口服胰岛素肠溶聚合物脂质杂化纳米粒的制备与评价

为了提高胰岛素的口服生物利用度,本研究以聚乙二醇聚乳酸共聚物(PEG-PLA)为高分子载体材料、磷脂s75为脂质材料、Eudragit L100为肠溶材料制备口服胰岛素肠溶聚合物脂质杂化纳米粒(INS-NPs L100),并对其体内外性能进行评价。采用W/O/W复乳溶剂挥发法制备胰岛素聚合物脂质杂化纳米粒(INS-NPs),以包封率、粒径和释药行为为评价指标,采用单因素法对处方进行优化;将最优INS-NPs与肠溶材料Eudragit^® L100混合制备成INS-NPs L100,并对其形态、体外释放及健康大鼠灌胃后的降血糖作用进行评价。以最优处方制备的INS-NPs包封率为(62.18±4.51)%,平均粒径为(225.2±94.3)nm,多分散系数为0.191±0.068,Zeta电位为-(14.84±1.26)mV。包裹肠溶材料后所制备的INS-NPs L100,在pH 1.0盐酸溶液中2 h累积释放量为8.01%,在pH 6.8的磷酸盐缓冲液中6 h累积释放量为67.31%。将所制备的INS-NPs L100经口给予健康大鼠(38 IU/kg)后,具有明显的持续降血糖作用,3.5 h时血糖浓度可降至初始值的76%。实验结果表明,本研究所制备的INS-NPs L100可有效减缓胰岛素在胃液中的释放速度,提高蛋白在胃肠道中的稳定性,为多肽、蛋白类药物口服给药提供了新的研究思路。     

透明质酸修饰的地塞米松核壳纳米粒的制备及表征

探讨透明质酸修饰的地塞米松核壳纳米粒的制备方法,并对其理化性质及释药行为等进行考察。首先采用薄膜分散水化-挤膜法制备核壳纳米粒（LCS-NPs）,单因素研究多种处方组成对LCS-NPs性质的影响。随后用透明质酸（HA）与二油酰磷脂酰乙醇胺（DOPE）的键合物（HA-DOPE）修饰LCS-NPs,制得HA-LCS-NPs。采用粒度仪和投射电镜分别考察HA-LCS-NPs的粒径、电位、微观形态和结构组成。以地塞米松为模型药物,考察载药HA-LCS-NPs的包封率和体外释药行为。HA-LCS-NPs在透射电镜下呈现清晰的核壳结构,平均粒径为（189±10.3）nm。HA-LCS-NPs对地塞米松的包封率和载药量分别为27.4%和5.9%,72 h累积释放率低于40%。结果表明,薄膜分散水化-挤膜法制备的LCS-NPs经HA-DOPE修饰,可得到具有明显核壳结构的纳米载体,并实现有效的药物包裹和良好的缓释特征。     

胰岛素与维生素B12在糖尿病性溃疡中的应用

目的：为了减轻糖尿病患者并发溃疡的痛苦，有效治疗糖尿病合并溃疡。方法：选择在门诊处置室换药的病例，从2004年6月至2006年6月共56例，使用胰岛素与维生素B12注射液在溃疡伤口处外用。结果：显效率为86％（48例），有效率为11％（6例）。结论：局部应用胰岛素及维生素B12，可改善局部代谢，给神经、血管提供一定的营养条件，使新的肉芽生长具有一个良好的环境，从而加快组织修复，促进创面早日愈合。     

胰岛素多肽固体脂质纳米粒的制备与理化性质研究

目的该课题选用水溶性多肽类药物,以生物相容性好的脂质为主体材料,制备固体脂质纳米粒。方法采用溶剂扩散法制备单硬脂酸甘油脂纳米粒,以胰岛素(ISULIN)为模型药物。研究纳米粒的理化性质,以微粒粒度与zeta电位测定仪测定其粒径分布、表面电位;高效液相法测定了药物包封率;考察载药纳米粒的体外释放特性;以4种不同比例的硬脂酸、油酸和单硬脂酸甘油脂,通过溶剂扩散法制备混合脂质纳米粒,考察混合脂质纳米粒的理化性质、包封率和体外释放特性。结果用水性溶剂扩散法可简便快速制备得到单硬脂酸甘油酷固体脂质纳米粒,纳米粒粒径呈单峰分布,体均粒径(435.3±121.6)nm,表面电位-(20.7±1.6)mV。采用HPLC测定,药物的包封率68.2%。体外释放研究结果显示,INSULIN-SLN在前8h快速释放了纳米粒所载药物的28.4%,随后每天以3.7%的速率持续释放。结论采用单硬脂酸甘油醋、硬脂酸、油酸混合脂质处方,并不显著影响纳米粒的粒径、表面电位和药物的包封率。油酸的加入,可在一定程度上增加药物的释放。     

