异槲皮苷对MC3T3-E1成骨细胞增殖与分化的影响作用

目的研究异槲皮苷对体外培养MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化的影响作用。方法以细胞矿化结节染色鉴定MC3T3-E1成骨细胞株骨矿化功能,以MTT法测定成骨细胞的增殖率,以试剂盒法测定细胞内碱性磷酸酶(ALP)的活性。结果在终浓度为1.08×10-6mol·L-1、1.08×10-7mol·L-1、1.08×10-8mol·L-1时,异槲皮苷能极显著促进MC3T3-E1成骨细胞增殖(P<0.01);终浓度为1.08×10-6mol·L-1时,异槲皮苷作用96h后能极显著提高细胞内ALP的活性(P<0.01)。结论一定浓度的异槲皮苷能够显著促进MC3T3-E1成骨细胞增殖和分化。     

白藜芦醇对LPS诱导的MC3T3-E1成骨细胞的骨保护作用

目的探讨白藜芦醇对脂多糖(LPS)诱导的MC3T3-E1成骨细胞的骨保护作用。方法采用CCK-8法检测白藜芦醇不同浓度下MC3T3-E1成骨细胞的细胞增殖活性,对硝基苯磷酸盐法检测白藜芦醇不同浓度下MC3T3-E1成骨细胞ALP活性。将MC3T3-E1成骨细胞分为空白组(基础培养基)、对照组(LPS 2μg/mL)和实验组(LPS 2μg/mL+白藜芦醇20μmol/L)。采用qRT-PCR检测三组成骨相关基因Runx2、ALP、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN) mRNA表达,Western blot法检测三组细胞沉默调节蛋白1(SIRT1)蛋白表达。结果白藜芦醇20μmol/L是MC3T3-E1成骨细胞最适成骨浓度(P<0.05)。与空白组比较,实验组成骨相关基因Runx2、ALP、OCN和OPN mRNA表达水平和SIRT1蛋白表达水平均降低(P<0.05);与对照组相比,实验组成骨相关基因Runx2、ALP、OCN和OPN mRNA表达水平和SIRT1蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论白藜芦醇能够通过提高Runx2、ALP、OCN、OPN和SIRT1相关...     

他汀类药物对TNFa诱导成骨细胞生长抑制的保护作用

目的比较4种他汀类药物对TNF-诱导的小鼠成骨细胞(MC3T32-E1)生长抑制的影响。方法小鼠成骨细胞MC3T3-E1用DMEM+10%胎牛血清培养,细胞活性用MTT法测定。结果 TNFα(1~100 ng.mL 1)呈浓度和时间依赖抑制MC3T3-E1细胞生长;低浓度的辛伐他汀(10 10~10 7mol.L 1)、氟伐他汀(10 10~10 6mol.L 1)和阿托伐他汀(10 8~10 6mol.L 1)处理MC3T3-E1细胞72 h后能明显促进成骨细胞生长,而低浓度的罗舒伐他汀(10 10~10 7mol.L 1)无作用,在高浓度(10 6~10 5mol.L 1)时抑制MC3T3-E1的生长;用辛伐他汀、氟伐他汀和阿托伐他汀与TNF-α(10 ng.mL 1)共同培养MC3T3-E1细胞72 h,呈浓度依赖逆转TNF-α诱导的MC3T3-E1生长抑制,而罗舒伐他汀在低浓度时显示较强的逆转作用,在高浓度(10 6mol.L 1)时无作用或促进TNFα诱导的MC3T3-E1生长抑制。结论辛伐他汀、氟伐他汀和阿托伐他汀(10 10~10 7mol.L 1)能促进MC3T3-E1细胞生长,逆转TNFα诱导的MC3T3-E1生长抑制;而罗舒伐他汀高浓度(10 6~10 5mol.L 1)时抑制MC3T3-E1的生长,在低浓度时能明显逆转TNF-α诱导的成骨细胞生长抑制。     

罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对小鼠成骨细胞增殖与Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响

目的 研究不同分子量的罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对体外培养新生小鼠颅骨MC3T3-E1细胞增殖与I型胶原蛋白分泌及I型胶原蛋白mRNA表达的影响.方法 采用WST-8法测定胶原蛋白多肽对小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖的影响,ELISA法检测胶原蛋白多肽对MC3T3-E1细胞I型胶原蛋白分泌的影响,采用real-ti...     

