人参皂苷Rg3对人晶状体上皮细胞生长的抑制作用

目的:观察人参皂苷Rg3对体外人晶状体上皮细胞SRA01/04生长的抑制作用。方法:不同质量浓度的Rg3处理体外培养SRA01/04细胞后,应用MTT比色法分析其细胞生长抑制作用;AO/EB染色法观察细胞的形态学改变;流式细胞仪测定48h细胞凋亡率。结果:Rg3在一定范围内抑制SRA01/04细胞生长,其抑制率随时间和质量浓度增加而增加。AO/EB染色可见实验组SRA01/04细胞核着黄色荧光或橘红色荧光,细胞核呈固缩状或圆珠状。流式细胞仪检测凋亡率随药物质量浓度增加而增加。结论:Rg3能有效抑制SRA01/04细胞增殖、并诱导其凋亡。     

榄香烯乳对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞survivin表达及端粒酶活性的影响

目的观察榄香烯乳对视网膜母细胞瘤（Rb）HXO-RB44细胞凋亡抑制蛋白survivin表达及端粒酶活性的影响，探讨榄香烯乳对RbHXO-RB44细胞的作用机制。方法用不同浓度榄香烯乳作用于HXO-RB44细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定细胞增生活性；RT-PCR检测survivinmRNA的表达；聚合酶链反应方法检测端粒酶活性。结果榄香烯乳处理后HXO-RB44细胞受到不同程度的抑制，survivinmRNA表达下降；RB细胞系端粒酶活性减弱。结论榄香烯乳诱导HXO—RB44细胞凋亡与survivin有关；可减弱RB细胞系端粒酶活性，影响其周期变化，抑制RB细胞系增生。     

褪黑素对体外培养的视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞增生活性的影响察

目的 探讨褪黑素（MLT）对视网膜母细胞瘤(RB)HXO-RB44细胞增生活性的影响及相关机制。方法 利用四氮唑化合物（MTT）比色法,观察不同浓度的MLT对RB HXO-RB44细胞增生活性的影响;利用10-10、10-9、10-8、10-7 mmol/L的MLT对RB HXO-RB44分别进行干预,采用Hoechst荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化;利用流式细胞仪测定不同浓度的MLT干预24 h后,RB HXO-RB44细胞内活性氧（ROS）的表达、细胞周期与凋亡情况。结果 浓度为10-7 mmol/L以下的MLT对HXO-RB44细胞并无抑制作用（P值均＞0.05）。10-6 mmol/L以上的MLT能够显著抑制HXO-RB44细胞增生（P＜0.01）。浓度为10-6、10-5、10-4 mmol/L的MLT干预后,随药物浓度的升高,HXO-RB44细胞内ROS的表达逐渐升高。Hoechst染色显示：不同浓度的褪黑素分别作用于培养的HXO-RB44细胞4、8、12、24 h后,细胞核固缩、核碎裂增多,细胞凋亡的程度随着MLT浓度的增大而加重。流式细胞仪检测：药物干预后,G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,随着MLT浓度的升高,HXO-RB44细胞凋亡率明显升高。结论 浓度大于10-6 mmol/L的MLT能够有效地抑制HXO-RB44细胞增生,其抑制效率随药物浓度的升高和作用时间的延长而增强;MLT的抗细胞增殖作用可能与其诱导HXO-RB44细胞内的活性氧产生、阻滞细胞周期于G0/G1期并诱导细胞凋亡有关。     

苦参碱对人视网膜母细胞瘤细胞生长与端粒酶活性影响的实验研究

目的探讨苦参碱（Ma）对体外培养的人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞的生长抑制作用及其机制。方法培养的人HXO—Rb44细胞经不同浓度的Ma作用后,采用噻唑蓝比色法（MTT法）测定细胞的生长状况;采用苏木素-伊红染色、流式细胞技术及核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口标记法检测细胞凋亡率和形态学变化;采用端粒重复扩增法检测端粒酶活性的变化。结果一定浓度范围内Ma可抑制HXO—Rb44细胞的生长（P〈0．01）,24h内呈浓度依赖性。0．4mmol／LMa作用12h,可观察到HXO—Rb44细胞凋亡的形态改变,细胞凋亡率开始增加（P〈0．01）,端粒酶活性下降（P〈0．01）,两者在48h内均呈时间依赖性,并具有一定相关性（r=-0．961,P〈0．01）。结论Ma可抑制HXO—Rb44细胞生长,诱导其凋亡,端粒酶活性下降可能是Ma诱发HXO—Rb44细胞凋亡机制之一,提示Ma对视网膜母细胞瘤的综合治疗具有一定的应用前景。     

