某高校新生钩端螺旋体感染血清学调查

目的：了解大学生钩端螺旋体感染状况。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定我校2002—2004级299名新生血清钩端螺旋体抗体。结果：①被检299名学生血清钩端螺旋体抗体阳性31人，总阳性率10．37％；②南方籍学生血清钩端螺旋体抗体阳性率18．75％，北方籍学生阳性率6．40％，南北方籍学生间阳性率差异有显著性；③农村源学生血清钩端螺旋体抗体阳性率12．96％，城市源学生阳性率3：61％，二者差异有显著性；④男生与女生血清钩端螺旋体抗体阳性率分别为15．22％、6．21％，男女生间阳性率差异有显著性。结论：我校学生中存在钩端螺旋体感染或隐性感染，建议对抗体阳性者做进一步诊断，以便得到及时的治疗。     

山西籍大学生钩端螺旋体感染血清学调查

[目的]了解山西省健康人群钩端螺旋体感染状况。[方法]采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定山西大学．大同医学院2004级630名山西籍新生血清钩端螺旋体抗体。[结果]（1）被检者血清钩端螺旋体抗体总阳性率为8．57％；（2）男、女生间、学生入学前所在地域阊以及城乡籍学生间阳性率差异均无统计学意义。[结论]本次研究结果表明，在山西存在钩端螺旋体感染，应重视对钩端螺旋体病的研究。     

钩端螺旋体外膜菌苗流行病学效果研究

目的：证实钩端螺旋体外膜菌苗的安全性和免疫效果。方法：在湖北省荆州市和石首市现场接种钩端螺旋体外膜菌80000人份,观察48h内体温、局部红肿等副反应和一年内接种钩端螺旋体外膜菌苗者发病情况,同时设对照组。结果：所有钩端螺旋体外膜菌苗接种者未见严重副反应和异常反应,仅2例菌苗接种者有低热和局部红肿,48h后消失,安全性良好。接种组发生黄疸出血群钩端螺旋体病人2例,对照组发生黄疸出血群钩端螺旋体病人47例,黄疸出血群钩端螺旋体外膜菌苗保护效果95.57％,95％可信限为85.43％－98.20％;对照组发生七日热群钩,端螺旋体病人15例,七日热群钩端螺旋体外膜菌苗有效率100.00％,95％可信限下限77.08％。结论：钩端螺旋体外膜菌苗安全性良好,接种与疫区流行菌群一致的钩端螺旋体外膜菌苗,可以取得良好的免疫保护效果。     

flaB-PCR在钩端螺旋体病检测中应用

目的 探讨flaB-PCR对组织标本中钩端螺旋体检测的可行性，为钩端螺旋体流行病学调查提供一种快速、有效的技术手段。方法 根据黄疸出血型钩体赖株高度保守序列flaB设计一对引物，用PCR方法对实验动物标本及疫区动物标本中的钩端螺旋体DNA进行flaB基因片断扩增，扩增产物用琼脂糖凝胶电泳进行检测。结果 该引物可特异性扩增钩端螺旋体DNA，而对本实验所用其它细菌均不扩增。肾组织中含10条钩端螺旋体经flaB-PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳可以目测到扩增产物。26份人工感染钩端螺旋体的动物脏器标本，flaB-PCR扩增阳性10份，阳性率38．46％；细菌分离阳性2份，阳性率7．69％。2种方法比较差异有统计学意义（X^2=6．93，P〈0．01）。疫区70份蛙肾标本。分离细菌8株，阳性检出率11．43％；flaB-PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳阳性14份，阳性检出率20％。细菌分离阳性的标本flaB-PCR均为阳性。结论 flaB-PCR灵敏、特异、快速，是钩端螺旋体检测的有效方法，可用于钩体病疫情监测和流行病学调查。     

浅谈钩端螺旋体病的诊断与防治

钩端螺旋体病是由致病性钩端螺旋体引起的以发热、黄疸、血红蛋白尿和流产为主要症状的人畜共患病,对畜牧业的危害很大。 [病原] 钩端螺旋体根据生物学特点不同,可分为双曲钩端螺旋体和问号状钩端螺旋体两大群,前者为非致病性或腐生性钩端螺旋体,后者为致病性钩端螺旋体。     

