肾疏宁抑制腹膜透析腹膜纤维化大鼠基质及新生血管的实验研究

目的:观察中药肾疏宁对腹膜纤维化大鼠腹膜功能、腹膜组织基质积聚、新生血管、结缔组织生长因子(CT-GF)、血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)及骨形态蛋白-7(BMP-7)表达的影响。方法:腹膜透析液+阿霉素注射法诱发SD大鼠腹膜透析腹膜纤维化模型,依体重随机分为4组,1.5%腹膜透析液模型组、4.25%腹膜透析液模型组、1.5%腹膜透析液+肾疏宁干预组及4.25%腹膜透析液+肾疏宁干预组,每组各15只,另设空白对照组(对照组,15只)。1.5%腹膜透析液+肾疏宁干预组及4.25%腹膜透析液+肾疏宁干预组予肾疏宁(按43.93g.kg-1.d-1)灌胃,对照组和模型组予等量生理盐水灌胃。检测腹透液葡萄糖浓度,计算超滤量(UF)及葡萄糖转运量(MGT)。观察腹膜病理形态学改变,分析腹膜厚度、腹膜血管计数、腹膜纤维连接蛋白(FN)及CTGF、VEGF、HGF、BMP-7表达。结果:治疗第6周末,1.5%腹膜透析液+肾疏宁干预组及4.25%腹膜透析液+肾疏宁干预组腹膜透析腹膜纤维化大鼠超滤量(-3.26±14.17)ml及(-2.04±10.74)ml、葡萄糖转运量(18.12±0.81)mmol/kg及(16.14±1.20)mmol/kg、腹膜厚度(74.68±15.33)μm及(211.75±58.23)μm、腹膜血管计数(8.21±2.66)个/mm2及(13.70±4.71)个/mm2、FN(152.47±36.94)%及(231.49±53.49)%、CTGF(708.67±127.22)%及(791.20±126.37)%、VEGF(0.42±0.08)%及(0.50±0.09)%、HGF(245.71±24.38)%及(222.05±23.43)%、BMP-7(351.27±31.99)%及(284.43±26.82)%,与同浓度透析液组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:肾疏宁可能通过调控CTGF、VEGF、HGF、BMP-7表达,阻抑基质过度积聚及新生血管生成,进而延缓腹膜透析大鼠腹膜纤维化进展。     

一氧化氮及其抑制剂对大鼠腹膜通透性的作用

目的 研究一氧化氮(NO)及一氧化氮抑制剂(L-NMMA)对腹膜透析通透性,特别是高糖透析中的作用。方法 建立大鼠长期腹膜透析模型,测定不同浓度透析液中以及不同刺激条件下腹膜巨噬细胞产生NO的水平。分别用1.5％、4.25％的葡萄糖透析液及分别加L-NMMA(5mg·kg~(-1)·d~(-1))行SD大鼠透析。10d后测定其腹膜动力学的变化。结果 腹膜巨噬细胞产生NO的水平,4.25％的葡萄糖透析液高于1.5％葡萄糖透析液(P<0.01),而后者又高于生理盐水(P<0.01)。高糖透析可减少腹膜的液体超滤(P<0.05)及溶质的转运。加用L-NMMA后腹膜的液体超滤及溶质的转运增加(P<0.05)。结论 腹膜透析时腹腔产生NO的水平增高,对腹膜的通透性增高中起一定作用。透析液中加入L-NMMA可改善腹膜的通透性。     

