miR-9-5p在乳腺癌组织中的表达与生物信息学分析

目的 探讨miR-9-5p在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,预测miR-9-5p靶基因并分析其在乳腺癌进展中的作用。方法 通过实时荧光定量PCR检测83例乳腺癌和癌旁正常组织中miR-9-5p的相对表达量。分析miR-9-5p表达水平与乳腺癌患者临床病理特征的关系。使用生物信息学方法预测miR-9-5p的靶基因并筛选关键节点基因,并对靶基因进行富集分析。结果 miR-9-5p在乳腺癌组织中的表达高于癌旁正常组织[1.45(0.41,4.72)vs 1.01(0.35,3.68),P<0.01],其表达水平与乳腺癌组织学级别、肿瘤大小、雌激素受体状态、孕激素受体状态、Ki67增殖指数和分子分型有关(P<0.05),与年龄、肿瘤部位、TNM分期、淋巴结转移情况和人表皮生长因子受体2状态无关(P>0.05)。miR-9-5p在80.95%(17/21)的三阴性乳腺癌、32.56%(14/43)的管腔型乳腺癌呈高表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。生物信息学方法预测的靶基因有138个,并筛选出SIRT1、BCL6、FOXP1等关键节点基因。miR-9-...     

microRNA-137在神经胶质瘤中的作用机制

microRNA-137（miR-137，微小RNA-137）在许多肿瘤中特别是神经胶质瘤中表达异常，其通过靶向调节CDK6、Rac1、MRGBP、Notch1等基因以及PTP4A3、FOXK1基因介导的信号通路参与神经胶质瘤细胞的增殖、代谢、周期调控、侵袭及患者预后。该文章重点讨论miR-137在神经胶质瘤中的几种特殊的作用机制，进一步了解了miR-137的潜在功能，为神经胶质瘤的诊疗提供新思路。     

COCH基因与miR-96的相关性研究

目的研究COCH基因与小分子RNAmiR-96的相互作用,探讨miR-96的表达变化是否对COCH基因有影响。方法在细胞水平上,转染miR-96的miRNA模拟物和miRNA抑制物而改变miR-96的表达水平,通过荧光定量PCR检测COCH基因的表达变化情况。结果 miR-96的表达变化与COCH基因的表达变化呈正相关关系。结论结果显示miR-96并没有对COCH基因进行负调控,而是呈现协同作用,甚至miR-96有可能作用于其他相关因子而导致COCH基因表达上调,从而影响COCH基因在耳蜗及前庭功能变化中的作用。     

miR-31调控PAX9对肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的 研究miR-31调控配对盒基因9(PAX9)对肺癌细胞侵袭和增殖能力的影响.方法 运用免疫组织化学检测肺癌组织和癌旁正常组织PAX9蛋白的表达;运用荧光定量PCR检测肺癌组织、癌旁正常组织和肺癌细胞株M14中miR-31的表达.通过转染miR-31-inhibitor下调M14细胞中miR-31的表达,双荧光素酶活性检测miR-31对PAX9转录活性的影响;Transwell侵袭实验检测miR-31对M14细胞的侵袭能力的影响;平板克隆实验检测miR-31对M14细胞的增殖能力的影响.结果 与癌旁正常组织比较,PAX9蛋白在肺癌组织中表达降低,miR-31在肺癌组织中表达明显升高(P<0.05);双荧光素酶活性检测结果显示,miR-31可以直接调控PAX9的转录活性;抑制miR-31的表达后,肺癌细胞株M14的PAX9蛋白表达水平上调,侵袭和转移能力明显降低(P<0.05).结论 miR-31靶向PAX9的表达,从而调控肺癌细胞的侵袭和增殖能力.     