地黄活性成分梓醇对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响

目的检测地黄活性成分梓醇对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。方法制备不同浓度地黄活性成分梓醇提取液。以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为药物筛选的细胞模型;用MTT法测定不同浓度的梓醇溶液的促细胞增殖作用;采用ALP活性和骨钙素定量检测分别观察不同浓度的梓醇溶液的促细胞分化作用;以Vonkos-sa钙化染色法了解不同浓度的梓醇溶液的促细胞钙化作用。结果梓醇在1×10-7～1×10-9mol·L-1浓度范围内培养24及48h促进成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖。梓醇在浓度1×10-5～1×10-6mol·L-148及72h提高成骨细胞株MC3T3-E1细胞内碱性磷酸酶的活性。梓醇在浓度1×10-5～1×10-6mol·L-1培养8及12d时能明显促进成骨细胞MC3T3-E1骨钙素合成和分泌。梓醇在浓度1×10-5～1×10-6mol·L-1培养19d时成骨细胞株MC3T3-E1细胞的矿化结节(mineralized bone nodular structure,MBNS)数目增多。结论梓醇可以提高成骨细胞株MC3T3-E1增殖和分化能力,梓醇可能是地黄治疗骨质疏松作用的活性成分之一。     

杜仲中槲皮素、京尼平苷及桃叶珊瑚苷对小鼠成骨样细胞系MC3T3-E1增殖和分化的影响

目的 对杜仲抗骨质疏松的药效成分进行初步筛选。方法 采用小鼠成骨细胞MC3T3-E1体外培养模型, 通过MTT法测定细胞增殖, ELISA方法测定碱性磷酸酶(ALP)活性, 观察杜仲中槲皮素、京尼平苷及桃叶珊瑚苷对成骨细胞增殖和分化的影响。结果 槲皮素促MC3T3-E1细胞增殖的有效浓度为10^-6 mmol/L, 桃叶珊瑚苷则为10^-5 mmol/L;10^-4 μmol/L京尼平苷在干预后4 d, 才逐渐显现出促进MC3T3-E1增殖作用。槲皮素(10^-5、10^-3 mmol/L)、京尼平苷(10^-3 mmol/L)和桃叶珊瑚苷(10^-3 mmol/L)可增加MC3T3-E1 ALP活性。结论 槲皮素、京尼平苷和桃叶珊瑚苷可促进成骨细胞的增殖和分化, 且作用强度具有浓度相关性和时间相关性, 可能为杜仲抗骨质疏松的药效物质基础。     

芫花素对于MC3T3-E1细胞向成骨细胞分化的影响

目的探索芫花素对于MC3T3-E1细胞向成骨细胞分化的影响。方法采用芫花素1、5、10、15μmol/L处理MC3T3-E1细胞14 d,采用MTS法检测芫花素对MC3T3-E1细胞增殖的抑制作用;实时定量PCR和Western blotting法检测测芫花素对MC3T3-E1细胞中ALP、HDAC1和Runx2 m RNA和蛋白表达的影响。结果芫花素5、10、15μmol/L可以显著促进MC3T3-E1细胞中ALP、Runx2 m RNA和蛋白表达水平的提高(P0.05),HDAC1 m RNA和蛋白表达水平的下调(P0.05),表明芫花素可以促进MC3T3-E1向成骨细胞分化。结论芫花素具有促进MC3T3-E1细胞可以促进成骨细胞分化,对成骨细胞的分化过程有一定的调节作用。     