四川省钩端螺旋体宿主动物调查

目的：了解野鼠、耕牛和猪的钩端螺旋体带菌情况，探讨减少钩端螺旋体病发病影响因素。方法：对野鼠鼠肾、耕牛牛尿和生猪猪肾进行钩端螺旋体菌株的分离培养。结果：在野鼠鼠肾和水牛牛尿中分离出钩端螺旋体菌株。结论：野鼠仍是我省钩端螺旋体病的主要传染源，水牛为七日热群钩端螺旋体病的传染源。初步发现近年我省钩端螺旋体病发病减少可能是由于野鼠种群变化带来的结果。     

健康人群血清钩端螺旋体抗体检测

钩端螺旋体病（Leptospirosis，简称钩体病），是由致病性钩端螺旋体（Leptospim interrogans，简称钩体）引起的一种分布广泛的自然疫源性疾病，我国是受钩体病危害十分严重的国家。近年来我校面向全国十几个省市招生，我们曾对本省籍在校学生钩端螺旋体感染情况进行调查。为了解来自其他省市学生钩端螺旋体感染状况，我们对本校2003、2004级外省籍学生进行了血清钩端螺旋体抗体检测。现将结果报告如下。     

钩端螺旋体病32例死亡病例的流行病学分析

钩端螺旋体病（简称钩体病）是由致病性钩端螺旋体引起的自然疫源性疾病。我县为广西所辖县份之一，是钩体病重点疫区，1986-2007年共报告钩体病病例995例，发病死亡人数为32例，病死率为3．22％。为了解钩体病病例的死亡原因，有效地控制钩体病的发生和流行，降低病死率，现对32例钩体病死亡病例进行流行病学分析如下。     

浅谈钩端螺旋体病的诊断与防治

钩端螺旋体病是由致病性钩端螺旋体引起的以发热、黄疸、血红蛋白尿和流产为主要症状的人畜共患病,对畜牧业的危害很大。1 病原 钩端螺旋体根据生物学特点不同,可分为双曲钩端螺旋体和问号状钩端螺旋体两大群,前者为非致病性或腐生性钩端螺旋     

信阳县1993年钩端螺旋体病暴发情况分析

信阳县１９９３年钩端螺旋体病暴发情况分析孔祥嘉，杨家强，苏玉杰，刘金远，林阳钩端螺旋体病（钩体病）是一种人兽共患的急性传染病。信阳县为钩端螺旋体病疫区，流行形式一直是以雨水和洪水型为主。１９９３年我县又发生了钩端螺旋体病的暴发。流行形式及临床表现均不...     

SH2020全自动琼脂糖凝胶电泳仪在地中海贫血筛查中的应用价值

目的:探讨SH2020全自动琼脂糖凝胶电泳仪在地中海贫血筛查中的应用价值。方法:采集外周静脉血作血常规,应用SH2020全自动琼脂糖凝胶电泳仪Hb电泳进行地中海贫血筛查,筛查结果阳性者进行基因诊断确诊。结果:对玉林地区人群2 998例进行地中海贫血筛查,筛出α地中海贫血540例,阳性率18.01%,筛出β地中海贫血422例,筛查阳性率14.08%。部分阳性者经GAP-PCR方法和PCR结合反向点杂交(RDB)技术作基因诊断,α地中海贫血阳性者符合率为75.00%,β地中海贫血符合率为82.94%。结论:应用SH2020全自动琼脂糖凝胶电泳仪Hb电泳进行地中海贫血筛查简便易行,检出率较高,适宜推广使用。     

聚合酶链反应和地高辛标记的核酸杂交技术用于钩端螺旋体的检测

目的为钩端螺旋体快速诊断和流行病学调查建立一种比较理想的方法.方法根据钩端螺旋体赖株DNA合成一对flaB引物,用PCR技术对钩端螺旋体菌株、疫区现场动物标本等进行flaB基因扩增,用地高辛（DIG）标记flaB基因探针,用琼脂糖凝胶电泳和斑点杂交技术进行检测.结果纯化钩端螺旋体DNA 5pg经flaB-PCR扩增后,琼脂糖凝胶电泳可以目测.用DIG标记的flaB探针可以检测到5fg及以下的DNA扩增产物.疫区70份蛙肾标本,分离细菌8株,阳性率11.43%.flaB扩增阳性14份,阳性率20%;DIG标记探针斑点杂交检测,阳性19份,阳性率为27.14%.结论PCR-斑点杂交是一种灵敏、特异、快速的钩端螺旋体检测方法,既可用于快速检测和早期诊断,也可用于疫情监测和流行病学调查.     

