异硫氰酸苯酯柱前衍生RP-HPLC测定大鼠脑组织中9种氨基酸类神经递质含量

目的 建立一种脑组织中氨基酸类神经递质的测定方法。方法 醋酸钠-乙腈-水为流动相,反相高效液相色谱洗脱,异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生和紫外检测器检测大鼠大脑皮质、海马、纹状体、中脑、小脑和下丘脑6个脑区中9种氨基酸类神经递质(谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸、牛磺酸、γ-氨基丁酸、谷氨酰胺、酪氨酸、色氨酸、丝氨酸)的含量。结果 9种氨基酸在50 min内洗脱完全,分离效果良好;浓度在5~400 μmol·L^-1内线性关系良好,且相关系数>0.99,平均回收率≥80%。结论 本方法简便、准确、灵敏度高、重复性好,适用于一般实验室脑组织中氨基酸类神经递质的测定。     

OPA-FMOC联用柱前衍生法测定复方氨基酸注射液中氨基酸的含量

采用邻苯二甲醛（OPA）和氯甲酸芴甲酯（FMOC－CL）与氨基酸进行柱前衍生,HPLC测定复方氨基酸注射液中氨基酸的含量,方法简便快速,准确。     

异硫氰酸苯酯柱前衍生法测定门冬氨酸鸟氨酸注射液含量

目的：建立一种用异硫氰酸苯酯柱前衍生的高效液相色谱方法测定门冬氨酸鸟氨酸注射液的含量。方法：选用Diamonsil（TM）钻石C18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，流动相A为0．1moL·L^-1醋酸钠缓冲液（pH6．5）-乙腈（93：7）；流动相B为乙腈-水（80：20），进行梯度洗脱。检测波长为254nm。结果：门冬氨酸鸟氨酸溶液住101．06～303．18μg·mL^-1浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系（r=0．9990），刚收率为99．1％（RSD=0．60％）。结论：本方法重复性好，定量准确，可用于门冬氨酸鸟氨酸注射液的含量测定。     

异硫氰酸苯酯柱前衍生化RP-HPLC法测定人血浆中10种氨基酸的浓度

目的:建立一种异硫氰酸苯酯柱前衍生化反相高效液相色谱同时测定人血浆中10种氨基酸的方法。方法:以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,Venusil-AA柱为分析柱,柱温40℃,采用二元梯度洗脱,254 nm波长处检测。结果:氨基酸血浆浓度在15.6~250μmol/L时,其峰面积与内标物峰面积的比值和氨基酸血浆浓度的线性相关系数,均大于0.99;10种氨基酸的加样回收率在96.3%~103.4%;日间和日内变异系数均在4.8%以下。应用该方法对小儿血浆中氨基酸含量进行了测定,取得了满意的结果。结论:该法简便、稳定,并且分离效果好,可用于人血浆中氨基酸浓度的检测。     

柱前衍生化HPLC法测定复方氨基酸注射液(20AA)中氨基酸含量

目的: 建立柱前衍生高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液（20AA）中包括门冬酰胺和盐酸鸟氨酸在内的18种氨基酸含量的方法。方法: 以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯（AQC）为衍生化试剂,以γ-氨基丁酸为内标,采用Kromasil C18(250 mm × 4.6 mm, 5?m)色谱柱,以140 mmol?L-1醋酸铵缓冲液(pH5.10)和乙腈-水(57∶43)溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为248 nm,进样量5?L。结果: 18种氨基酸在1.2～108.8 ?g?mL-1范围内浓度与峰面积线性相关,相关系数为0.994 7～0.999 7;在标示浓度的80％、100％、120％三个浓度水平的平均回收率为97.4％～103.1％,RSD为1.3％～3.7％(n=9)。结论: 本法操作简便,结果准确,优于现行标准的方法。     