胰岛素缓释载体聚乙二醇-聚己内酯-聚甲基丙烯酸-N,N-二乙氨基乙酯的制备及评价

目的 制备pH敏感聚乙二醇-聚己内酯-聚甲基丙烯酸-N,N-二乙氨基乙酯(mPEG-PCL-PDEAEMA)载胰岛素缓释纳米粒,考察其体外释放效果和体内降糖活性.方法 结合开环聚合反应和原子转移自由基聚合反应合成具有不同疏水链段的mPEG-PCL-PDEAEMA,用傅里叶红外光谱和核磁共振氢谱表征其结构;采用纳米沉淀技术制备聚合物载胰岛素纳米粒,动态光散射法测定粒径,透射电子显微镜观察其形态;BCA法测定载药情况,并考察其体外释放行为;建立糖尿病大鼠模型,监测给药后血糖水平.结果 在pH1.2~7.4时,聚合物纳米粒的粒径随pH增大而减小.以90%wt投药比制备mPEG5k-PCL13k-PDEAEMA10k和mPEG5k-PCL10k-PDEAEMA10k载胰岛素纳米粒时的包封率和载药率为最佳,包封率分别为(81.99±1.77)%和(53.12±0.62)%,载药率分别为(42.46±0.53)%和(32.34±0.26)%,粒径分别为181.9±6.67 nm和169±7.1 nm.体外释放结果显示聚合物载胰岛素纳米粒具有出色的缓释行为,并且随着疏水链段的增长,药物释放速度减慢.体内药效实验表明mPEG5k-PCL13k-PDEAEMA10k载胰岛素纳米粒能够在体内保持48 h的降血糖效果,较游离胰岛素的降糖作用时间明显延长.结论 pH敏感三嵌段聚合物mPEG-PCL-PDEAEMA有望成为理想的胰岛素缓释载体.     

聚乙二醇化壳聚糖纳米粒的制备及局部滴眼给药性能评价

目的 制备一种聚乙二醇修饰的壳聚糖纳米粒,评价其局部滴眼给药性能.方法 以伏立康唑为模型药物,采用离子交联法制备载药的聚乙二醇化壳聚糖纳米粒,对其进行表征后,分别考察纳米粒的药物缓释能力、对眼表药物代谢动力学的影响及其角膜渗透性.结果 聚乙二醇化壳聚糖纳米粒粒径为(235±23)nm,Zeta电位为(+23.1±0.6) mV,载药量为11.16％,包封率为61.35％.纳米粒体外释放药物非常缓慢,可持续释药48 h;相比于伏立康唑水溶液,纳米粒的药物浓度-时间曲线下面积明显增加,药物半衰期延长,清除率减少,眼表药物平均滞留时间延长(P＜0.05).荧光标记的聚乙二醇化壳聚糖纳米粒可穿透角膜上皮逐渐向角膜基质渗透.结论 与药物水溶液相比,聚乙二醇化壳聚糖纳米粒能够有效减少眼表药物的流失,改善药物的生物利用度.     

艾塞那肽聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒制备及体外评价

目的：探讨呼出气一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide,FeNO）检测用于诊断咳嗽变异性哮喘（cough variant asthma,CVA）的临床价值及其影响因素。方法：连续收集2015年10月到2016年9月于我院就诊的慢性咳嗽患者607例,首先完成FeNO检测,之后通过支气管激发试验或支气管舒张试验并结合病史作为诊断CVA的标准,绘制FeNO诊断CVA的受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC曲线）,确定其最佳阈值;建立logisitic回归模型,通过模型分析筛选与CVA相关的因素,根据ROC曲线评价FeNO及FeNO联合其他相关因素对CVA的诊断价值。结果：607例患者中最终诊断CVA患者331例,非CVA患者276例。CVA组的FeNO水平明显高于非CVA组[（54.7±44.5） ppb vs. （19.8±11.9） ppb,P=0.000];FeNO用于判定CVA的最佳阈值为31 ppb,约登指数最大值为0.507 6,ROC曲线下面积（area under curve,AUC）为0.794,此时检验的敏感度为61.63%,特异度为89.13%,阳性预测值为87.18%,阴性预测值为65.95%;年龄增高会引起FeNO下降,FeNO联合年龄、吸烟史诊断CVA的AUC为0.813,单用FeNO时的AUC为0.794,但两者差异无统计学意义（P=0.224）。结论：FeNO检测是诊断CVA的有效辅助手段,有助于慢性咳嗽的鉴别诊断;FeNO联合患者年龄、吸烟史诊断CVA价值不优于单用FeNO的诊断价值。     

