七氟烷后处理对大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的探讨七氟烷后处理对大鼠在体心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为5组(n=8):假手术组(S组);缺血再灌注组(IR组);1%、2%、3%七氟烷后处理组(SP1、SP2、SP3组),建立心肌缺血再灌注模型,再灌注结束时测定血清LDH浓度、心肌p53蛋白表达水平和细胞凋亡。结果与S组比较,各组血清LDH浓度、心肌p53蛋白表达和细胞凋亡升高(P<0.05);与IR组比较,各SP组血清LDH浓度、心肌p53蛋白表达和细胞凋亡降低(P<0.05);与SP2组比较,SP1组和SP3组血清LDH浓度、心肌p53蛋白表达和细胞凋亡升高(P<0.05)。结论七氟烷后处理可通过下调p53蛋白表达抑制细胞凋亡,从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,2%七氟烷后处理的效果更显著。     

缺血预处理联合后处理的肺保护作用研究进展

近年来,体外循环术、肺移植术、肺栓塞溶栓治疗术等技术水平的日渐成熟,然而肺缺血再灌注损伤仍然是最常见的术后并发症,造成患者术后肺功能不全,严重者甚至可造成患者死亡。随着缺血预处理和缺血后处理概念的提出,为再灌注肺损伤的保护方法提供了新的理论基础和研究方向。本文就预处理联合后处理的肺保护作用综述其研究进展。     

血塞通注射液对缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨血塞通注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将24只Wistar大鼠随机分为三组:心肌缺血再灌注组(MIR,n=8):术前给予生理盐水干预;血塞通治疗组(X,n=8):术前给予血塞通注射液600 mg/(kg·d)腹腔注射给药3天;假手术组(S,n=8):术前处理同MIR组.MIR和X组大鼠在结扎左前降支30分钟后行再灌注240分钟.S组所有操作同MIR组,大鼠仅穿线不结扎左前降支.分别于缺血再灌注240分钟采血,S组取相同时点采血.检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和肌钙蛋白I(cTnI)含量变化.结果 与X组和S组比较,MIR组血清SOD活性显著降低(P＜0.001),MDA、cTnI含量显著升高(P＜0.001);与S组比较,X组血清SOD、MDA浓度差异无显著性(P＞0.05),而血清cTnI显著升高(P＜0.01).结论 血塞通可能通过减少MDA的产生,增加SOD活性,减轻心肌缺血再灌注损伤.     

花生四烯乙醇胺对大鼠心功能与心肌一氧化氮水平及一氧化氮合酶活性的影响

目的 观察大麻素类物质花生四烯乙醇胺（anandamide，Ana）对大鼠体外心脏左心室心肌中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。方法 采用Langendorff方法观察Ana对大鼠体外心脏心率（HR）、冠脉流量（CF）、冠脉灌注压(CPP)、左室压最大上升速率(＋dp/dtmax)、左室压最大下降速率( dp/dtmax)、左室收缩峰压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)及左室发展压(LVDP)的影响；NO含量和NOS活性采用联苯胺荧光分光光度法测定。结果 Ana可使体外心脏心率、CPP、＋dp/dtmax、 dp/dtmax、LVSP、LVDP降低，使LVEDP升高，CF增加。选择性大麻素CB1受体拮抗药AM251(1 μmol·L 1)可阻断 Ana的部分心脏效应；另一选择性大麻素CB2受体拮抗药AM630(1 μmol·L 1)对Ana的心脏效应无显著影响。NOS抑制药L N 硝基精氨酸甲酯（L NAME）(100 μmol·L 1)对Ana的心脏效应也无显著影响。Ana能增强原生型NOS(cNOS)活性，抑制诱生型NOS(iNOS)活性，促进心肌NO的释放。结论 Ana使离体大鼠心肌收缩力降低，心率减慢，表现出负性肌力和负性频率作用；Ana可舒张冠脉，增加冠脉流量；大麻素CB2受体可能不参与Ana的这些心脏效应，内源性NO也可能不参与调节Ana的心脏效应；可能存在其他新的作用位点调节Ana的心脏效应。Ana调节心肌NOS同工酶活性，增加cNOS活性，降低iNOS活性，促进NO的释放，可能发挥心肌保护作用，在心肌缺血和高血压治疗中有潜在应用前景。     

