碱性成纤维细胞生长因子与肝素结合性质的研究进展

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ｂＦＧＦ)是成纤维细胞生长因子 (ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ ,ＦＧＦｓ)这一大家族的原型成员 ,自 1974年首次从牛垂体中分离ｂＦＧＦ以来[1] ,ＦＧＦ家族的成员目前已增加至 19位[2 ] 。ＦＧＦｓ各成员结构相关、功能相似 ,调节多种细胞的生长、分化、迁移、凋亡 ,此外 ,该家族成员均能结合肝素或硫酸肝素[3 ] 。ｂＦＧＦ和硫酸肝素的结合是它所具有的复杂生化调节机制的基础。肝素和ｂＦＧＦ及其受体三者共同组成复杂的ｂＦＧＦ…     

乙酰肝素酶、碱性成纤维细胞生长因子在胃癌中表达及对血管新生和肿瘤进展的影响

目的：探讨乙酰肝素酶(Hpa)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在胃癌组织中表达及其对血管新生和肿瘤生物学行为的影响。方法：应用免疫组化SABC法检测60例胃癌组织中Hpa、bFGF表达及计数肿瘤微血管密度(MVD)。结果：Hpa、bFGF表达和MVD、浸润深度、TNM分期和淋巴结转移有关，且Hpa、bFGF共表达病例有更高MVD与单独一种阳性表达相比。Hpa表达和bFGF表达呈正相关。结论：Hpa、bFGF可加速肿瘤浸润和转移，促进肿瘤间质微血管生成。且Hpa、bFGF在促进肿瘤间质微血管生成方面有协同作用。     

碱性成纤维细胞生长因子的生物活性分析

本文报告以人脐带内皮细胞原代培养技术,CAM及多聚物载体技术检测bFGF生物活性,结果表明bFGF是机体血管新生的强烈刺激剂。bFGF对血管、神经、结缔组织、骨与软骨细胞具有多向作用,深入研究其生物效应,对于促血管新生,动脉硬化及肿瘤防治,中枢神经创伤后修复,肢体再生,晶体再生,促创伤愈合,以及人工血管的开发应用等均具有重要的实际意义。     

乙酰肝素酶、肝细胞生长因子和血管内皮生长因子在非小细胞肺癌组织中的表达及其相关性

目的:研究乙酰肝素酶(HPA)、肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与临床特征之间的关系;并分析三者表达的相关性。方法:采用免疫组织化学检测45例非小细胞肺癌组织及10例正常组织中HPA、HGF及VEGF的表达水平。结果:非小细胞肺癌组织中HPA、VEGF的表达与正常组织表达、TNM分期有关。HGF的表达与正常组织的表达有关。三者中任意两者间在非小细胞肺癌组织中的表达均呈正相关性。结论:HPA、HGF与VEGF参与了非小细胞肺癌的发生、发展、浸润与转移;在非小细胞肺癌的发展过程中,三者之间可能存在协同作用。     

碱性成纤维细胞生长因子的研究进展

bFGF是一种作用广泛的细胞因子，其最显著的作用是促进细胞分裂，因此在肿瘤的发生发展、促进损伤组织修复等方面受到关注。除了通过经典的受体途径发挥作用外，高分子量bFGF还具有核转位现象，其核转位只发生在G1-S过渡期。应用酵母双杂交系统发现了能与bFGF发生相互作用的蛋白质，为研究bFGF作用的分子机制提供了有益的线索。     

上皮生长因子受体与非小细胞肺癌肿瘤免疫及转移的相关关系

目的与方法 采用链霉菌抗生物素蛋白－过氧化物酶连结法（ＬＳＡＢ）免疫组化和图象定量分析技术检测５０例非小细胞型肺癌（其中伴有淋巴结转移者３２例,不伴转移者１８例）上皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达,结果：ＥＧＦＲ表达与肿瘤间质淋巴细胞浸润（ＴＩＬ）呈负相关（Ｐ〈０．０１）,ＥＧＦＲ高表达时,ＴＩＬ浸润少,肺癌的转移率高（８３％）ＥＧＦＲ的表达与肺癌的组织类型明显相关（＿Ｐ〈０．０５）,但与肺癌的分     