大鼠腹膜纤维化相关miRNA的初步筛选

目的:初步筛选参与腹膜透析相关腹膜纤维化的miRNA。方法:将SD雄性大鼠24只[体重(150±10)g]随机平均分为3组:正常对照组;生理盐水组,每日腹腔注射0.9%生理盐水20ml;高糖组,每日腹腔内注射4.25%含糖透析液20ml。4周后,进行腹膜平衡试验(PET)。取大鼠腹膜组织行光镜检查,基因芯片分析检测各组大鼠腹膜组织miRNA。选取芯片分析显著差异表达的miRNAs,进行real-timePCR验证。结果:高糖组大鼠的超滤量和透出液葡萄糖浓度/初始腹透液葡萄糖浓度(D2/D0)明显减少,透析液尿素浓度/血浆尿素浓度(D/Purea)明显增加,提示高糖组大鼠腹膜呈高转运、腹膜功能下降。高糖组腹膜间皮下基质增厚、血管增生及炎症细胞浸润明显增加。基因芯片分析提示:在高糖组中,miR-100、miR-152与miR-497表达呈明显下调。在高糖组与生理盐水组中,miR-192、miR-194表达均呈显著下调。real-timePCR结果提示miR-100、miR-152、miR-497、miR-192、miR-194在高糖组中均呈低表达,与芯片分析结果基本一致。结论:在高浓度腹膜透析液诱导的大鼠腹膜纤维化模型中,多条miRNAs呈一致性差异表达。提示miRNA可能参与大鼠腹膜纤维化。     

高糖通过活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3途径诱导人腹膜间皮细胞凋亡

目的 探讨高糖损伤人腹膜间皮细胞(HPMC)的机制。方法 (1)分离培养HPMC,以细胞形态、免疫细胞化学染色作细胞鉴定;(2)第2代HPMC分别经含1.5%、2.5%、4.25%葡萄糖的M199培养基培养48h后(以正常M199培养基和含4.25%甘露醇的M199培养基为对照),检测HPMC caspase-3活性和HPMC凋亡情况;(3)分别用25μmol/L、50μmol/L、和100μmol/LZ-VAD.fmk和4.25%葡萄糖共同刺激体外培养的HPMC(以DMSO和4.25%葡萄糖为对照),流式细胞仪观察HPMC凋亡情况,同时检测50μmol/L Z-VAD.fmk组和葡萄糖对照组caspase-3活性。结果 (1)HPMC caspase-3活性和凋亡率与葡萄糖浓度呈正相关(r分别为0.9506和0.9868,P<0.01),且HPMC caspase-3活性与凋亡率呈正相关(r=0.9860,P<0.01)。与M199对照组相比,2.5%葡萄糖组和4.25%葡萄糖组HPMC caspase-3活性和凋亡率显著增加(P<0.05),而1.5%葡萄糖组及4.25%甘露醇组HPMC caspase-3活性和凋亡率无显著差异(P>0.05)。(2)4.25%葡萄糖组caspase-3活性显著高于4.25%甘露醇组(P<0.05),但4.25%甘露醇组caspase-3活性与对照组相比无显著差异(P>0.05)。(3)与对照组相比,Z-VAD,fmk组HPMC凋亡率(P<0.05)和caspase-3活性(P<0.05)显著下降,且HPMC凋亡率与Z-VAD.fmk呈负相关(r=-0.8836,P<0.01)。结论 (1)高糖能以     

地塞米松在防治腹膜通透性增高中的作用

目的探讨腹膜透析过程中地塞米松对腹膜表面层、间皮细胞形态和腹膜功能的影响.方法24只SD雄性大鼠随机分为4组.第1组大鼠不接受任何注射即行腹膜动力学实验;第2组以4.25%的高糖透析液透析;第3组(地米1组)腹腔内注射4.25%的透析液并加入地塞米松(剂量为0.1 mg/kg),每天1次,连续7d;第4组(地米2组)腹腔内连续注射透析液2周,第1周为普通4.25%透析液,第2周始用上述剂量地塞米松的透析液继续透析1周.以上各组在停止透析48 h后行腹膜动力学实验.然后取前腹壁组织行光镜及电镜检查.结果腹腔注射4.25%的透析液7 d后,腹膜功能呈高通透性,腹膜表面层明显变薄及疏松,腹膜组织呈明显慢性纤维化改变.使用了加入地塞米松透析液的两组动物其腹膜表面层、间皮细胞形态和腹膜功能与对照组比较无显著差异.结论腹腔注射地塞米松对腹膜表面层、间皮细胞形态有很好的保护作用,明显改善大鼠高通透腹膜的转运功能.     

