淀粉样前体蛋白5'端启动子非翻译区域的核因子结合区可调控基因表达

<正>细胞外大量β淀粉样蛋白(Aβ蛋白)的堆积是Alzheimer病(AD)和DOWN综合症的神经病理学表现。Aβ蛋白来源于大量的有差别剪接的淀粉样前体蛋白(APP)。有数据显示APP基因的表达水平对Aβ蛋白堆积的病理过程有重要作用。     

β-淀粉样蛋白的神经毒性与跨膜离子转运

Alzheimer' s Disease,( AD)已成为影响老年人健康和寿命的突出问题。一般公认 ,脑内出现高密度的老年斑和神经纤维缠结是 AD的病理学特征。老年斑的主要成分是 β-淀粉样蛋白 ( Amyloidβ-Protein,AβP) [1 .2 ]。AβP由 40～ 42个氨基酸组成 ,是 β-淀粉样蛋白前体 βAPP的裂解产物。βAPP的编码基因位于 2 1号染色体 ,在正常人脑以及其它器官也有表达。因此 ,βAPP和 AβP在正常细胞的功能意义已受到人们的注意 ,对此问题的了解可能有助于阐明它们在 AD发病中的意义。目前积累的资料主要涉及到 AβP的神经毒作用[3 ] 。本文从…     

一种阿尔茨海默病诊断的分子标记AD7c-NTP

阿尔茨海默病 ( Alzheimer's disease,AD)也称老年性痴呆 ,主要的神经病理学特征是脑内出现神经元纤维缠结 ( neu-rofibrillary tangle,NFT)和神经变性斑 ,并有轴突的异常增生和大量神经元细胞凋亡。家族性 AD约占总 AD发病率的 5 %～ 10 % ,其余 90 %为散发性 [1 ]。家族性 AD与 2 1号染色体上的淀粉样前体蛋白 ( amyloid precusor protein,APP)基因 ,及 1号和 14号染色体上的早老蛋白 ( presenilins,PS)基因的突变有关 ;载脂蛋白ε4基因也是发生 AD的高危因子[2 ] ;另外 ,Aβ1-4 2、Tau蛋白、GAP- 4 3、apo J、S- 10 0蛋白、黑…     

090 阿耳茨海默氏病动物实验研究新进展:Aβ肽免疫接种能减少行为缺损和淀粉样斑的形成

阿耳茨海默氏病(Alzheimer's Disease,AD)是一种大脑内皮层某些区域和神经元进行性变形所致.淀粉样Aβ肽是淀粉样蛋白前体蛋白(APP)分解的衍生物,它的异常代谢过程与在大脑皮层中的沉积是AD主要的病理过程.因此,通过干扰Aβ的生成或沉积有望改善AD的临床表现.     

淀粉样前体蛋白在因的分子遗传学和分子生物学

淀粉样前体蛋白(amyloid precusor protein,APP）是Aβ（β－amyloid peptide,Aβ）的前体蛋白，后是阿尔蒋海墨疾病（Alzheimer's disease,AD)最主要的病理标志，APP突变后增加神经毒性蛋白Aβ42／43的表达量，从而导致家族性AD（FAD）的发生，本综述了APP的基因结构，功能，突变体的类型及基因突变的病理学后果，同时追踪了如下两方面的研究进展：（1）Aβ产生的途径，（2）APP代放的调控机制。     

淀粉样前体蛋白基因的分子遗传学和分子生物学

淀粉样前体蛋白 (amyloid precusor protein,APP)是 Aβ(β- am yloid peptide,Aβ)的前体蛋白。后者是阿尔茨海默疾病 (Alzheimer's disease,AD)最主要的病理标志。 APP突变后增加神经毒性蛋白 Aβ42 / 43的表达量 ,从而导致家族性 AD(FAD)的发生。本文综述了 APP的基因结构、功能、突变体的类型及基因突变的病理学后果 ,同时追踪了如下两方面的研究进展 :1Aβ产生的途径 ;2 APP代谢的调控机制     

