耐多药结核分枝杆菌KatG及rpoB基因变异的研究

目的：建立快速检测耐多药结核分枝杆菌的分子药敏方法，掌握南通地区结核分枝杆菌KatG及rpoB基因的突变特点，探索结核分枝杆菌耐异烟肼、利福平直接检测的可行性。方法：收集47例耐异烟肼、利福平的结核分枝杆菌临床分离株行PCR结合DNA直接测序法检测KatG及rpoB基因突变。以结核分枝杆菌标准株H37Rv为参比菌株，应用BACTEC460TB快速培养系统进行结核分枝杆菌自动培养、药敏。结果：47例耐异烟肼、利福平分离株结核分枝杆菌KatG及rpoB基因突变阳性分别为29例(61．7％)、43例(91．5％)，两者同时突变26例(55．3％)。结论：PCR-直接测序法敏感、特异、可靠实用，可快速检测结核分枝杆菌KatG及rpoB基因突变，用于临床耐多药结核快速检测。     

结核分枝杆菌的耐药性分析

目的：为了探讨结核分枝杆菌与其他几种常用抗结核药物耐药性之间的关系。方法：采用绝对浓度法对临床分离的418株结核分枝杆菌进行6种抗结核药物的药敏试验。结果：得耐药物（氧氟沙星）结核分枝杆菌72株。其中单耐氧氟沙星菌株占19．4％，同时耐3种药以上的菌株占69．5％。结论：耐氧氟沙星结核分枝杆菌多数是多耐菌株，在治疗多耐菌引起的结核病时要慎用氧氟沙星。     

结核分枝杆菌初始耐药监测分析报告

目的:监测结核分枝杆菌的耐药情况,评价江门市结核病控制工作成效。方法:对2000年至2004年我市结核病人痰培养阳性菌株进行初始耐药性监测。结果:初治1075例痰培养阳性结核分枝杆菌,有150例耐药,初始耐药率为13.95%,耐1药和2药率分别占耐药总数的44.7%和36.0%,耐3药4药率共占耐药总数的19.3%,2004年比2000年初始耐药率下降幅度54.7%。结论:连续观察5a江门市结核分枝杆菌初始耐药率呈逐年下降趋势,提示耐药结核病的流行状况已有好转,结核病控制工作取得明显效果。     

42例非结核分枝杆菌肺病临床分析

目的 探讨非结核分枝杆菌肺病的临床特点,提高非结核分枝杆菌肺病的发现、诊断及鉴别诊断水平,减少误诊误治.方法 选取北京结核病控制研究所2013年1月至2016年12月确诊的42例非结核分枝杆菌肺病(NTM)患者的病例资料信息进行回顾性分析总结.结果 在42例非结核分枝杆菌肺病患者中,确诊胞内分枝杆菌14例;鸟分枝杆菌9例;堪萨斯分枝杆菌6例;偶然分枝杆菌6例;脓肿分枝杆菌5例;龟分枝杆菌2例.42例患者的主要症状有咳嗽、咳痰31例(73.81％),咯血6例(14.29％),发热8例(19.05％).药敏试验表明研究中的非结核分枝杆菌对常见抗结核药物具有高度耐药性,一线4种药总耐药率高达100％,一线4种药全耐药率高达69.05％,其中脓肿分枝杆菌对参与测试的9种抗结核药物均有较高耐药性.结论 由于非结核分枝杆菌肺病发病的隐蔽性及非结核分枝杆菌极强的耐药性,给非结核分枝杆菌肺病的诊治带来了极大困难.因此临床亟待一种更为快捷准确的诊断方法,对非结核分枝杆菌肺病的发现、诊断及治疗具有重要意义.     

