周期蛋白D1在先天性与后天性胆脂瘤中的表达

目的通过研究周期蛋白D1(CyclinD1)在先天性胆脂瘤和后天性胆脂瘤的表达,探讨其表达差异的意义。方法选取我院就诊的60例中耳胆脂瘤患者,其中先天性胆脂瘤25例,后天性胆脂瘤35例;同时选取同期3例慢性中耳炎手术患者正常耳廓后皮肤组织作为对照组。采用免疫组化方法检测胆脂瘤组织中CyclinD1的表达。结果 CyclinD1免疫组化染色在先天性胆脂瘤和后天性胆脂瘤中均为阳性表达,但后天性胆脂瘤中阳性表达率高于先天性胆脂瘤,其差异具有统计学意义(P<0.01);CyclinD1在正常皮肤中不表达。结论 CyclinD1在后天性胆脂瘤上皮表达增强,可能是炎症刺激所致。     

M CP -1和 FN 在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义

目的探讨单核细胞趋化因子（monocyte chemotactic factor ,MCP -1）和纤维连接蛋白（fibronectin , FN）在继发性中耳胆脂瘤上皮中的表达及其对胆脂瘤上皮侵袭能力的影响。方法应用免疫组织化学MaxVi-sionTM法检测MCP-1和FN在30例中耳胆脂瘤上皮、20例胆脂瘤患者耳后正常皮肤、16例非胆脂瘤患者耳后正常皮肤中的表达,应用计算机图像分析系统对其阳性表达灰度值情况及分析,比较三组之间 MCP -1和 FN表达的差异。结果 MCP-1阳性细胞表达主要分布于胆脂瘤上皮全层,其中棘层呈高表达,MCP-1在中耳胆脂瘤上皮中阳性表达率为70％,灰度值为147．2±20．1,强于胆脂瘤患者耳后正常皮肤中的阳性表达（35％,200．8±18．4）和非胆脂瘤患者耳后正常皮肤中的阳性表达（37．5％,193．3±15．5）（ P＜0．05）。FN阳性细胞主要分布于胆脂瘤上皮全层,基底层、棘层和基质呈高表达,FN在中耳胆脂瘤上皮中阳性表达率为76．7％,灰度值为139．2±18．5,强于胆脂瘤患者耳后正常皮肤中的阳性表达（30％,195．0±12．9）和非胆脂瘤患者耳后正常皮肤中的阳性表达（31．3％,191．6±13．5）（P＜0．05）。在30例中耳胆脂瘤上皮组织中,MCP-1和FN的灰度值与胆脂瘤的侵袭能力负相关（rmcp-1＝-0．682,rfn ＝-0．531,P＜0．01）,MCP-1和FN蛋白的表达不存在线性相关。结论 MCP-1和FN均在成人中耳胆脂瘤中高表达,且与中耳胆脂瘤的侵袭能力呈负相关。     

中耳胆脂瘤上皮中CYLD、c-jun、Ki-67的表达及意义

目的研究抑癌基因CYLD(cylindromatosis)、原癌基因c-jun及细胞核增殖相关抗原Ki-67在中耳胆脂瘤上皮细胞中的表达情况,分析它们之间的相互关系,探讨CYLD、c-jun、Ki-67在中耳胆脂瘤发病机制中的可能作用。方法采用免疫组化技术检测CYLD、c-jun及Ki-67蛋白产物在30例中耳胆脂瘤上皮组织(实验组)及20例正常耳后皮肤上皮组织(对照组)中的表达情况。结果 CYLD蛋白产物阳性表达定位于细胞浆,其在中耳胆脂瘤上皮中主要见基底层弱阳性或阳性表达,而在对照组正常耳后皮肤上皮全层均见阳性表达或强阳性表达,CYLD蛋白在中耳胆脂瘤上皮中的表达明显低于正常耳后皮肤(X2=16.333,p=0.000,p<0.05)。c-jun蛋白产物阳性表达定位于细胞浆和细胞核,其在中耳胆脂瘤上皮中上皮全层均见阳性表达或强阳性表达,而在对照组正常耳后皮肤上皮中均仅见基底层弱阳性或阳性表达,c-jun蛋白在中耳胆脂瘤上皮中的表达明显高于正常耳后皮肤(X2=14.901,p=0.000,p<0.05)。Ki-67蛋白产物定位于细胞核,细胞质内未见Ki-67蛋白表达。其在中耳胆脂瘤上皮基底层、棘层,甚至颗粒层中均可见阳性或强阳性表达,而在对照组正常耳后皮肤上皮中均仅见基底层弱阳性或阳性表达,Ki-67蛋白在中耳胆脂瘤上皮中的表达明显高于正常耳后皮肤(X2=13.675,P=0.000,P<0.05)。Spearman相关性分析发现中耳胆脂瘤上皮细胞CYLD、c-jun蛋白表达存在负相关(rs=-0.381,P=0.038,P<0.05)。结论与正常耳后皮肤的上皮细胞相比,中耳胆脂瘤上皮细胞具有高度增殖的能力。CYLD、c-jun异常表达可能与中耳胆脂瘤发生、发展密切相关。在中耳胆脂瘤上皮中可能也存在CYLD对c-jun表达的负调节。     

