灯盏花素对自发性高血压大鼠肾脏保护作用

目的研究灯盏花素对高血压大鼠肾脏的保护作用。方法10周龄自发性高血压大鼠（SHR）随机分为灯盏花素治疗组、氯沙坦治疗组、对照组，分别灌服等容量的灯盏花素、氯沙坦溶液及蒸馏水。4周后测定各组大鼠血压、左心室肥厚指数、尿微量白蛋白排出量及肾脏Na^＋，K^＋-ATPase活性。结果经药物干预后，灯盏花素组大鼠血压无明显改变（P〉0．05），而氯沙坦组大鼠血压显著下降（P〈0．01）；灯盏花素组与对照组比较，左心室肥厚指数下降，24小时尿微量白蛋白排泄量降低，肾脏Na^＋，K^＋-ATPase活性的升高。结论灯盏花素对高血压大鼠肾脏有保护作用，同时对高血压所致的心肌肥厚有一定的防治作用。     

灯盏花素对高糖环境近端小管上皮细胞钠钾ATP酶活性的影响

目的观察灯盏花素（breviscapine,Bre）对高糖环境原代培养的近端小管上皮细胞（proximal tubule epithelial cells,PTEC）钠钾ATP酶（Na^＋,K^＋-ATPase）活性的影响。方法手工微分离法原代培养PTEC,MTT法检测不同浓度的灯盏花素作用72h对PTEC增殖的影响,以确定合适的灯盏花素实验浓度。将细胞分为5组：正常对照组（NC组）、高糖组（HG组）、小剂量灯盏花素组、中剂量灯盏花素组、大剂量灯盏花素组,每组设6个复孔,作用72h。液闪法测定PTEC钠钾ATP酶活性。结果HG组PTEC钠钾ATP酶活性显著高于NC组（P〈0.01）,小剂量组与HG组比较无统计学意义,中剂量组与HG组比较明显降低（P〈0.05）,大剂量组显著降低（P〈0.01）。结论高糖环境下PTEC的钠钾ATP酶活性明显升高;灯盏花素对高糖环境原代PTEC钠钾ATP酶活性的升高有明显的抑制作用;其对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）的防治作用可能部分通过抑制PTEC钠钾ATP酶活性实现。     

灯盏花素对糖尿病大鼠视网膜氧化应激和视网膜细胞凋亡的保护作用

目的：观察灯盏花素（EB）对糖尿病（DM）大鼠视网膜中自由基和视网膜细胞凋亡的影响，探讨EB治疗糖尿病视网膜病变（DR）的机制。方法：选取糖尿病成年Wistar大鼠30只大鼠随机分成单纯DM组和EB治疗组，每组15只。同时设同批次同种属大鼠15只作为空白对照组。EB治疗组，每天用EB100mg／kg灌胃一次；空白对照组和单纯DM组每天用100mg／kg的生理盐水灌胃一次。各组大鼠取眼球作视网膜消化铺片，用酶联免疫分析法检测两维大鼠视网膜细胞凋亡程度。硫代巴比妥酸荧光法检测两组大鼠视网膜组织中脂质过氧化物含量，化学发光法检测两组大鼠视网膜组织中超氧化物歧化酶的活性。结果：①与空白对照组相比，单纯DM组大鼠视网膜细胞溶解液测得的A值明显升高（P〈0．01）；EB治疗组大鼠视网膜细胞溶解液测得的A值较单纯DM组显著降低（P〈0．01），但仍离于空白对照组（P〈0．05）。②与空白对照组相比，单纯DM组大鼠视网膜中脂质过氧化物水平明显升高，EB治疗组大鼠视网膜中脂质过氧化物水平明显降低（P〈0．01），但仍高于空白对照组（P〈0.05）。③与空白对照组相比，单纯DM组大鼠视网膜中超氧化物歧化酶活性显著降低，EB治疗维大鼠视网膜中超氧化物歧化物活性照著升高（P〈0．01），但仍高于空白对照组（P〈0．05）。结论：EB对DR有一定的治疗作用，其机制可能是增强视网膜组织中抗氧化能力和抑制视网膜细胞凋亡。     

黄芪、灯盏花素对实验性糖尿病大鼠肾脏形态学的研究

0 引言糖尿病肾病是糖尿病重要并发症之一,也是导致终末期肾功能衰竭(ERDS)的主要原因.因此,探讨中药对糖尿病肾脏保护作用,为防止糖尿病肾病的发生或延缓肾损害进程尤为重要.我们观察了黄芪、灯盏花素对实验性糖尿病大鼠肾脏的形态学影响.     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏PI3K/AKT传导通路的影响

