病毒性肝炎的肝细胞膜抗体的检测

近年来肝炎的免疫学研究指出:肝细胞抗原,特别是肝细胞膜抗原可能是引起慢性肝炎肝细胞损害的靶抗原。因此,检测肝脏器官特异性自身抗体对于认识肝炎或慢性肝病的自身免疫现象具有重要意义。关于此问题国外已有不少研究报告。国内报道甚少。为了解肝脏器官特异性自身抗体在病毒性肝炎(以下简称肝炎)发病机制中的作用,我们于1981年4月至11月对各型肝炎进行了肝细胞膜抗体(LMA)间接荧光法检测。兹将检测结果报告如下。     

病毒性肝炎患者微粒体自身抗体检测及其意义的研究

本文首次报道我国病毒性肝炎患者抗微粒体自身抗体检测。抗微粒体自身抗体主要在慢性活动型肝炎(CAH)、慢性重型肝炎及慢性小叶型肝炎(CLH)中检出,其中以CAH检出率最高(18.9％)。在慢性迁延性肝炎(CPH)、急性肝炎患者中未能查出这种自身抗体。3例肝内HDAg阳性病例,2例出现抗微粒体抗体阳性。提示:抗微粒体抗体存在与部分慢性活动性肝脏病变及HDV二重感染有一定的关系。     

应用固相免疫酶(DASS)方法对病毒性肝炎抗肝特异性脂蛋白抗体的研究

肝细胞膜特异性脂蛋白(LSP)是肝病自身免疫反应的特异性抗原。用固相免疫酶试验检测123例肝炎患者血清中抗LSP抗体。结果:急性肝炎发病2～4周抗LSP抗体阳性率64.4％,发病8周以后在恢复期中阳性率16.7％。慢性迁延性肝炎阳性率64％。慢性活动性肝炎阳性率85.1％。亚急性肝坏死阳性率100％。说明抗LSP抗体检出率与病毒性肝炎病程有关,慢活肝与对LSP产生的自家免疫反应有密切的关系。同时也提示肝炎患者血清中抗LSP抗体的水平与肝脏损害的严重程度有关。(P<0.01)     

丙型肝炎患者自身抗体检测的临床意义

目的探讨丙型肝炎患者血清中自身免疫性抗体的检出率与疾病的相关机理。方法对89例丙型肝炎患者血清和20例体检健康者血清进行抗核抗体(ANA)、ENA抗体、抗线粒体抗体(AMA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗肝膜抗体(LMA)、类风湿因子(RF)等自身抗体检测。结果①丙型肝炎伴ANA、ENA抗体等6种自身抗体阳性率高于正常对照组(P<0.05),其中RF的阳性检出率最高(30.34%)。②急性丙肝组患者阳性检出率为43.75%;慢性丙肝组阳性检出率36.99%,两组比较差异无显著性(χ2=0.25,P>0.05)。③单纯抗-HCV阳性的58例中自身抗体阳性者25例,检出率43.10%;HCV RNA阳性的31例中9例抗体阳性,检出率29.03%。结论HCV感染过程中机体普遍存在自身免疫现象,应引起重视。     

自身抗体检测对自身免疫性肝炎的诊断研究

目的 检测抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗肝肾微粒体抗体(LKM)、抗可溶性肝抗原抗体(SLA)、抗肝细胞膜抗体(LMA)、抗线粒体抗体(AMA)，来探讨自身抗体检测对诊断自身免疫性肝炎的临床意义。方法 应用ELISA方法筛选出肝炎病毒血清标志物阴性而谷丙转氨酶异常升高的病人血清。应用间接免疫荧光法检测自身抗体。结果38份血清中有9例存在一项或一项以上的自身抗体，其中ANA阳性5例，SMA阳性4例，LKM阳性4例，SLA阳性1例，LMA阳性2例，抗线粒体抗体阳性2例。结果 全为阴性的血清标本29例；而对照组健康人只有1例ANA呈阳性。结论 自身免疫性肝炎是一组以存在自身抗体为特点的肝损害疾病，通过检测自身抗体可对一部分AIH病人进行确诊。     