时钟基因Rev-erbα在疾病中作用的研究进展

Rev-erbα是生物钟系统的时钟基因,广泛表达于生物体各组织器官。作为核受体超家族中的成员,Rev-erbα可被GSK4112,SR9009,SR9011和SR8278等配体调控并发挥转录抑制作用。研究表明,Rev-erbα可通过调控脂质代谢、抑制炎症反应和氧化应激及增强β淀粉样蛋白的吞噬在心脑血管疾病和神经退行性疾病的发生发展中发挥重要的作用。此外,Rev-erbα可通过抑制自噬和细胞增殖发挥抗癌作用。Rev-erbα的配体被广泛应用于多种疾病的防治研究中。本文对Rev-erbα及其配体在心脑血管疾病、神经退行性疾病和癌症等疾病中的作用进行综述,同时对Rev-erbα作为药物靶标的可行性作简要探讨。     

下调miR-374a通过靶向TCF21抑制宫颈癌细胞SiHa增殖、迁移、侵袭的分子机制

摘要：目的:阐明下调miR-374a靶向转录因子21（TCF21）调控宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的分子机制。方法:采用Realtime PCR法检测微小RNA（miR）-374a在正常宫颈上皮细胞和宫颈癌细胞中的表达变化。在宫颈癌细胞Si Ha中转染miR-374a inhibitor,MTT检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞侵袭以及迁移能力变化,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白表达变化。在线靶基因预测软件预测miR-374a的靶基因可能为TCF21,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。在宫颈癌细胞Si Ha中共转染miR-374a inhibitor和TCF21 siRNA,检测细胞增殖、侵袭、迁移变化。结果:miR-374a在正常宫颈上皮细胞中的表达水平明显低于宫颈癌细胞。转染miR-374a inhibitor后的宫颈癌细胞Si Ha增殖、迁移和侵袭能力下降,细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达减少。miR-374a靶向负调控TCF21表达。TCF21 siRNA逆转miR-374a inhibitor对宫颈癌细胞Si Ha增殖、侵袭和迁移的抑制作用。结论:下调miR-374a通过靶向TCF21抑制宫颈癌细胞Si Ha增殖、迁移、侵袭。     

基质金属蛋白酶及抑制剂在伴有神经周浸润的胰腺癌组织中的表达

目的研究基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9和其抑制剂TIMP-2基因和蛋白在伴有神经浸润的胰腺癌组织中的特异表达。方法实验分为癌旁对照组、有神经周浸润的胰腺癌组,采用q PCR和Western印迹法检测各组MMP-2、MMP-9和TIMP-2基因和蛋白表达的变化。结果与癌旁对照组相比,有神经浸润的胰腺癌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2 mRNA的表达均显著增加,MMP-9和TIMP-2总蛋白的表达显著增加,MMP-2在癌旁组织和肿瘤组织中蛋白的表达无明显差异。结论 MMP-9和TIMP-2基因和蛋白在有神经周浸润的胰腺癌组织的表达显著增加。     

MicroRNA-21表达调控研究

MicroRNAs(miRNAs)是一类广泛存在于真核细胞中的长约22 nt的非蛋白编码的、单链RNA,具有转录后基因调控的功能,与细胞分化、生长以及代谢等多种生物学过程的调节有关。研究发现,人体很多肿瘤中都存在miRNA的差异表达。而在这些差异表达的miRNA中,又以miR-21(miRNA-21)较为特殊。因为miR-21在几乎所有实体肿瘤中都存在高表达,而且高表达的miR-21可能发挥类似原癌基因的作用。miR-21通过负调节靶基因增加肿瘤细胞的增殖、凋亡以及肿瘤侵入转移,这些靶基因有PTEN、PDCD4、RECK等等。该文主要介绍miR-21在肿瘤中的作用、调节机制,以及作为靶基因在肿瘤的治疗中的临床意义。     

研究miR-1256和miR143基因对人肾透明细胞癌的调控作用

目的探讨miR-1256和miR143基因在人肾透明细胞癌组织中的调控及其临床意义。方法应用RT-PCR的方法从转录水平对36例原发性散发的肾细胞癌和36例正常肾组织中miR-1256和miR143进行检测,采用Western-Blot方法从蛋白质水平来检测miR-1256和miR143基因在肾透明细胞中的调控和表达情况。结果研究结果 miR-1256在肾透明细胞的癌标本组织中的表达明显比对照组织中的低很多,两组差异比较具有统计学意义(P<0.05);miR143在肾透明细胞的癌标本组织中的表达也明显比对照组织低很多,两组差异比较具有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-1256和miR143基因的表达情况研究能对肾透明细胞癌的发生和发展有重要临床指导意义。     