三七总皂苷对腹膜纤维化大鼠转化生长因子-β_1的影响

目的：探讨三七总皂苷对腹膜纤维化大鼠转化生长因子-β1的影响。方法：21只惠斯脱（WISTAR）大鼠分成三组：（1）对照组（n=7）：每日腹腔内加入一次生理盐水100 ml/kg;（2）模型组（n=7）：每日腹腔内加入一次4.25%葡萄糖腹透液100 ml/kg,同时在第1、3、5、7天联合脂多糖腹腔注射,按0.6 mg/kg;（3）试验组（n=7）：每日腹腔内加入一次4.25%葡萄糖腹透液100 ml/kg同时每天加入一次三七总皂苷35 mg/kg,在第1、3、5、7天联合脂多糖腹腔注射,按0.6 mg/kg;透析4周后行1 h腹膜平衡试验,并分别测定透析液和血浆尿素氮的比值（D/P）、葡萄糖重吸收值（D1/D0）、超滤容积,透析液中白细胞总数、用ELISA方法行腹膜透析液转化生长因子-β1（TGF-β1）。结果：模型组、试验组与对照组相比较,超滤量均显著下降（P〈0.05）;而透析液中TGF-β1、表达均显著增多,腹膜组织增厚也均显著增多（P〈0.05）。试验组与模型组比较,其超滤量明显改善（P〈0.05）,而透析液中TGF-β1显著减少（P〈0.05）,腹膜组织增厚明显改善（P〈0.05）。结论：PNS可以通过下调腹膜分泌TGF-β1,从而改善试验性腹膜纤维化,在一定程度上保护腹膜功能。     

内皮抑素在大鼠腹膜的表达及其与腹膜血管新生的关系

目的 研究大鼠腹膜血管内皮抑素（endostatin, ES）基因及蛋白表达与腹膜血管新生的关系。 方法 32只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为正常组、肾衰竭非透析组（非腹透组）、1.5%腹膜透析组（1.5% PD组）、4.25%腹膜透析组（4.25% PD组）,每组8只。PD组经规律PD 28 d后,取各组大鼠新鲜腹膜组织,用RT-PCR检测ES mRNA表达;用组织免疫组化染色检测ES蛋白表达;以CD34染色观察腹膜组织毛细血管密度（MVD）。 结果 各组均有ES mRNA表达,正常组为0.47±0.05;非腹透组为0.45±0.04;1.5% PD组为0.46±0.04;4.25% PD组为0.47±0.03;各组表达差异无统计学意义。正常组ES蛋白表达积分0分;非腹透组积分2分;1.5%PD组积分4分;4.25%PD组呈高表达,积分9分。正常组MVD为3.13±1.13;非腹透组为5.13±1.14;1.5%PD组为9.00±1.51;4.25%PD组为10.75±1.83;组间差异均有统计学意义（P < 0.05）。 结论 尿毒症状态和非生理性腹透液刺激可使大鼠腹膜组织ES蛋白表达升高,其在长期透析所致腹膜组织毛细血管生成增多中可能发挥一定的作用。     

