圆锥角膜的共焦显微镜表现临床分级

目的 观察临床上不同阶段圆锥角膜的共焦显微镜图像，推测圆锥角膜的病理发展过程，并进行圆锥角膜的共焦显微镜分级。方法 采用共焦显微镜（Confoscan 2．0），观察24例24眼不同发展阶段（lawless分期）圆锥角膜患者的角膜共焦显微镜图像，进行分析并提出焦显微镜下的临床分分期。结果 共焦显微镜下圆锥角膜首先出现了排列规则的裂隙状暗纹，随着病情的不断进展，病变逐渐由角膜后弹力层向前发展，逐渐累及角膜的后基质和前基质，同时角膜基质细胞核拉长、排列出现紊乱，前后基质细胞失去了原有特征。急性圆锥角膜的患者角膜基质细胞出现水肿，角膜瘢痕在共焦显微镜下呈强反光的无细胞样结构。讨论 共焦显微镜下圆锥角膜的病理发展过程，是从角膜后弹力层开始，由后向前发展，逐渐累及角膜的后基质、前期基质，最后角膜破裂引起急性圆锥角膜，角膜出现水肿，愈合后遗留瘢痕。据此提出圆锥角膜共焦显微镜分期将为四个阶段：第一阶段、角膜裂隙样暗纹累及角膜后弹力层；第二阶段、角膜裂隙样暗纹累及角膜后后基质；第三阶段、角膜裂隙样暗纹累及角膜前基质；第四阶段、出现角膜基质水肿或者瘢痕。     

圆锥角膜各期的共焦显微镜表现

目的评价共焦显微镜在圆锥角膜临床研究中的应用价值。方法应用共焦显微镜观察圆锥角膜患者32例（48眼）及正常对照组17例（28眼），分别比较早、中、晚期圆锥角膜与正常对照组的图像特点。结果早期圆锥角膜出现激活状态的角膜细胞、浅基质层的细小皱褶、深基质层的暗纹、部分内皮细胞异形性明显，中、晚期圆锥角膜出现角膜上皮细胞拉伸、细胞核皱缩；基质细胞排列紊乱、基质层暗纹；而对照组未发现上述表现。各期圆锥角膜的角膜基质层厚度、不同深度角膜基质细胞密度、内皮细胞密度与对照组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论共焦显微镜对早期圆锥角膜的发现以及圆锥角膜病理发展的研究具有重要的临床价值。     

圆锥角膜对侧无明显改变眼的共焦显微镜所见

目的　了解圆锥角膜患者对侧无明显临床改变眼的共焦显微镜的影像特点 ,探索共焦显微镜在早期圆锥角膜的临床检查中的意义和诊断价值。方法　前瞻性的应用共焦显微镜研究评价37例圆锥角膜患者对侧眼无明显临床改变者、 6 2例中高度近视和 4 3例中高度近视角膜接触镜佩戴者作对照 ,比较各组之间的图像、角膜基质、内皮细胞的密度等。结果　圆锥角膜对侧眼无明显临床改变者组和中高度近视组、中高度近视接触镜组比较 ,其年龄、近视度数、散光度数均无统计学差异(均P >0 .0 5)。共焦显微镜检查中发现圆锥角膜患者对侧眼无明显临床改变者组中有 8例出现前或后基质暗纹 ,对照组角膜没有发现类似的改变。角膜内皮细胞密度和角膜前、中、后基质细胞密度在早期圆锥角膜与对照组之间无明显统计学差异 (均P >0 .0 5)。各组间上皮下神经的形态结构没有明显差别。结论　共焦显微镜可活体检查圆锥角膜组织结构和细胞的改变 ,是一种新的临床检测手段 ,它为早期圆锥角膜的诊断提供了一种新的思路 ,具有一定的诊断价值。     

活体共焦显微镜对结膜滤过泡在细胞水平的研究

目的 应用活体共焦显微镜对小梁切除术后结膜滤过泡的组织病理学改变进行细胞水平的观察,研究结膜滤过泡形成的影响因素并进一步探讨滤过性手术的滤过机制.方法 对小梁切除术后3周至510周的59例患者共86只眼行裂隙灯、眼压及活体共焦显微镜检查.将受试眼的滤过泡分为两种类型:①功能性滤过泡型(43只眼);②非功能性滤过泡型(43只眼).根据术中是否使用过MMC再将各型滤过泡分为Normal组与MMC组.对各组滤过泡中微囊泡的大小、数量、结缔组织的密度进行统计学分析.结果功能性滤过泡中含有大量透明的微囊泡,上皮下存在比较疏松的结缔组织;而非功能性滤过泡中没有或仅有少许透明度较低的微囊泡,结缔组织极致密;功能性滤过泡中出现新生血管的比例远远小于非功能性滤过泡.与Normal组相比较术中联合应用MMC的功能性滤过泡中含有大量直径较大、壁薄的微囊泡,其上皮下结缔组织较疏松,各层组织内均可见大量高反光颗粒;而术中联合应用MMC的非功能性滤过泡仅结缔组织比Normal组疏松.结论 活体共焦显微镜检查能对结膜滤过泡进行诊断成像,是一种与来自离体组织学检查结果完全吻合的新的活体检查方法 ,对将来提高滤过性手术的成功率具有直接的指导作用.     

