乙型肝炎病毒基因YMDD自然变异的检测及意义

近来,国内外有报道HBV基因存在YMDD自然变异,本研究对未经拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者YMDD热点变异L528M、M552I/V位点进行检测,并分析其与临床的关系.……     

乙型肝炎病毒YMDD变异患者肝组织表面抗原和核心抗原的表达

长期服用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎可引起乙型肝炎病毒(HBV)YMDD变异。YMDD变异是指病毒聚合酶的活性区第552个或551个甲硫氨酸(M)发生突变,被缬氨酸或异亮氨酸取代,是导致HBV对拉米夫定耐药、治疗失败或者无应答的原因[1-3]。本研究检测HBV YMDD变异患者肝组织中表面抗原(HBsAg)和核心抗原(HBcAg)的表达,以探讨YMDD变异引起拉米夫定治疗失败的细胞分子病理机制。资料与方法一、对象我院2004—2005年的45例发生YMDD变异的慢性乙型肝炎患者,其中男28例,女17例,年龄22~68岁。所有病例服用拉米夫定100mg/d0.5~2.5年,HBV YMDD…     

乙型肝炎病毒YMDD变异患者肝组织中HBsAg、HBcAg表达的比较

长期服用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎,可引起HBV YMDD变异.HBV YMDD变异是指病毒DNA聚合酶活性区的第204位或551位甲硫氨酸(M)发生突变,被缬氨酸或异亮氨酸取代,是导致HBV对拉米夫定耐药、治疗失败或HBV无应答的原因[1-3].拉米夫定治疗失败主要表现为患者肝功能损伤、肝脏组织学病理变化和病情复发甚至加重[4,5].为了比较HBV YMDD变异患者肝组织中HBsAg、HBcAg表达的差异,我们对2004至2005年发生YMDD变异的45例慢性乙型肝炎患者进行了相关研究,现报道如下.     

慢性乙型肝炎拉米夫定耐药患者HBV基因型及ALT变化的观察

观察慢性乙型肝炎患者用拉米夫定治疗后HBVP基因变异与不同HBV基因型感染及HBV DNA复升水平和转氨酶变化.收集51例慢性乙型肝炎患者用拉米夫定治疗52-78周后发生YMDD变异的血清标本,对照组128例未用拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者血清标本,应用聚合酶链反应方法,测定HBV DNA基因型;用限制性片段长度多态性分析方法(PCR RELP)测定HBV DNA YMDD变异;同时进行HBV DNA定量分析.结果显示51例拉米夫定治疗后HBV DNA基因变异患者以B型和C型为主,分别为10例(19.6%)和39例(76.47%),B C混和型2例(3.92%),未见其它基因型.拉米夫定治疗引起HBVDNAYMDD变异可以发生在不同HBV基因型感染的慢性乙型肝炎患者中,与对照组比较二者没有显著性差异.     

拉米夫定加肝络欣治疗慢性乙型肝炎疗效及对YMDD变异的影响

观察拉米夫定加肝络欣联合治疗慢性乙型肝炎的疗效及对慢性乙型肝炎病毒P基因(YMDD)变异的影响。收集乙型肝炎病毒(HBV)HBeAg、HBVDNA阳性的慢性乙型肝炎患者6 7例,分为拉米夫定加用肝络欣组(A组)、单用拉米夫定组(B组)。分别检测血清HBeAg、抗-HBe、HBVDNA ,肝脏生化指标和基因YMDD变异。在治疗5 6周时,拉米夫定联合肝络欣组HBeAg/抗-HBe转换率(39. 4 % ) ,优于拉米夫定组(P <0 .0 5 )。HBVDNA阳性率及YMDD变异率都比拉米夫定组低(P <0 . 0 5 )。拉米夫定联合肝络欣能在一定程度上提高治疗慢性乙型肝炎的疗效并可减少YMDD变异。     

乙型肝炎病毒YMDD联合前C变异及其临床意义

目的：研究拉米夫定治疗过程中乙型肝炎病毒（HBV）前C区，P区YMDD基序变异及其对疗效的影响。方法：对5例拉米夫定（100mg/d)治疗过程中HBeAg血清转换而HBV DNA仍阳性的慢性乙型肝炎患者，采用聚合酶链反应（PCR）产物直接测序方法分析HBV前C、P区的基因序列，结果：5例患者前C区均发现有G1896A变异，其中3例HBeAg血清转换前未发现此变异，2例已有此变异，同时5例患者在拉米夫定治疗后检测出YMDD变异，变异类型均为M5521，其中有1例在出现M5521变异40周后变为M552V变异，有2例M5521联合L528M变异，5例患者中有1例治疗无反应，另4例在治疗过程中HBV DNA突发，结论：拉米夫定治疗过程中YMDD变异的出现可导致HBV DNA突发，而前C区G1896A变异可致HBeAgbe阴转，因此在治疗过程中出现HBeAg血清转换后需结合HBV DNA检测，排除前C区变异的可能。     