重庆地区耐多药结核分枝杆菌基因分型特征分析

目的 对重庆地区耐多药结核患者结核分枝杆菌进行基因分型,明确该地区基因类型的特征和流行情况.方法 连续收集重庆市公共卫生医疗救治中心和重庆市第十二人民医院结核内科2013年7月至2015年3月753例临床诊断为耐多药结核患者的痰液或其他体液,采用液体培养法分离培养分枝杆菌,采用PCR方法对分枝杆菌分离株进行菌种鉴定,并使用多位点数目可变串联重复序列分析(multiple locus variable number of tandem repeat analysis,MLVA)方法进行基因分型.采用Bionumerics Version 3.0和phyloviz软件进行各基因位点的多态性和成簇分析.结果 共分离培养出538例耐多药分枝杆菌菌株,经PCR鉴定确认结核分枝杆菌有503例(95.8％),非结核分枝杆菌有35例(4.2％).北京家族型470例(93.4％,470/503),非北京家族型33例(6.6％,33/503).503例分枝杆菌菌株共分为348个基因型,其中267例患者分离株为单一基因型,其余236例菌株可归入81个簇,成簇率为30.8％.北京家族型有76个簇,成簇率为30.8％,成簇比例为35.9％,非北京家族型有5个簇,成簇率为30.3％,成簇比例为33.3％.不同特征的耐多药结核人群对结核分枝杆菌北京基因型菌株易感因素分析:感染北京基因型菌株与性别无显著性关联(x2=2.68,P ＞0.05);与年龄呈显著性关联(x2 =784.00,P＜0.05).结论 重庆地区耐多药结核分枝杆菌的基因型存在明显的多态性,北京基因型占绝对优势;不同特征耐多药结核人群感染北京基因型菌株与性别无关,与年龄相关.     

2009年589株结核分枝杆菌耐药性分析

目的了解深圳市第三人民医院门诊和住院结核病患者感染状况和结核分枝杆菌耐药情况。方法用MB／Bact240分枝杆菌培养仪和改良罗氏管对患者的多种标本进行分枝杆菌分离培养鉴定,对分离到的结核分枝杆菌采用绝对浓度法对4种一线抗结核药物,异烟肼（INH,H）、利福平（RFP,R）、乙胺丁醇（EMB,E）和链霉素（SM,S）,进行药物敏感性试验。结果1722例患者的标本结核分枝杆菌培养阳性589株,其中痰标本453株,非痰标本136株;结核菌培养阳性率为34．2％（589／1722）;对INH、RFP、EMB、SM的耐药率分别是15．1％（89／589）、14．3％（84／589）、4．8％（28/589）和17．1％（101/589）;总耐药率26．3％（155／589）,耐多药率10％（59／589）,其中4种药全耐者占2．7％（16／589）。结论本地区结核病疫情呈上升趋势。结核茵耐药情况仍然十分严重。     

广西百色地区结核分枝杆菌异烟肼耐药基因特征分析

目的：分析百色市地区结核分枝杆菌异烟肼耐药相关基因 KatG 、inhA 的突变特征。方法收集128例结核病患者痰液标本,采用改良罗氏培养基分离培养结核分枝杆菌,绝对浓度法检测异烟肼耐药性,提取耐药菌株 DNA ,PCR 扩增耐药结核分枝杆菌 katG 、inhA 基因序列并分析异烟肼耐药相关基因突变特征。结果分离培养出98例结核分枝杆菌,34株对异烟肼耐药,耐药率为36．7％,耐药菌株 KatG 基因突变率为44．1％（15／34）,其中315位点突变率为66．7％（10／15）,出现两个新的突变位点为279（4／15）和427（1／15）。 inhA 5位点突变率为13．3％（2／15）,inhA 16位点突变率为6．7％（1／15）,3株均为 katG 和inhA 联合突变。结论百色地区耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性产生与 katG 和 inhA 基因突变相关,检测本地区结核分枝杆菌katG 和 inhA 基因突变可预测结核分枝杆菌对异烟肼的耐药性。     

