(均P<0.05)。结论:EMs患者在位子宫内膜组织中PTN和MK表达的变化可能与子宫内膜异位症的发生、发展有关。     

B7-H4在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的:研究子宫内膜异位症(EMs)患者在位、异位内膜组织中B7同源体4(B7-H4)的表达情况及血清sB7-H4的水平变化,探讨其在EMs发生、发展中的作用及意义.方法:免疫组化法检测43例卵巢子宫内膜异位组织、43例在位内膜组织及30例正常子宫内膜组织中B7-H4的表达情况;ELISA夹心法检测EMs患者血清中sB7-H4的表达水平.结果:B7-H4主要表达于子宫内膜细胞的胞浆和胞膜.异位内膜、在位内膜、正常内膜的B7-H4阳性率分别为62.8％、55.8％和30.0％,组间差异显著(x2=8.067,P=0.018);不同月经周期中B7-H4的表达无显著差异(P＞0.05).EMs患者血清中sB7-H4的表达水平显著高于对照组[(36.23±5.67)μg/L vs (31.24±4.56) μg/L,t=2.398,P＜0.05].结论:B7-H4蛋白的异常表达可能与EMs的发生、发展有关,其可能成为EMs诊断和治疗的一个新靶点.     

子宫内膜异位症在位内膜及裸鼠模型异位病灶芳香化酶的表达及意义

目的:探讨芳香化酶在子宫内膜异位症(EMs)在位内膜及其裸鼠模型异位病灶中的表达意义。方法:征集EMs组及非异位症(NEMs)组各24例,应用其分泌晚期子宫内膜,建立EMs裸鼠模型,取建模后5d、15d、30d裸鼠异位病灶,RT-PCR及免疫组化方法检测两组在位内膜和异位病灶芳香化酶mRNA及蛋白表达。结果:芳香化酶mRNA表达,EMs组异位病灶(0.894±0.23)表达强于在位内膜(0.685±0.15),P<0.05;阳性表达率(87.50%,83.33%)无差异。NEMs组异位病灶表达强度和阳性表达率(0.920±0.24,95.83%)均高于在位内膜(0.612±0.15,62.50%),P<0.05。两组在位内膜比较,EMs组阳性表达率高于NEMs组,P<0.05。两组异位病灶及各组不同时期异位病灶(EMs组,5d:0.889±0.23;15d:0.990±0.19;30d:0.880±0.29;NEMs组,5d:0.889±0.23;15d:0.905±0.23;30d:0.918±0.22)比较,芳香化酶mRNA表达无差异。芳香化酶蛋白阳性表达率,EMs组异位病灶(95.83%)与在位内膜(91.67%)比较,差异不显著。NEMs组异位病灶(95.83%)高于在位内膜(70.83%),P<0.05。EMs组在位内膜高于NEMs组,P<0.05;两组异位病灶比较,差异不显著。结论:局部雌激素合成增强在EMs发病机理中起重要作用。芳香化酶是EMs等雌激素依赖性疾病在子宫内膜特异性表达标记物。     