重组人促红细胞生成素对缺血后处理大鼠心脏功能的保护作用

目的:研究PI3K/Akt信号通路介导重组人促红细胞生成素(rhEPO)对缺血后处理(IPC)大鼠心脏功能的保护作用。方法:构建大鼠缺血/再灌注(I/R)模型,将42只♂SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、I/R组、IPC组、IPC+PI3K/Akt特异抑制剂Wort-mannin(W)组、rhEPO组、rhEPO+W组及rhEPO+IPC组,分别测定结扎前基础状态下(Baseline)、缺血后30min(I30min)、再灌注后30min(R30min)、再灌注后180min(R180min)的心功能参数左室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)。结果:与Sham组比较,I/R组在各不同时间点LVSP均明显降低;I30min时各组与Sham组比较,LVSP明显降低;与I/R组相比,IPC组、rhEPO组和rhEPO+IPC组R30min、R180min时LVSP明显升高;IPC+W组较IPC组、rhEPO+W组较rhEPO组LVSP前者均显著降低;各组+dp/dtmax、-dp/dtmax变化趋势类似LVSP;而LVEDP变化趋势与之相反;rhEPO+IPC组上述各指标较IPC组和rhEPO组无显著性差异。结论:IPC及rhEPO均能保护心肌缺血再灌注大鼠的心脏功能,其保护效应可能与PI3K信号转导通路的激活有关;联合应用rhEPO和IPC并不能进一步发挥心脏功能保护作用。     

葱白提取物对心肌缺血-再灌注损伤大鼠的保护作用及其机制

目的探讨葱白提取物(FOB)预处理对大鼠心肌缺血-再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制。方法SD成年大鼠随机分为假手术组,I/R组,FOB(小、中、大剂量)(300,600,1200 mg·kg^-1)+I/R组和硝酸甘油+I/R组,每组10只;结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注24 h建立在体心肌I/R损伤模型。多导生理记录仪记录和分析左心室功能变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;Western blotting和实时-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌Bax和Bcl-2蛋白及mRNA表达水平;免疫荧光检测细胞色素C(Cyt-C)和凋亡酶激活因子1(Apaf-1)的表达。结果与I/R组比较,FOB(小、中、大剂量)+I/R组大鼠心功能均明显改善;CK、LDH和CK-MB浓度降低;Bax蛋白及mRNA表达水平下调,同时Bcl-2蛋白及mRNA表达水平升高;Cyt-C及Apaf-1蛋白表达下降(P<0.05),并存在一定量效关系。结论FOB具有显著改善大鼠心肌I/R损伤及拮抗心肌细胞凋亡的作用,其机制与调节心肌Bax、Bcl-2、Cyt-C和Apaf-1的表达密切相关。     

654-2对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响探讨

目的探讨654-2对肝缺血再灌注损伤(I-R)的保护作用及对P-selectin蛋白表达的影响机制。方法20只Wistar大鼠随机分为I-R组和654-2组,I-R模型由夹闭门静脉左支45min再开放3h制备,比较两组动物血清ALT、GSH和肝组织P-selectin蛋白水平变化。结果654-2组ALT、GSH指标显著低于I-R组(P<0.01),654-2可显著改善肝细胞镜下损伤并减少肝组织P-selectin蛋白的表达。结论654-2可通过下调肝细胞P-selectin蛋白的表达而对肝缺血再灌注损伤(I-R)有保护作用。     

神经系统疾病脑一氧化氮、一氧化氮合酶的变化

目的 通过测定癫痫患者及格林巴利综合征患者脑内NO及NOS的变化探讨NO的可能作用。方法 采集复杂部分性发作病人发作3日内及格林巴利综合征患者脑脊液测定NO及NOS的含量。结果 病性发作3日内脑内NO水平247.5000±79.6829μmol/L,NOS为1.6088±0.1831U/ml,格林巴利综合征病人NO水平为478.9024±180.2927μmol/L,NOS活性为1.2648±0.2308U/ml,均显著高于对照组。结论 NO参与了某些神经系统疾病的发病过程,在复杂部分性发作及格林巴利综合征中具有不同的作用机制。     

缺血预处理对肝脏抗氧化能力的影响及机制

目的 在大鼠肝脏原位缺血再灌注(I/R)模型上观察缺血预处理(IP)对肝脏抗氧化能力的影响及其机制。方法 在大鼠肝脏原位缺血再灌注模型上,心包穿刺抽血,切取肝组织,分别进行血清ALT、AST检测,肝组织MDA、SOD、Cat、GSH-PX测定。结果 发现预处理组与缺血再灌注组相比血清中ALT、AST水平及肝组织匀浆中MDA的含量降低,而肝组织中SOD、Cat及GSH-PX的活性均不同程度增高,多数检测指标各预处理组之间均无明显差异。结论 实验表明缺血预处理能增强缺血再灌注肝脏的抗氧化能力,增加预处理的次数并不能增加预处理的效果。腺苷在缺血预处理过程中起着重要作用。     