紫杉醇甘草次酸修饰透明质酸纳米粒的制备及性能研究

优化紫杉醇甘草次酸修饰透明质酸（PTX/GA-HA）纳米粒的载药工艺,并系统评价其体内外特性。以载药量、包封率为评价指标,通过单因素考察优化甘草次酸修饰透明质酸纳米粒的载药工艺。制得的纳米粒粒径为（321.2±8.2）nm,荷负电;载药量和包封率分别为（31.2±0.8）%和（90.3±1.6）%。体外释放动力学研究显示,在偏酸性介质中,PTX/GA-HA纳米粒下具有更快的释药速度。同时,MTT实验显示其对多种肿瘤细胞具有杀伤作用,尤其对HepG2细胞的生长抑制作用最强。此外,细胞摄取实验表明,GA-HA纳米粒易被肿瘤细胞摄取。因此,PTX/GA-HA纳米粒具有优良的体内外特性,其成功制备将有助于提高抗肿瘤药物的肿瘤靶向治疗效果。     

5-氟尿嘧啶PLGA纳米粒的制备及其体内外释药研究

目的:以生物可降解材料乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)制备5-氟尿嘧啶(5-FU)纳米粒,并对其进行体内外释药研究。方法:采用复乳-溶剂挥发法结合高压均质法制备5-FU-PLGA纳米粒。用透射电镜观察纳米粒的形态,并对5-FU-PL-GA纳米粒的粒径及其分布、载药量、包封率和体内外释药进行了研究。结果:制得的5-FU-PLGA纳米粒为类球形实体粒子,平均粒径为85.4 nm,载药量为10.6%,包封率为52.7%,体外释药符合Higuchi方程:Q=5.851 6t1/2+8.735(r=0.9923)。5-FU水溶液组在体内半衰期(t1/2)仅为0.36 h,tmax为0.26 h,AUC为18.15μg.h/mL,而同剂量的5-FU-PLGA纳米粒在体内t1/2为2.35 h,tmax为1.13 h,AUC为41.09μg.h/mL。结论:制得的5-FU-PLGA纳米粒可改变5-FU体内的药代动力学行为,延长5-FU在体内的循环时间,具有明显的缓释作用,口服吸收好,生物利用度有明显提高。     

固体脂质纳米粒给药系统新载体的研究进展

固体脂质纳米粒是近年来很受重视的一种新型药物传递载体,它综合了传统胶体给药系统如乳剂、脂质体及聚合物纳米粒等的优点,具有靶向、控释、提高药物稳定性、毒性小、可大批量生产等特性,可供多途径给药.本文就近年来固体脂质纳米粒的组成、制备方法、在给药途径中的应用以及发展前景作一综述.     

维生素B12在治疗口腔溃疡中的应用

目的探讨维生素B12在治疗口腔溃疡中的实际效果。方法将口腔溃疡患者随机分成4组,分别外敷维生素B12维生素B2、冰硼散、氯已定含片,对比各组在愈合时间与疼痛抑制方面差别。结果外敷维生素B12组在愈合时间与疼痛抑制方面明显优于其他组。结论维生素B12在治疗口腔溃疡时不但愈合时间短于其他药物,而且能有效地抑制疼痛,可以作为一种治疗方法在临床应用。     

前体氨基酸对维生素B12发酵合成的影响

谷氨酸、苏氨酸、甘氨酸和甲硫氨酸是维生素B12合成的重要前体。在脱氮假单胞菌（Pseudomonas denitrifican）发酵的产物合成期以补加的方式考察了这4种氨基酸对维生素B12合成的影响。在合成培养基的基础上,通过单因素添加试验分别考察了这些氨基酸对维生素B12合成的影响,发现谷氨酸、甘氨酸和苏氨酸影响显著;并进一步利用三因素三水平的正交试验设计考察了氨基酸混合添加对菌体生长和维生素B12合成的影响,结果表明谷氨酸是最主要的影响因素,并且发现同时添加多种氨基酸更有利。当添加量为谷氨酸0.45 g/L、苏氨酸0.20 g/L、甘氨酸0.15 g/L时,得到的菌体量和维生素B12产量分别比对照组提高了13.1%和46.0%。     