十堰市结核分枝杆菌临床分离株耐药性分析

目的：分析临床分离结核分枝杆菌的耐药性特点，了解十堰地区近年来耐药结核分枝杆菌的流行情况。方法：收集2003年9月～2006年5月十堰市疾病控制中心门诊痰菌阳性标本，获取培养阳性标本84份，采用绝对浓度间接法试验对全部培养阳性标本进行4种抗结核药物（RFP、INH、SM、EMB）的耐药性测定。结果：总耐药率60．7％（51株），耐多药率为40．5％（34株）。耐药顺序为RFP〉INH〉SM〉EMB。结论：本地结核菌耐药率远远高于全国平均耐药率（46％），因此应加强抗结核药物的耐药性监测，根据药敏结果选择有效化疗方案，彻底治疗结核病人。     

非结核分枝杆菌在活动性肺结核患者中的病原监测结果分析

目的对活动性肺结核患者的病原菌进行监测,为临床诊断和治疗提供依据。方法对正定县疾控结核门诊2012年1月1日~2012年12月31日期间确诊的198例活动性肺结核患者采集痰标本(其中痰涂片阳性62例,痰涂片阴性136例),用传统方法进行培养、菌群鉴定和药物敏感试验(INH、RFP、EMB、SM、OFX、KM 6种药物)。对确诊的非结核分枝杆菌(NTM)患者进行病史追查、治疗随访。结果涂片阳性患者培养阳性59例,涂阳培阳率95.16%,菌群鉴定结果:结核分枝杆菌56例、非结核分枝杆菌3例,非结核分枝杆菌占涂阳培阳的5.08%,占涂阳患者的4.84%。涂片阴性培养阳性36例,涂阴培阳率26.47%,菌群鉴定结果:结核分枝杆菌30例、非结核分枝杆菌6例,非结核分枝杆菌占涂阴培阳的16.67%,占全部涂片阴性的4.41%。9例非结核分枝杆菌患者的药敏结果:1例新涂阳患者对6种药物全敏感、1例复发涂阳患者对6种药物均耐药,其余患者对6种药物不同类型有不同的耐药情况。非结核分枝杆菌病病史:3例有明确的结核病史、3例症状持续数年但未明确诊断、3例为新发患者,1年以上病史者占66.67%。结论非结核分枝杆菌肺病被误诊为活动性肺结核的现象不容忽视,尤其是病史较长的活动性肺结核患者;痰培养、菌群鉴定和药敏试验应成为指导临床诊断和治疗的依据。     

非结核分枝杆菌肺病的CT征象分析

目的：探讨非结核分枝杆菌肺病的CT影像学表现。方法：回顾性分析2005年11月至2009年11月在本院确诊的30例非结核分支杆菌肺病的CT影像学资料,研究其cT影像学特点。结果：30例患者病灶跨双肺三叶及以上分布的病例占90％（27／30）;病变通常以多种形态混杂存在,以斑片状浸润影及条索影并存为多见,占53．3％（17／30）;合并支气管扩张者占93．3％（28／30）,合并空洞63．3％（19／／30）及胸膜肥厚粘连43．3％（13／30）;但淋巴结肿大及胸腔积液少见。结论：非结核分枝杆菌肺病的cT以合并支气管扩张及多部位多形态混杂为其主要特征。     

80株结核分枝杆菌临床分离株耐药性特点

目的 分析结核分枝杆菌临床分离株对5种抗结核药物的药物敏感性。方法用改良罗氏培养法测定结核分枝杆菌临床分离株的耐药性（MIC）、耐药率。结果80株结核分枝杆菌临床分离株对INH、RFP、EMB、SM和LVFX的平均MIC分别为9．7μg／mL、30．1μg／mL、16．4μg／mL、38．7μg／mL和0．9μg／mL;耐药率分别是67．2％、35．0％、53．8％、63．8％和16．3％。总耐药率为83．75％;耐单药率为17．5％;耐多药率为66.3％;耐多药株占总耐药株的79．1％。结论80株结核分枝杆菌临床分离株耐药率和耐多药率都较高,结核病的防治将面临更大的困难。     