非甲-非戊型肝炎患者血清自身抗体的检测及分析

目的 探讨非甲-非戊型肝炎患者血清自身抗体的存在情况及临床意义。方法 采用ELISA法筛选28例非甲-非戊型肝炎患者，用间接免疫荧光法和蛋白质印迹法分别检测所有研究对象的抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA-M2)、抗肝肾微粒体抗体(ALKM)、抗可溶性肝抗原抗体／抗肝胰抗体(ASLA／ALP)、抗肝细胞胞浆抗原1型抗体(LCIA)。结果 11例非甲-非戊型肝炎患者检出至少一种以上自身抗体，自身抗体总检出率达39．3％。未检出抗SLA／ALP及抗LCIA。经完善相关检查并结合临床特点。最终有6例患者诊断为自身免疫性肝病(自身免疫性肝炎-Ⅰ型3例、Ⅱ型1、原发性胆汁性肝硬化2例)。结论 非甲-非戊型肝炎可存在自身免疫性肝病和其他类型肝炎病毒。在非甲-非戊型肝炎患者中常规检查抗肝抗原自身抗体有助于疾病的诊断和鉴别诊断。     

肝炎肝硬化患者肝组织中HCV表达的初步探讨

目的:观察肝炎肝硬化患者肝组织中丙型肝炎病毒(HCV)的表达,探讨肝硬化患者肝组织中HCV的表达几率。方法:随机选取100例肝炎肝硬化患者进行肝活检。取肝组织,用免疫组化SP法,检测肝组织中的HCV。结果:100例肝炎肝硬化患者肝组织中,HCV阳性表达者10例,HCV检出率为10％。结论:结果表明,HCV是引起肝炎肝硬化的又一重要因素。     

抗-LSP与病毒性肝炎病理改变的关系

本文应用酶联免疫吸附试验检测经肝组织病理诊断为重症肝炎、慢活肝、慢迁肝及慢性无症状HBsAg携带者等87例患者血清中的抗肝特异性膜脂蛋白(抗-LSP)。其结果表明,重症肝炎、慢活肝的抗-LSP阳性检出率远较慢迁肝及无症状HBsAg携带者高,且抗-LSP的检出率及抗体水平均与肝组织病理改变程度呈正相关,提示了抗-LSP与肝细胞坏死程度关系密切。此项检测对病毒性肝炎患者病情的估价及预后的判断具有重要意义。     

ELISA法对HBsAg—IgM的测定及意义

本文介绍一种ELISA法检测循环乙型肝炎表面抗原-IgM(HBsAg-IgM)复合物,共测定各类型肝炎及无症状携带者73例,还有乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与乙型肝炎核心抗体(抗HBc)阴性者(健康人)28例,计101例。急性肝炎HBsAg-IgM检出率为77.27％,慢性活动型为50％;慢性迁延型为37.5％;慢性重症肝炎为33.33％;无症状携带者为50％。健康人检出率为14.28％。文中述及血清HBsAg滴度(RPHA法)与HBsAg-IgM检出的关系,将HBsAg-IgM血清稀释度类型分为四类,分别观察其OD值的表现。也探讨了HBsAg-IgM检测时某些影响因素。     

不同类型肝炎患者及献血员血清和肝组织中TTV的检测

目的：探讨不同类型肝炎患者及献血员TTV（Transfusion transmitted Virus,TTV)其感染状态及临床特征。方法：采用斑点杂交和原位杂交方法检测不同人群共83例及7例不同类型肝病病人的肝组织TTVDNA。结果：TTV在各组肝炎病总检出率为22．9％,7例肝组织TTV阳性率为28．6％,而且在非甲－非戌型肝炎病人中检出率最高（38．9％）,结论：TTV在不同人群中均能检。而非甲－非戌型肝炎患者中检出率最高,提出TTV可能是一种损肝病毒,而且可致肝重度损害。     

慢性乙型肝炎患者的HDV感染

作者对69例经病理确诊为慢性乙型肝炎患者,检测了肝内δ抗原(ABC免疫组化法)和血清δ抗体(ELISA法),结果57例肝组织有 7例检出δ抗原,39例血清中 7例检出δ抗体,无 1例 δ抗原和抗体同时阳性。HDV 标志的总检出率为20.3％(14/69)。CPH和CAH之间的HDVM检出率无显著性差异。HDV感染与无HDV感染者之间,HBV复制标志无差异。HDV 感染者蛋白质代谢紊乱程度较重。发现3例肝内δ抗原和血清HB-DNA均为阳性,显示重叠HDV感染,对HBV复制未见明显抑制。     