胰岛素毫微球口服与灌肠对糖尿病大鼠的降糖作用的对比研究

目的 比较自制的胰岛素毫微球给糖尿病大鼠口服、灌肠后的血糖变化，以研制一种生物利用度高的胰岛素非注射制剂。方法 应用pH≥7时溶解的甲基丙烯酸Ⅲ经乳化聚合法制成胰岛素毫微球给糖尿病大鼠口服、灌肠、观察用药后不同时间的血糖变化。结果 糖尿病大鼠口服胰岛素毫微球后，血糖在0．5h开始降低，1～3h达高峰，7h内血糖维持在较低水平。胰岛素毫微球给糖尿病大鼠灌肠后，0．5～1h降糖作用达高峰，降血糖作用强于口服给药，但持续时间较口服给药短，3～5h血糖维持在较低水平，7h血糖恢复接近用药前水平。结论 自制的胰岛素毫微球无论口服还是灌肠对糖尿病大鼠均有明显的降糖作用，灌肠组降血糖作用起效快，降血糖作用强于口服给药，但持续时间较口服给药短。结肠对胰岛素毫微球有良好的吸收作用。     

CO2对脱氮假单胞菌发酵生产维生素B12的影响

通过调整进气中空气和CO2的比例,研究了CO2的体积分数（φCO2)为0.03%,3.32%,8.86%和13.84%时对脱氮假单胞菌的生长和维生素B12合成代谢的影响。发酵过程的生理代谢分析结果表明：当进气中CO2体积分数增加到8.86%时,菌体的生长没有受到显著影响;而单位菌体糖消耗速率为29.95 mg/(g·h),仅为对照组的77%;产物的合成速率可达到1.75 mg/(L·h),比对照组1.02 mg/(L·h)的合成速率提高了71.6%。但CO2体积分数为13.84%时,菌体生长、底物利用以及维生素B12的合成都将受到抑制,因此在生产过程中控制CO2的体积分数非常关键。     

脑梗死患者血浆叶酸和维生素B_(12)与同型半胱氨酸的相关性研究

目的观察脑梗死患者血浆叶酸和维生素B12(VitB12)与同型半胱氨酸(Hcy)的相关性。方法检测243例脑梗死患者血浆叶酸、VitB12、Hcy水平,并根据叶酸水平将Hcy分为低于正常组(A组)、正常偏低组(B组)和偏高组(C组),比较叶酸与Hcy的相关性;同样,根据VitB12水平再将Hcy分为A、B、C三组,比较两者相关性。结果叶酸A、B、C三组之间Hcy水平两两比较均差异有统计学意义(P<0.05),同样,VitB12三组比较均差异有统计学意义(P<0.05)。Hcy与叶酸和VitB12相关系数rs分别为-0.560,P=0.00和-0.302,P=0.00。149例高Hcy(>16 mmol/L)患者中,叶酸和VitB12水平都在A组和B组的占73%(108例),都在C组的占4%(6例)。叶酸水平在A组和B组,而VitB12在C组的占11%(17例);VitB12水平在A组和B组,而叶酸在C组的占12%(18例)。结论叶酸或VitB12的绝对缺乏或相对缺乏是高Hcy血症的重要原因。叶酸和VitB12水平与Hcy水平均呈负相关,且与叶酸的相关性强于VitB12,但在部分人群中其相关性可能存在差异。     