N-去硫酸肝素对胃癌碱性成纤维细胞生长因子基因表达和血管形成的影响

目的 研究N-去硫酸肝素对人胃癌组织原位移植NOD-SCID小鼠转移模型的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因表达、血管形成和肿瘤转移影响.方法 建立人胃癌组织原位移植NOD SCID小鼠胃癌转移模型.移植后一周,20只小鼠随机分成两组,分别静脉注射生理盐水(0.9%氯化钠组)与10 mg/kg N-去硫酸肝素(N-去硫酸肝素组),每周两次,共3周.第6周处死动物,观察肿瘤转移情况,免疫组织化学检测肿瘤组织微血管密度表达,荧光定量PCR检测肿瘤组织bFGF基因mR-NA表达.结果0.9%氯化钠溶液组10只小鼠9只有肿瘤转移,N-去硫酸肝素组10只小鼠只有2只转移,两组间差异有统计学意义(P《0.05).未发现出血等不良反应.0.9%氯化钠溶液组平均微血管密度为9.1士3.4,N-去硫酸肝素组为4.7±1.8,两组间差异有统计学意义(t=3.617,P《0.05).荧光定量PCR测定显示,N.去硫酸肝素组bFGF mRNA(2.60±0.56%)相对表达量较0.9%氯化钠溶液组(30.65±6.84%)低,两组差异有统计学意义(t=4.08,P《0.01).结论 N-去硫酸肝素通过抑制肿瘤组织bFGF基因表达和血管生成,抑制肿瘤转移.N-去硫酸肝素无明显出血等不良反应.     

碱性成纤维细胞生长因子诱导非贴壁骨髓基质细胞向成骨细胞分化

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对非贴壁骨髓前体细胞(NASP)的增殖分化作用。方法：分离骨髓前体细胞体外培养，用碱性磷酸酶化学染色及图象分析测定细胞克隆数；采用免疫组化(ABC法)进行骨钙素及碱性磷酸酶(ALP)测定，研究bFGF对NASP的促增殖作用。结果：bFGF能促进NASP细胞增殖，诱导NASP细胞产生碱性磷酸酶及骨钙素。结论：bFGF主要作用于非贴壁生长的基质前体细胞，bFGF能增加骨的数量，促进骨样组织形成。     

碱性成纤维细胞生长因子对小鼠脾脏细胞凋亡的抑制作用

目的和方法：Ｘ射线照射结合无血清培养诱导小鼠脾细胞凋亡,采用流式细胞术定量分析碱性成纤维细胞生长因子对脾细胞凋亡的抑制作用,并采用淋巴细胞转化试验「＾３Ｈ」－ＴｄＲ掺入法检测ｂＦＧＦ对脾细胞的增殖效应。结果：小鼠经过不同剂量Ｘ射线照射,脾细胞再经过不同时程无血清培养,都出现了典型了亚二倍体ＡＰ峰,１μｇ＝ｍｌ和２μｇ／ｍＬ     

碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展

介绍碱性成纤维细胞生长因子对骨干细胞、成骨细胞、破骨细胞和血管形成的可能作用机理，及其与其它生长因子之间的相互作用。对碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展进行综述。     

肠道缺血再灌流对肾内源性碱性成纤维细胞生长因子和 …

目的和方法：研究肠道缺血再灌流过程对肾脏内源性碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β基因表达的影响，采用肠系膜上动脉夹闭４５ｍｉｎ与再灌流６ｈ和２４ｈ动物模型，用原位杂交与逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）技术研究两种生长因子基因在正常，缺血以及再灌流肾组织中的表达。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子对人羊水细胞及其它细胞的影响*