乙肝DNA聚合酶在187例乙型肝炎病毒感染的各类肝病中的检测

采用免疫沉淀法对187例乙肝病毒感染患者作了DNA聚合酶(DNA--P)的测定。在各类肝炎中DNA—P的阳性检出率以慢活肝最高为66.6％,依次为急性肝炎45％,携带者33.5％,慢迁肝31.5％。本文分析了乙肝的抗原抗体系统与DNA—P检出率的关系。经统计学处理,DNA—P检出率与HBsAg滴度增高呈正相关γs=0.99,P<0.01。HBeAg阳性组DNA—P检出率为62.4％,抗—HBe阳性组DNA—P检出率为29.5％,抗—HBs阳性8例、DNA—P均为阴性。抗—HBc—IgM强阳性组DNA—P检出率为86.4％。作者认为1/3无症状携带者DNA—P活力增高表明病毒在复制,因此携带者在流行病学上的意义不可忽视。又鉴于18例抗—HBe阳性血清DNA—P活力增高,因此在判断HBeAg~-/抗—HBe~+患者病毒复制情况时,应予慎重。     

714例疑似自身免疫性肝病患者相关自身抗体的检测

目的:观察在疑似自身免疫性肝病(AILD)患者相关自身抗体的阳性率及自身免疫性肝病检出率.方法:采用间接免疫荧光法检测714例疑似AILD患者血清标本中的抗线粒体抗体(AMA)、抗核抗体(ANA)及抗平滑肌抗体(SMA),免疫印迹法检测抗线粒体抗体亚型-丙酮酸脱氢酶复合物(AMA-M2)、抗肝肾微粒体抗体(LKM-1)、肝细胞溶质抗原Ⅰ型抗体(LC-1)、可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(SLA/LP),并查阅临床资料进行确诊.结果:ANA、AMA、SMA、AMA-M2、LC-1、SLA/LP、LKM-1阳性率分别为37.67％、11.34％、1.97％、16.94％、1.68％、1.40％、0.56％,确诊原发性胆汁性肝硬化(PBC)68例(9.52％),自身免疫性肝炎(AIH)疑似患者4例(0.56％),未检出原发性胆管炎(PSC)患者.结论:AILD中,以PBC最常见,间接免疫荧光法和免疫印迹法联合应用检测自身抗体可减少AILD的漏诊.     

肝癌患者围手术期外周血黑色素瘤抗原-1mRNA和甲胎蛋白mRNA检测与术后复发的关系

目的 探讨肝细胞癌患者围手术期外周血MAGE-1mRNA和甲胎蛋白(AFP)mRNA表达水平其与术后转移复发的关系。方法 通过巢式RT—PCR,在围手术期检测了45例肝细胞癌患者外周血MAGE-1mRNA和AFPmRNA,并进行平均11个月的随访。同时以22例肝炎后肝硬化、11例肝血管瘤、12例肝转移癌患者和20例健康志愿者外周血标本作为对照组进行了MAGE-1mRNA和AFP mRNA的对比检测。结果 MAGE-1mRNA在12例肝转移癌患者外周血中的检出率为33．3％(4／12);肝炎后肝硬化、肝血管瘤患者和健康志愿者中均未检出。AFP mRNA在肝炎后肝硬化患者外周血中的检出率为13．6％(3／22),在肝转移癌、肝血管瘤患者和健康志愿者中均未检出。45例肝细胞癌患者外周血中,MAGE-1mRNA／AFP mRNA的检出率分别是术前42．2％(19／45)／51．1％(23／45),术后7d20％(9／45)／24．4％(11／45),术后28d15．6％(7／45)／22．2％(10／45)。统计分析提示,术后28d肝细胞癌患者外周血检出MAGE-1 mRNA／AFPmRNA预示患者近期复发。并且双标志物联合检测较单标志物检测对预测复发具有更高的敏感性。结论采用巢式RT—PCR的方法联合检测肝细胞癌患者术后28d外周血中癌特异性的MAGE-1 mRNA和肝细胞特异性的AFP mRNA有助于预测肝细胞癌患者术后的转移复发。     