共焦显微镜对活体Francois角膜营养不良中央混浊的观察

目的：报告用共焦显微镜观察活体Francois角膜营养不良中央混浊的结果。方法：2位不相关的患者，一位78岁男性和一位75岁女性。均患有Francois角膜营养不良伴中央混浊，用常规裂隙灯活体显微镜和共焦显微镜进行检查。     

Sjoegren综合征患者的角膜激光共焦显微镜活体观察

目的应用激光共焦显微镜观察Sjoegren综合征（SS）患者角膜各层的形态改变。方法应用激光共焦显微镜对15例（30眼）SS患者和15例（30眼）同龄正常对照组的角膜进行检查，获取角膜全层图像，并进行比较、分析。结果与对照组相比，SS组角膜上皮各层细胞密度均明显下降，并出现炎性细胞和树突状细胞浸润。角膜基质细胞呈多突起星状，细胞体积增大，胞核反光减弱，胞质反光增强，浅基质出现炎性细胞浸润。SS组较对照组角膜上皮下神经纤维变细，弯曲度变大，走行方向明显改变，部分神经纤维断裂。结论SS患者不仅角膜上皮、浅基质细胞、上皮下神经出现明显改变，且角膜基质细胞形态与角膜免疫状态均出现异常。     

三种实验动物角膜活体共焦显微镜检测的比较解剖学研究

背景 海德堡视网膜厚度分析仪和角膜模块的结合实现了对眼表活体组织结构的非侵入性检查,利用共焦显微镜对常用实验动物角膜结构进行比较研究可为相关研究提供依据.目的 利用活体共焦显微镜比较新西兰大白兔、Lewis大鼠、Swiss小鼠的角膜结构,建立实验动物角膜的活体组织图像资料,为共焦显微镜的实验研究提供依据.方法 利用海德堡视网膜厚度分析仪(HRT-Ⅱ)的Rostock角膜模块对新西兰大白兔、Lewis大鼠、Swiss小鼠的角膜进行活体分析,角膜的每一层各采集20张共焦显微镜图片,比较分析实验动物角膜各层的形态学特点及角膜内皮细胞密度.结果 共焦显微镜下3种实验动物角膜表层上皮细胞表现为高反光或低反光的多形细胞,基底上皮细胞表现为暗的细胞质,细胞核不可见,细胞间排列紧密、规则;前弹力层均表现为含有丰富上皮下神经丛的无定形物质.兔角膜基质层在黑色背景中散布着高反光物质,即为角膜基质细胞核,后基质层细胞密度高于前基质层;大鼠和小鼠的角膜基质层仅观察到大量反光的星形结构,无明显的细胞核.3种实验动物的角膜内皮细胞形态相似,均表现为高反光的胞体,边界较暗且细胞排列成蜂窝状.新西兰兔前基质角膜细胞密度中位数为387.5个/mm2,后基质角膜细胞密度中位数为223.5个/mm2,明显少于前基质的细胞密度(U=0.000,P=0.000);新西兰兔、Lewis大鼠、Swiss小鼠角膜内皮细胞密度中位数分别为2192.5、1936.0、1565.0个/mm2,总体差异有统计学意义(H=49.940,P=0.000),兔角膜内皮细胞密度明显高于大鼠和小鼠,差异均有统计学意义(x2=0.000,P=0.000;x2=0.000,P=0.000),大鼠和小鼠的角膜内皮细胞密度差异亦有统计学意义(x2=0.000,P=0.000).结论 共焦显微镜下新西兰大白兔、Lewis大鼠、Swiss小鼠角膜各层的细胞形态相似,但内皮细胞密度和基质细胞形态之间存在明显差异.HRT-Ⅱ的Rostock角膜模块可为动物实验提供角膜各层次的高分辨率图像.     