氯沙坦钾对大鼠腹膜透析模型腹膜纤维化组织中TLR4表达的影响

目的：探讨氯沙坦钾对大鼠腹膜透析模型腹膜纤维化组织中TLR4、IL-6、IL-8表达的影响。方法：30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、腹膜纤维化模型组（模型组）、氯沙坦钾治疗组（治疗组）,每组各10只。正常对照组不予任何干预,模型组给予4.25%腹膜透析液腹腔注射（100ml·kg^-1·d^-1）,治疗组给予4.25%腹膜透析液腹腔注射（100ml.kg-1.d-1）,同时给予氯沙坦钾片灌胃（30mg·kg^-1·d^-1）,于4周末杀检大鼠,做腹膜平衡试验,准确量取超滤量,留取0和4h血清与腹腔流出液标本,计算葡萄糖转运量,4h后,取壁层腹膜组织作形态学观察,用免疫荧光的方法检测TLR4、IL-6、IL-8在脏层腹膜组织中的表达。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠壁层腹膜厚度明显增厚（P〈0.01）,超滤量下降（P〈0.01）,葡萄糖转运量升高（P〈0.01）。与模型组相比较,氯沙坦钾治疗后大鼠壁层腹膜变薄（P〈0.01）,超滤量增加（P〈0.01）,葡萄糖转运率量下降（P〈0.01）;正常腹膜组织中TLR4、IL-6、IL-8在间皮细胞中呈弱表达,模型组与正常组相比,TLR4、IL-6、IL-8表达明显增多;治疗组与模型组相比,TLR4、IL-6、IL-8蛋白表达明显下调。结论：氯沙坦钾能够下调腹膜纤维化大鼠腹膜组织TLR4、IL-6、IL-8表达水平,改善腹膜的超滤和转运功能。     

可溶性酪氨酸激酶2融合蛋白对尿毒症腹膜透析大鼠腹膜形态和功能的影响

目的 研究可溶性酪氨酸激酶2融合蛋白（sTie-2-Fc）对尿毒症腹膜透析大鼠腹膜血管新生、溶质转运和超滤功能的影响。 方法 32只雄性Wistar大鼠按数字随机法分为假手术组、尿毒症组、尿毒症腹透组和sTie-2-Fc干预组（均n=8）。尿毒症腹透组和sTie-2-Fc干预组大鼠经腹透管每天2次腹腔灌注4.25%葡萄糖透析液（3 ml/100 g体质量）共4周,sTie-2-Fc干预组大鼠每次灌注时在透析液中加入1 μg sTie-2-Fc。各组大鼠处死前行腹膜平衡试验,检测腹膜转运和超滤功能,取大网膜标本行抗CD31免疫组化染色并计血管数。 结果 与假手术组大鼠相比,尿毒症组大鼠的2 h腹透液和血肌酐比值（D/Pcr）增高（0.78±0.05比0.70±0.09,P = 0.028）,腹透液2 h与0 h葡萄糖比值（D/D0）降低（0.69±0.05比0.76±0.07,P = 0.033）,腹膜超滤量（UF,ml）减少（2.29±0.50比4.58±1.64,P = 0.005）,腹膜血管数量增加[（5.8±3.0）/HP比（1.6±0.5）/HP,P < 0.01]。尿毒症腹透组大鼠的溶质转运较尿毒症组大鼠进一步增高（D/Pcr: 0.89±0.05比0.78±0.05,P < 0.01;D/D0:0.47±0.09 比0.69±0.05, P < 0.01）,UF（ml）减少（0.40±0.59比2.29±0.50,P = 0.005）,腹膜血管数量增多[（16.7±1.2）/HP比（5.8±3.0）/HP,P < 0.01]。干预组大鼠使用sTie-2-Fc后,UF（ml）较尿毒症腹透组大鼠显著增加（1.56±0.48比0.40±0.59,P = 0.014）,腹膜血管数量显著减少[（9.2±1.2）/HP比（16.7±1.2）/HP,P ＜ 0.01],但两组大鼠的D/Pcr和D/D0差异均无统计学意义。 结论 sTie-2-Fc使尿毒症腹透大鼠腹膜血管新生减少,超滤增加,有利于保护腹膜结构和功能,可能是防治腹透后腹膜结构和功能改变的另一靶点。     