聚合酶链反应检测重型肝炎患者血清HBVDNA

采用ＰＣＲ法检测４８例重型肝炎患者血清中ＢＨＶＤＮＡ存在情况，并与斑点杂交检测进行比较，结果表明：ＰＣＲ检测３９例阳性，检出率为８１．３％（３９／４８）．ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）组ＰＣＲ检测均阳性（８／８），ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（－）组阳性率为８８．０％（２２／２５），抗体阳性组检出率为７２．７％（８／１１），检测灵敏度为１．０ｆｇ；斑点杂交检测１５例阳性，阳性率３０．２％（１５／４８），各组斑点杂交阳性率均低于ＰＣＲ法．提示：（１）大多数重型肝炎患者血清中存在低滴度的病毒颗粒，对重肝发病有一定作用；（２）大部分ＨＢｅＡｇ阴性，抗体阳性的重型肝炎患者血清仍有传染性，应考虑抗病毒治疗．     

新疆肝病患者HDV、HBV感染的免疫组化研究

作者以直接酶标法及过氧化物酶-抗过氧化物酶法(PAP法)对145例新疆各类肝病患者的肝组织进行HDV、HBV感染的免疫组化研究,各类标本中,HBsAg及HBcAg的合计检出率为39.3％,HDAg在HBV血清学标记阳性患者肝组织中的检出率为3.5％。胞浆型HBcAg表达多见于肝组织病变明显区域,HDAg在肝炎后肝硬化组的检出率明显高于HBV感染非肝硬化组(P<0.025),提示肝炎后肝硬化与HDV感染有关。     

肝、胆道系统的免疫学

自身抗体和肝损害 1、肝相关性自身抗体 (1) 抗平滑肌自身抗体:开始被认为是狼疮样肝炎特有的抗体。被检者血清与小鼠的平滑肌起反应,用荧光抗体法染色成阳性而得名。狼疮样肝炎的阳性率大约70～80％,系统性红斑狼疮(SLE)则不能被检     

用PCR方法检测肝组织中的新型肝炎病毒TTV

选取非甲－非庚型肝炎后肝病死亡患者肝组织,提取肝组织DNA,应用PCR方法检测TTV,观察肝组织中TTV的感染情况。结果表明：16例肝病患者肝组织中TTV阳性者9例,总检出率56％。提示TTV可以感染肝组织,可能是导致非甲－非庚型肝炎的重要病原。     

前S抗体与乙型肝炎病毒清除及临床预后的关系

为了探讨前S1和前S2抗体的临床意义,我们应用前S1和前S2合成肽建立的一种酶免疫技术检测104例急慢性HBV感染者的血清。前S1和前S2抗体的检出率在18例急性乙型肝炎中为100.0％和66.7％,在50例无症状HBV携带者中为30.0％和24.0％,在36例慢性活动型肝炎中为47.2％和19.4％,在无症状HBV携带者和慢性活动型肝炎中前S抗体检出率在无病毒复制时高于病毒活跃复制期。结果提示:在急性HBV感染者中前S抗体较抗HBs更早出现,可能是疾病早期预后状况和感染恢复的标志,慢性HBV感染者中前S抗体不仅存在,且可反映病毒清除。     

丙型肝炎病毒抗体单片段检测与总抗体检测的比较研究

目的 通过对国产HCV抗体分片段酶联免疫检测试剂与进口第三代抗-HCV检测试剂检测丙型肝炎病毒抗体的研究来了解丙肝病毒抗体单片段检测的意义。方法 采用国产基因重组表达的丙型肝炎病毒不同区(C、NS3、NS4、NS5)特异性抗原分别包被酶标板，以间接EIA法检测75例丙肝患血清中不同区特异性抗体。并以Ab—bott公司第三代抗-HCV试剂进行总抗体检测，同时做HCV—RNA检测。结果 75例血清中HCV不同区抗原片段NS3、HCV～C、NS4、NS5的抗体检出率分别为93．3％(70／75)、92．0％(69／75)、70．7％(53／75)、64．0％(48／75)。含2个片段以上的抗体检出率为94．7％(71／75)；抗-HCV总抗体的检出率为98．7％(74／75)；HCV—RNA检出率为77．4％(58／75)。结论 HCV不同区抗原片段的抗体检出率有差别，NS3、HCV—C检出率较高，其次为NS4、NSS。两种试剂有较好的相关性，HCV抗体单片段试剂可作为检测丙型肝炎病毒抗体的补充试剂，单独片段抗体阳性具有一定意义，动态观察NS3、NS4抗体水平可预测IFN的治疗效果。