放烧复合伤骨髓工质细胞某些粘附分子表达的意义

目的：深入探讨放烧复合伤对造血微环境损伤的机制。方法：采用流式细胞仪观察了５．０Ｇｙγ线放射损伤、１５％Ⅲ度体表面积烧伤和放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞表达篾官细胞粘附分子（ＶＣＡＭ－１）、纤维连接素（Ｆｎ）、层粘素（Ｌｎ）和Ⅳ型胶原（ＣｏｌⅣ）等细胞外基质成分的变化。结果：在本实验条件下，随着伤后时间的延长，骨髓基质细胞表达ＶＣＡＭ－１、Ｆｎ、Ｌｎ和ＣｏｌⅣ的水平具有以单烧组〉正常组〉复合伤组〉单     

与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞外基质构筑及含量的变化

目的：探讨联合培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）对内皮细胞（ＥＣ）粘附能力的影响。方法：应用免疫荧光细胞化学、激光共聚焦扫描显微镜和图像分析等技术,以静态条件下单独培养的ＥＣ为对照组,观察与ＶＳＭＣ联合培养的ＥＣ细胞外基质Ｆｎ,Ｌｎ和ＣｏｌⅣ的构筑方式及其含量的变化。结果：与单独培养的ＥＣ相比,联合培养的ＥＣ细胞外基质各组分的构筑有明显的变化,且含量也发生变化,Ｆｎ,Ｌｎ增多,ＣｏｌⅣ减少。结论：与ＶＳＭＣ联合培养的ＥＣ的粘附能力可能增强,为改进血管ＥＣ种植的组织工程技术提供了部分实验依据。     

放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞体外成灶能力的变化

观察放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞体外集落生成能力的变化。方法：采用Ｄｅｘｔｅｒ型骨髓基质细胞体外培养法，观察５．０Ｇｙγ线放射损伤，１％Ⅲ度体表面积烧伤和放烧复合伤小鼠于伤后３，，１４ｄ和经外体外培养，１４，２１，２８ｄ的骨髓基质细胞集落形成能力的变化。结果：１．单放组和复合伤组增以伤后第７天最低，至伤后第１４ｄ仍未达正常组水平，单烧组除伤后第３ｄ低于正常组外，至伤后第１４ｄ与正常组无显著差异。     

放射损伤复合烧伤造血功能障碍与造血重建

放射损伤复合烧伤是核战争和意外核事故条件下发生的主要伤类之一，而造血功能损伤是贯穿放烧复合伤全过程并在疾病的转归和预后方面起主导作用的因素。本项目研究的目的是研究放射损伤、烧伤和放烧复合伤对造血实质细胞和造血微环境两方面的影响及其作用机制，以及在损伤条件下两者之间有机联系的改变及相互影响。掌握放烧复合伤时造血功能障碍的发生发展规律，并进而探索促进造血重建的措施。     

外周血干细胞移植前后骨髓微环境细胞粘附分子的临床研究

目的：初步探讨外周血干细胞移植预处理对骨髓造血微环境影响的分子机制。方法：采用流式细胞仪检测了42例患者接受外周血干细胞移植预处理前及移植后30、90、180d骨髓微环境基质细胞表达血管细胞粘附分子(VCAM-1)、纤维连接素(Fn)、层粘素(Ln)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)等细胞粘附分子水平的变化。结果：移植前接受单纯化疗方案预处理的患者(简称单化组)骨髓基质细胞表达VCAM-1、Fn、Lm和ColⅣ的水平以移植后90d最低；移植前接受化疗 全身放疗方案预处理的患者(简称化放组)骨髓基质细胞表达VCAM-1、Fn、Lm和ColⅣ的水平以移植后30d最低；至移植后180d，单化组和化放组患者骨髓基质细胞表达VCAM-1、Fn、Lm和ColⅣ等指标仍未恢复到移植预处理前的水平，且放化组骨髓基质细胞表达上述细胞粘附分子水平的恢复过程较单化组缓慢。结论：造血干细胞移植前接受大剂量化／放疗预处理后骨髓基质细胞表达细胞粘附分子的功能障碍可能与移植后某些患者造血功能恢复过程缓慢有关。     