天料木中异香豆素糖苷化合物对MC3T3-E1细胞增殖、分化及OPG/RANKL/RANK信号通路的影响

目的 探讨天料木中异香豆素糖苷化合物4-hydroxy-2-{[（benzoyl） oxy]methyl}phenyl-β-D-glucopyranoside-6-benzoate （HPGB）对小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1细胞活性的影响及其作用机制。方法 体外培养MC3T3-1细胞,用不同浓度的异香豆素糖苷化合物进行干预,采用MTT法测定MC3T3-1细胞增殖情况,碱性磷酸酶（ALP）测定细胞分化情况,悬液芯片技术检测、分析糖蛋白Dickkop （DKK-1）、骨保护素（OPG）、骨桥蛋白（OPN）、骨钙素（BGP）和核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）蛋白表达水平。Real-time PCR法检测、分析DKK-1、RANKL mRNA的表达水平。结果 异香豆素糖苷化合物在3~300 μmol/L可促进MC3T3-E1细胞增殖和分化能力,具有浓度相关性;与正常对照组相比,异香豆素糖苷化合物可提高MC3T3-E1的ALP活性。蛋白结果表明,异香豆素糖苷化合物可显著上调MC3T3-E1细胞中OPG、OPN的表达,DKK-1、RANKL蛋白表达无明显变化,但显著提高了OPG/RANKL值。同时,mRNA结果显示异香豆素糖苷化合物可显著上调MC3T3-E1细胞中OPG mRNA表达,显著提高OPG/RANKL值。结论 异香豆素糖苷化合物可通过上调OPG、OPN的表达、提高OPG/RANKL值,促进MC3T3-E1的增殖和分化。     

左旋肉毒碱对MC3T3-E1成骨细胞及OPG表达的作用

目的探讨左旋肉毒碱对MC3T3-E1成骨细胞及OPG的表达作用,为临床预防骨质疏松提供参考。方法以小鼠骨细胞MC3T3-E1成骨细胞为研究对象,用左旋肉毒碱对其表达进行干预,最后,以免疫组化法检测左旋肉毒碱干预前后OPG蛋白质表达水平的改变,分析左旋肉毒碱对MC3T3-E1成骨细胞OPG的表达作用。结果 1 mmol/L左旋肉毒碱对小鼠成骨细胞无明显作用,10~100 mmol/L左旋肉毒碱能促进小鼠成骨细胞增殖,显著抑制人成骨细胞凋亡,增加小鼠骨密度。结论左旋肉毒碱可通过促进MC3T3-E1成骨细胞OPG的表达,促进成骨细胞增殖,呈剂量依赖性和时间依赖性,并且左旋肉毒碱可抑制人成骨细胞凋亡,延长其存活时间。     

卡托普利对MC3T3-E1细胞增殖、分化及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的观察卡托普利对MC3T3-E1细胞增殖、分化和Ⅰ型胶原基因表达水平影响。方法在MC3T3-E1细胞中加入不同浓度的卡托普利,应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、RT-PCR的方法观察卡托普利对MC3T3-E1细胞的增殖、碱性磷酸酶活性和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。结果 10-11 mol.L-1浓度的卡托普利作用24 h能明显促进MC3T3-E1细胞增殖,作用3 d能明显促进MC3T3-E1细胞表达碱性磷酸酶。卡托普利可刺激MC3T3-E1细胞表达Ⅰ型胶原,以10-11 mol.L-1作用最强。结论卡托普利有促进MC3T3-E1细胞增殖、促进碱性磷酸酶表达和增加Ⅰ型胶原mRNA表达的作用。     