共焦显微镜——开启干眼诊疗的细胞水平时代

活体共焦显微镜（IVCM）能活体无创观察角膜上皮、基质细胞、免疫炎症细胞、神经,以及结膜、睫毛毛囊、睑板腺等组织结构,并进行客观量化分析,从而帮助从细胞水平对干眼进行早期诊断、细化分型、明确病因、治疗指导、预后判断等,为干眼诊疗开启了一个全新的时代。     

Sjgren综合征患者的角膜激光共焦显微镜活体观察

目的应用激光共焦显微镜观察Sjgren综合征(SS)患者角膜各层的形态改变。方法应用激光共焦显微镜对15例(30眼)SS患者和15例(30眼)同龄正常对照组的角膜进行检查,获取角膜全层图像,并进行比较、分析。结果与对照组相比,SS组角膜上皮各层细胞密度均明显下降,并出现炎性细胞和树突状细胞浸润。角膜基质细胞呈多突起星状,细胞体积增大,胞核反光减弱,胞质反光增强,浅基质出现炎性细胞浸润。SS组较对照组角膜上皮下神经纤维变细,弯曲度变大,走行方向明显改变,部分神经纤维断裂。结论SS患者不仅角膜上皮、浅基质细胞、上皮下神经出现明显改变,且角膜基质细胞形态与角膜免疫状态均出现异常。     

Sj(o)gren综合征患者的角膜激光共焦显微镜活体观察

目的 应用激光共焦显微镜观察Sjogren综合征(SS)患者角膜各层的形态改变.方法应用激光共焦显微镜对15例(30眼)SS患者和15例(30眼)同龄正常对照组的角膜进行检查,获取角膜全层图像,并进行比较、分析. 结果与对照组相比,SS组角膜上皮各层细胞密度均明显下降,并出现炎性细胞和树突状细胞浸润.角膜基质细胞呈多突起星状,细胞体积增大,胞核反光减弱,胞质反光增强,浅基质出现炎性细胞浸润.SS组较对照组角膜上皮下神经纤维变细,弯曲度变大,走行方向明显改变,部分神经纤维断裂.结论 SS患者不仅角膜上皮、浅基质细胞、上皮下神经出现明显改变,且角膜基质细胞形态与角膜免疫状态均出现异常.     

全植床深板层角膜移植术后角膜上皮基底细胞的共焦显微镜活体动态观察

目的通过对全植床深板层角膜移植术（FBDLK）后不同时期角膜上皮基底细胞的观察，了解角膜基底上皮在经冰冻保存过的角膜材料表面上的重建过程。方法20例（20眼）行FBDLK的患者在术后的不同时期分别进行裂隙式角膜共焦显微镜检查。对所得的清晰的角膜基底细胞的图像进行“反色”法电脑自动分析，获得基底细胞密度、细胞面积和细胞多形性变异率等数据并作统计学分析。结果FBDLK术后3～4d，植片表面上皮化已基本完成，此时植片中央区的基底层细胞密度较低，细胞体积较大呈近圆形；至术后15d时，角膜基底细胞的密度、面积和细胞多形性变异率等与正常对照组无明显差异；观察至术后12个月上述指标均保持稳定。结论-20℃冰冻保存角膜材料作为供体行FBDLK术后，植片表面能较快地完成上皮化，上皮基底细胞在术后15d时密度和形态已经恢复正常。     

圆锥角膜患者表面角膜镜片术后镜片细胞和神经重建的活体动态观察

目的：应用共焦显微镜观察圆锥角膜患者表面角膜镜片术（epikeratophakia,EP)后不同时期的镜片组织,了解低温冷冻脱水角膜材料移植后组织细胞和神经重建的动态过程。方法：对24例（24只眼）圆锥角膜患者行EP,应用共焦显微镜分别对术后不同时期的角膜镜片组织细胞、神经重建过程进行活体动态观察,并摄像记录。结果：镜片上皮层：术后3或4d,组织镜片表面已被角膜表层上皮细胞覆盖,镜片边缘可见翼状细胞及形态不规则、低密度的基底细胞;术后1个月,上皮基底细胞完全覆盖角膜镜片;术后6个月,基底细胞密度及形态趋于正常,可见上皮下散在神经丛;术后2年,神经丛形态接近正常。镜片基质层：术后1年内,镜片基质细胞无变化,细胞少、形态不规则;术后2年,镜片边缘偶见正常形态的基质细胞;术后5年,镜片中央仍未见正常形态的基质细胞,镜片前后基质细胞相同。镜片基质神经：术后6个月,有神经干伸入镜片基质内,术后2年,基质神经数量增多;术后5年,基质神经尚未达到正常密度。结果：冷冻的非活性角膜组织行EP后组织镜片各层细胞、神经重建的时间各不相同,但并不影响植片透明度。     