目的探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏PI3K/AKT传导通路的影响.方法 80只健康昆明种雄性SD大鼠随机分为正常对照组（N）、糖尿病组（DM）各25只和糖尿病灯盏花治疗组（EB）30只.链脲菌素（streptozotocin,STZ）诱导建立糖尿病大鼠模型.EB组灯盏花素20 mg/（kg.d）腹腔内注射,给药后2周和6周处死大鼠,SYBRGreenI荧光定量RT-PCR方法检测各组大鼠肾脏AKT、bax和bcl-2 mRNA的表达.检测血肌酐、尿素氮和血糖水平;肾组织HE,PAS染色比较各组肾小球平均面积（MGPA）、肾小球平均体积（MGV）.结果 （1）肾脏指数、MGPA、MGV为糖尿病组〉灯盏花组〉正常组（P〈0.05）;（2）血肌酐和尿素氮水平为糖尿病组〉灯盏花组〉正常组（P〈0.01）.（3）与正常组比较糖尿病组大鼠肾脏bax、bcl-2 mRNA的表达显著增强,bax/bcl-2的比值明显升高;灯盏花组与糖尿病组比较bcl-2 mRNA表达增强,bax mRNA表达减弱,bax/bcl-2比值降低.AKTmRNA表达,2周各组间无差异,6周EB组较N组增高（P〈0.01）,较DM及2周EB组增高（P〈0.05）.结论高血糖可促进糖尿病大鼠肾脏肥大,影响肾功能;灯盏花素可增加糖尿病大鼠肾脏AKTmRNA的表达,进而增加抗凋亡基因bcl-2的表达,影响NF-κB的表达,抑制糖尿病大鼠肾脏肥大,发挥保护肾功能.     

灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

本研究采用大鼠脑缺血再灌注模型，观察灯盏花素对脑缺血再灌注损伤的保护作用。结果表明，灯盏花素能不同程度地降低脑含水量和ＭＤＡ含量，提高ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性，保护Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性。提示灯盏花素可通过保护脑组织抗氧化酶的活性，抑制脂质过氧化反应，减轻自由基对脑组织的损害对缺血再灌注脑组织的保护作用。     

灯盏花素对急性肺栓塞大鼠的保护作用

目的:观察灯盏花素对急性肺栓塞大鼠的保护作用。方法:将40只健康SD雄性大鼠随机分成4组,即假手术组、模型组、灯盏花素低剂量组与灯盏花素高剂量组,各10只。其中模型组、灯盏花素低剂量组、灯盏花素高剂量组在制备肺栓塞模型时均采用颈总静脉注射自体血栓的方法,假手术组则注射葡萄糖氯化钠注射液。灯盏花素低剂量组、灯盏花素高剂量组腹腔注射灯盏花素进行干预。取大鼠动脉血行血气分析;测定大鼠肺系数、湿质量干质量比(W/D);检测大鼠肺组织丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:灯盏花素高、低剂量组较模型组的氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)水平均升高,灯盏花素高、低剂量组肺系数、W/D、MDA含量较模型组降低,SOD活性较模型组升高。结论:灯盏花素对急性肺栓塞大鼠有保护作用。     

灯盏花素对实验性2型糖尿病大鼠周围神经病变防治作用的研究

目的观察灯盏花素对2型糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用。方法将Wistar大鼠随机分为对照组（10只）、模型组，对照组正常规饮食，模型绀用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素（STZ）注射诱导2型糖尿病，然后把成模大鼠分为2组：糖尿病组、治疗组各14只。治疗组给予灯盏花素10mg·kg^-1·d^-1。分别于用药后1、3个月测定血脂、血糖，坐骨神经运动传导速度，并观察腓肠神经病理改变。结果治疗组大鼠血脂、血糖较糖尿病组明显降低，坐骨神经运动传导速度较糖尿病组明显提高（P〈0．05或P〈0．01），腓肠神经有髓神经纤维数量和纤维总截面积增加，较糖尿病组亦明显加大（P〈0．05 P〈0．01）。结论灯盏花素对实验性2型糖尿病大鼠周尉神经损害有一定防治作用。     

灯盏花素对糖尿病肾病大鼠肾组织MMP-9表达的影响

目的观察灯盏花素对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响。方法 STZ诱导的糖尿病SD大鼠模型,雌性SD大鼠随机分为正常对照组(N)、DN模型组(DN)、DN模型+灯盏花素治疗组(DS)三组。模型建立后,在第12周,测量血糖、24 h尿蛋白定量;12周末处死大鼠,检测尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr);取大鼠肾组织行HE染色,进行病理组织学观察;用免疫组化法检测肾组织MMP-9。结果实验12周末,与DN模型组比较,DS组大鼠24 h尿蛋白定量、BUN、Scr显著降低(P0.05);肾组织病理改变减轻,免疫组化结果显示,肾组织MMP-9明显增加(P0.05)。结论灯盏花素可增加MMP-9表达,降低蛋白尿,保护肾脏功能。提示灯盏花素可能通过调节MMP-9的表达,从而减缓糖尿病肾病的发生和发展。     

灯盏花素对去甲肾上腺素诱导的大鼠心肌c-fos表达的影响

目的了解灯盏花素对去甲肾上腺素(NE)诱导的心肌c-fos基因表达的影响.方法通过离体心脏灌流,采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,测定左心室c-fos表达水平.结果灯盏花素明显减弱NE诱导的大鼠心肌c-fos基因表达.结论灯盏花素可抑制NE诱导的心肌c-fos基因表达.     