二甲双胍通过激活自噬促进MC3T3-E1细胞系成骨分化的研究

目的探讨二甲双胍通过激活自噬促进MC3T3-E1细胞系成骨分化的作用。方法用含有不同浓度二甲双胍的成骨诱导剂处理MC3T3-E1细胞,其中二甲双胍的浓度分别为0(对照)、200、400、800μmol/L。利用碱性磷酸酶(ALP)染色检测二甲双胍促进MC3T3-E1细胞成骨的最适浓度,采用免疫印迹法(Western blotting)和免疫荧光法检测自噬相关蛋白,并选择出二甲双胍的最佳干预浓度。对照组、二甲双胍400μmol/L组、二甲双胍400μmol/L+3-甲基腺嘌呤(3-MA,5 mmol/L)组和3-MA 5 mmol/L组分别干预MC3T3-E1细胞4 h后,采用Western blotting法、免疫荧光法、透射电镜检测自噬指标,并利用ALP染色、半定量RT-PCR和Western blotting检测成骨能力。结果二甲双胍能够剂量相关性地促进MC3T3-E1细胞的ALP活性,并且400μmol/L二甲双胍是促进MC3T3-E1细胞成骨的最适浓度。二甲双胍0(对照)、200、400μmol/L组的LC3 Ⅱ/Ⅰ比值逐渐增大,P62/β-actin比值逐渐减小,LC3荧光强度逐渐增强;800μmol/L二甲双胍组的LC3 Ⅱ/Ⅰ值减小,P62/β-actin比例增大,LC3荧光强度下降;且与对照组比较,400μmol/L二甲双胍组的LC3Ⅱ/Ⅰ比值明显增大,P62/β-actin比值明显降低(P0.05),LC3荧光强度最强。与对照组比较,二甲双胍400μmol/L组中LC3 Ⅱ/Ⅰ的比值增大,P62蛋白表达减少(P0.05),LC3荧光强度增强,自噬体数量增多;ALP活性增强,成骨相关基因和蛋白OCN,COL1的表达增强(P0.001、0.05、0.01)。二甲双胍中加入3-MA 5 mmol/L后,LC3 Ⅱ/Ⅰ的比值减小,P62蛋白表达增多,LC3荧光强度减弱,自噬体数量减少;ALP活性减弱,成骨相关基因和蛋白OCN,COL1的表达减弱。结论二甲双胍能通过激活MC3T3-E1细胞系的适度自噬促进其成骨分化。     

葛根素对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化及TRPM3 mRNA表达的影响

目的观察葛根素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化及TRPM3 mRNA表达的影响。方法分别采用CCK-8法、碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色测定葛根素对MC3T3-E1细胞增殖、成骨分化、矿化作用的影响。流式细胞术检测葛根素对MC3T3-E1细胞周期及细胞内钙离子浓度的影响。RT-PCR检测葛根素对TRPM3基因m RNA表达的影响。结果 0.1、1、10μmol·L~(-1)葛根素能明显促进MC3T3-E1细胞增殖,使G1期细胞比例减少,G_2+S期细胞比例增加,其中0.1μmol·L~(-1)浓度效果最为明显;与正常对照组相比较,0.1μmol·L~(-1)葛根素组细胞的ALP活性和矿化结节面积均明显提高;0.1μmol·L~(-1)葛根素组细胞的TRPM3 m RNA表达水平和细胞内钙离子浓度明显降低。结论葛根素可促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化和矿化,可降低TRPM3 mRNA表达水平和细胞内钙离子浓度。     

重组成骨蛋白-1在钛合金微粒环境下对MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化、矿化的影响

目的在钛-6铝-4钒(Ti-6Al-4V)合金微粒环境下观察重组成骨蛋白-1(recombinant OP-1,r OP-1)对成骨细胞的影响,为防治关节假体无菌性松动提供新的治疗途径。方法根据小鼠颅顶骨前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1)中是否加入Ti-6Al-4V微粒和r OP-1,分为微粒组(5、10、15μg/m L Ti-6Al-4V)、处理组(微粒组加入200 ng/m L r OP-1)、阳性组(加入200ng/m L r OP-1)和对照组,检测各组24、72、120 h MC3T3-E1细胞增殖能力、72 h碱性磷酸酶(akaline phosphatase,AKP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)mRNA的表达,及120 h成骨细胞的矿化能力。结果 1r OP-1无促进Ti-6Al-4V微粒环境下成骨细胞增殖能力,与微粒组比较,差异无统计学意义(P>0.05);2r OP-1可提高成骨细胞分化,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);同时逆转Ti-6Al-4V微粒抑制成骨细胞分化,与微粒组比较差异有统计学意义(P<0.05);3茜素红S染色后Ti-6Al-4V微粒钙结节数量随着浓度增加逐渐降低,和微粒组比较,加入r OP-1后钙结节数量呈增多趋势。结论 Ti-6Al-4V微粒环境下,r OP-1无提高成骨细胞增殖能力,能提高细胞分化矿化能力,r OP-1可以作为潜在治疗关节假体无菌性松动一种方法。     