Apoptin基因诱导视网膜母细胞瘤凋亡的研究

目的观察Apoptin基因对人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-RB44的促凋亡作用,并探讨其可能的机制。方法用脂质体将Apoptin基因导入HXO-RB44细胞,通过RT-PCR法检测ApoptinmRNA的表达,同时用SABC免疫组织化学法分析Apoptin和p53的表达。采用细胞计数法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果转入Apoptin基因后,HXO-RB44细胞的生长明显受抑制（P〈0.05）。细胞周期分析可见凋亡峰,凋亡率为38.5%。细胞中可见Apoptin阳性表达（P〈0.05）,p53表达差异无统计学意义（P〉0.05）。凋亡细胞在荧光显微镜下形成凋亡小体。结论转入Apoptin基因可显著促进HXO-RB44细胞的凋亡,Apoptin诱导的凋亡不依赖功能性p53的生成。     

环氧合酶-2及其选择性抑制剂对视网膜母细胞瘤细胞体外生长增殖的影响

目的:观察人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达情况,以及选择性COX-2抑制剂尼美舒利(nimesulide,NIM)对该细胞株生长增殖的影响。方法:体外培养HXO-RB44细胞;采用免疫细胞化学SP法检测HXO-RB44细胞中COX-2的表达情况;将不同浓度的NIM(0,200,300和400μmol/L)作用于HXO-RB44细胞24,48和72h后,用噻唑蓝(MTT)比色法观察NIM对细胞增殖的影响。结果:免疫细胞化学结果显示,COX-2在HXO-RB44细胞中的表达率高达98.3%,阳性物质弥漫分布于整个胞质或沿核膜周边呈线状分布。阴性对照组中阳性细胞表达率为0%。MTT法显示,NIM能降低HXO-RB44细胞的吸光度A值(P<0.01),细胞生长抑制率随作用时间和药物浓度的增加而增加。结论:COX-2在HXO-RB44细胞高表达;NIM能显著抑制HXO-RB44细胞的生长和增殖,抑制作用呈剂量和时间依赖性。     

人参皂甙Rg3在大鼠角膜新生血管中的作用研究

目的研究人参皂甙Rg3对大鼠角膜新生血管(CNV)的作用。方法建立角膜碱烧伤后CNV模型,SD大鼠随机分为对照组和0.1、0.2、0.5mg/L人参皂甙Rg3治疗组。显微镜下观察各组CNV生长情况并计算CNV面积;免疫组织化学和半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组角膜内血管内皮生长因子(VEGF)在不同时间点的表达变化。结果人参皂甙Rg3不同质量浓度组均能显著抑制CNV生长,0.5mg/L人参皂甙Rg3组抑制作用最显著(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3对大鼠角膜碱烧伤后CNV的生长有明显抑制作用,其作用机制与抑制VEGF表达有关。     

榄香烯乳联合足叶乙甙对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞凋亡及survivin表达的影响

目的:观察榄香烯乳联合足叶乙甙对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞凋亡及Survivin表达的影响及其作用机制.方法:采用榄香烯乳、足叶乙甙单药及两者联合处理视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞,观察HXO-RB44细胞生长情况并采用四甲基偶氮唑蓝(MT)结果:HXO-RB44细胞经榄香烯乳、足叶乙甙及两者联合处理后,细胞增殖受到不同程度的抑制(r=0.963,P＜0.05),Survivin蛋白表达下降(P＜0.01);其中以两者联合用药最为显著.结论:榄香烯乳联合足叶乙甙能协同抑制HXO-RB44细胞的增殖,并可能下调survivin的表达,促进细胞的凋亡,抑制RB细胞系增生.     

lncRNA-MEG3通过P53途径介导视网膜母细胞瘤凋亡

目的 探讨MEG3是否参与视网膜母细胞瘤的形成及其分子机制.方法 应用实时荧光定量PCR技术检测视网膜母细胞瘤组织及瘤旁正常视网膜组织标本中MEG3的表达水平;通过转染pcDNA-MEG3或siRNA-MEG3上调或干扰视网膜母细胞瘤细胞SO-RB50及HXO-RB44中MEG3的表达水平,随后用流式细胞仪检测转染后的细胞凋亡率变化,用Western blot检测转染前后P53蛋白表达水平的变化.结果 视网膜母细胞瘤组织中MEG3的表达较瘤旁正常视网膜组织出现显著下降(P=0.014).转染了pcDNA-MEG3的SO-RB50细胞MEG3表达显著增加(P =0.002),转柒了siRNA-MEG3的HXO-RB44细胞MEG3表达显著减少(P=0.004).流式细胞仪检测结果显示,MEG3表达上调后的SO-RB50细胞凋亡率显著增加(P＜0.05);干扰MEG3表达后的HXO-RB44细胞凋亡率显著减少(P＜0.05).Western blot检测结果显示,转染了pcDNA-MEG3的SO-RB50细胞中P53蛋白的表达较阴性对照组显著增加(P＜0.05),转染了siRNA-MEG3的HXO-RB44细胞中P53蛋白的表达较阴性对照组显著减少(P＜0.05).结论 视网膜母细胞瘤组织中MEG3的表达下调,且MEG3可能通过促进P53蛋白的表达诱导视网膜母细胞瘤细胞的凋亡,从而影响视网膜母细胞瘤的发生和发展.     

