贵州地区汉族结核病患者HLA-DM基因多态性的研究

HLA—DM基因是人类HLA-Ⅱ类基因区的一种非典型基因，分为DMA和DMB两个区，目前已明确的DMA等位基因有4个（DMA＊0101～0104），DMB等位基因有5个（DMB＊0101～0105）。HLA-Ⅱ类分子依赖途径是结核分枝杆菌抗原的主要递呈方式，HLA-DM分子作为经典Ⅱ类分子的分子伴侣，其基因多态性是否影响结核抗原的递呈值得研究。     

HLA-DM基因研究进展

HLA-DM基因是1991年发现的人MHC-Ⅱ类基因区的新成员，分为HLA-DMA和HLA-DMB两个区，分别编码HLA-DMA分子和HLA-DMB分子，共同组成HLA-DM异二聚体分子。DM基因存在基因多态性，DMA和DMB等位基因分别有4个和5个，即DMA*0101-0104和DMB*0101-0105。绝大多数DM分子位于APC细胞的内体和溶酶体中，有少数DM分子位于朗罕氏细胞、B细胞及不成熟的树突状细胞等细胞的表面。DM分子可以促进占据抗原结合沟的稳定链(invariant chain，Ii chain)的释放，使抗原肽能够与MHC-Ⅱ类分子结合。     

用PCR-RFLP方法探测MEG白血病细胞HLA-Ⅱ基因型

研究MEG白血病细胞系表达HLA Ⅱ类抗原类型 ,提高对该细胞的HLA Ⅱ基因型的认识。旨在从分子遗传学水平上研究HLA Ⅱ类抗原与急性巨核细胞白血病发病机理的关系。采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术分析MEG白血病细胞系HLA Ⅱ类抗原类型。结果是MEG白血病细胞系的HLA Ⅱ类抗原的等位基因型分别是 :DRB1 14 0 6 0 4 10 ,DQB1 0 4 10 0 4 0 1,DPB1 0 5 0 1 0 5 0 1。该项研究提高了对巨核细胞白血病细胞系HLA Ⅱ基因型的认识 ,并为临床上进一步探讨HLA Ⅱ基因型与急性巨核细胞白血病致病基因之间…     

恒河猴(Macaca mulatta)主要组织相容性复合体及其与SIV/SAIDS疾病进程关系的研究进展

主要组织相容性复合体（Major histocompatibility complex，MHC）是脊椎动物染色体上一组紧密连锁的基因群，人MHC位于6p21．3上，恒河猴MHC定位在6q24上。MHC可分为三大基因群，分别称为Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类基因。MHC编码的糖蛋白称MHC分子，典型的MHCI类分子几乎表达于所有类型的细胞，主要与内源性抗原肽结合并递呈给CD8^＋杀伤性T细胞，导致靶细胞死亡；MHCⅡ类分子主要表达于免疫系统细胞，能够结合外源抗原肽并呈递给CD4^＋辅助性T细胞。它们在针对病原生物的免疫应答中发挥着重要的作用。     

HLA-DM及HLA-DO的研究进展

抗原递呈涉及多种机制及各种分子。细胞膜上的外来抗原被细胞表面的mIg或BCR摄取进入细胞内早 后期内涵体及溶酶体中。内质网中的新合成并结合于Ii链的HLAⅡ类分子进入内涵体 溶酶体中 ,Ii链降解成为CLIP片段 ,在DM DO的联合作用下 ,结合于HLAⅡ类分子抗原结合槽内的CLIP脱落 ,同时抗原肽进入槽内形成HLAⅡ 抗原肽复合物 ,将抗原提呈于细胞表面供T细胞识别 ,激发一系列的免疫反应。DM DO对于这一复杂过程的准确进行起着至关重要的作用     