依帕司他对早期糖尿病肾病肾小管功能的影响初探

目的：探讨依帕司他对早期糖尿病肾病肾小管功能的作用。方法选取该院于2013年3月—2014年3月收治的糖尿病肾病Ⅲ期患者86例,随机分成两组：治疗组(43例)和对照组(43例),治疗组在严格控制血糖的基础上加用依帕司他治疗,对照组在严格血糖基础上加用安慰剂治疗。分别治疗6个月后,测定尿α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-球蛋白(β2-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)。结果应用依帕司他治疗组肾小管相关指标较对照组均有更明显的好转。结论依帕司他对早期糖尿病肾病肾小管功能损伤有一定的治疗作用。     

自发性高血压大鼠MnPO注射AngⅡ对EDLS释放和近球小管Na+,K+-ATPase活性的影响

目的探讨自发性高血压大鼠（SHR）正中视前核（MnPO）注射AngII对血清内源性洋地黄样物质和肾脏近球小管Na^＋,K^＋-ATPase活性的影响。方法24只雄性SHR随机分为人工脑脊液组、AngⅡ组、Losartan组,同时选用8只雄性WHY大鼠作为正常对照组。用小动物脑立体定位仪在MnPO区定位并中枢微量注射,放射免疫法测定血清内源性洋地黄样物质（EDLS）和血浆AngⅡ水平,立体显微镜下手工微分离近球小管,液体闪烁计数器测定近球小管管周膜上的Na^＋,K^＋-ATPase的活性。结果①MnPO注射AngII后,SHR各组与WHY组比较,血浆AngⅡ水平、血清EDLS水平、近球小管Na^＋,K^＋-ATPase的活性有显著性差异（P〈0.05）。②MnPO注射AngII后,SHR-AngⅡ组与SHR-人工脑脊液组比较,血浆AngⅡ水平无显著变化（P〉0.05）,血清EDLS水平显著升高（P〈0.05）,近球小管Na^＋,K^＋-ATPase的活性显著下降（P〈0.05）。③在MnPO预先用Losartan处理后,SHR-Losartan组与SHR-AngⅡ组比较,血浆AngⅡ水平无显著性改变（P〉0.05）,血清EDLS水平明显低于SHR-AngⅡ组（P〈0.05）,其近球小管Na^＋,K^＋-ATPase的活性明显高于SHR-AngⅡ组（P〈0.05）。④MnPO注射AngⅡ后,SHR-AngⅡ组血清EDLS水平与其近球小管Na^＋,K^＋-ATPase活性呈显著负相关（r=-0.795,P〈0.01）。结论在SHR中,AngⅡ在MnPO的AT1受体介导下,引起高水平EDLS释放,从而抑制近球小管Na^＋,K^＋-ATPase活性的作用可能与SHR本身调节机制上调有关。     

小檗碱对糖尿病大鼠早期肾脏高滤过状态的干预作用

目的研究小檗碱对糖尿病大鼠早期肾脏血流动力学的干预作用及其可能机制。方法利用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射诱导建立大鼠1型糖尿病模型，将Wistar大鼠随机分为5组，分别为正常组、模型组、卡托普利组（50mS／kg．d）、低剂量小檗碱组（9．375mg／kg.d）和高剂量小檗碱组（28．125ms／kg．d）。病程4周时处死动物，取血、尿和肾脏标本，测定尿量、肾重／体重比值；测定血糖、尿微量白蛋白、肌酐清除率、肾组织一氧化氮（nitricoxide，NO）水平及诱导性一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）活性，免疫组化方法检测肾组织iNOS蛋白的表达，并通过光镜观察肾脏的病理结构变化。结果模型组大鼠尿量、肾重／体重比值、血糖、尿微量白蛋白、肌酐清除率、肾组织NO水平、肾组织iNOS活性及蛋白的表达、肾小球系膜及基底膜相对面积均显著大于正常组（P〈0．05）；卡托普利组和低剂量小檗碱组中大鼠的上述指标比糖尿病组的显著减少（P〈0．05），但与正常组相比差异无显著性（P〉0．05）；高剂量小檗碱组对上述指标有部分改善作用。结论小檗碱能延缓糖尿病大鼠早期肾脏结构和功能损害的进程，其机制可能与小檗碱抑制糖尿病大鼠肾组织iNOS蛋白的表达从而抑制NO的产生有关。     