鹿茸胶原酶解物对地塞米松诱导成骨细胞MC3T3-E1凋亡的保护作用

目的研究鹿茸胶原酶解物(VCH)作为治疗药物对地塞米松(DEX)所致MC3T3-E1细胞损伤的影响,探究VCH对糖皮质激素性骨质疏松的保护作用。方法分别用不同浓度的VCH处理成骨细胞MC3T3-E1,MTT法测定细胞活力,通过AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,实时PCR及Western印迹检测MC3T3-E1细胞分化相关因子的m RNA及蛋白表达水平。结果 VCH 0.3 g·L~(-1)作用于MC3T3-E1细胞48 h以后能显著促进MC3T3-E1细胞的增殖;VCH可促进骨细胞的活性,可上调成骨细胞分化的标志蛋白ALP的表达和转录,可明显减少DEX所诱导的MC3T3-E1细胞凋亡(P<0.05)。结论 VCH抑制糖皮质激素引起成骨细胞凋亡,促进骨形成,为骨质疏松症的防治提供理论依据。     

马卡列丙中1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌对成骨细胞增殖、分化和矿化的影响

目的 探究马卡列丙中蒽醌类成分1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌对成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。方法 以MC3T3-E1成骨细胞作为对象研究，设立阴性对照组(二甲基亚砜)、阳性对照组(雌二醇)和药物组，采用四甲基偶氮唑盐比色法检测不同质量浓度1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌对MC3T3-E1成骨细胞增殖活性的影响，选出增殖活性最强的浓度进行后续研究，采用碱性磷酸酶染色法测定1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-羟基蒽醌对MC3T3-E1成骨细胞的分化程度，茜素红染色评估1,6,8-三羟基2,7-二甲氧基-3-羟基蒽醌对MC3T3-E1成骨细胞矿化能力的影响。结果 药物组MC3T3-E1成骨细胞在1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌质量浓度为100 nmol/L时增殖活性最高，选用质量浓度为100 nmol/L的1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌能促进MC3T3-E1成骨细胞的分化和矿化。结论 1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌能显著促进成骨细胞增殖、分化和矿化水平，为马卡列丙的促骨折愈合作用提供了理论...     

锁阳含药血清对MC3T3-E1成骨细胞增殖分化及矿化的影响

目的:研究锁阳含药血清对体外培养小鼠成骨细胞的增殖、分化以及矿化的影响。方法:小鼠灌胃14天后摘眼球取血制备含药血清,分别将10%浓度的各组含药血清及对照组血清(生理盐水组血清)分别加入细胞培养液中培养成骨细胞。采用CCK8法检测成骨细胞增殖能力,钙钴法检测其碱性磷酸酶活性,0.2%茜素红染色法观察成骨细胞钙化结节情况。结果:同一时间点,与生理盐水血清组比较,锁阳含药血清各组均能促进MC3T3-E1成骨细胞增殖,其中,锁阳含药血清中剂量组与高剂量组在三个时间点均能够显著促进细胞增殖(p0.01);锁阳含药血清能够增强MC3T3-E1成骨细胞分泌碱性磷酸酶(ALP),且有一定的浓度依赖性;随着锁阳含药血清浓度的增加,钙化结节数量也呈现增加的趋势。结论:锁阳含药血清能够促进MC3T3-E1成骨细胞增殖分化与矿化,且在一定浓度范围内,浓度越高,促进作用愈明显。     

染料木素促成骨样细胞增殖作用及其机制研究

目的观察染料木素(genistein)对成骨样细胞MC3T3-E1细胞增殖及骨形成蛋白-2(BMP-2)、β-连环素(β-catenin)表达的影响。方法培养成骨样细胞MC3T3-E1,加入不同浓度的染料木素(1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6和1×10-5mol·L-1),以1×10-9mol·L-1雌激素(β-estradiol,E2)作为阳性对照组,采用MTT比色试验法和碱性磷酸酶(ALP)活性检测法,观察染料木素作用后MC3T3-E1的增殖及分化情况,以Westernblot方法检测成骨样细胞中BMP-2和β-catenin蛋白的表达。结果染料木素可促进MC3T3-E1细胞增殖,染料木素作用后细胞的ALP值也明显升高,呈浓度依赖性;染料木素可增加BMP-2和β-catenin表达,且呈浓度依赖性。结论染料木素促进MC3T3-E1细胞增殖与分化,可通过调节BMP-2和Wnt/β-catenin信号通路而影响成骨样细胞的活性。     