CⅡTA基因编码区不同单倍型cDNA的功能研究

目的 研究MHCⅡ类反式激活因子(cⅡTA)基因编码区非同义单核苷酸多态性(SNP)位点C19170G(Leu45Val)和C30799G(Ala500Gly)构成的4种不同单倍型cDNA的功能.方法 将4种不同单倍型的真核表达载体和卒载体分别转染至HeLa细胞.用RT-PCR和间接细胞免疫荧光技术检测未经转染的HeLa细胞、转染4种真核表达载体及卒载体的HeLa细胞cⅡTA mRNA与3种HLAⅡ类分子(HLA-DR、DP、DQ)的表达,并用流式细胞技术对其表达的3种HLAⅡ类蛋白进行定量分析.结果 未经转染和转染空载体的HeLa细胞均尤CⅡTA mRNA和3种HLAⅡ类分子的表达,而转染4种不同单倍型真核表达载体的HeLa细胞均出现CⅡTA mRNA表达,并表达3种HLAⅡ类分子.证实了转染4种不同单倍型真核表达载体后的HeLa细胞3种HLAⅡ类分子表达水平差异无统计学意义(P均>0.05).结论 中国人CⅡTA基因编码区这两个SNP位点的多态性(2个位点氨基酸的改变)不影响CⅡTA反式激活HLAⅡ类基因表达的能力.     

HLA-DM及HLA-DO的研究进展

抗原递呈涉及多种机制及各种分子。细胞膜上的外来抗原被细胞表面的mIg或BCR摄取进入细胞内早／后期内涵体及溶酶体中。内质网中的新合成并结合于Ii链的HLAⅡ类分子进入内涵体，溶酶体中，Ii链降解成为CLIP片段，在DM／DO的联合作用下，结合于HLAⅡ类分子抗原结合槽内的CLIP脱落。同时抗原肽进入槽内形成HLAⅡ一抗原肽复合物，将抗原提呈于细胞表面供T细胞识别，激发一系列的免疫反应。DM／DO对于这一复杂过程的准确进行起着至关重要的作用。     

091 HLA-DM及HLA-DO的研究进展

抗原递呈涉及多种机制及各种分子.细胞膜上的外来抗原被细胞表面的mIg或BCR摄取进入细胞内早/后期内涵体及溶酶体中.内质网中的新合成并结合于Ii链的HLAⅡ类分子进入内涵体/溶酶体中,Ii链降解成为CLIp片段,在DM/DO的联合作用下,结合于HLAⅡ类分子抗原结合槽内的CLIP脱落,同时抗原肽进入槽内形成HLAⅡ-抗原肽复合物,将抗原提呈于细胞表面供T细胞识别,激发一系列的免疫反应.DM/DO对于这一复杂过程的准确进行起着至关重要的作用.     

HLA遗传易感性在病毒致癌中的作用北大核心

HLA复合体是一组与免疫应答密切相关、高度多态且紧密连锁的基因群,包括HLA-Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类基因区。HLA-Ⅰ类分子可通过向CTL提呈内源性抗原肽激活细胞毒作用,从而清除受感染细胞。HLA-Ⅱ类基因,包括HLA-DP、HLA-DQ和HLA-DR,可编码与外源性抗原肽结合的HLA-Ⅱ类分子,并将抗原肽提呈给CD4+T细胞,进而触发信号级联反应;HLA-Ⅲ类基因包括补体基因C2、B、C4及参与炎症反应的TNF-α、热休克蛋白、淋巴毒素α和淋巴毒素β等基因,多与炎症反应相关。HLA转录调控区的某些功能性单核苷酸多态性基因型可能通过结合转录因子影响HLA的表达,进而改变免疫反应/炎症反应的强度,导致病毒感染慢性化并迁延慢性非可控炎症,最终促进癌症的进化发育,其中HLA-Ⅱ类抗原发挥关键作用。文章总结了HLA遗传易感性在病毒感染相关肿瘤中作用的最新研究成果,并探讨了其可能的机制,以期为恶性肿瘤的个体化预防和免疫治疗方案制定提供参考。     

CD_3——T_H细胞缺损的分子基础

CD4分子是单链跨膜糖蛋白,分子量55Kd,由四个胞外功能区(E1～E4)、跨膜区和胞浆区组成.胞外功能区E_1与Ig_k链v区有同源性,胞浆区尾部与P56~(LCK)相连.CD4可与MHCⅡ类分子的非多形性部分结合.CD4与MHCⅡ类分子结合位点广泛地分布在E_1,E_2和E_3的N端.这两种分子结合可增强CD4~+T细胞与抗原呈递细胞之间的粘附性,提高CD4~+T细胞识别抗原的敏感性,并通过CD4-P56~(LCK)传递信号促进T细胞活化,此外,CD4分子对未成熟T细胞在胸腺内分化成熟过程有重要作用.     

