PGE2、PGF2α和Iloprost对小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响

目的 从甲状腺功能及性腺功能变化的角度研究腺嘌呤诱发慢性肾衰的内分泌紊乱的机理.方法 运用腺嘌呤灌服复制大鼠慢性肾衰模型,以正常大鼠作为对照,应用放射免疫法检测大鼠性腺激素、甲状腺激素的含量及光镜观察睾丸的结构变化.结果 模型组大鼠血清甲状腺激素含量均低于正常对照组.模型大鼠的性激素含量与正常对照组有明显差异.病理结果 显示与上述结果 相一致.结论 性激素分泌量的变化和甲状腺分泌功能的降低是慢性肾衰并发内分泌功能障碍的重要原因之一.     

FVB小鼠超排卵及胚胎冷冻技术的研究

目的为制备FVB转基因小鼠及保种繁殖提供最佳超排周龄及胚胎冷冻方法。方法对4—6周、6．8周、8．10周FVB小鼠进行超数排卵效果的比较及采用体外培养受精卵至2-cell法和输卵管吹卵法两种不同方法收集2-cell受精卵进行胚胎冷冻。结果4．6周雌鼠经超排后回收的受精卵（24．6个）明显高于6—8周龄、8—10周龄的FVB雌鼠（14．5个、16．2个），差异有显著性；两种方法回收的2-cell受精卵经冷冻保存后，Ⅱ组受精卵解冻后2-cell形态正常的胚数（106个）高于I组解冻后2-cell形态正常的胚数（90个），但两者无显著性差异。结论本研究将为制备FVB转基因小鼠及转基因动物的种系保存和繁殖提供了基础。     

胚胎冷冻技术应用于抗菌肽转基因小鼠的保种传代

目的研究胚胎冷冻在抗菌肽转基因FVB小鼠保种传代中的应用。方法对6~8周正常雌性FVB小鼠进行超排分别与雄性杂合子抗菌肽转基因FVB小鼠交配，收集2-cell胚胎，进行胚胎冷冻。1周后进行胚胎复苏移植，通过PCR方法对仔代鉴定。结果冻存胚胎140枚，复苏获得存活胚胎98枚，移植85枚，产仔38只，获得阳性后代12只。结论通过胚胎冷冻技术保种及复苏移植技术可对抗菌肽转基因小鼠进行传代。     

近交系小鼠超数排卵的研究

近交系小鼠超数排卵(简称超排)的研究可为小鼠胚胎库的建立提供大量胚胎。以孕马血清促性腺激素(PMSG)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)为主,按不同品系小鼠的特点,加前列腺素(PGF_(2α))1μg/只以上。超排BALB/c系小鼠,平均每只雌鼠取可用胚胎22枚,C 57 BL/6 A系小鼠为23枚,对照组分别取得7枚和8枚,实验组与对照组差异显著(P<0.05)。超排处理后的雌鼠交配受孕率较高。实验结果提示改进的超排方法可提高国产激素制品的超排效果。     

不同剂量孕马血清促性腺激素(PMSG)对未成年大鼠超数排卵效果与质量的影响

目的：建立SD大鼠的有效超数排卵程序，为大鼠胚胎生物工程相关技术的研究提供参考。方法：分别用10、20、30、40、50IU的孕马血清促性腺激素/人绒毛膜促性腺激素（PMSG／hCG）对4～5周龄、6～7周龄、8～9周龄SD大鼠进行超数排卵，比较超排效果，并将超排处理后体内受精的2-细胞胚胎移植给受体雌鼠，观察妊娠产仔情况。结果：4～5周龄组SD大鼠在激素剂量为20IU／只时，平均超排卵54．6枚，明显高于其他组合；6～7周龄组在激素剂量为40IU／只时超排卵数最多，为32．7枚，但与30IU和50IU剂量组差异不显著；8～9周龄组超排效果最差，平均超排卵20枚左右。超排处理的2-细胞胚胎移植给代孕鼠后，妊娠率为63．3％，与对照组（60％）差异不显著。结论：SD大鼠的超排效果随着年龄增长而下降，4～5周龄雌鼠超排效果最好，其中激素剂量为20IU／只时超排卵数最多，且超排的卵子质量正常，受精后可以完成全程发育。     

初情期前云南滇南小耳猪超数排卵和原核期胚胎体外发育的研究

目的对初情期前云南滇南小耳猪超数排卵和原核期胚胎体外发育进行研究．方法对8头初情期前云南滇南小耳猪注射1000IUPMSG和500IUhCG诱导超数排卵,以自然交配和人工授精技术、手术或离体冲卵技术回收原核期胚胎,并进行胚胎体外培养研究．结果超排的激素处理方法可成功诱导超生理数量的卵子发育和排卵及受精,最多可得到31枚受精卵．受精卵的囊胚率可达到87．5％．经过比较研究,人工授精可能优于自然交配的授精方式;雌激素可作为初情期前小母猪的超排成败的重要标志．但是,手术法冲卵的技术较离体冲卵的还很低．结论初情期云南滇南小耳猪可用于体内胚胎生产,其原核期胚胎体外发育具有比较高的的发育潜能．     