自动离心涂片法检查结核分枝杆菌的临床应用

目的建立一种操作快速、简单、检出率高的痰涂片检查结核分枝杆菌的方法。方法采用自动离心涂片技术．检查276例肺结核患者痰内结核分枝杆菌,同时与漂浮集菌涂片法、直接涂片法进行方法学比较。结果276例肺结核患者痰内结核分枝杆菌检出率：自动离心涂片法为25．7％,漂浮集菌法为32．2％,直接涂片法为17．0％。结论自动离心涂片法痰内结核分枝杆菌检出率明显高于直接涂片法,比漂浮集菌法略低,因其快速、检出率高,值得推广应用。     

非结核分枝杆菌肺病分析

目的：了解非结核分枝杆菌（nontuberculous mycobacteria,NTM）肺病流行情况及耐药特点。方法：收集2003年9月～2006年5月门诊痰菌阳性标本,按《全国结核病细菌学检验规程》的要求,用改良罗氏法进行痰结核菌培养、菌种鉴定和药物敏感性试验。结果：非结核分枝杆菌分离率为10.3%,35岁以上分离率高于35岁以下人群,性别无明显差异。耐药率达100%,明显高于结核分枝杆菌,耐多药率51.7%,与结核分枝杆菌无明显差异。结论：非结核分枝杆菌在肺病患者中分离率高,且多耐药,因此对难治性肺病患者进行菌株鉴定及药敏试验非常重要。     

结核分枝杆菌实验室药敏结果的分析

目的通过对166株结核分枝杆菌药敏试验结果分析,得出依赖利福平药物的菌株发生率及特点。方法采用绝对浓度间接法对166株结核分枝杆菌进行6种药物的敏感性试验,药物依赖判定：在含有结核药物的培养基上生长旺盛程度和菌量,高浓度药物培养基≥低浓度培养基≥对照培养基。结果166株结核分枝杆菌中耐药菌110株,其中INH、5M、RFP在6种药物中耐药比例较高,而RFP最高(49．4％);166株结核分枝杆菌共检出依赖菌26株(15．7％)。结论药物依赖现象多发生自耐多药菌株。     

住院肺结核患者结核分枝杆菌耐药情况分析

目的 分析不同年龄组住院肺结核患者结核分枝杆菌耐药情况。方法分析2010年8月1日-2011年7月31日462例住院肺结核患者结核分枝杆菌对INH、RFP、Sbl和EMB的耐药性试验结果,观察青年组（14-39岁）、中年组（40-59岁）和老年组（≥60岁）对抗结核药物的耐药率和耐多药率。结果青年组、中年组和老年组初治患者耐药率分别为2613％、44．7％、和43．4％,青年组低于中年组和老年组,差异有统计学意义（X^2=7．12,P〈0．01）、（X^2=5．41,P〈0．05）;青年组、中年组和老年组复治患者耐多药率分别为15．6％、57．8％和19．6％,中年组高于青年组和老年组,差异有统计学意义（X^217．40,P〈0．01）、（X^2=20．67,P〈0．01）。结论不同年龄组结核病患者耐药率、耐多药率均有所不同,应引起重视。     

非结核分枝杆菌肺病74例临床分析

目的了解非结核分枝杆菌（NTM）肺病的临床特点。方法分析2012年3月1日至2013年1月31日长沙市中心医院胸科中心痰分枝杆菌培养阳性、菌型鉴定为非结核分枝杆菌患者74例,对其病原菌分型、耐药性及临床表现进行总结。结果NTM肺病致病菌以缓慢生长型菌株为主,占77．1％,其中主要包括胞内分枝杆菌及鸟分枝杆菌;NTM耐药率非常高,对一线抗结核药有天然耐药性,NTM药敏试验发现NTM对异烟肼（INH）、链霉素（SM）耐药率为100％,对利福平（RFP）、利福喷丁（RFT）、乙胺丁醇（EMB）、比嗪酰胺（PZA）耐药率为95％;NTM肺病病程长,〉1年者占59．5％,以中老年为主,〉45岁者占78．4％,主要症状为咳嗽、咳白粘痰、气促、咯血、胸痛、发热、乏力及体重下降;胸部CT主要表现为双肺多肺叶受累,多形态改变同时存在,易形成空洞、支扩,胸膜受累可见;治疗上选择联合用药,疗程12—24个月。结论对病程长、病情反复、病变广泛,特别是伴有典型空洞、支气管扩张等表现的多耐药中老年患者,有必要警惕NTM肺病的可能,及时完善NTM检测及其可能有效药物的药敏试验,根据药敏试验及适应证选择联合用药。     