MHCⅡ类抗原加工基因DM的研究进展

DM基因是近年来新发现的与抗原处理有关的HLA Ⅱ类基因。它能促进经典Ⅱ类分子与肽的结合,推测在免疫调节及在人体对某些疾病易感性中起作用。本文就DM基因近年来的研究进展作一简述。     

MHC基因多态性和肿瘤的发生

人类主要组织相容性复合物 (MHC)是一段约 3 6Mb的染色体区段 ,有 2 2 0多个基因位点 ,其中人类白细胞抗原(HLA)等位基因超过 2 0 0 0个 ,是迄今所知最复杂、多态态最高的遗传系统。几乎所有的HLA等位基因编码的蛋白质的差别都集中分布在其与抗原肽结合的分子凹槽中。这种差别决定了与抗原肽的结合强度 ,进而影响抗原肽的提呈 ,可能是肿瘤易感性的遗传基础之一。以病原微生物感染为诱因的肿瘤、非病原生物直接引起基因或染色体结构变化等原因导致的肿瘤 ,在与HLA等位基因的易感性上可能存在不同的机制。HLA等位基因的遗传易感性还与人种的遗传背景有关。由于技术上的原因 ,目前MHC多态性与肿瘤的遗传易感性研究主要集中在HLAII类等位基因或单倍型。HLAI类及其他MHC区域多态基因的等位基因与肿瘤易感性的研究值得关注。MHC有大量人群频率不一的等位基因和位点之间很强的连锁不平衡 ,要确定HLA等位基因与肿瘤发生的关系仍有困难 ,家系分析、群体规模的受累姊妹配对分析可获取更多信息。MHC单倍型和SNP分析相结合有利于准确分析MHC区域基因和肿瘤的关系 ,并鉴定和分析MHC中的新基因。理解MHC遗传多态性与肿瘤易感性对肿瘤的生物治疗有指导意义。     

Ⅱ类反式激活蛋白与免疫应答

MHCⅡ类分子在向CD4 T细胞提呈经过加工的抗原和诱发免疫反应中起重要作用。MHCⅡ类分子异常表达会引起裸淋巴细胞综合征等严重的免疫缺陷性疾病。目前已知CⅡTA是决定MHCⅡ类分子表达的主要调节因子。此外CⅡTA还影响着自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤排斥、移植耐受等。因此,Ⅱ类反式激活蛋白作为影响诸多基因的单体蛋白,在干预MHCⅡ类分子提呈抗原途径上是理想的药物治疗靶点。     

超抗原

超抗原在刺激T细胞时,需要辅助细胞MHCⅡ类分子的结合,但不是MHC限制.超抗原与MHCⅡ类分子的复合体作用于T细胞TCRVβ的某个片段,而不是抗原特异识别部位.故可激活较大量T细胞.超抗原可能与自身免疫病等的发病机理有密切关系.     

HLA-G结构与功能研究进展

胎盘组织外绒毛滋养层细胞不表达经典的HLAⅠ类分子 ,使这些细胞易感于NK细胞的攻击 ,但由于表达非经典的MHCⅠ类分子HLA G可以防止NK细胞识别这些细胞 ,HLA G至少是 3种NK细胞抑制受体的配体 ;表达HLA G的滋养层细胞可能递呈肽类给T细胞 ,转染膜结合型HLA G1, G2及可溶型HLA G分子的细胞能抑制同种T淋巴细胞的增殖反应及抗原特异性的CTL反应 ;以及HLA G基因的多态性程度是有限的 ,提示HLA G在母体对半异体的胎儿的免疫耐受中可能起一个重要的作用。     

MHCⅡ类抗原的异常表达与自身免疫病

七十年代初期,人们发现T 细胞和B 细胞之间的相互作用受MHCⅡ类抗原的限制。即T 细胞和B 细胞具有共同MHCⅡ类抗原时,才能发挥协同效应。同样,T 细胞与抗原提呈细胞之间的相互作用亦受到MHCⅡ类抗原的限制,这种遗传限制性对于免疫反应的诱发是至关重要的。近年来,免疫组织化学的大量研究表明,在自身免疫病靶器官的上皮细胞膜上,异常地表达MHCⅡ类抗原,其作用可能与自身抗原的提呈、触发自身免疫反应有关。一、MHCⅡ类抗原的组织分布在人类,MHCⅡ类抗原的基因有四个     