VCAM-1修饰人脐血基质细胞扩增移植重建造血微环境功能的研究

本课题利用人脐带血丰富的细胞资源从一全新的角度探讨重建造血微环境功能的措施和机理 ,为造血损伤的救治寻求更有效的辅助治疗途径。实验采用吸附单克隆抗体 磁珠分离系统 (ＭＡＣＳ)分离人脐血ＣＤ34+ 细胞行基质细胞体外液体培养扩增 ,构建ＶＣＡＭ 1ｃＤＮＡ重组逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ并成功转染扩增后的脐血基质细胞 ,在检测转染后ＶＡＣＭ 1基因表达水平达到要求后移植 1× 10 7个给我们事先建立的放、化疗诱导的骨髓造血微环境损伤的动物模型 (ＢＡＬＢ/ｃ -ｎｕ/ｎｕ裸鼠 ) ,观察其重建造血微环境促进造血功能重建的效应和机理…     

5．0 Gy放射损伤对小鼠早期骨髓造血基质细胞周期及其DNA含量的影响

取５．０Ｇｙγ射线照射后３ｄ和７ｄ的小鼠骨髓体外液体培养１４ｄ和２１ｄ，显示骨髓基质细胞仍能贴壁生长，但骨髓基质细胞集落（ＣＦＵ－Ｆ）数量显著低于正常，照后７ｄ的ＣＦＵ－Ｆ数量虽比照后３ｄ的ＣＦＵ－Ｆ数量有所增加，但恢复缓慢；延长培养时间，显示照射鼠的骨髓基质细胞增殖受抑。流式细胞仪检测结果表明Ｇ２＋Ｍ期细胞和ＤＮＡ含量显著低于正常对照组；随着照后时间的延长，Ｓ、Ｇ２＋Ｍ期含量有所恢复，但仍显著低于正常对照组。说明骨髓造血基质细胞具有较高的辐射敏感性且对辐射损伤持续较久。     

二十碳五烯酸对卵巢切除小鼠骨髓造血干细胞及基质细胞分化增殖功能…

以卵巢切除（ＯＶＸ）小鼠模型，观察二十碳五烯酸（ＥＰＡ）对骨髓造血干细胞和基质细胞分化增殖功能的调节作用，结果ＯＶＸ组骨髓造血干细胞培养（ＣＦＵ－ＧＭ）明显增高（Ｐ〈０．０５）；ＥＰＡ具有降低ＯＶＸ组骨髓ＣＦＵ－ＧＭ和提高骨髓基质细胞培养（ＣＦＵ－Ｆ）的作用，但无促ＯＶＸ小鼠子宫生长发育作用。     

巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤小鼠骨髓造血组织面积和基质细胞粘附力的影响

目的：研究藏药巴桑母酥油丸对放射线．化学复合损伤小鼠骨髓造血组织面积和基质细胞粘附能力的影响,探究桑母酥油丸促进其外周血像恢复的机制。方法：放射线一化学复合损伤小鼠灌胃巴桑母酥油丸14d后,制股骨切片,用图像分析软件测其骨髓造血组织面积百分比;进行骨髓基质细胞培养,测其对骨髓细胞黏附能力。结果：巴桑母酥油丸组的骨髓造血组织面积百分比显著高于空白组和生理盐水组;骨髓基质细胞培养第7、14、20d后对骨髓细胞的黏附力亦均显著高于空白组与生理盐水组。结论：促进骨髓造血组织恢复、提高基质细胞对造血细胞粘附力可能是巴桑母酥油丸经干预骨髓造血微环境进而促进放射线一化学复合损伤小鼠外周血像恢复的途径之一。,     

放烧复合伤对骨髓基质细胞血小板生成素基因表达的影响

目的：研究５Ｇｙγ射线放射损伤复合１５％Ⅲ度烧伤小鼠骨髓基质细胞血小板生成素（ＴＰＯ）基因表达的影响。方法：采用骨髓基质细胞培养、逆转录聚合酶链式反应、斑点杂交和原位杂交技术检测基质细胞ＴＰＯ ｍＲＮＡ。结果：惺赂仿组动物股骨骨髓巨核细胞和外周血小板数分别在伤后第７、１３天和第３、７天降到低值。骨髓基质细胞ＴＰＯ ｍＲＮＡ量于伤后第３、１３天出现明显的组间差异，表现在放射组和烧伤组明显低于正常水平     