3T3-L1前脂肪细胞分化过程中miRNAs基因的表达变化

目的:探讨3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中miRNAs基因的表达变化。方法:运用经典的"激素鸡尾酒"法建立3T3-L1前脂肪细胞分化模型。采用实时定量聚合酶链式反应方法检测不同时相点(0d、2h、2d、4d)细胞分化相关标志物的表达和20种miRNAs的表达变化,采用生物信息学方法对变化显著的miRNAs进行靶基因预测。结果:成功建立3T3-L1前脂肪细胞分化模型。不同时相点细胞分化相关标志物基因水平提示3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞。20种miRNAs中以miR-126、miR-214、miR-320、miR-351的表达最为显著。靶基因预测结果显示,miR-126靶基因有影响细胞增殖的转录因子Crk、代谢相关基因Irs1等;miR-214靶基因有转录因子Zbtb20、Kpna1等;miR-320靶基因有影响代谢相关基因Igf2bp3、Gxylt1等;miR-351靶基因有Myt1、Mcl1、Bmf等。结论:miR-126、miR-214、miR-320、miR-351可通过影响基因转录及细胞代谢水平,从而对3T3-L1前脂肪细胞分化发挥作用,为开发治疗肥胖等疾病的新药提供了新的研究思路。     

miR-7和miR-153抑制α-syn表达在百草枯诱导多巴胺能神经元损伤中的作用机制

目的探讨miRNA-7和miRNA-153在百草枯(PQ)诱导多巴胺能神经元损伤中抑制α-syn表达的作用机制。方法运用TargetScan和HMDD等基因预测软件预测miR-7和miR-153与α-synuclein蛋白编码基因(SNCA)结合位点及与帕金森病相关性。选择高表达内源性α-syn的HEK293T细胞作为转染细胞株,采用化学合成miRNAs模拟物和抑制剂转染HEK293T细胞调控其miR-7和miR-153表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞α-syn基因与蛋白表达水平,观察miR-7和miR-153与内源性α-syn基因表达的关系;为了进一步研究在环境化学物PQ诱导下miR-7和miR-153对α-syn基因的调控作用,以人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)作为多巴胺能神经元体外模型,不同浓度PQ(0、25、50、100、200、400和800μmol/L)处理细胞24 h, 100μmol/L PQ处理细胞不同时间(0、12、24、36、48、60和72 h),CCK8法检测细胞增殖活性;RT-qPCR检测miR-7、miR-153表达,Western blot检测α-syn蛋白表达水平;对多巴胺能神经元分别转染miRNA模拟物和miRNA抑制剂后再进行PQ诱导24 h, Western blot和RT-qPCR检测α-syn蛋白及基因表达水平。结果生物信息学分析显示,α-syn编码基因(SNCA) 3′-UTR有两个片段能够与miR-7(序列120～127)和miR-153(序列459～465)结合;上调HEK293T细胞miR-7和miR-153表达后,α-syn基因和蛋白表达水平均明显下降,尤其在100 nmol/L浓度下降明显(P0.05);相反,抑制miRNA表达后α-syn基因和蛋白表达水平升高(P0.05),说明miR-7和miR-153能够靶向下调α-syn基因进而抑制α-syn蛋白表达。进一步使用外源化学物PQ处理多巴胺能神经元,染毒组细胞增殖活性随剂量和时间的增加而下降(P0.05);细胞内α-syn蛋白表达水平升高(P0.05);而miR-7和miR-153表达水平明显降低(P0.05);向细胞转染miRNA模拟物以上调miRNA表达后,α-syn mRNA和蛋白表达均被抑制(P0.05),而转染miRNA抑制剂抑制miRNA表达,α-syn mRNA及蛋白表达增加(P0.05)。结论 MiR-7、miR-153在PQ诱导多巴胺能神经元损伤中抑制了α-syn基因及蛋白表达。     