CD44反义寡核苷酸对人眼小梁细胞增生与凋亡的影响

目的观察CD44反义寡核苷酸封闭CD44基因表达对人眼小梁细胞增生与凋亡的影响,探讨黏附分子CD44在原发性开角型青光眼发病过程中可能的作用。方法采用硫代修饰的CD44反义寡核苷酸,通过脂质体介导转染体外培养的人眼小梁细胞。MTT法观察CD44反义寡核苷酸对人眼小梁细胞增生的影响。流式细胞仪检测CD44反义寡核苷酸封闭CD44基因表达对人眼小梁细胞凋亡的影响。结果3种浓度的CD44反义寡核苷酸对人眼小梁细胞的增生起抑制作用且呈浓度依赖性,浓度越高抑制作用越强,但对小梁细胞的凋亡起促进作用,浓度越高促凋亡作用越明显。结论CD44反义寡核苷酸封闭CD44基因表达后人眼小梁细胞增生作用受到抑制,小梁细胞的凋亡增加。黏附分子CD44可能通过影响小梁细胞的增生与凋亡过程参与了原发性开角型青光眼发病过程。     

Strabisme Alternant - Etude clinique - traitement

The author defines motor and sensory alternation: the term alternation should not be used in isolation, it should always be accompanied by the name of the parameter concerned. Sensory alternation is always found together with motor alternation but the reverse is not true.The examining criteria for a diagnosis of sensory alternation are given, sensory alternation must not be confused with alternating inhibition. Working from clinical observations of cases of motor alternating strabismus, the author selects 2 types of binocular sensory relations which allow one to differentiate between:- cases of primary alternating strabismus- cases of secondary alternating strabismusThese forms will develop in different ways; in both cases a cure is possible providing that the right treatment is prescribed and once prescribed carefully followed, etc. It is always a case of serious forms of strabismus whose developmental period is spread over several years.According to the authors, the frequency of cases of true primary strabismus is from 1–3%, the frequency of cases of secondary alternating strabismus varies according to the type of therapy practised on cases of monocular strabismus with amblyopia. These latter will become cases of alternating strabismus under the influence of certain types of therapy carried out over several years (penalization, rocking, alternated occlusion, etc...).Experimental data on kittens confirm clinical data; kittens placed in abnormal environments during the sensitive period will show modification in the distribution of cortical cells and the absence of binocular cells (either because the excitation of the two eyes was not simultaneous, or not identical: artificial strabismus, occlusion, opaque glasses). This disturbances become irreversible after a certain period of exposure (a function of age, length of exposure, etc...).It is thus necessary to bear in mind: 1) the iatrogenic risks of certain orthoptic treatments, 2) the necessity for a binocular form of treatment as soon as possible, as once a certain stage is passed, cortical plasticity diminishes and the elaboration of normal binocular relations becomes impossible.

---

     

Effects of Adenosine Agonists on Intraocular Pressure and Aqueous Humor Dynamics in Cynomolgus Monkeys

The effects of single or multiple topical doses of the relatively selective A₁adenosine receptor agonists (R)-phenylisopropyladenosine (R-PIA) and N⁶-cyclohexyladenosine (CHA) on intraocular pressure (IOP), aqueous humor flow (AHF) and outflow facility were investigated in ocular normotensive cynomolgus monkeys. IOP and AHF were determined, under ketamine anesthesia, by Goldmann applanation tonometry and fluorophotometry, respectively. Total outflow facility was determined by anterior chamber perfusion under pentobarbital anesthesia. A single unilateral topical application of R-PIA (20–250 μg) or CHA (20–500 μg) produced ocular hypertension (maximum rise=4.9 or 3.5 mmHg) within 30 min, followed by ocular hypotension (maximum fall=2.1 or 3.6 mmHg) from 2–6 hr. The relatively selective adenosine A₂antagonist 3,7-dimethyl-1-propargylxanthine (DMPX, 320 μg) inhibited the early hypertension, without influencing the hypotension. Neither 100 μg R-PIA nor 500 μg CHA clearly altered AHF. Total outflow facility was increased by 71% 3 hr after 100 μg R-PIA. In conclusion, the early ocular hypertension produced by topical adenosine agonists in cynomolgus monkeys is associated with the activation of adenosine A₂receptors, while the subsequent hypotension appears to be mediated by adenosine A₁receptors and results primarily from increased outflow facility.