川芎嗪对大鼠肾缺血-再灌注后核因子-kB表达与一氧化氮合酶活性的影响

目的 研究川芎嗪对肾脏缺血-再灌注后肾功能、核因子-κB(NFκB)的表达及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组、缺血-再灌注模型组和川芎嗪处理组,化学法检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)浓度以及左肾组织中一氧化氮合酶活性,HE染色后镜下观察肾脏病理变化,免疫组化测定肾组织NF-KB的表达水平.结果 川芎嗪15,30,45 mg·kg-1剂量于缺血前静脉注射均能降低再灌注时肾脏组织中NF-κB的表达.抑制诱生型NOS(iNOS)活性、降低尿素氮和肌酐水平,其中以15 mg·kg-1作用最为显著.结论 川芎嗪15,30,45mg·kg-1剂量均能减轻肾缺血损伤,其机制可能与抑制NF-κB的表达、降低iNOS活性有关,且该作用与川芎嗪的剂量相关,以15 mg·kg-1剂量的效果最好.     

吸入一氧化氮改善犬吸入性损伤肺功能及作用机制

为评价吸入一氧化氮(NO)在犬烟雾吸入性损伤肺功能改善效果及验证其作用机制。作者把21只犬随机分为三组,烟雾吸入后,对照组单纯吸氧,治疗组吸氧+0.0045％(45ppm)NO,连续监测12小时血气变化;正常组不致伤,用于建立组织学对照。数据行多个样本均数间方差分析。结果,吸入NO组能明显改善肺氧合功能(P<0.05),对肺通气功能也具有明显改善作用(P<0.05);动脉血和肺组织环磷酸乌苷(cGNP)明显升高(P<0.01)。结论,吸入NO能明显改善肺功能,作为吸入性损伤的综合治疗,吸入NO可推荐临床应用。     

Effects of Kaempferol and Myricetin on Inducible Nitric Oxide Synthase Expression and Nitric Oxide Production in Rats

Abstract: When administered as drugs or consumed as food components, polyphenolic compounds synthesized in plants interfere with intracellular signal transduction pathways, including pathways of nitric oxide synthase expression. However, effects of these compounds in vivo do not always correlate with nitric oxide synthase‐inhibiting activities revealed in experiments with cultured cells. The initial goal of this work was to compare effects of flavonoids kaempferol and myricetin on inducible nitric oxide synthase mRNA and protein expression monitored by real‐time RT‐PCR and immunohistochemistry and to evaluate the impact of these effects on nitric oxide production in rat organs measured by means of electron paramagnetic resonance spectroscopy. Kaempferol and myricetin attenuated the lipopolysaccharide‐induced outburst of inducible nitric oxide synthase gene expression; kaempferol also significantly decreased the lipopolysaccharide‐induced outburst of inducible nitric oxide synthase protein expression in the liver. Myricetin decreased nitric oxide production in intact rat liver. Kaempferol did not decrease nitric oxide production neither in intact rats nor in the lipopolysaccharide‐treated animals. Kaempferol even enhanced the lipopolysaccharide‐induced increase of nitric oxide production in blood. Myricetin did not interfere with lipopolysaccharide effects. As both kaempferol and myricetin are known as inhibitors of inducible nitric oxide synthase expression, our results suggest that modifications of nitric oxide level in tissues by these compounds cannot be predicted from data about its effects on nitric oxide synthase expression or activity.     