荧光PCR和PFGE在副溶血弧菌食物中毒诊断中的应用研究

[目的]探讨荧光PCR和脉冲场电泳（PFGE）在副溶血弧菌食物中毒调查中的应用。[方法]对中毒样品进行荧光PCR检测,副溶血弧菌临床分离株基因组DNA经NotI酶切,通过PFGE获得电泳图谱,利用BioNumerics软件对图谱进行聚类分析。[结果]部分样品荧光PCR检测结果呈阳性,同起食物中毒菌株PFGE图谱一致。[结论]荧光PCR可以快速准确的鉴定病原体。PFGE具有很强的菌株同源性分析能力,适用于食物中毒病原菌学鉴定和传染源溯源。荧光PCR和PFGE在食物中毒的快速诊断中可发挥重要作用。     

用两次聚合酶链反应检测血清中丙型肝炎病毒核糖核酸

应用丙型肝炎病毒核酸序列中的两对引物F-1(1—21),R-1(324—304),F-3(28—48),R-3(284—264),对4名抗-HCV阳性的献血员血清进行了两次聚合酶链反应("nested"PCR),经电泳鉴定1例为阳性,核酸长度为257bp。这一方法的建立为我国开展丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的检测提供了可能性。     

我国耕牛钩端螺旋体带菌和排菌状况调查

来源不同地区的牛尿经聚合酶链反应（PCR）检测和分离培养，PCR产物凝胶电泳阳性率11％，PCR产物Southern－blot阳性率13％，分离培养阳性率3．1％。不同地区牛尿标本PCR检测结果差异明显。结果表明，我国某些地区的耕牛钩端螺旋体排菌率非常高，其中以七日热和澳洲群为主。说明耕牛是这些地区钩体病的主要传染源。PCR和培养分离结果的比较显示，PCR是构体病传染源调查的一种灵敏、特异、快速和简便的方法。     

艾滋病和丙型肝炎病毒感染吸毒者的树突状细胞表面分子基因多态性分析

目的 研究吸毒人群中艾滋病病毒(HIV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染者与未感染者中,等位基因树突状细胞表面特异性分子同源物(DC-SIGNR)的分布情况,筛选出HIV或HCV抗性基因.方法 选择深圳市戒毒所吸毒人群血液样本500份,其中313份来自静脉注射吸毒者,对他们进行HIV及HCV抗体筛查,并提取外周血基因组DNA,对DC-SIGNR颈区基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测和基因序列测定分析.结果 检出97例HIV阳性吸毒者,均为静脉注射吸毒者,且全部为HCV阳性;HIV阴性吸毒人群中,HCV抗体阳性率57.57%(232/403);HIV阴性静脉注射吸毒者中,HCV阳性率63.89%(138/216);而采用鼻吸等其他方式吸毒者的阳性率为50.26%(94/187),静脉注射吸毒与其他方式吸毒者阳性率的差异具有统计学意义(x2=7.61,P=0.0058).x2检验结合确切概率法分析显示,HIV阳性的吸毒者中,DC-SIGNR颈区5/6和5/8等位基因型的出现频率[4.55%(4/88)和2.27%(2/88)]高于HIV未感染组[1.04%(4/384)和0(0/384),确切概率法P=0.043和P=0.034],具有统计学意义;HCV阳性吸毒人群中,各类杂合子及纯合子的出现频率与HCV阴性吸毒人群间差异无统计学意义,静脉注射吸毒者与其他方式吸毒者之间差异无统计学意义.结论 在吸毒人群中,DC-SIGNR颈区等位基因分布与HCV感染无明显相关性,而等位基因型5/6可能与HIV感染相关,但由于频率较低,仍需进一步验证.     