神经节苷脂促进β-淀粉样蛋白生成及其二者协同分布

目的：探讨神经节苷脂GMl干扰β—淀粉样蛋白前体(APP)正常代谢途径以及增加β—淀粉样蛋白(Aβ)生成的可能机制，以确立GMl在阿尔获海默病(AD)脑淀粉样变性过程中的特定作用。方法：选用人类β—淀粉样蛋白前体基因(APP695)转染细胞模型，用IP—westem印迹法观察GMl，对细胞APP代谢产物Aβ释放的影响；应用激光共聚焦扫描显微术(LSCM)分别定量分析不同浓度GMl作用下细胞内Aβ40刚和Aβ42荧光强度的变化；通过双重免疫荧光标记确定GMl与巩和Aβ40或Aβ42的协同定位分布。结果：GMl干扰细胞APP水解代谢和促进Aβ的释放；细胞内Aβ40和巩荧光强度均随GMl浓度的增加而增强；内、外源性GMl分别与Aβ40和Aβ42在细胞内协同定位。结论；提示GMl通过与Aβ的协同分布，直接参与或促进AD脑老年斑淀粉样病变的发生。     

以β淀粉样蛋白作为阿尔茨海默症治疗靶点的研究进展

β淀粉样前体蛋白(APP)是一种单次跨膜天冬氨酸蛋白质,其被β和γ分泌酶相继水解后会产生具有毒性作用的β淀粉样蛋白(Aβ).阿尔茨海默症(AD)最主要的病理特征是Aβ在神经元胞外大量聚集形成淀粉样斑及tau蛋白在胞内过度磷酸化形成纤维化缠结.长期以来,AD的发病被认为与Aβ聚集具有较大的相关性,以Aβ为靶点的抗体性治疗...     

淀粉样前体蛋白调节神经干细胞增殖与分化的研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种常见的脑退行性疾病,是导致老年前期和老年期痴呆的主要原因,其表现是进行性的记忆减退、认知障碍和人格改变.AD的主要病理学特征是在大脑海马区域和大脑皮层形成大量的老年斑(SP)和神经元纤维缠结(NFT)以及出现弥漫性脑萎缩.SP的主要成分是β-淀粉样多肽(Aβ),而淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)是Aβ的前体,因此一直吸引着研究者们对其在AD的病理过程中影响的研究,但对其在正常体内的生理意义却知道得不多.     

β-淀粉样多肽1-42(Aβ42)多克隆抗体的制备及其鉴定

目的：β—淀粉样多肽1—42(Amyloid β1-42，简称Aβ42)是存在于阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease，AD)患者脑组织中的特异病理改变之物，同时它在AD患者的脑积液及血浆中有所改变。我们制备Aβ42多克隆抗体及其建立测定方法，是希望找到—个特异性鉴定AD的生物指标。方法：将Aβ42多肽与匙孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联，免疫新西兰白兔从而产生抗—Aβ啦多克隆抗体。此特异性抗体可用于ELISA、Western印迹法和免疫组织化学的方法中，并可测定AD脑组织中的特异性淀粉样沉淀物。结果：通过免疫组织化学法鉴定此抗—Aβ42多克隆抗体，结果显示在AD患者的脑组织淀粉样沉淀物中呈阳性。同时应用Western印迹法对Aβ42抗体进行了鉴定，结果显示Aβ42多肽的分子量与Aβ42多肽标准的4．5kDa分子量相一致。结论：我们所制备的Aβ42多克隆抗体能与Aβ42抗原呈特异性结合，这就为研究淀粉样前体蛋白(APP)在生理学和病理生理学上的机制提供了—个有效工具。     

γ分泌酶早老素及其相互关系的研究进展

Alzheimer氏病(AD)是一种常见的老年相关疾病，一个显著的病理特征是病人的脑组织在镜下可见老年斑。γ分泌酶剪切APP产生的Aβ42片段是形成老年斑的主要物质。有研究表明早老素(Presenilin，PS)基因的错义突变可导致APP异常转运和加工，是家族性AD(FAD)最常见的病因。本文对当前γ分泌酶。早老素及它们之间的关系的研究进行了总结和综述。     