牛磺酸后处理对大鼠肢体缺血再灌注后胰腺损伤的影响

【摘要】目的观察大鼠肢体缺血再灌注（LIR）后胰腺的变化及牛磺酸（Tau）后处理的保护作用。方法将24只SD雄性大鼠随机分为对照（Control）组、LIR组和Tau组,每组8只。测定各组血浆黄嘌呤氧化酶（XOD）、丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、胰淀粉酶（AMS）、胰脂肪酶（LPS）、胰蛋白酶（Trypsin）含量的变化,光镜下观察胰腺组织形态学变化,用免疫组化观察胰腺组织中C/EBP同源蛋白（CHOP）的表达,TUNEL法观察胰腺组织细胞凋亡情况。结果LIR组MDA、XOD、ROS、AMS、LPS及Trypsin均高于Control组和Tau组,SOD低于Control组和Tau组（均P＜0.05）。HE染色结果显示LIR组腺泡结构破坏,间质血管扩张充血,血管周围有炎细胞浸润,胰岛形态不规则。Tau组较LIR组腺泡分界略清楚,血管扩张程度减轻,周围炎细胞减少,核浆分界和胰岛结构均有改善。免疫组化染色结果显示Tau组胰腺组织CHOP表达较LIR组下调。TUNEL染色结果显示Tau组胰腺组织细胞凋亡数量较LIR组减少。结论Tau后处理可减轻大鼠LIR后胰腺损伤,其机制可能与抑制氧化应激反应、下调CHOP表达,从而减轻内质网应激诱导的细胞凋亡有关。     

二甲双胍对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

摘 要 目的：探讨二甲双胍对心肌缺血再灌注大鼠心肌凋亡的影响。方法: 采用结扎冠脉前降支30 min,再灌注2 h的方法制备大鼠心肌缺血再灌注模型,随机分为正常对照（NC）组、假手术（Sham）组、缺血再灌注（IR）组、二甲双胍高（HD）、中（MD）、低（LD）3个剂量组（150,300,500 mg·kg-1）,每组10只,于建模前3 d至处死前每天灌胃给药,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,RT PCR法检测心肌组织中HIF 1α基因表达,Western blot法检测心肌组织中Fas、Bcl 2、Bax和caspase 3蛋白表达。结果: 与IR组相比,LD组、MD组和HD组大鼠24 h和7 d时心肌细胞凋亡率均降低,差异均有统计学意义（P<0.01）;与IR组相比,LD组、MD组和HD组大鼠24 h和7 d时心肌组织中HIF 1α mRNA相对表达量均降低,差异均有统计学意义（P<0.01）;与IR组相比,LD组、MD组和HD组大鼠24 h和7 d时Fas、caspase 3和Bax蛋白相对表达量均降低,而Bcl 2蛋白相对表达量均升高,差异均有统计学意义（P<0.01）。二甲双胍各剂量组的作用均呈剂量相关性,其中MD组和HD组与LD组相比,差异有统计学意义（P<0.01）。结论: 二甲双胍可减少缺血 再灌注大鼠心肌细胞凋亡发生,其机制可能与改善心肌缺血环境、抑制Fas死亡信号通路激活、增加凋亡抑制因子Bcl 2表达有关。     

褪黑素对海马神经元保护作用的机制

目的　探讨褪黑素对海马神经元保护作用的可能机制。方法　以 6～ 8个月龄沙鼠制成脑缺血再灌注动物模型。腹腔注射褪黑素并以生理盐水 (NS)作对照 ,72h后检测海马组织中乳酸脱氢酶(LDH)及一氧化氮 (NO)含量。结果　褪黑素小剂量组LDH为 (35 .49± 7.2 8) μmol/mg ,NO为 (13 .11±3.5 8) μmol/mg ;褪黑素大剂量组分别为 (31.39± 6 .89) μmol/mg ,(10 .72± 2 .43) μmol/mg二组均显著低于生理盐水组的 (4 6 .6 1± 12 .5 9) μmol/mg和 (17.2 8± 3.2 1) μmol/mg。 结论　褪黑素可能是通过减少缺血再灌注后海马区NO的含量而发挥对神经元的保护作用     

一氧化氮在胎儿一胎盘功能监测中的作用

目的研究足月妊娠妇女血清一氧化氮(NO)含量与胎盘功能的关系.方法采用Griess方法测定30例胎盘功能不全足月初孕妇外周血中NO的稳定代谢产物亚硝酸基/硝酸基的含量,以30例胎盘功能正常的孕妇作对照,同时测定胎盘重量和新生儿体重. 结果(1)实验组和对照组血清NO含量分别为76.86+29.67μmol/L和1190.16±25.93μmol/L,两组比较有极显著性差异(P＜0.01);(2)实验组与对照组的胎盘重量及新生儿体重分别为473.3±31.4g、533.3±37.9g和3094.5±175.6g、3336.7±251.9g,两组比较有极显著性差异(P＜0.01),且胎盘重量及新生儿体重与NO含量呈明显正相关. 结论足月妊娠妇女NO含量与含量与胎盘功能密切相关,与胎血盘、胎儿发育呈正相关.     