不同剂量FSH和LH对小鼠超排效果的影响

目的确定对昆明小鼠超排所需的FSH和LH最佳剂量,提高超排效果.方法 48只小鼠随机分为四组,分别用3 IU、6 IU、9 IU、12IU的FSH分四次递减腹腔注射,48 h后分别注射LH 3 IU、6 IU、9 IU、12 IU,合笼;次日早检栓,48 h后冲胚.结果见栓率为79.17%（38/48）;冲胚结果：3 IU FSH＋3 IU LH、6 IU FSH＋6IU LH、9IUFSH＋9 IU LH、12 IU FSH＋12 IU LH组平均每只小鼠获可用胚分别为5.67（68/12）枚、13.00（156/12）枚、29.17（350/12）枚、11.50（138/12）枚;且9 IU FSH＋9 IU LH组与其余三组的超排效果差异均极显著（P＜0.01）.     

C57BL/6J小鼠超数排卵的研究

为冻伤治疗提供参考而建立了兔冻伤模型。方法是将银圆在液氮中冷却至-196℃后紧贴兔皮肤3、5、10s，分别观察其致伤结果，致冻3s可使兔皮肤发生Ⅱ度冻伤的病理改变；致冻5s则可使兔皮肤发生Ⅱ度-深Ⅱ度冻伤；而致冻10s可造成深Ⅱ度以上病理改变。结果表明，致冻5s所造成的Ⅱ度-深Ⅱ冻伤可作为标准建立动物模型。     

小鼠胚胎冷冻保存技术研究进展

随着生物工程小鼠的大量出现，建立一种完善的胚胎冷冻保存技术体系保存这些资源至关重要。自20世纪70年代对小鼠胚胎冻存成功以来，胚胎冷冻技术已得到飞速发展。目前研究焦点在于寻找更好的冷冻保护剂和简化操作方法等方面。本文对小鼠胚胎冷冻保存技术的冷冻保护剂、冷冻方法及所涉及的主要原理和目前的研究进展进行了评述。     

不同日龄和品系小鼠超排卵、体外受精及受孕率的比较研究

用PMSG和HCG分别对不同日龄(28日龄、56日龄和112日龄)的ICR,B6C3F1和C57BL/6J三个品系小鼠进行超排处理,并分别进行IVF(体外受精)及体外培养后将2-细胞期的胚胎移植至假孕受体的输卵管中,以此比较不同日龄和品系小鼠的超排、体外受精率和受孕率.结果显示,三个品系的28日龄小鼠的排卵数均高于56日龄和112日龄的排卵数(P<0.01),但品系和年龄并不影响卵母细胞在体外受精后形成2-细胞胚胎的受精率(平均约为91%的受精率),以及这些正常的胚胎在移植至受体后的受孕率(约51%左右).     

反复超促排卵对老龄小鼠生殖能力的影响

目的 探索反复促排卵对老龄小鼠生殖功能的影响。方法 30只7月龄雌性C57BL/6小鼠,随机分成对照组与模型组,模型组予孕马血清促性腺激素（（Pregnant Mare Serum Gonadotropin, PMSG）腹腔注射,隔48小时后注射人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,HCG）,隔周一次,连续4周,建立反复超促排卵老龄小鼠模型;对照组仅在第四周注射PMSG、HCG促排卵。第4次促排卵16小时后检测对照组、模型组小鼠血清雌二醇（estrogen ,E2）、孕酮（P）、抑制素B（Inhibin-B ,INHB）水平;HE染色卵巢组织形态学变化,透射电镜观察颗粒细胞超微结构;RT-qPCR检测卵巢JNK、BAX、P53、FOXO3a等基因的表达;体式显微镜下观察卵母细胞形态并检测其活性氧ROS水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠血清E2、P、INHB均显著降低P<0.01）,卵巢原始卵泡显著减少（P<0.01）、发育卵泡亦减少（P<0.05）,黄体数量显著增加（P<0.05）;模型组小鼠卵巢颗粒细胞中嵴模糊及空泡征的线粒体明显增多（P<0.01）;JNK、BAX、P53水平较对照组显著增加（P<0.05）,FOXO3a水平较对照组降低（P<0.01）;同时,模型组小鼠的卵母细胞碎裂率及ROS水平均显著增加（P<0.01）。结论 经历4周连续超促排的老龄小鼠卵巢储备功能下降,可获得的卵子质量和数量减少,可能与连续超促排卵导致卵泡内ROS积聚,卵巢氧化应激水平激增,JNK、BAX、P53等凋亡相关基因表达增加,颗粒细胞线粒体功能紊乱有关。由过度氧化应激反应导致这一系列变化后最终导致老龄小鼠卵母细胞质量降低甚至碎裂。