MicroRNAs在结直肠炎癌转化过程中的作用

结直肠癌是全世界第三大常见癌症, 炎症性肠病是导致结直肠癌发生的关键因素之一。MicroRNAs是一类小的非编码RNA, 在维持肠道稳态和调节各种病理生理状况方面起着至关重要的作用。然而, microRNAs在结直肠炎癌转化过程中的作用尚不清楚。本综述的目的是总结结直肠癌中低表达的(miR-126、miR-320、miR-148/152、miR-146a、miR-370-3p、miR-449a、miR-200b、miR-193a-3p、miR-139-5p和miR-124)和高表达的(miR-21、miR-155、miR-31、miR-19a、miR18a、miR-301a和miR-214)microRNAs, 以及它们在结肠炎恶性转化中的作用, 这些microRNAs的不同表达可用于结肠炎相关性结直肠癌的早期预防、诊断和精确治疗。     

肺腺癌细胞PC9/GR中miR-21抑制剂可逆转吉非替尼耐药

目的 本研究的目的是筛选及鉴定肺腺癌细胞中与吉非替尼耐药相关的miRNA.方法 RT-PCR验证肺腺癌细胞株PC9与其吉非替尼耐药细胞株PC9/GR中miR-21、miR-7、miR-128、miR-574-3p、miR-542-5p的表达差异;将miRNA的模拟物/抑制剂转染至耐药细胞株PC9/GR中,使miRNA的表达水平恢复至PC9中的水平;CCK8法检测PC9/GR中miRNA表达水平恢复后对吉非替尼敏感性的变化.结果 RT-PCR检测miR-21在PC9/GR中高表达,miR-7、miR-128、miR-574-3p、miR-542-5p在PC9/GR中低表达;将miRNA的模拟物/抑制剂转染至耐药细胞株PC9/GR中,发现miR-21抑制剂可增加吉非替尼敏感性约9.64％,P＜0.05.结论 miR-21抑制剂可逆转肺腺癌细胞PC9/GR对吉非替尼的耐药.     

帕金森病患者脑脊液中miR-9a的表达及其临床意义

目的研究miR-9a在帕金森病(PD)患者脑脊液中的表达,为帕金森病的早期诊断提供临床检测指标。方法采用实时荧光定量PCR检测42例PD患者、24例普通头痛患者和24例健康人脑脊液中miR-9a表达水平情况。分析脑脊液中miR-9a表达水平与PD相关临床指标的关系。结果 PD组患者脑脊液中miR-9a表达水平明显高于头痛组和健康对照组(P<0.05),且PD患者脑脊液中miR-9a表达与帕金森综合评分量表(UPDRS)分级呈正相关(r=0.70,P<0.05)。ROC曲线确诊PD患者的脑脊液miR-9a临界值为0.667,其诊断敏感度为85.7%,特异度为77.9%。结论脑脊液miR-9a的检测不仅有助于PD的诊断,也可能作为判断PD病情的指标之一。     

血清miR-429作为胰腺癌潜在诊断生物标志物的价值研究

目的 探讨miR-429作为胰腺癌潜在诊断标志物的可能性.方法 利用癌症基因图谱(TCGA)及基因表达谱(GEO)数据库分析了miR-429在胰腺癌组织及血清中的表达.使用RT-qPCR检测50例胰腺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-429的表达,并检测了30例胰腺癌患者及30例健康者血清中miR-429的表达.利用相关...     

MicroRNA-21在心血管疾病中的作用

MicroRNA-21(miR-21)广泛表达于多种组织,并且参与多种疾病的发生发展。近期研究表明,miR-21的表达在多种心血管疾病时发生改变,如动脉粥样硬化、肺动脉高压、心衰、心肌缺血等。MiR-21也参与调节血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、心肌细胞、心肌成纤维细胞的功能。MiR-21通过抑制多种靶基因的表达参与上述作用。越来越多的证据表明,miR-21在心血管疾病中发挥重要作用,可能是治疗心血管疾病的新靶点。     

miR-212对疾病基因表达调控的研究进展

miRNAs是存在于动植物中的一类RNA分子,每一个miRNA可以调节一个或多个基因,具有十分复杂的调节网络.根据现有研究,miRNA至少调节人类1/3的基因.miR-212是一种新发现的miRNA,它的表达在人类某些疾病的发生、发展过程中起到了非常重要的作用,在阐释相关疾病的发病机制、筛选诊断标志物、疾病的治疗、新药...     