拉米夫定治疗前后乙型肝炎病毒YMDD变异的相关因素分析

目的 了解遵义地区HBV基因型以及拉米夫定治疗前后发生YMDD变异的相关因素,及早进行拉米夫定疗效及耐药的预测. 方法 53例慢性乙型肝炎患者分别在口服拉米夫定前及治疗后3、6、12、18、24个月进行血清HBV DNA定量、乙型肝炎标志物、ALT、AST、总胆红素,白蛋白的检测.同时在接受拉米夫定治疗前采用基因测序法检测HBV基因型及YMDD变异株,治疗后HBV DNA定量下降又反弹升高,且血清HBV DNA＞1×104拷贝/ml时,再次进行YMDD变异株检测.率的比较用卡方检验及确切概率法,两组均数之间比较采用独立样本t检验,有序变量之间的比较采用秩和检验.结果 遵义地区的HBV基因型由B、C及B+C基因型构成.拉米夫定治疗后18例检出YMDD变异株,用药1年和2年的变异率分别为15.1%和34.0%.HBV突变类型有rtL180M/M204V、rtL180M/M204I、rtM204I和rtL180M四种,其中C区rtM204V全部合并rtL180M突变(100%),C基因型中rtL180M/M204V联合突变及rtL180M/M204I联合突变明显高于B基因型(77.8%比25.0%及22.2%比12.5%);C基因型中未见点突变,而rtM204I、rtL180M的点突变仅见于B基因型.YMDD变异与未变异组性别、民族、乙型肝炎家族史及HBeAg情况差异无统计学意义(P＞0.05),病程≥2年组和年龄＜35岁组变异率明显升高(X2值分别为4.707和5.853,P值均＜0.05).不同HBV DNA滴度患者YMDD变异率差异无统计学意义(X2=0.801,P＞0.05),但HBV DNA＜105拷贝/ml者未发现YMDD变异.结论 拉米夫定治疗后YMDD变异可能与HBV基因型及P基因突变类型有关,并随治疗时间的延长而增加.为了减少YMDD变异的发生,应选用病程短、HBV DNA水平较低、肝损害较重的患者进行拉米夫定治疗,有条件的应检测HBV基因型.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中HBV YMDD变异与临床

目的:探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中HBV YMDD变异与临床的关系。方法:对应用拉米夫定治疗的19例慢性乙型肝炎患者进行肝功能、乙肝病毒血清学标志物、HBV YMDD变异检测,个别病例进行肝组织病理学检查。结果:ALT异常率为47％,HBeAg血清转换率为15.8％,HBV YMDD变异发生率为25％,肝组织中HBsAg和HBcAg依然阳性。结论:运用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎6个月后可出现HBV YMDD变异,随着治疗时间延长,其变异发生率越高;该药远期降酶作用不够理想;HBeAg血清转换率不高;肝组织内仍处于炎症状态。     

拉米夫定联合左旋咪唑涂布剂治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的:研究拉米夫定联合左旋咪唑涂布剂治疗慢性乙型肝炎的效果,HBV YMDD变异的发生率及停药后远期持续应答率.方法:随机将慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者分成治疗组及对照组,对照组患者单用拉米夫定,治疗组在应用拉米夫定基础上加用左旋咪唑涂布剂.治疗前、治疗结束时,采用统一方法检测两组患者的配套肝功能,HBV DNA定量,HBV-M;疗程中每3个月检测上述指标各1次并记入患者档案.对疑有HBV DNA变异者,采用统一方法检测YMDD变异及前C区变异.并对停药后的远期疗效进行追踪观察.比较两组的生化学应答,病毒核酸应答,病毒血清学应答,并评价其综合疗效,HBV YMDD变异率及远期持续应答率.结果:治疗组治疗结束时生化学、病毒核酸,病毒血清学完全应答率分别达87.7%、90.4%、41.3%;其综合疗效评价完全应答率也达27.4%;停药后6个月及1年持续应答率分别达62.75%、52.94%,HBV YMDD变异率为9.59%.结论:拉米夫定联合左旋咪唑涂布剂治疗慢性乙型肝炎疗效明显优于单用拉米夫定者,并可减少HBV YMDD变异率,值得临床进一步推广验证.     

基因芯片技术检测乙型肝炎病毒YMDD变异

核苷类似物拉米夫定(3TC)治疗慢性乙型肝炎(CHB)过程中,乙型肝炎病毒(HBV)P基因YMDD基序中的甲硫氨酸密码子(M)易突变为缬氨酸(V)或异亮氨酸(I),形成YMDD变异的两种氨基酸序列,即YVDD和YIDD。国内外研究发现[1,2],YMDD基序变异与拉米夫定耐药、肝炎复发有密切关系。我们采用HBV基因多态性芯片检测技术,对102例长期用拉米夫定治疗CHB患者血清进行了检测,进一步探讨YMDD变异与临床的关系。材料和方法一、临床资料102例为2002年7月～2002年12月就诊于我科门诊患者,服用拉米夫定(100mg/d)时间在9～30个月者,其中男70例,女32例,…