Caspase-8在中耳胆脂瘤上皮中的表达及意义

目的 研究caspase-8(胱天蛋白酶-8)在中耳胆脂瘤上皮的表达,探讨其在中耳胆脂瘤发病机制中的作用.方法 分别采用免疫组化法和Western Blot(蛋白质印迹法)技术检测caspase-8在36例中耳胆脂瘤组织及20例正常外耳道皮肤组织中的表达情况.结果 caspase-8在36例胆脂瘤上皮各层细胞中均有强表达,而正常外耳道皮肤表达较弱,caspase-8在胆脂瘤上皮中的蛋白表达水平较正常外耳道皮肤显著增高,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 胆脂瘤上皮中caspase-8表达较外耳道皮肤显著增高,其可能参与了中耳胆脂瘤上皮细胞的过度凋亡及增殖的调控.     

PTEN、 P-Akt和NF-кB在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义

目的 研究10号染色体缺失张力蛋白磷酸酶(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN)、磷酸化Akt (P-Akt)及核转录因子- κB (NF-κB)在中耳胆脂瘤上皮中的表达,探讨PI3K (phosphatidylinositol-3-kinase,磷脂酰肌醇-3激酶)- Akt信号通路在中耳胆脂瘤上皮细胞过度增殖机制中的可能作用.方法 采用免疫组织化学SP法(辣根酶标记链霉卵白素连接法,streptavidin - peroxidase conjugated method)检测30例中耳胆脂瘤组织标本与15例正常外耳道皮肤标本中PTEN、P-Akt及NF- kB蛋白的表达.结果 PTEN蛋白阳性表达主要定位于上皮细胞核,其在中耳胆脂瘤上皮中阳性表达率为36.7％,明显低于正常外耳道皮肤组的93.3％ (P＜ 0.01);P-Akt蛋白阳性表达主要定位于上皮细胞胞质,其在中耳胆脂瘤上皮中阳性表达率为70.0％,明显高于正常外耳道皮肤组的26.7％ (P＜0.01);NF- κB蛋白阳性表达定位于上皮细胞核,其在中耳胆脂瘤上皮中阳性表达率为63.3％,明显高于正常外耳道皮肤组的20.0％ (P＜ 0.01).在30例中耳胆脂瘤上皮组织中,PTEN分别与P-Akt、NF-κB蛋白的表达之间呈显著负相关(P＜0.01),而P-Akt和NF- κB蛋白的表达呈显著正相关(P＜0.01).结论 PTEN、P-Akt和NF- κB在中耳胆脂瘤上皮的异常表达可能在胆脂瘤的发生、发展过程中起重要作用.胆脂瘤上皮中PI3K-Akt信号通路的激活可能参与了胆脂瘤上皮细胞过度增殖机制.     

两种基质金属蛋白酶在胆脂瘤和中耳癌中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMP)的MMP－2和MMP－9的胆脂瘤和中耳癌中的表达差异及其在骨浸润作用。方法 采用免疫组织化学方法检测36例胆脂瘤上皮，10例胆脂瘤外耳道皮肤、16例中耳癌组织及正常组织中MMP－2和MMP－9的表达。结果 ①MMP－2和MMP－9在胆脂瘤上皮染色最强。而且在上皮组织的各层细胞均有表达，基底膜染色最强。②胆脂瘤上皮中的MMP－2和MMP－9的表达明显高于其对应的外耳道皮肤和正常外耳道上皮。MMP－2阳性表达在胆脂瘤上皮中为83％，胆脂瘤外耳道上皮为50％，正常外耳道皮肤2例有微弱表达。③16例中耳鳞癌组织中，MMP－9的阳性达率为50％（8／16），MMP－2的阳性表达率为56.25%(9/16)，表达水平与肿瘤的病理分级和临床分期有关。④中耳癌组织中MMP－2的表达与MMP－9表达不致，而胆脂瘤组织中MMP－2和MMP－9的表达密切相关。结论 胆脂瘤向周围骨质侵袭的特性与中耳癌相似，MMPs家族及其抑制剂之间的平衡紊乱所致的蛋白水解酶活性增高是引起中耳胆脂瘤骨吸收的原因之一。     