真菌性角膜炎药物治疗后转归的共焦显微镜观察

目的探讨共焦显微镜对判断真菌性角膜炎经抗真菌药物治疗后转归的作用,为调整临床用药和选择治疗方案提供客观依据。方法2001年1月至2003年5月我院诊治的328例真菌性角膜炎患者中,选择共焦显微镜检查发现菌丝,溃疡直径≤5mm患者58例(58只眼),常规给予抗真菌药物治疗。分别在治疗前及治疗后7、14、28d和停药后7d对病灶的特定位点进行共焦显微镜检查,观察局部菌丝密度、炎性细胞密度和形态以及角膜基质细胞的变化,以此判断治疗效果,并根据情况调整用药;对共焦显微镜未查见真菌菌丝及炎性细胞的患者,巩固治疗1周后完全停药,并继续随访2个月,以观察有无真菌复发。结果53例患者在药物治疗7d时有明显好转,病灶缩小,共焦显微镜表现为查到菌丝的位点减少,菌丝密度降低,炎性细胞明显减少,形态趋于均匀,同时可见正常形态的角膜基质细胞出现;14d时,37例溃疡愈合,23例共焦显微镜未查见菌丝和炎性细胞;28d时,所有患者的角膜上皮已完全愈合,其中22例共焦显微镜检查仍可见浅基质中存在少量菌丝或未消退的炎性细胞,其余31例患者均未见菌丝和炎性细胞。以上53例位患者在随访期间均未见复发。另5例在用药7d内病情加重,共焦显微镜下见菌丝密度明显增加,炎性细胞增多,角膜基质破坏范围扩大,提示药物治疗效果不佳,故入院行角膜移植术。结论共焦显微镜检查是目前判断真菌性角膜炎药物治疗后病情转归的理想手段,能够为临床调整用药提供客观依据。(中华眼科杂志,2005,41：614-619)     

板层角膜移植术后全层角膜组织改变的共焦显微镜观察

目的研究活体扳层角膜移植术后角膜各层组织的共焦显微镜(confocal microscopy)形态学改变，方法应用Confoscan 2.0共焦显微镜对板层角膜移植术后3月～3年，角膜植片稳定的患者共17例17眼，进行扫描检查，记录与分析各层角膜图像。结果共焦显微镜上能够清楚地观察到稳定角膜的上皮细胞、基底层细胞、前弹力层，它们同正常角膜的相应细胞在图像上没有显著差别。但植片与植床的基质细胞在共焦显微镜图像上有着明显的差异。板层角膜移植术后稳定角膜植片的基质细胞，细胞核较小呈中等反光，排列较植床的基质细胞紊乱。而角膜植床的基质细胞，细胞核较大也呈中等反光，排列较植片的基质细胞稍整齐，结论1、Confoscan 2.0共焦显微镜可活体检查，板层角膜移植术后角膜组织结构和细胞的病理改变。2、板层角膜移植术后可成功的重建眼表。3、活体板层角膜移植术后稳定角膜上有自体角膜基质细胞与异体的角膜基质细胞同时共存，角膜内发细胞的形态结构正常。4、角膜板层间的不平滑与植片基质细胞结构紊乱可能是导致板层角膜移植术后视力不佳的重要原因。     

激光原位角膜磨镶术后角膜的共焦显微镜研究

目的 通过共焦显微镜对角膜细胞水平的观察,了解激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)后角膜伤口的愈合情况,角膜各层细胞的形态学变化及密度变化,角膜神经纤维的再生情况,以指导手术设计及术后的处理.方法 通过Nidek公司的CONFOSCAN 2.0共焦显微镜观察29例(58眼)接受LASIK手术的患者,将手术前后各时间段的角膜基质细胞密度、内皮细胞密度、角膜细胞激活范围作方差分析,两两比较有无差异;同时观察术后上皮下神经纤维的生长情况.结果 LASIK后1周见多数患眼出现不同程度的前弹力层及浅基质层皱褶,角膜瓣板层切口前后见基质细胞激活,细胞稀疏,排列紊乱,边界不清,层间出现不同程度的高反光颗粒,随时间延长变少.角膜最浅层基质细胞密度较术前下降,直至术后6个月仍未恢复;最深层基质细胞密度与角膜内皮细胞密度较术前无显著性差异.基质激活范围与切削量无相关性(P>0.05),而与角膜瓣厚度呈负相关(r=-0.828,P<0.05),并且随时间延长激活范围减小(r=-0 580,P<0.01);术后第1周大部分未见上皮下神经纤维,少数出现短的无交联神经纤维,术后3个月约半数出现短的上皮下神经纤维,直至术后6个月才出现长的神经纤维,但密度及形态仍未恢复.结论 LASIK手术导致角膜层间出现微小皱褶和碎屑,角膜基质细胞激活,范围随时间减小,并且角膜瓣越薄激活反应范围越广.调整手术相关参数(角膜瓣的厚度、大小、激光切削的深度和范围等)能减轻术后伤口的愈合反应和角膜神经的受损程度,减少术后干眼等并发症,促进术后角膜神经和基质细胞的早期恢复.