肿瘤坏死因子—α对放烧复合伤粒—单系造血作用的实验研究

探索重组人肿瘤坏死因子－α对小鼠放烧复伤后粒－单系造血的调控作用以及烧伤，放射损伤对造血损伤的复合效应。方法：采用小鼠骨髓粒－单系祖细胞体外琼脂培养技术。结果；ＴＮＦ－α对正常小鼠粒－单系造血表现出明显的抑制作用，且呈剂量依赖性。结论：ＴＮ－Ｆα在体外培养体系中对放射损伤，烧伤及放烧复合伤粒－单系造血具有强烈的抑制作用，在体内则表现出一定的刺激作用。     

急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞缝隙连接功能的研究

目的：研究急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞缝隙连接的功能方法：体外培养正常（正常对照组）及急性淋巴细胞白血病（急淋组）原代骨髓基质细胞,采用细胞免疫组化法及计算机灰度检测观察两组之间Connexin 43表达的变化,采用细胞划痕染料传输技术比较两组之间缝隙连接细胞间通讯（GJIC）功能的差异。结果：急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞Connexin 43的表达较正常骨髓基质细胞明显减低,GJIC功能减弱。结论：急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞缝隙连接功能下降可能与白血病骨髓造血微环境功能异常有关。     

姬松茸对马利兰诱导致骨髓衰竭小鼠的治疗作用

目的：观察姬松茸多糖对马利兰诱导致骨髓衰竭的治疗作用。方法：采用体外骨髓造血祖细胞ＧＭ—ＣＦＵ、ＣＦＵ—Ｅ、ＣＦＵ—Ｆ培养技术。结果：马利兰损伤后骨髓ＧＭ—ＣＦＵ、ＣＦＵ—Ｅ、ＣＦＵ—Ｆ分别减少至正常的３９８０％、４５００％和４７３０％，经姬松茸多糖（ＡＢＰＳ）０４ｇ／ｋｇ／ｄ×５ｄ，ｉｐ治疗后，骨髓造血分别恢复到马利兰对照组的２１５、１７６和１４９倍（Ｐ＜００１或００５）。表明ＡＢＰＳ可明显促进骨髓造血功能损伤的恢复。同时观察到，ＡＢＰＳ促进ＧＭ—ＣＦＵ、ＣＦＵ—Ｅ的增殖作用强于康力龙，促进ＣＦＵ—Ｆ的增殖作用次于硝酸一叶秋碱。且ＡＢＰＳ与康力龙，硝酸一叶秋碱之间均无协同效应。结论：姬松茸治疗马利兰诱导致骨髓衰竭是通过促进造血细胞增殖和改善造血微环境来恢复骨髓造血。     

体外培养人骨髓基质细胞的超微结构

体外培养人骨髓基质细胞的组成及功能与人体造血微环境相似，可作为研究人体造血微环境的良好模型。选择体外培养第４周的人骨髓基质细胞层，经固定、脱水、原位包埋、超薄切片染色后电镜观察。结果：可见基质层由３类基质细胞及ＥＣＭ组成。巨噬样细胞样基质细胞浆内可见ＣＩ；基质细胞表面ＥＣＭ包含胶原纤维；内皮细胞样基质细胞间可见细胞间连接，但这种连接未见于造血祖细胞及其他基质细胞间。结论：人骨髓体外培养基质细胞超微结构与人体及小鼠骨髓微环境既有相似也有不同处，其差异可能由于体内外不同生长条件所引起。     

TNF—α对放烧复合伤小鼠骨髓细胞IL—3调节作用的研究

研究重组人肿瘤坏死因子α对放烧复合伤小鼠骨髓有核细胞（ＢＭＮＣ）ＩＬ－３Ｒ的调节作用。方法以放烧复合伤小鼠为模型,观察一次性静脉注入不同剂量的ＴＮＦ－α对ＢＭＮＣ增殖的影响及１０万ＵＴＮＦ－α对ＩＬ３Ｒα表达及功能,ＢＭＮＣ数量的调节作用。     