二氢杨梅素对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的改善作用及其机制研究

目的研究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的改善作用及其机制。方法采用地塞米松诱导3T3-L1脂肪细胞形成胰岛素抵抗细胞,以1×10-6mol·L-1罗格列酮为阳性对照,DMY(1×10-5¹×10-8mol·L-1)与胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞共培养72 h,用葡萄糖氧化酶法测定细胞培养基中的葡萄糖含量,计算葡萄糖消耗量;采用RT-PCR检测脂肪细胞的GLUT4、Akt 2和脂联素基因的表达量。DMY(1×10-51×10-8mol·L-1)与胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞共培养72 h,用葡萄糖氧化酶法测定细胞培养基中的葡萄糖含量,计算葡萄糖消耗量;采用RT-PCR检测脂肪细胞的GLUT4、Akt 2和脂联素基因的表达量。DMY(1×10-5¹×10-8mol·L-1)加入正常3T3-L1脂肪细胞中培养48 h,检测细胞的葡萄糖消耗量。结果 DMY(5×10-71×10-8mol·L-1)加入正常3T3-L1脂肪细胞中培养48 h,检测细胞的葡萄糖消耗量。结果 DMY(5×10-7¹×10-8mol·L-1)明显增加地塞米松诱导胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖消耗量,并呈现一定的浓度依赖性,和罗格列酮相比,差异无统计学意义。1×10-51×10-8mol·L-1)明显增加地塞米松诱导胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖消耗量,并呈现一定的浓度依赖性,和罗格列酮相比,差异无统计学意义。1×10-5¹×10-8mol·L-1DMY处理正常3T3-L1脂肪细胞48 h后,葡萄糖消耗量与正常组相比差异无统计学意义。RT-PCR结果显示,DMY作用于胰岛素抵抗的脂肪细胞72 h后,脂肪细胞的GLUT4、Akt2和脂联素基因的表达量明显增加,与地塞米松模型组相比,差异有统计学意义。结论 DMY能改善3T3-L1脂肪细胞的胰岛素抵抗状态,其机制可能与其上调GLUT4、Akt2和脂联素基因的表达量有关。     

丹参素对地塞米松诱导MC3T3-E1成骨细胞损伤的保护作用

目的 探讨丹参素对地塞米松诱导MC3T3-E1成骨细胞损伤的保护作用。方法 构建地塞米松1μmol/L诱导MC3T3-E1成骨细胞损伤模型;其中,C、D、E组分别采用丹参素10、20、40μmol/L预处理。另设空白对照组(A组)和地塞米松1μmol/L模型对照组(B组)。MTT法检测细胞存活率,二硝基苯肼法和流式细胞术分别检测乳酸脱氢酶(LDH)和活性氧(ROS)水平,Western blot检测p21、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白水平。检测丹参素40μmol/L预处理小干扰RNA沉默p21表达(F组)后地塞米松1μmol/L诱导MC3T3-E1成骨细胞(G组)的细胞存活率以及Nrf2和HO-1蛋白水平。结果 与A组比较,B、C、D、E组细胞存活率降低,LDH和ROS水平升高,且p21、Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高(P<0.05)。与B组比较,C、D、E组细胞存活率和p21、Nrf2和HO-1蛋白表达水平呈丹参素浓度依赖性升高,而LDH和ROS水平降低(P<0.05)。G组细胞存活率高于B组,但低于E组(P<0.05)。G组...     

瑞香素通过PI3K/AKT和BMP/Smad信号通路保护糖皮质激素诱导的成骨细胞增殖和分化抑制研究

目的 探讨瑞香素对地塞米松诱导的成骨细胞增殖和分化抑制的作用及分子机制.方法 体外培养MC3T3-E1细胞,分为对照组、地塞米松组、地塞米松+瑞香素40μmol/L组、地塞米松+瑞香素60μmol/L组和地塞米松+瑞香素80μmol/L组;采用CCK-8试剂盒测定细胞活力;RT-PCR法测量细胞中碱性磷酸酶(Alkal...