B族维生素对肌肉萎缩小鼠PMO运输效率的影响

目的:探究B族维生素对反义寡核苷酸药物磷酸二胺吗啉代寡核苷酸（PMO）在DMD治疗中运输效率的影响以及药物安全性评价。方法:通过对成年的杜兴肌肉萎缩症（DMD）模型mdx小鼠胫骨前肌分别局部注射PMO和各种维生素的混合液,利用免疫荧光（IF）和Western印迹检测dystrophin蛋白表达情况,评估各维生素对PMO作用效果的影响;通过尾静脉注射PMO和维生素B12的混合液,相同方法检测维生素B12对PMO治疗效果的影响,同时利用苏木素-伊红组织染色（HE）技术检测组织病理情况,评估维生素B12联合PMO治疗的安全性。结果:在mdx小鼠局部给药实验中,比较不同的B族维生素对PMO药效影响时,发现维生素B12对PMO的促进效果最佳（t=8.015,P＜0.01）;随后选择维生素B12与PMO混合对mdx小鼠进行系统治疗时,相比于PMO生理盐水组,发现维生素B12能够在胫骨前肌（t=9.631,P＜0.01）和股四头肌（t=8.452,P＜0.01）上明显提高PMO的系统治疗效果,同时对mdx小鼠不产生肌肉不良反应。结论:维生素B12作为营养补充剂能够显著提高PMO在mdx小鼠上的局部治疗效果,但系统治疗效果有限,且对小鼠肌肉组织无损伤。     

Vitamin B12 deficiency in patients with type 2 diabetes mellitus using metformin and the associated factors in Saudi Arabia

Objectives:To assess the presence of vitamin B12 deficiency among metformin users and associated factors in patients with type 2 diabetes mellitus.Methods:An observational cross-sectional study was conducted with 307 diabetic patients in the primary health care centers at King Abdulaziz Medical City (KAMC), Riyadh, Saudi Arabia between October 2017 and January 2018. Face-to-face interviews were conducted with the participants, using a designed checklist.Results:The prevalence of vitamin B12 deficiency was (3.6%) and the majority of the sample had borderline B12 levels (66.1%). The vitamin B12 deficiency and borderline levels were strongly associated with the dose of metformin. Patients taking doses of metformin more than 1000 mg had lower levels of vitamin B12. The use of multivitamin and vitamin B complex was assessed, and it was found that there was a marked decrease in the prevalence of vitamin B12 deficiency in patients using vitamin B complex containing more than 200 mcg vitamin B12.Conclusion:Our findings show a low prevalence of vitamin B12 deficiency in type 2 diabetic patients taking metformin. The majority of the sample had borderline deficiency; therefore, additional investigation and management are required.     

pH对胰岛素口腔喷剂中胰岛素稳定性的影响

胰岛素在胰岛素口腔喷剂中处于比较复杂的体系,对ｐＨ敏感程度如何与其稳定性有密切关系。本文在ｐＨ８、９、１０、１１、１２５个梯度５０℃下同时碱解,用ＲＰ－ＨＰＬＣ方法,检测出胰岛素在口腔喷剂中的碱性降解点为ｐＨ１１左右。ＨＰＬＣ条件：流动 动相,Ｖ（乙腈）：Ｖ（磷酸盐缓冲液,ｐＨ３．０）＝２７：７３;流速,１ｍＬ／ｍｉｎ;进样量,２０ｕＬ。     

维生素B1、B12穴位注射治疗灼口综合征的临床疗效

目的：提高治疗灼口综合征的临床疗效。方法：采用维生素B1，B12穴位注射治疗35例灼口综合征（Burning mouth syndrome,BMS)患者，并以口服谷维素和复合维生素B治疗灼口综合征患者20例作为对照，结果：治疗组显效10例，有效23例，无效2例，总有效率达94．28％，对照组显效2例，有效7例，无效11例，总效率45％（P＜0．001），与对照组相比，疗效差异有显著性。结论：维生素B1，B12穴位注射治疗灼口综合征具有较好的疗效，且操作简便，经济实用，无明显副作用，又可重复治疗，可在临床上推广使用。     

血清维生素B_(12)水平与多发性硬化关系的Meta分析

目的 综合评价血清维生素B_(12)(VB_(12))水平与多发性硬化(MS)的关系.方法 联合应用计算机及手工检索,全面检索血清VB_(12)水平与MS病例对照研究的相关文献.对所获文献进行方法学质量评价、筛选和异质性检验.采用Stata 10.1软件对提取的数据进行分析.结果 共9篇文献进入Meta分析,获得样本807例,其中病例组414例,对照组393例.Meta分析结果显示,MS病例组血清VB_(12)水平显著低于对照组(标准化均差为-0.24,95%可信区间为-0.39-0.10).敏感性分析显示2组在血清VB_(12)水平上的差异结果可靠.结论 血清VB_(12)水平与MS具有相关性,VB_(12)的缺乏可能在MS的病理过程中发挥作用.