目的：探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子（ｒｈｂＦＧＦ） 对人羊水细胞及其它细胞的影响。方法：在低血清培养基培养条件下进行人羊水细胞及Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠巨噬细胞和３Ｔ３ 成纤维细胞,采用四甲基偶氮唑盐（ ＭＴＴ） 比色法和倒置显微镜观察ｒｈｂＦＧＦ 对人羊水细胞存活的影响。结果：人羊水细胞、Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠巨噬细胞和３Ｔ３ 成纤维细胞在０－４ ％ 胎牛血清培养基培养条件下,不同浓度的ｒｈｂＦＧＦ 对羊水细胞的作用存在相关性。结论：ｒｈｂＦＧＦ 能延长羊水细胞、Ｂａｌｂ／ｃ小鼠巨噬细胞和３Ｔ３ 成纤维细胞的存活时间     

含重组碱性成纤维细胞生长因子培养基中3T3成纤维细胞在血纤维蛋白凝块上生长的可能性（英文）

目的：重组碱性成纤维细胞生长因子对培养条件下３Ｔ３成纤维细胞在血纤维蛋白凝块上生长的可能研究。方法：采用Ｇｉｅｍｓａ染色和ＭＴＴ检测法,经过电镜扫描,分段对比观察,研究３Ｔ３细胞在血纤维蛋白凝块上的生长情况。结果：ｒｈｂＦＧＦ促进细胞生长产维持细胞存活的最佳浓度是１００ｎｇ／ｍｌ,在含有１００ｎｇ／ｍｌ的低血清培养基中细胞可在血纤维蛋白凝块生长。经４８ｈ培养以后仍有大量的细胞存活。结论：３Ｔ３成纤     

金属硫蛋白参与碱性成纤维细胞生长因子的心肌细胞保护作用

目的:在培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(anoxia/reperfusion,A/R)损伤模型上,观察金属硫蛋白(MT)在碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)心肌保护中的作用,探讨bFGF心肌保护作用的可能机制。方法:用bFGF(10^-10、10^-9、10^-8mol/L)及同时应用PD₀₉₈₀₅₉的bFGF(10^-9mol/L)预孵育乳鼠心肌细胞24h,复制心肌细胞A/R损伤模型,光镜下计算细胞存活率,[¹⁰⁹Cd]-血红素饱和法测细胞MT含量,硫代巴比妥酸法测细胞丙二醛(MDA)含量,以自动生化分析仪测培养液乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:bFGF呈浓度依赖地诱导心肌细胞MT生成,10^-10、10^-9、10^-8MbFGF组MT含量分别高于A/R组54%、62%、76%,并拮抗A/R引起的细胞损伤,细胞存活率高于A/R组,细胞乳酸脱氢酶(LDH)及蛋白漏出较少,细胞丙二醛(MDA)含量低于A/R组,而用丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂PD₀₉₈₀₅₉抑制MT生成则减弱了bFGF的上述细胞保护作用。结论:MT参与了bFGF的心肌保护作用,并与MAPK的介导有关。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子结构类似物在大肠杆菌中的高效稳定表达研究(英)

目的：用基因工程的方法获得高效稳定表达的重组人碱性成纤维细胞生长因子结构类似物。 方法： 利用定点突变技术，将天然hbFGF的第78与96位半胱氨酸替换为丝氨酸，通过载体pET-3c，突变基因被克隆并转化至大肠杆菌BL21(DE3)plysS，IPTG诱导表达后，SDS-PAGE分析蛋白表达结果。 结果： 纯化后突变蛋白的可溶性成分大幅度增加，而二聚体与多聚体显著减少至纯化后总蛋白的8％以下。MTT法的结果表明，结构类似物蛋白具有良好的生物学活性。这种新的结构类似物蛋白能较好地替代天然hbFGF在临床上的使用。 结论： 在不影响生物学活性的条件下，对个别氨基酸残基进行突变以获得新的结构类似物的方法，能够有效提高外源蛋白在大肠杆菌中表达的稳定性及可溶性。     