反向膜杂交技术检测结核分枝杆菌耐药株的临床价值研究

目的评价反向膜杂交技术对于肺结核病患者的结核分枝杆菌耐药基因检测的临床应用价值。方法利用反向膜杂交技术检测了40株耐药结核分枝杆菌培养分离株、10株非结核分枝杆菌培养分离株、240例肺结核患者痰标本的rpoB、katG,、inhA突变基因。240例痰标本同时进行结核菌培养。106株膜芯片检测阳性样本测序验证。结果特异性方面：膜芯片检测40株结核分枝杆菌培养分离株,均为阳性;10株非结核分枝杆菌培养分离株,均为阴性。灵敏度方面：膜芯片检测240例临床痰标本中,66例结核分枝杆菌阳性,占27.5%。耐药基因准确性方面：106例膜芯片检测阳性的样本进行测序验证,两者结果完全一致。结论反向膜杂交技术可快速检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药突变基因,与常规结核分枝杆菌培养、测序检测耐药基因的结果相符,可应用于临床。     

结核分枝杆菌基因分型及其耐药性分析

目的探讨四川地区结核患者结核分枝杆菌基因分型及其与耐药性关系。方法采用PCR和琼脂糖凝胶电泳技术,对124株结核分枝杆菌的6个可变重复位点进行检测,并应用Gel-Proanalyzer3.0软件和BioNumerics（Version3.0）软件对检测结果进行基因型分析,同时分析其基因型与耐药之间的关系。结果124株结核分枝杆菌共分为37个不同的VNTR类型,成簇基因型占74.19%（92/124）,单一基因型占25.81%（32/124）。耐药菌株在成簇类型和单一类型的分布上存在统计学差异。结论四川地区结核患者的结核分枝杆菌具有明显的基因多态性,成簇类型是主要流行菌株,应加强流行结核菌株的监控。     

PCR反向膜杂交技术检测临床标本中结核分枝杆菌

目的 探讨结核分枝杆菌（TB）PCR反向膜杂交技术的临床应用价值。方法 采用该技术对本院300例确诊结核的或高度怀疑为结核分枝杆菌感染的病人标本、60例非结核住院病人标本进行检测,同时用培养镜检法、常规PCR法作对照试验。结果 PCR反向膜杂交法检出TB菌176例、阳性率（58．7％）,比培养镜检法47例（15．7％）、常规PCR法156例（52．0％）检出率高,而对60例证实无结核分枝杆菌的标本、几种方法检测均为阴性。结论 该技术能快速、敏感和高度特异地检测临床标本中的TB菌。     

肺结核、肺癌患者外周血结核分枝杆菌及其L型的检测方法

目的：建立检测血液中结核分枝杆菌及其Ｌ型的简便方法,并对其临床应用进行评价。方法：将红细胞裂解后离心检测,建立ＰＣＲ法、直接培养法、溶血离心培养法、溶血离心涂片法和滴片法。结果：１３例肺结核和２５例肺癌患者中,肺结核和肺癌患者外周血结核分枝杆菌ＰＣＲ检测的阳性数为８例中３例和１１例中３例;结核分枝杆菌及其Ｌ型直接培养法总阳性率为１７．６５％,溶血离心涂片法、溶血离心培养法、滴片法的总阳性率分别为９．５２％、４１．１８％和５８．８２％;肺结核和肺癌患者外周血结核分枝杆菌以Ｌ型为主,表现为抗酸或非抗酸。结论：肺结核和肺癌患者外周血存在结核分枝杆菌及其Ｌ型,并以Ｌ型为主;溶血离心培养法和滴片法结合免疫酶染色可常规用于检测血液中结核分枝杆菌及其Ｌ型。