柱前衍生RP-HPLC法测定人参中17种氨基酸的含量

目的:建立同时测定人参中17种游离氨基酸和总氨基酸含量的方法,并应用于不同生长周期、炮制方法和生长部位的人参研究。方法:采用异硫氰酸苯酯对样品进行柱前衍生,以反相高效液相色谱法测定,外标法计算含量。色谱柱为UltimateAAA氨基酸分析专用柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为三水合醋酸钠缓冲溶液(pH6.5)-乙腈溶液(93:7,V/V)、B为80%乙腈-水(80:20,V/V),梯度洗脱,检测波长为254nm。结果:17种氨基酸的检测浓度线性范围为0.0025～2.5000μmoL·mL-1,r均>0.9980。17种游离氨基酸的平均加样回收率在87.30%～100.01%之间,RSD在0.59%～2.94%之间(n均为6);测定总氨基酸时的平均加样回收率在91.50%～100.07%之间,RSD在0.41%～2.00%之间(n均为6)。结论:本方法灵敏、准确、重复性好,可用于人参及其相关产品的质量控制。     

DNFB柱前衍生化RP-HPLC法测定氨肽素的氨基酸含量

目的用二硝基氟苯 (DNFB)柱前衍生化RP HPLC法测定氨肽素中氨基酸的含量。方法采用二硝基氟苯为衍生试剂进行衍生 ,ODS(KromasilC18,4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm)色谱柱分离 ,以乙腈 0 0 5mol·L-1乙酸钠水溶液为流动相 ,梯度洗脱 ,3 60nm检测 ,在 3 0min内 ,测定氨肽素的氨基酸组成与含量。结果线性范围 (总氨基酸 1 4种 )为 0 1 5～ 0 75 g·L-1;回收率为 94 8%～ 1 0 3 5 % ;RSD为0 2 6%～ 1 47% (n =5 )。结论DNFB柱前衍生化RP HPLC法可有效控制产品质量     

DTDPA-PITC联合柱前衍生化HPLC法同时测定复方氨基酸注射液中18种氨基酸的含量

目的:建立同时测定含有半胱氨酸或胱氨酸的复方氨基酸注射液中18种氨基酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,以二硫代二丙酸(DTDPA)和异硫氰酸苯酯(PITC)联合作为柱前衍生化试剂。色谱柱为Kromasil C18,流动相[A为0.1 mol/L醋酸盐缓冲液(pH 5.38)-乙腈(93∶7,V/V)、B为乙腈-水(80∶20,V/V),采用梯度洗脱],检测波长为254 nm,流速为1.0 ml/min,进样量为3μl,柱温为35Ⅴ。结果:18种氨基酸在各自测定浓度的20%¹80%的范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r≥0.999 0);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.91%;平均回收率在95.7%180%的范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r≥0.999 0);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.91%;平均回收率在95.7%⁹9.7%之间,RSD≤1.99%(n=9)。结论:该方法准确、高效,实现了同时对复方氨基酸注射液中半胱氨酸以及其他17种氨基酸的准确定量。     

柱前衍生RP唱HPLC法同时测定珐菲亚中14种水解氨基酸

目的 建立柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定珐菲亚中14种水解氨基酸含量的方法。方法 采用Waters XBridge Shield RP₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,梯度洗脱,流速0.8 ml/min,检测波长254 nm,柱温25℃。结果 14种氨基酸在一定浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r值均>0.9990,加样回收率（n=6）为90.2%~105.1%,氨基酸衍生溶液在24 h内稳定。结论 本实验建立的方法可靠,可用于珐菲亚中氨基酸的含量测定。     

柱前衍生RP-HPLC法测定桑叶中16种游离氨基酸的含量

目的:建立柱前衍生法测定桑叶中游离氨基酸的含量。方法:以水超声提取桑叶中的氨基酸,以异硫氰酸苯酯柱前衍生,采用反相高效液相色谱法测定氨基酸的含量。结果:桑叶中含有苏氨酸、缬氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、γ-氨基丁酸、丙氨酸、组氨酸、胱氨酸、色氨酸、异亮氨酸等16种游离氨基酸;其中人体必需氨基酸有7种,人体半必需氨基酸有1种,含量占氨基酸总量的20%左右。结论:本法不需要专门的氨基酸分析仪,操作简便、灵敏度高,结果准确、可靠。桑叶中氨基酸的种类齐全、含量丰富,具有很高的开发利用价值。     