RNA干扰抑制乙酰肝素酶对肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和凋亡的影响

目的 探讨抑制乙酰肝素酶表达对人肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 构建靶向人乙酰肝素酶基因短发夹状双链RNA(shRNA)真核表达质粒(pshRNA-Hpa),用脂质体将其转入A549细胞,建立稳定转染细胞株系,经逆转录.PCR和Western blot法检测转染效率后,分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell侵袭实验和流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI双染法)检测其对A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.采用Western blot法检测转染后磷酸化蛋白激酶B(PKB/Akt-Ser473)的表达.结果 转染pshRNA-Hpa的A549细胞乙酰肝素酶mRNA及蛋白表达明显低于未处理A549细胞,抑制率分别为54.09%和48.26%,细胞增殖速度减缓,侵袭能力降低,流式细胞术显示早期细胞凋亡率达(12.53±0.34)%,较空白对照组、空载体转染细胞组和阴性对照组明显增加(P＜0.01).同阴性对照质粒相比,转染pshRNA-Hpa的A549细胞Akt-Ser473的磷酸化水平降低52.15%.结论 靶向乙酰肝素酶重组shRNA质粒pshRNA-Hpa能有效抑制A549细胞乙酰肝素酶的表达,并可能通过下调磷酸化蛋白激酶B途径抑制细胞的增殖侵袭、促进细胞的凋亡.     

人肺癌细胞中生长因子的自泌循环和癌基因表达

用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ核酸杂交技术对４个人肺癌细胞系进行了表皮生长因子（ＥＧＦ）、转化生长因子α（ＴＧＦα）以及表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的基因表达研究，发现这些肺癌细胞系中均有ＥＧＦ和ＴＧＦ＿α的基因表达，３／４中亦有ＥＧＦＲ的基因表达。这些癌细胞系中自泌的生长因子作用于自身的ＥＧＦ受体形成的自泌循环，不断刺激其自身的增殖，这可能是癌细胞无休止生长的主要原因之一。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ核酸杂交结果还表明：在这４个肺癌细胞系中，无ｃ－ｍｙｃ癌基因表达的细胞系中有大量的ＥＧＦ和ＴＧＦα的基因表达。用ＥＧＬ抗ＥＧＦ和抗ＥＧＦＲ抗体处理这些人肺癌细胞系，抗ＥＧＦ和抗ＥＧＦＲ抗体在一定程度上可抑制其增殖，这也说明这些癌细胞中生长因子自泌环路的存在。     

308nm准分子激光对人角质形成细胞活力及bFGF表达与分泌的影响

目的:探讨308 nm准分子激光对人角质形成细胞(hKCs)活力及碱性成纤维细胞生长因子(bF-GF)表达与分泌的影响。方法:体外培养人角质形成细胞,免疫荧光法鉴定细胞。分别予不同剂量308 nm准分子激光及311 nm窄谱中波紫外线(NB-UVB)照射,MTT法检测hKCs细胞活力,RT-PCR法和ELISA法分别检测bFGF表达和分泌水平,并与NB-UVB进行对比。结果:细胞鉴定证实为角质形成细胞。308 nm准分子激光剂量达600 mj/cm2,NB-UVB剂量达500 mj/cm2时hKCs活力下降;2种光源在一定剂量范围内照射均可使hKCs表达、分泌bFGF水平增加,并呈剂量依赖性;308 nm准分子激光诱导hKCs分泌bFGF的水平高于NB-UVB。结论:308 nm准分子激光照射对hKCs活力的影响小于NB-UVB;308 nm准分子激光可以通过剂量依赖的方式诱导hKCs表达与分泌bFGF来促使白癜风复色,与NB-UVB相比效果更佳。