中耳胆脂瘤上皮中Livin、p73的表达与其发生关系研究

目的 观察凋亡抑制蛋白家族成员Livin及p53基因家族成员p73在中耳胆脂瘤上皮的表达情况,探讨它们在胆脂瘤发病机制中的作用.方法 采用免疫组织化学技术SP法(streptavidin-perosidabe,链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法)检测30例胆脂瘤标本及16例外耳道正常皮肤组织中的Livin及p73的表达情况,并结合胆脂瘤对听小骨骨质破坏程度,采用SPSS 10.0软件包进行统计学分析.结果 Livin表达于细胞核及部分细胞质,而D73表达于胞浆,上述两指标在中耳胆脂瘤中的阳性表达率分别为76.7%、40%,Livin在胆脂瘤上皮中的表达高于外耳道正常皮肤(P<0.05),而p73在胆脂瘤及外耳道皮肤中的表达差异无显著性(P>0.05),听小骨骨质破坏程度与上述指标的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 Livin在中耳胆脂瘤的异常表达可能在胆脂瘤的发生、发展过程中起相应作用,可能参与胆脂瘤上皮的凋亡调控过程,而p73在中耳胆脂瘤的发生和发展中的作用尚难确定.     

MMP-9在中耳胆脂瘤中的表达和意义

目的 研究基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)在中耳胆脂瘤上皮中的表达,并探讨其与中耳胆脂瘤的血管形成以及胆脂瘤侵蚀行为的关系.方法采用免疫组织化学SP法检测MMP-9、Ⅳ型胶原蛋白在44例患者中耳胆脂瘤组织标本与10例正常外耳道组织中的表达.结果 MMP-9在胆脂瘤上皮各层均有表达,在外耳道皮肤中为弱阳性表达;胆脂瘤基质周围微血管计数均数高于正常外耳道皮肤,二者差异具有统计学意义(P＜0.05);MMP-9在胆脂瘤中的表达与周围微血管计数间呈正相关关系.结论 MMP-9可能在中耳胆脂瘤血管生成中起重要作用.     

蛋白酪氨酸磷酸酶基因和磷酸化蛋白激酶B在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义

目的 检测蛋白酪氨酸磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,P-AKT)在人类中耳胆脂瘤上皮组织中的表达情况及其相关性,探讨他们在中耳胆脂瘤上皮细胞形成机制中的重要作用.方法 应用免疫组织化学SP法检测40例人中耳胆脂瘤组织标本及15例正常皮肤标本中PTEN、P-AKT蛋白的表达.结果 免疫组化显示细胞质PTEN主要在胆脂瘤组织和正常皮肤组织的上皮细胞浆着色,阳性表达率为50.0％,明显低于正常皮肤组的86.6％ (x2=5.075,P＜0.01);P-AKT蛋白在中耳胆脂瘤上皮组织和正常皮肤组的上皮细胞浆着色,阳性表达率分别为72.5％和26.7％,两者差异具有显著性(x2=7.605,P=0.006,P＜0.01),15例外耳道正常上皮组织中,PTEN与P-AKT蛋白的表达之间呈显著负相关(r=-0.689,P＜0.0001,P＜0.01).结论 PTEN和P-AKT蛋白在中耳胆脂瘤上皮组织中的异常表达可能与胆脂瘤上皮的高度增殖和抗凋亡状态密切相关.PTEN蛋白表达缺失导致其抑制作用减弱,使P-AKT蛋白表达过度,继而引起胆脂瘤上皮细胞凋亡受抑制.     

两种基质金属蛋白酶在胆脂瘤和中耳癌中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases, MMP）的MMP-2和MMP-9在胆脂瘤和中耳癌中的表达差异及其在骨浸润作用。方法采用免疫组织化学方法检测36例胆脂瘤上皮,10例胆脂瘤外耳道皮肤、16例中耳癌组织及正常组织中MMP-2和MMP-9的表达。结果①MMP-2和MMP-9在胆脂瘤上皮染色最强。而且在上皮组织的各层细胞均有表达,基底膜染色最强。②胆脂瘤上皮中的MMP-2和MMP-9的表达明显高于其对应的外耳道皮肤和正常外耳道上皮。MMP-2阳性表达在胆脂瘤上皮中为83%,胆脂瘤外耳道上皮为50%,正常外耳道皮肤2例有微弱表达。③16例中耳鳞癌组织中,MMP-9的阳性表达率为50%（8/16）,MMP-2的阳性表达率为56.25%（9/16）,表达水平与肿瘤的病理分级和临床分期有关。④中耳癌组织中MMP-2的表达与MMP-9表达不一致,而胆脂瘤组织中MMP-2和MMP-9的表达密切相关。结论胆脂瘤向周围骨质侵袭的特性与中耳癌相似,MMPs家族及其抑制剂之间的平衡紊乱所致的蛋白水解酶活性增高是引起中耳胆脂瘤骨吸收的原因之一。