坎地沙坦对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的:探讨坎地沙坦对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(Vi mentin)表达的影响。方法:雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ,60 mg/kg)诱导糖尿病模型后,随机分为糖尿病组和坎地沙坦组。正常对照组仅注射等剂量溶媒。16周后观察各组血糖(BS)、肾重/体重(KW/BW)、24h尿白蛋白排泄率(AER)、肌酐清除率(Ccr)。PAS染色观察肾脏病理形态学变化;免疫组化观察肾组织α-SMA和Vi mentin表达的变化。结果:与对照组相比,糖尿病组大鼠BS、KW/BW、AER、Ccr及间质纤维化损伤均显著上升(P<0.01),坎地沙坦组上述指标除血糖外均明显改善,与对照组相比,α-SMA和Vi mentin在肾小管上皮表达均明显上调(P<0.01),结果表明,坎地沙坦治疗阻止了二者在糖尿病大鼠肾脏的高表达。结论:坎地沙坦能显著下调糖尿病大鼠肾小管α-SMA和Vi mentin表达,阻抑肾小管上皮细胞转分化。     

山茱萸环烯醚萜总苷对糖尿病大鼠肾形态学及其Na+,K+-ATP酶活性的影响

目的：从形态学及蛋白酶的角度探讨山茱萸环烯醚萜总苷（ICO）防治糖尿病肾病（DN）的作用。方法：腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病大鼠模型，将造模成功的大鼠按血糖值随机分为模型组、氨基胍组和ICO组，同期另没一正常组，各组连续灌胃12周。实验结束后用光镜观察肾形态学变化，试剂盒测定肾组织细胞膜Na^＋，K^＋-ATP酶的活性。结果：模型组大鼠肾脏光镜检查肾小球和肾小管病变明显。而且肾组织细胞膜Na^＋，K^＋-ATP酶活性低于正常组。而ICO组病变明显减轻，表现出较好的抗肾小球内基质增生、抗肾小管坏死和改善Na^＋，K^＋-ATP酶活性等作用。结论：ICO可改善糖尿病大鼠肾组织形态学病变及修复Na^＋，K^＋-ATP酶活性，对DN所引起的结构和功能改变都具有一定的防治作用。     

夹竹桃甙对Na~+、K~+-ATP酶抑制的动力学研究

本文对夹竹桃甙抑制Na~+、K~+-ATP酶的动力学作了探讨,并与乌本甙的作用进行了比较。结果表明:夹竹桃甙抑制Na~+、K~+-ATP酶,在Na~+、K~+浓度改变对均为非竞争性抑制,Na~+/K~+比例6:1时,为混合性抑制,而ATP对夹竹桃甙的作用几无影响。     

氯胺酮对大鼠大脑皮层和丘脑突触体Na^＋K^＋—ATP酶活性的影响

目的动态观察氯胺酮对大鼠大脑皮层和丘脑Na+,K+-ATP酶活性的影响.方法SD大鼠32只,随机分为对照组、麻醉组、恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组.对照组腹腔注射生理盐水10ml·kg-1,其余各组均为腹腔注射氯胺酮1100mg·kg-1.对照组腹腔注射生理盐水后10min断头,麻醉组、恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组分别在大鼠翻正反射消失后10min、翻正反射恢复后和完全清醒后断头,取双侧大脑皮层和丘脑匀浆,离心,制备粗制突触体,用分光光度法测Na+,K+-ATP酶活性.结果大鼠氯胺酮100mg·kg-1腹腔注射能明显降低大脑皮层和丘脑Na+,K+-ATP酶活性,分别较对照组降低了32.8%和31.4%(P＜0.05),而在翻正反射恢复后和动物完全清醒后Na+,K+-ATP酶活性恢复(与对照组相比,P＞0.05).结论Na+,K+-ATP酶活性在氯胺酮全麻机理中可能发挥重要作用.     

人肾近端小管上皮细胞的原代培养、传代及鉴定方法研究

目的:创建一种重复性好、细胞量多的人肾近端小管细胞(PTC)培养方法。方法:取新鲜正常人肾组织分离纯化,用含10%新生牛血清等营养充分的DMEM/F12(1∶1)液进行近端小管细胞的原代培养及传代,并以免疫组化、酶化学染色、透射电镜鉴定。结果:培养5~6天后融合成单层细胞,形态呈鹅卵石样,可传代7~9代,鉴定确定为人肾近端小管细胞,重复培养10次,均能稳定获得同样细胞,每克肾皮质可分离培养出(6~12)×106个PTC。结论:此培养方法可在7天内获得人肾近端小管细胞,且重复性好,细胞数量多,为进行肾小管细胞治疗提供必需的细胞,也为研究肾小管病变提供实验平台。