邻苯二甲醛柱前衍生化-HPLC测定复方氨基酸注射液中蛋氨酸亚砜的含量

目的 建立测定复方氨基酸注射液中蛋氨酸亚砜含量的方法。方法 采用邻苯二甲醛（O-phthaladehyde,OPA）柱前衍生HPLC。色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse AAA C₁₈柱（150 mm×4.6 mm,5µm）,检测波长为338 nm,流动相A为0.04 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液（调节pH至7.8）,流动相B为乙腈-甲醇-水（45：45：10）,梯度洗脱,流速为2.0 ml·min^-1,柱温为40℃,供试品溶液与OPA衍生剂及硼酸盐缓冲液按设定程序自动混匀后进样。结果 蛋氨酸亚砜的质量浓度线性范围为0.000 5~0.050 0 mg·mL^-1（R=0.999 9）;定量限为0.250 5 μg·mL^-1,检测限为0.083 5 μg·mL^-1;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;平均回收率为99.1%（RSD=1.33%,n=9）。结论 该方法操作简便,可用于复方氨基酸注射液中蛋氨酸亚砜的含量测定。     

柱前衍生高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中氨基酸的含量

目的建立以2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂,高效液相色谱法(HPLC)测定复方氨基酸注射液(18AA)中各氨基酸含量的方法。方法采用Agilent HC-C 18色谱柱,乙腈-水(60∶40)为流动相A,乙腈-磷酸盐缓冲液(9∶91)流动相B,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长360 nm,柱温27℃。结果复方氨基酸注射液中各氨基酸分离度良好,线性相关系数均大于0.9989,平均回收率均在98%~102%之间,RSD%均小于2%。结论本方法可以用于复方氨基酸注射液(18AA)中氨基酸检测。     

柱后衍生阳离子交换色谱法与柱前衍生高效液相色谱法测定人胎盘组织液中18种氨基酸含量比较

摘 要 目的：比较柱前衍生高效液相色谱法（HPLC法）和柱后衍生阳离子交换色谱法（AARO法）测定人胎盘组织液中18种氨基酸含量的差异。方法: HPLC法采用 C₁₈柱和2,4 二硝基氯苯（DNCB）进行柱前衍生化,加入0.1 mol·L^-1硼砂缓冲液（pH=9.1）,进行测定;AARO法采用强酸性阳离子交换色谱柱和柱后衍生化,直接测定。结果: 柱前衍生高效液相色谱法和柱后衍生阳离子交换色谱法的重复性考察,AARO法各组分RSD为0.91%～1.84%,HPLC法RSD为1.04%～1.87%。结论:柱后衍生阳离子交换色谱法与柱前衍生高效液相色谱法测定人胎盘组织液种 18种氨基酸,均可采用,两种方法对测定上述各氨基酸结果一致性较好, 但柱前衍生HPLC法可能易造成衍生不彻底和衍生物不稳定。     

HPLC法和氨基酸分析仪(AAA)法测定肠外营养注射液(25)中18种氨基酸的含量的比较

目的:RP-HPLC法和氨基酸分析仪(amino acid analyzer,AAA)法测定氨基酸含量的比较。方法:采用高效液相色谱仪和氨基酸分析仪测定肠外营养注射液(25)中18种氨基酸的含量。采用C18柱和异硫氰酸苯酯进行柱前衍生化,加入二硫代二丙酸作为保护剂,同时测定半胱氨酸;AAA法采用离子交换色谱柱和茚三酮柱后衍生化进行,不需加入保护剂,直接测定半胱氨酸。结果:RP-HPLC法和AAA法的重复性分别小于1.1%和3.1%,2种测定方法的相对偏差在0.19%～8.2%之间。结论:AAA法更适于肠外营养注射液(25)种18中氨基酸的测定。     