shRNA靶向抑制NF-κB基因治疗食蟹猴子宫内膜异位症的研究

目的 观察靶向NF-κB基因的短发夹状RNA(shRNA)在治疗食蟹猴子宫内膜异位症的效果,分析NF-κB基因在食蟹猴子宫内膜异位症发生发展中的作用.方法 构建食蟹猴子宫内膜异位症模型,同时合成高特异性的靶向NF-κB基因的shRNA腺病毒及其阴性对照空载shRNA腺病毒.将建模成功的食蟹猴分成实验组、阴性对照组及单纯建模组,将NF-κBshRNA腺病毒在腹腔镜下直接注入实验组食蟹猴子宫内膜异位病灶内,阴性对照组在病灶内注射空载shRNA腺病毒,单纯建模组病灶内注射生理盐水.注射腺病毒后4周,腹腔镜下观察病灶变化,取各组子宫内膜异位病灶进行CD34免疫组化染色检测微血管密度,并采用蛋白印迹法(western blot)检测NF-κB及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达.结果 成功构建了食蟹猴子宫内膜异位症模型.实验组食蟹猴异位病灶较前萎缩,其微血管密度(0.002 0±0.000 3)较阴性对照组(0.021 9±0.002 6)、单纯建模组(0.024 5±0.003 3)明显减小,分别比较,差异有统计学意义(P＜0.01).实验组食蟹猴NF-κB蛋白的表达水平(0.338±0.174)较阴性对照组(0.678±0.021)、单纯建模组(0.645±0.098)明显下降,分别比较,差异有统计学意义(P＜0.01).实验组食蟹猴PCNA蛋白的表达水平(0.37±0.17)低于阴性对照组(0.57±0.26)、单纯建模组(0.57±0.28),分别比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 NF-κB shRNA通过靶向抑制NF-κB基因的表达后,能够抑制食蟹猴子宫内膜异位症的进展,抑制子宫内膜异位病灶的血管生成能力,减弱异位子宫内膜细胞的增殖能力.     

黏附分子VCAM-1和ICAM-1在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的:探讨血管细胞黏附分子(VCAM-1)和细胞间黏附分子(ICAM-1)在子宫内膜异位症(EMT)发病中的作用及意义。方法:采用荧光定量聚合酶链反应技术(Real-Time PCR)和免疫印迹法(Western-Blot)分别检测EMT(15例)患者异位内膜、在位内膜和对照组(15例)子宫内膜中VCAM-1、ICAM-1mRNA及蛋白的表达情况。采用双抗夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)检测EMT组(44例)与对照组(28例)中可溶性VCAM-1(s VCAM-1)和可溶性ICAM-1(s ICAM-1)的水平,并对VCAM-1、ICAM-1在不同组中的mRNA、蛋白及血清中的表达行相关性分析。结果:1EMT异位内膜组VCAM-1、ICAM-1mRNA的表达均明显高于在位内膜组及对照组(P0.01);在位内膜组VCAM-1、ICAM-1mRNA的表达与对照组差异无统计学意义(P0.05)。2EMT异位内膜组VCAM-1、ICAM-1蛋白的表达明显高于在位内膜组及对照组(P0.01),在位内膜组VCAM-1蛋白表达高于对照组(P0.01);EMT在位内膜组ICAM-1蛋白的表达与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。3EMT患者血清中s VCAM-1和s ICAM-1水平均明显高于对照组(P0.01),Ⅲ、Ⅳ期患者血清中s ICAM-1水平较Ⅰ、Ⅱ期患者明显升高(P0.01)。4EMT异位内膜组组织中VCAM-1与ICAM-1在mRNA、蛋白表达及血清中的水平均无相关性(P0.05)。结论:异位内膜的VCAM-1和ICAM-1的表达异常可能在EMT的发生发展中具有重要作用,但ICAM-1与VCAM-1在EMT中可能具有各自的信号通路及蛋白表达的途径。     

基质细胞衍生因子1、趋化因子受体4和淋巴管新生在子宫内膜异位症中的意义

目的:探讨基质细胞衍生因子1(SDF-1)、趋化因子受体4(CXCR4)及D2-40标记的微淋巴管密度(MLVD)在子宫内膜异位症(EMs)中的表达及意义。方法:选取2017年11月2018年5月就诊于南通大学第二附属医院的卵巢型EMs患者20例,取其在位内膜和异位内膜。另选取同期因子宫肌瘤行子宫切除或子宫肌瘤挖除术患者20例,取其正常内膜。比较不同内膜组织中SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白的表达水平及MLVD,并通过细胞划痕实验验证SDF-1对异位子宫内膜细胞迁移能力的影响。结果:①异位内膜中SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白表达水平及MLVD均高于在位内膜、正常内膜,且在位内膜中的表达水平高于正常内膜,差异均有统计学意义(P<0.05)。②SDF-1处理组细胞迁移率高于DMEM-F12处理组细胞迁移率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SDF-1、CXCR4可能参与EMs的淋巴管新生,促进子宫内膜细胞的淋巴迁移,在疾病的发生、发展中发挥一定作用。     