瘢痕疙瘩与HLA-II类基因相关性研究

目的 :探讨免疫遗传学因素在瘢痕疙瘩发病机制中的作用。方法 :用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 5 0例瘢痕疙瘩患者进行HLA Ⅱ类基因分型 ,并以 1 0 0例正常人的HLA Ⅱ类基因为对照。结果 :瘢痕疙瘩组HLA DQ5抗原频率 ( 3 0 % )明显高于对照组 ( 1 4% ) ,相对危险率 (RR) =2 .63 ;HLA DR1 7和HLA DQ8抗原频率 ( 2 % )明显低于对照组 ( 1 4% ,1 5 % ) ,RR =0 .1 3 ,0 .1 2。结论 :瘢痕疙瘩与HLA DQ5基因呈正相关 ,与HLA DR1 7和HLA DQ8基因呈负相关。HLA DQ5、HLA DR1 7和HLA DQ8基因可能是瘢痕疙瘩患者易感的单倍型     

MHCⅡ类反式激活因子基因的克隆、鉴定及初步功能测定

目的 克隆MHCⅡ类反式激活因子（class Ⅱ rtansactivator,CⅡTA）基因并进行初步功能测试，为CⅡTA的应用研究奠定基础。方法 RT－PCR扩增CⅡTA基因，将其克隆到pGEM-T载体上并进行酶切和测序鉴定，用EcoRⅡ、XhoⅠ将CⅡTA定向克隆到表达载体pcDNA3上，用脂质体转染法将pcDNA3/CⅡTA转入HeLa细胞；流式细胞术观察细胞表面HLA－DR／DQ的表达变化。结果 成功克隆CⅡTA基因，CⅡTA的转入使HeLa细胞表面表达HLA－DR／DQ分子。结论 转入CⅡTA能使HeLa细胞表面表达MHCⅡ类分子表达，CⅡTA参与调控MHCⅡ类基因的转录和表达。     

HLA-B7可诱导启动子调控TNF-α和IFN-β基因协同增强抗肿瘤效应

目的　将TNF α和IFN β基因导入人肝癌细胞株Liu6和SMMC 772 1,以增强其免疫原性。方法　以腺病毒为载体 ,以IRES连接TNF和IFN基因 ,选择HLA B7可诱导启动子调控其表达。分别用Southern Northernblot和MTT法检测TNF α和IFN β基因的整合、转录与表达。流式细胞仪检测MHCⅠ类分子表达。CTL细胞毒性实验检测T细胞对转染细胞的杀伤作用。细胞增殖实验检测目的基因的表达对肿瘤细胞的抑制作用。结果　TNF α和IFN β基因可整合入转染细胞 ,并被有效转录。转染细胞MHCⅠ类分子的表达比对照组高 3～ 4倍。TNF活性 :Liu6细胞为 3 .778ng ml,SMMC 772 1为2 .0 17pg ml;2 4hIFN最高活性分别为 397.8U 10 6 个细胞和 345 .8U 10 6 个细胞。对照组与实验组在效靶比分别为 5∶1,10∶1,15∶1时 ,CTL细胞毒性实验结果差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ,表明T细胞杀伤作用明显增强。细胞增殖实验结果显示实验组与对照组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。目的基因的表达对肿瘤细胞具有一定的抑制作用 ,抑制率分别为 5 .5 %(Liu6 ) ,3.7%(SMMC 772 1)。结论　人TNF α和IFN β基因导入人肝癌细胞株Liu6和SMMC 772 1可明显增加其对TNF、IFN和MHCⅠ类分子的表达 ,增强机体对转染瘤细胞的杀伤作用。     

抗原提呈中的MHC Ⅱ相关分子和亚细胞结构

MHCⅡ限制的抗原提是与CD4+T细胞的激活密切相关，在免疫系统中占重要的地位。近年来，有关MHCⅡ的研究取得了很大的进展，本文就MHCⅡ限制的抗原提呈过程作一综述，并重点讨论了与此相关的两个重要分子Ii和DM以及亚细胞结构MIIC的结构与功能。