FSD-C10调节阿尔茨海默病双转基因小鼠炎性微环境

目的:探讨新型Rho激酶抑制剂FSD-C10对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型小鼠脑内炎性微环境的调节作用。方法:采用双转染人β-淀粉样蛋白前体(β-amyloid protein precursor,APP)695swe基因和人早老素1(presenilin-1,PS1)ΔE9突变基因的8月龄小鼠作为AD动物模型,随机分为模型组和FSD-C10治疗组,分别经腹腔注射生理盐水和FSD-C10(25 mg·kg~(-1)·d~(-1))持续治疗2个月,同月龄野生型小鼠作为正常对照组。应用Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)实验检测小鼠学习和记忆能力。采用免疫组化和Western blot技术检测小鼠脑组织β-淀粉样蛋白(Aβ)、磷酸化Tau蛋白(p-Tau)、β位点APP剪切酶(BACE)、Toll样受体4(TLR-4)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和精氨酸酶1(Arg-1)的表达。结果:与模型组相比,FSD-C10干预能显著改善APP/PS1双转基因小鼠学习和记忆能力,减少海马区Aβ1-42、p-Tau和BACE的表达,抑制脑内炎症信号通路TLRs/NF-κB轴TLR-4的表达和p-NF-κB的激活,减少i NOS的表达,增加Arg-1的表达。结论:FSD-C10干预能明显改善APP/PS1双转基因小鼠的学习和记忆能力,其机制可能是通过抑制TLRs/NF-κB信号通路激活,减少炎症因子的分泌及促进M1型炎性小胶质细胞向M2型抗炎小胶质细胞转化,从而改善APP/PS1双转基因小鼠脑组织炎症微环境。     

EPA对创伤性脑损伤APP/PS1转基因小鼠淀粉样肽沉积和认知功能的作用

目的探究二十碳五烯酸(EPA)对创伤性脑损伤APP/PS1转基因小鼠淀粉样肽沉积和认知功能障碍的作用。方法对3月龄APP/PS1小鼠施行创伤性脑损伤(TBI)手术并在手术当天即开始对其进行为期30天的EPA乙酯治疗(腹腔注射,1g/Kg/d)。TBI手术30天后(小鼠4月龄),通过HE染色和免疫组织化学检测小鼠脑内淀粉样肽(Aβ)负荷,通过Y-迷宫自发变更试验和高架十字迷宫试验检测小鼠认知功能状态。结果 TBI手术造成小鼠皮层明显空洞形成和组织缺损,4月龄APP/PS1/小鼠海马区开始出现Aβ斑块,TBI可显著加重APP/PS1小鼠海马区Aβ负荷,而EPA治疗后APP/PS1小鼠海马区Aβ负荷可恢复至生理水平。4月龄APP/PS1小鼠并未出现显著认知功能损害,TBI可使APP/PS1小鼠探索活跃度、空间工作记忆和危险识别能力明显降低,EPA治疗可恢复至未损伤小鼠同等水平。结论EPA治疗可降低创伤性脑损伤AD模型小鼠脑内淀粉样斑块沉积和改善认知功能障碍。     

β淀粉样前体蛋白外部功能区选择性磷酸化和裂解的调节

β淀粉样前体蛋白(βAPP)系一种在进化中高度保守的膜结合蛋白,在大多数哺乳动物组织尤其是神经组织呈高表达状态。βAPP经蛋白水解后可产生淀粉样β肽(Aβ),后者在脑中的沉积是Alzheimer病早期典型的改变。现已发现βAPP在转化成非淀粉样(即正常转换)或淀粉样衍生物过程中由蛋白激酶C(PKC)参与的蛋白质磷酸化反应进行调节,但对βAPP磷酸化作用机制和性质尚不清楚。本研究     

17α雌二醇对转基因细胞株(APP/PS1N2a)β-淀粉样蛋白生成的影响

目的 探讨17α雌二醇（ESUB>2/SUB>α）对稳定表达人β-淀粉样前体蛋白（APP）/早老因子-1（PS1）即APP /PS1基因的神经母细胞瘤细胞株（Neuro-2a）（APP/PS1 NSUB>2/SUB>a）β-淀粉样蛋白（Aβ）产生的影响及可能机制。方法 将APP/PS1 NSUB>2/SUB>a细胞用10×10SUP>-9/SUP> mol/L E2α预处理2d,更换培养液后,分别进行如下处理：1.加入不同浓度ESUB>2/SUB> a（25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L）和溶媒（对照组）,用免疫印迹法(Western blotting)检测APP/PS1 NSUB>2/SUB> a细胞内和细胞外的Aβ蛋白水平及细胞BACE1蛋白水平;2.加入 100nmol/L ESUB>2/SUB>α、20nmol/L葡萄糖和5mIU葡萄糖氧化酶（GOX）。24h后,进行二氢乙啶(DHE)染色观察APP/PS1 N2a细胞中活性氧（ROS）含量的变化。结果 不同浓度E2α（25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L）处理后,细胞外Aβ蛋白水     