PRL-3和MMP-9与子宫内膜异位症侵袭、种植关系的研究

目的:观察促肝细胞再生磷酸酶3(PRL-3)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在子宫内膜异位症(EMs)的表达,探讨它与子宫内膜异位症侵袭、种植的关系。方法:用SABC免疫组织化学法检测PRL-3和MMP-9在31例EMs的异位内膜及在位内膜组织、27例正常子宫内膜组织的表达。结果:PRL-3与MMP-9表达的强弱顺序均为:EMs组异位内膜>EMs组在位内膜>对照组子宫内膜,组间差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ~Ⅱ期的异位内膜PRL-3及MMP-9表达强度均高于Ⅲ~Ⅳ期(P<0.05),但在位内膜二者表达强度在不同临床分期中无统计学差异(P>0.05)。EMs组异位内膜的PRL-3与MMP-9表达呈正相关(P<0.05),在位内膜的PRL-3与MMP-9表达则无明显相关性(P>0.05)。结论:PRL-3和MMP-9可能与EMs的侵袭、种植密切相关。     

来曲唑对子宫内膜异位症大鼠TNF-α、IL-6、NF-κB表达的影响

目的:研究不同剂量来曲唑对大鼠子宫内膜异位症(EMs)模型的治疗作用及其对异位病灶中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:将建模成功的大鼠随机分为来曲唑组(低、中、高剂量组)、米非司酮组及生理盐水空白对照组。灌胃4周后采用自定义疼痛评分及阴道痛觉过敏实验评价大鼠疼痛情况;观察异位内膜生长情况;放射免疫法测定血清E2、P、T水平;应用免疫组化法检测TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白表达;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测TNF-α mRNA、IL-6 mRNA、NF-κB mRNA的含量。结果:来曲唑各组异位病灶体积明显缩小或萎缩,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);来曲唑中、高剂量组与低剂量组、米非司酮组相比较,异位病灶体积缩小更明显(P<0.05)。治疗后各组大鼠血清E2、P水平均无显著差异(P>0.05),但来曲唑组大鼠血清T水平升高,且呈剂量依赖性(P<0.05)。来曲唑治疗后模型鼠疼痛评分降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),且高剂量来曲唑组较米非司酮组疼痛减轻更明显(P<0.05)。在20、30、40mmHg阴道压力的刺激下,米非司酮组和来曲唑组大鼠的逃避率较空白组显著降低(P<0.05),较少发生痛觉过敏,而在压力为5、10mmHg时,各组间逃避率的差异无统计学意义(P>0.05)。各治疗组异位内膜中TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白和mRNA的表达,均较空白组显著降低(P<0.05),尤以高剂量来曲唑组蛋白表达最低。NF-κB与TNF-α、IL-6的表达均呈正相关(P<0.05)。结论:来曲唑对大鼠异位病灶体积影响明显,可缓解EMs引起的疼痛。这可能是通过降低异位病灶局部雌激素水平,降调TNF-α、IL-6、NF-κB在异位内膜组织中的表达而发挥治疗作用的。     

COX-2、VEGF在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的观察环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在子宫内膜异位症(EMs)中的表达,并探讨其在子宫内膜异位症发病机制中的作用.方法利用免疫组化法检测COX-2和VEGF在35例EMs的异位内膜及在位内膜组织、35例正常子宫内膜组织中的表达.结果①COX-2及VEGF在异位内膜的表达显著高于在位内膜和正常子宫内膜(P均＜0.05).而COX-2及VEGF在EMs在位内膜的表达显著高于正常子宫内膜(P均＜0.05).②EMs的异位内膜、在位内膜中COX-2和VEGF的表达之间有显著相关性(r=0.711;r=0.676,P均＜0.01).③COX-2和VEGF在EMs未孕与已孕患者异位内膜、在位内膜中的表达均未发现有统计学差异(P均＞0.05).结论COX-2和VEGF在子宫内膜异位症的发生、发展中起重要作用.