MicroRNA-503抑制乳腺癌细胞增殖的作用及其机制研究

目的　观察miR-503 对乳腺癌细胞增殖的影响并探讨其作用机制。方法　收集35 对乳腺癌及癌旁组织,利用实时荧光定量 PCR 法检测和比较其miR-503 的表达。选择体外培养的乳腺癌T47D 细胞系,分别转染miR-503 模拟物和miR 阴性对照模拟物(miR-NC),构建miR-503 和miR-NC 过表达细胞系。同时,利用荧光素酶报告基因检测法探索miR-503 的下游靶基因。转染miR-503 靶基因的真核表达质粒于上述两种T47D 细胞系中,通过MTT 检测细胞活力变化。结果　miR-503在乳腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织。过表达miR-503 能显著降低乳腺癌 T47D 细胞的增殖。胰岛素样生长因子1型受体（IGF-1R）是miR-503 的靶基因,其在T47D 细胞中的蛋白表达水平被miR-503 负调控,上调IGF-1R 的表达能显著逆转miR-503 对T47D 细胞增殖的抑制作用。结论　miR-503 通过负调控IGF-1R 的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。     

大鼠miR-142-3p、 miR-145-3p表达模式分析

摘要： 目的 筛选并鉴定对大鼠乳腺发育和泌乳调控起关键作用的微 RNAs （miRNAs）。方法 以 U6 为内参基因, 运用实时荧光定量 PCR, 比较 miR-142-3p、 miR-145-3p 在泌乳 21 d 大鼠乳腺、 肝、 心、 脾、 肺、 肾、 卵巢、 子宫各器官的组织样品表达量的差异及不同泌乳阶段 （1、 7、 21 d） 乳腺组织 miR-142-3p、 miR-145-3p 的表达规律。结果 miR-142-3p 在泌乳 21 d 各组织的表达存在差异, 乳腺中的表达量显著高于心、 脾、 肺、 肾、 卵巢和子宫, 仅次于肝中的表达量 （P < 0.05）。miR-145-3p 在乳腺中的表达量显著高于肝、 脾和肾, 而在心、 肺、 卵巢和子宫中差异无统计学意义 （P > 0.05）。乳腺组织在泌乳 1、 7、 21 d 比较, miR-142-3p 的相对表达量持续下调, 而 miR-145-3p 的相对表达量先下调后上调。结论 miR-142-3p 和 miR-145-3p 在大鼠各组织及不同生理时期存在表达差异; miR-142-3p 可通过调节靶基因催乳素受体 （Prlr） 来调控乳腺的发育和泌乳的形成, miR-145-3p 可能具有与 miR-145、 miR-145-5p 相似的功能。     

microRNA-103b在急性淋巴细胞白血病患者中的表达及意义

目的：微小RNA（ microRNA,miRNA）是一类长度为21-25nt的内源性单链非编码RNA小分子。本研究旨在探讨miR-103b在急性淋巴细胞白血病（ ALL）中的表达及临床意义。方法用实时定量聚合酶链反应（ qRT-PCR）技术检测80例初诊ALL患者和20例正常人骨髓单个核细胞标本中miR-103b的相对表达量,并与患者临床资料进行相关性分析。结果 miR-103b在ALL患者中的相对表达量高于正常对照组（ P ＜0创．05）,但其在急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）及急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）中的表达水平差异无统计学意义（ P ＞0．05）,miR-103b的表达与是否存在bcr-abl融合基因及其mRNA的表达水平无相关性（ P ＞0．05）。结论 miR-103b在ALL患者中表达上调,可作为临床诊断ALL的潜在分子标记物,bcr-abl融合基因的表达对miR-103b在ALL中的表达无明显影响。