腹膜透析超滤衰竭的诊治策略

超滤衰竭是腹膜透析常见的并发症,是导致腹膜透析失败的重要原因之一。超滤衰竭定义为4.25%葡萄糖透析液留腹4 h后超滤量<400 ml。超滤衰竭根据病理生理机制分为4种类型：Ⅰ型超滤衰竭由于有效腹膜表面积增加导致,Ⅱ型超滤衰竭由于葡萄糖渗透转导作用下降导致,Ⅲ型超滤衰竭由于腹膜有效表面积减少导致,Ⅳ型超滤衰竭由于通过腹腔淋巴系统或局部组织间隙吸收大量水分导致。避免过度使用高浓度葡萄糖透析液、有效防治腹膜透析相关腹膜炎、保护残肾功能、选用生物相容性好的透析液、使用改善腹膜损伤和纤维化药物等是防治超滤衰竭的有益方法。     

胸腰椎骨折椎弓根内固定断裂与植骨融合方式的相关性分析

[目的]探讨胸腰椎骨折椎弓根螺钉内固定系统内固定术后,椎弓根螺钉断裂与植骨融合方式之间的关系,以探讨胸腰椎骨折植骨融合的最佳方式。[方法]回顾性研究1995年5月~2005年12月本院脊柱外科收治的胸腰椎骨折病人197例,其中A组单纯内固定(不植骨)患者14例,B组“H”形椎板植骨21例,C组横突间植骨67例,D组椎间、椎内联合横突间植骨95例。[结果]术后随访6~32个月,内固定断裂12例,其中A组4例,B组3例,C组5例,D组0例,4组中D组内固定断裂率显著低于其他3组(P<0.05)。[结论]椎间、椎体内联合横突间植骨重建脊柱三柱的稳定性,符合人体生物力学原理,能有效降低内固定断裂的发生。     

Study of the correlations between the volumes of the hypophysis, the epiphysis and the subfornical organ to the somatic weight and the volume of the hypothalamus in rodents]

The correlations between volume of the hypophysis, of the epiphysis and of the subfornical organ to body weight and volume of the hypothalamus were studied on 193 rodents belonging to 41 species. Concerning the volume of the hypophyseal lobes the regression slopes of Rodentia occupy an intermediate position between those of Isectivora and Prosimians studied by BAUCHOT. The volume of the epiphysis increases more rapidly with the weight of the body than that of the hypophyseal lobes, the volume of the subfornical organ increases on the contrary more slowly.     

Characteristics of the receptors in the isolated capsule of the hip in the cat

Summary The properties of the afferent fibres from the capsule of the hip joint have been studied in the cat in situ, in relation to joint rotation, and in an isolated capsule preparation which was opened and stretched directly with an actuator.In situ two types of afferent fibres were found, those having a full range of sensitivity and others having only a limited range in response to the joint rotation. When studied in isolated tissue the afferent fibres of the capsule were uniform in threshold and sensitivities, and no full range receptors were found. We conclude that the full range receptors which enter the articular nerve of the hip are spindle afferents and not capsule receptors. On the basis of these and previous results in animals and man the role of joint receptors in kinaesthesia and position sense is discussed.

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Résumé Les auteurs ont étudié les propriétés des nerfs afférents à la capsule de la hanche, chez le chat en imprimant à l'articulation des mouvements de rotation et sur des préparations de capsule isolée et ouverte en l'étirant directement grâce à un dispositif mécanique.In situ, on a trouvé deux types de nerfs afférents, les uns ayant en réponse à la rotation articulaire une étendue complète de sensibilité et les autres seulement une sensibilité limitée. Sur la capsule isolée les nerfs afférents sont indentiques en ce qui concerne le seuil et la sensibilité et on ne trouve aucun récepteur complet. On en conclut que les récepteurs de toute l'étendue de la sensibilité qui pénètrent les nerfs articulaires de la hanche sont des fibres en fuseau d'origine musculaire et non des récepteurs capsulaires. Sur ces bases et sur les résultats précédemment obtenus chez l'animal et chez l'homme, les auteurs discutent le rôle des récepteurs articulaires dans la cénesthésie et le sens des positions.