柴胡皂甙对FSC激活及合成细胞外基质的实验研究

观察柴胡有效成分柴胡皂甙对原代培养贮脂细胞（ＦＳＣ）激活及合成细胞外基质（ＥＣＭ）的作用。结果：治疗组库普弗细胞条件培养基（ＴＫＣｎｃｍ）、治疗ＣＣｌ４损伤库普弗细胞条件培养基（ＴＫＣｔｃｍ）、ＴＫＣｎｃｍ加肝细胞条件培养基（ＰＣｎｃｍ）组ＦＳＣ内结蛋白阳性反应明显减弱,对细胞表型转化的形态学特征有一定改善,各治疗组ＦＳＣ的ＤＮＡ合成及３Ｈ－脯氨酸掺入量均呈不同程度降低,ＦＳＣ内Ⅰ型胶原含量明显减少。说明柴胡皂甙对肝细胞具有保护作用,直接抑制ＦＳＣ内ＤＮＡ的合成,还可抑制ＦＳＣ的激活,从而抑制ＦＳＣ合成ＥＣＭ的能力。     

婴幼儿血管瘤中bFGF与细胞外基质相关关系的研究

目的：通过检测碱性成纤维细胞生长因子Ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）与Ⅳ型胶原（ＩＶｔｙｐｅｃｏｌａｇｅｎ,ＩＶ－ｃｏｌ）、层粘连蛋白（Ｌａｍｉｎｉｎ,ＬＮ）在婴幼儿血管瘤中的表达,探讨它们与血管瘤发病机理的关系。方法：采用ＳＰ免疫组化法和图像分析技术,对７０例婴幼儿血管瘤组织中的ｂＦＧＦ、ＩＶ－ｃｏｌ和ＬＮ进行了定性和定量分析。结果：ｂＦＧＦ位于胞浆,胞核染色较淡;但主要位于细胞外基质,呈线网状分布。ＩＶ－ｃｏｌ,ＬＮ主要位于小血管及增生的腺管周围,连续线状分布。三者在血管瘤组织中均呈高表达,且ｂＦＧＦ与ＩＶ－ｃｏｌ、ＬＮ之间相关关系显著。结论：ｂＦＧＦ和细胞外基质的高表达与血管瘤的发生、发展密切相关。     

不同细胞外基质在大鼠胚胎心脏中表达规律的比较

目的 比较不同细胞外基质（ＥＣＭ）及其共同基质受体在大鼠胚胎心脏中的表达规律，探讨ＥＣＭ在胚胎期心脏发生、发育过程中的作用。方法 将胎龄天数（ＥＤ）为１１～１９ｄ的胚鼠用酶免疫组织化学染色检测ＥＣＭ中的ＦＮ、ＬＭＮ、Ｖｎ、ＣｏⅣ及其受体β１在胚胎心脏中的表达。结果 ①ＥＣＭ及其受体在胚胎各期心脏的空间性分布各不相同，ＦＮ及ＬＭＮ有明显的空间分布互补关系，β１的空间分布主要与ＦＮ相似，但在空间隔及心     

E838对放烧复合伤造血功能防护效应的实验观察

目的 研究新型抗放药E838对放烧复合伤和单纯放射损伤造血功能的防护效果。方法 动物致伤前、后不同时间给予E838腹腔注射,观察其存活率和死亡动物平活日,并在用药后不同时间检测其外周血白细胞计数,骨髓有核细胞数（BMNC）、骨髓CFU－GM和CFU－S数。结果 E838预防用药能够明显提高损伤动物的30d存活率及平均活存时间;对造血功能的研究结果亦表明,E838预防用药能够减少伤后外周血白细胞、骨髓有核细胞数、骨髓粒－单系祖细胞数及GFU－S等计数的下降幅度,并促进其恢复。结论 E838对放烧复合伤和单纯放射损伤具有确切的预防效果,对损伤小鼠造血功能也有很明显的保护作用。     

创伤性脑血管痉挛的监测及其对预后的影响

目的：应用二维经颅彩色多普勒显像仪（ＣＤＦＩ）,早期监测头伤者有无脑血管痉挛（ＣＶＳ）。方法：３７１例颅脑损伤者分５组：①轻型无ＳＡＨ（蛛网膜下腔出血）组;②中型无ＳＡＨ组;③轻型有ＳＡＨ组;④中型有ＳＡＨ组;⑤重型组。伤后当天、３ｄ、７ｄ和２周检测脑血管各血流指数。结果：两个有ＳＡＨ及重型组比两个无ＳＡＨ组发生ＣＶＳ显著增高。结论：两个有ＳＡＨ组及重型组患者易发生ＣＶＳ,且伤后当天即可发生,高峰期为伤后３～７ｄ,持续期因伤情轻重而异,伤情重者持续时间长,反之亦然。