柱前衍生-HPLC法测定硫酸庆大霉素注射液的含量

目的 建立一种测定硫酸庆大霉素含量的PHLC法.方法 硫酸庆大霉素经氯甲酸芴甲酯衍生化后用HPLC法测定.以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱,流动相为乙腈:0.1mol·L-1醋酸盐缓冲液(75:25);流速1mL·min-1,检测波长为265nm.进样量20μL.结果 硫酸庆太霉素在浓度13～256 U·mL-1的范围内线性良好(r=0.9996,n=6).平均回收率为99.64±1.55,RSD%为1.55(n=9).结论 本法简便、准确,灵敏,可作为硫酸庆大霉素注射液的含量测定方法.     

柱前衍生HPLC法测定依达拉奉注射液中L-半胱氨酸含量

目的建立柱前衍生化HPLC法测定依达拉奉注射液中L-半胱氨酸盐酸盐含量的方法。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1mol.L-1醋酸钠溶液(用冰醋液调节pH至6.5)(45∶55),流速为1.0mL·min-1,检测波长254nm。结果 L-半胱氨酸盐酸盐衍生物浓度在0.4～4.0μg·mL-1范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998);平均回收率100.5%,RSD为1.4%(n=9)。结论本方法快速准确。     

15种氨基酸注射液HPLC DABS柱前衍生法测定

采用ＤＡＢＳ柱前衍生化，对１５种氨基酸进行ＨＰＬＣ含量测定，方法简便，衍生产物ＤＡＢＳ－氨基酸稳定，过量的ＤＡＢＳ水解产物对氨基酸定量测定无干扰，分析周期短，１５种氨基酸的回收率在９８．８７％～１００．７９％，ＲＳＤ为０．２９％～０．８３％。     

柱前衍生-HPLC测定不同等级的梅花鹿鹿茸饮片中氨基酸的含量

目的 建立柱前衍生-HPLC测定不同等级梅花鹿鹿茸饮片中17种氨基酸成分含量的方法,并比较氨基酸含量的差异。方法 采用HPLC,以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生,梯度洗脱的方法,检测不同等级梅花鹿鹿茸饮片中17种氨基酸的含量。结果 不同等级的梅花鹿鹿茸饮片的总氨基酸成分含量差异显著。氨基酸含量蜡片 > 粉片 > 纱片 > 骨片。结论 梅花鹿鹿茸饮片的质量受采割部位的影响。该方法适用于梅花鹿鹿茸饮片中氨基酸成分的含量测定,可为其等级的制定提供理论依据。     

高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液(9AA)中抗氧剂的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)测定复方氨基酸注射液(9AA)中抗氧剂焦亚硫酸钠与L-盐酸半胱氨酸含量的方法。方法采用HPLC法测定。强酸型阳离子交换柱(磺化苯乙烯-二乙烯基苯共聚物),以0.04 mol/L磷酸溶液为流动相,柱温为50℃,检测波长为200 nm,测定焦亚硫酸钠的含量;采用C18柱,以二硫代二丙酸为氧化剂,异硫氰酸苯酯柱前衍生化,梯度洗脱,检测波长为254 nm,测定L-盐酸半胱氨酸的含量。结果焦亚硫酸钠和L-盐酸半胱氨酸分别在0.04～0.36和4.24～38.12 mg/L范围内线性关系良好,回收率分别为98.6%和99.6%,RSD分别为0.90%和1.5%(n=9)。结论建立了准确高效的焦亚硫酸钠与L-盐酸半胱氨酸的HPLC测定方法,为质量标准的提高提供依据。     

三七中十八种游离氨基酸的柱前衍生化-HPLC法测定

建立了柱前衍生化-HPLC法同时测定三七中的18种游离氨基酸.以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,以乙腈-0.05 mol/L乙酸钠缓冲液为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm.结果显示三七根中的游离氨基酸以精氨酸、丙氨酸和脯氨酸为主,约占18种游离氨基酸总量的80%.18种氨基酸的平均回收率为96.5%～103.4%,RSD均小于3%.