氯贝丁酯抑制大鼠海马神经元HMG还原酶表达和胆固醇外流

氯贝丁酯广泛用于高脂血症及其继发症动脉粥样硬化的治疗.研究证实高脂血症还是阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)发生的重要因素.β-淀粉样蛋白前体蛋白(amybid precursor protein,APP)代谢产生β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ),是AD发生的关键,APP的3种同功体即APP695、APP751和APP770均能生成AB.高胆固醇水平促进APP生成AB,降低神经元胆固醇合成和/或促进胆固醇排出均可抑制AB的生成[1].     

早老素1基因在转染CHO细胞中的表达及其与γ-分泌酶的关系

目的 研究早老素1(PS1)在淀粉样前体蛋白(APP)加工生成β-淀粉样多肽(Ap)过程中的作用及其与γ-分泌酶的关系。方法构建APP和PSI双基因稳定转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株,应用免疫沉淀和印迹、脉冲追踪及ELISA方法,检测PS1的表达和代谢半衰期,分析对Aβ分泌的影响及与γ-分泌酶功能的关系。结果PS1转染的CHO细胞(APP-PSI)表达的主要是相对分子质量为45000的全长PS1蛋白,其半衰期短于1h,而其活性片段的N-末端片段和C-末端片段则相对稳定,半衰期接近16h。突变型PS1(M146L)转染细胞分泌的Ap总量与野生型PS1转染细胞没有明显差别,但分泌的Aβ亚型Ap142是未转染PS1或野生型PS1转染细胞分泌的将近2倍。结论 PS1参与了APP加工生成Aβ的过程,突变型PS1(M16L)导致Aβ142的分泌增加,提示PS1可能就是预期的γ-分泌酶。     

Alzheimer氏病的动物模型

<正> 在Alzheimer氏病(AD)患者的脑内,β-淀粉样蛋白(βA)蓄积并形成淀粉样蛋白斑及血管的淀粉样蛋白沉积。β-淀粉样蛋白从β-淀粉样蛋白前体蛋白质(APP)衍生而来,其基因突变常见罕见的家族性AD[Hardy:Neurosci Facts 3:65(1992)]。这些突变中有一种类型与培养细胞中βA合成的增加有关[Citron et al:Nature 360:672(1992);Cai et al:Science 259:514(1993)]。为了加速βA沉积的研究,研究者们研制了一些动物模型。首先,研究了包括老龄大鼠和猴在内的一些实验动物的APP代谢和βA合成,因为老年灵长类动物出现βA沉淀和出现与年龄相关的行为缺陷,所以对它们的研究具有特殊的意义。     

β-分泌酶与阿尔茨海默病

β-分泌酶(β-site APP cleaving enzyme,BACE)在β位点裂解β淀粉样蛋白前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)并产生β淀粉样蛋白(amyloid proteinβ,Aβ),Aβ的聚集是形成阿尔茨海默病(Alzhemier’s disease,AD)患者脑中老年斑的主要原因,引起神经元损伤和认知功能减退,在AD的发病过程中起到中心和共同通道的作用。BACE的抑制剂部分抑制BACE,可使Aβ水平下降,取得明显疗效。进一步研究BACE抑制剂的作用机制,对AD治疗具有良好的前景。     

DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的定位研究

目的研究二价金属离子转运体1(divalent metal transporter 1,DMT1)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层内的定位分布,探讨DMT1异常表达影响脑铁代谢平衡从而参与AD发病的可能机制。方法应用免疫组织化学方法观察DMT1在9月龄APPsw/PS1小鼠大脑皮层的阳性分布;应用免疫荧光双标技术和共聚焦激光扫描显微镜观察DMT1蛋白和β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的一致性分布和位置关系。结果APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内均有DMT1阳性表达;DMT1和Aβ免疫双标发现DMT1免疫阳性产物与Aβ共存于老年斑,二者分布具有一致性。结论DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内大量表达,其分布与Aβ具有一致性,提示DMT1可能参与AD脑内Aβ沉积和老年斑形成。