用PCR-ICT方法检测肠出血性大肠杆菌O157

目的初步建立肠出血性大肠杆菌O157的聚合酶链式反应-免疫层析检测(PCR-ICT)技术。方法根据肠出血性大肠杆菌O157的溶血性基因(hlyAB)序列设计特异性引物和探针,并分别经生物素和地高辛标记,用胶体金免疫层析技术检测PCR扩增产物。结果用建立的PCR-ICT方法检测5株O157H7血清型大肠杆菌均得到阳性结果,检测5株非O157血清型普通大肠杆菌和5株其他肠杆菌菌株均得到阴性结果,检测冻虾仁、冻贝肉、冻鸡肉、冻猪肉等出口食品样品43份,未检出肠出血性大肠杆菌O157,与PCR-凝胶电泳和分离培养法检测结果一致。结论用金标免疫层析方法检测PCR产物,其灵敏度基本与电泳法相当。初步应用表明PCR-ICT方法简便具有快速、易操作、检测时间短、简便等特点。     

乙型肝炎病毒DNA不同抽提方法的比较及在其隐匿性感染中的应用

目的对血清中HBV DNA不同抽提方法进行比较,选择较优方法进行隐匿性HBV感染的检测。方法分别用直接煮沸法、辛酸钠法、蛋白酶K消化-酚-氯仿法、PEG8000法、辛酸钠-酚-氯仿法、碱裂解法、柱抽提法,抽提血清中HBV DNA,比较各方法对PCR检测HBV DNA得率的影响,并在得率较高的方法中进行灵敏度、重复性的比较。采用辛酸钠法、辛酸钠-酚-氯仿法、碱裂解法处理单一抗-HBc阳性血清并进行套式PCR。结果辛酸钠-酚-氯仿法HBV DNA得率最高,辛酸钠法、碱裂解法、直接煮沸法、柱抽提法得率次之,蛋白酶K消化-酚-氯仿法及PEG8000法得率较低。辛酸钠-酚-氯仿法有较高的灵敏度,较好的重复性。在单一抗-HBc阳性血清中,辛酸钠-酚-氯仿法、辛酸钠法和碱裂解法的HBV DNA检测阳性率分别为35%、25%和20%。结论核酸抽提方法的不同直接影响HBV的PCR检测灵敏度。辛酸钠-酚-氯仿法在隐匿性HBV DNA检测中有较好的效果。     

Genetic analysis of Pseudomonas aeruginosa by enterobacterial repetitive intergenic consensus polymerase chain reaction (PCR) and arbitrarily primed PCR: gel analysis compared with microchip gel electrophoresis.

OBJECTIVES: To assess the applicability of a newly emerging microchip gel electrophoresis for rapid strain differentiation among clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa, and to compare this technique with the traditional gel method for DNA separation. METHODS: One hundred clinical strains of P. aeruginosa obtained from a hospital in northwestern Ohio were tested for reactivity to 3 serotype-specific monoclonal antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay. Twelve strains (4 from each serogroup) were selected for DNA analysis by polymerase chain reaction (PCR)-based, single primer DNA fingerprinting methods with 3 different primers: 1 enterobacterial repetitive intergenic consensus PCR and 2 arbitrarily primed PCRs. The PCR products were analyzed by agarose slab gel and microchip gel electrophoresis. RESULTS: Of the 100 clinical isolates tested, 39% (4%, 14%, and 21%) were found to be serotypes 0:3, 0:6, and 0:11, respectively. Twelve strains were chosen for DNA analysis by PCR. The PCR products were analyzed by agarose slab gel electrophoresis and on microchips to determine interspecies diversity. Both methods demonstrated that different serotypes exhibited different electrophoretic patterns. Two strains (clinical strains 6 and 7, serotype 0:6) showed identical patterns, indicating a high degree of relatedness. CONCLUSION: In all cases, there was concordance between the electrophoretic patterns detected by the two methods. The capability of conducting both PCR and microchip gel electrophoresis offers an opportunity for an automated and rapid method for genetic analysis and differentiation among strains of P. aeruginosa and other microorganisms.