左旋卡尼汀对大鼠心脏缺血-再灌注损伤能量代谢的影响

目的：观察左旋卡尼汀对离体大鼠心脏缺血-再灌注损伤的作用及对心肌细胞能量代谢的影响。方法：将制备成功的Langendorff离体心脏模型随机分成3组（各8只）。正常对照组（CON组）：K—H液灌注65min；左旋卡尼汀组（L—CAR组）：离体心脏用K—H液平衡15min后，K—H液中加入5mmol／L左旋卡尼汀继续灌注20min．然后全心停灌20min，再用相同的液体复灌30min；心肌缺血-再灌注组（MIRI组）：整个实验过程同L—CAR组．但灌注液中不含左旋卡尼汀。比色法测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）含量，高效液相色谱法测定再灌注末心肌组织中腺苷酸的含量。结果：缺血前各组LDH活性差异无统计学意义（P〉0．05），再灌注末L—CAR组LDH含量明显低于MIRI组（P〈0．01），而心肌组织ATP、ADP、总腺苷酸水平及能荷则高于该组（P〈0．05，P〈0．01）。结论：左旋卡尼汀对缺血-再灌注心肌有保护作用，其保护机制与改善心肌能量代谢有关。     

人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠nNOS，iNOS表达的影响

【摘要】 目的 探讨人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织一氧化氮合酶（NOS）表达的影响。方法 将大鼠随机分成假手术组,模型组（脑缺血再灌注损伤组）,人参皂苷Rg1 10,20,40mg/kg组,尼莫地平组（阳性药物对照组）,每组10只。采用大鼠中动脉栓塞法制作大鼠脑缺血再灌注模型,观察大鼠再灌注后神经功能缺损情况,采用比色法检测大鼠nNOS,iNOS和一氧化氮（NO）的含量,应用免疫组化和免疫印迹法检测脑组织缺血再灌注后nNOS,iNOS的表达。结果 （1）人参皂苷Rg1各组大鼠脑缺血后神经功能评分明显低于模型组（p<0.05）;（2）与模型组相比,人参皂苷Rg1各组随浓度增高nNOS含量及表达增高（p<0.05）,iNOS含量及表达明显降低（p<0.05）;（3）免疫组化和免疫印迹的结果也证明这一趋势。结论 人参皂苷Rg1防治大鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与激活nNOS,抑制iNOS有关,且以高剂量效果较好。     

1,25-二羟维生素D_3对脊柱结核患者外周血单个核细胞的NO及iNOS的影响研究

目的:研究1,25-二羟维生素D3(DHVD3)作用下脊柱结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量变化,探讨其对脊柱结核患者的免疫调节作用。方法:患者PBMC分为试验组(加入DHVD3)和对照组(加入培养基),接种卡介苗后培养;采用硝酸还原酶法测定不同时间点(0、3、6、9、12d)试验组和对照组培养上清液中NO的相对吸光度值,分析其变化规律;于第6天收获2组培养细胞,提取细胞总RNA,逆转录后,定量聚合酶链反应(PCR)扩增,对目的基因iNOS及参照基因3-磷酸甘油醛脱氢酶的mRNA进行分析,用相对定量方法2-ΔΔCt比较其差异。结果:细胞培养第6天,试验组NO的相对吸光度值和iNOS的mRNA含量均高于对照组(P<0.05)。结论:DHVD3可使脊柱结核患者PBMC内iNOS的含量增加,进而促进NO的分泌,从而增强单个核细胞对结核杆菌的吞噬作用。     

缺血后处理对大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-xl/s的影响

目的:从Bcl-xl/s基因和蛋白水平探讨缺血后处理抗大鼠心肌细胞凋亡的机制。方法:18只健康Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、缺血再灌注损伤(I/R)组、缺血后处理(PostC)组,每组6只。采用原位缺口末端标记(TUNEL)检测大鼠心肌细胞凋亡指数;免疫组化法检测BcL-xl/s蛋白表达水平;荧光实时定量PCR法检测心肌组织Bcl-xl/s基因表达水平。结果:与I/R组相比,PostC组再灌注后心肌细胞凋亡指数明显降低,PostC组Bcl-xl蛋白及mRNA表达水平明显上调,Bcl-xs蛋白及mRNA表达水平明显下调。结论:PostC能显著减少缺血再灌注后心肌细胞凋亡,凋亡相关基因Bcl-xl、Bcl-xsmRNA及蛋白参与了由缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡。