基于“五原则”的开心散质量标志物（Q-Marker）的预测分析

开心散是治疗“好忘”的经典名方,现收录于《古代经典名方目录（第一批）》,可治疗心失所养、痰阻心窍、心肾不交所致之善忘。临床常用于改善记忆力衰退、语言障碍、认知功能障碍、人格改变等神经精神疾病的症状。通过梳理开心散的化学成分、质量控制、药动学、药理作用以及临床应用等相关文献,基于“五原则”对开心散的中药质量标志物（quality marker,Q-Marker）进行预测分析,人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、细叶远志皂苷、3,6′-二芥子酰基蔗糖、远志(口山)酮III、茯苓酸、β-细辛醚、α-细辛醚的专属性高、可测性强,可作为开心散的Q-Marker,为其质量控制研究提供参考。     

运用HPLC和GC-MS研究开心散有效抗抑郁成分大鼠吸收情况

目的:明确开心散提取物经大鼠灌胃后有效抗抑郁成分的吸收情况。方法:用水蒸气蒸馏法回收石菖蒲挥发油部分,用50%乙醇提取开心散复方有效成分,按原方比例予Wistar大鼠灌胃,分离含药血清和脑组织。含药血清经HPLC检测,定性分析有效抗抑郁成分人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6,-二芥子酰基蔗糖;脑组织匀浆离心后分离上清液,经萃取后,GC-MS定性分析复方中石菖蒲挥发油有效抗抑郁成分α-细辛醚和β-细辛醚入脑情况。结果:HPLC得到人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6,-二芥子酰基蔗糖;GC-MS得到α-细辛醚和β-细辛醚。结论:开心散的5种有效抗抑郁成分均能被大鼠吸收,进一步明确了开心散抗抑郁疗效的物质基础。     

运用HPLC和GC-MS研究开心散有效抗抑郁成分作用研究

目的:明确开心散提取物经大鼠灌胃后有效抗抑郁成分的吸收情况。方法:用水蒸气蒸馏法回收石菖蒲挥发油部分,用50%乙醇提取开心散复方有效成分,按原方比例予Wistar大鼠灌胃,分离含药血清和脑组织。含药血清经HPLC检测,定性分析有效抗抑郁成分人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6’-二芥子酰基蔗糖;脑组织匀浆离心后分离上清液,经萃取后,GC-MS定性分析复方中石菖蒲挥发油有效抗抑郁成分α-细辛醚和β-细辛醚入脑情况。结果:HPLC得到人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6’-二芥子酰基蔗糖;GC-MS得到α-细辛醚和β-细辛醚。结论:开心散的5种有效抗抑郁成分均能被大鼠吸收,进一步明确了开心散抗抑郁疗效的物质基础。     

经典名方开心散的基准样品关键质量属性研究

该研究使用不同批次饮片制备15批开心散基准样品粉末，建立开心散HPLC特征图谱，并进行特征峰归属和相似度分析；以西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、远志口山酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖、人参皂苷Rb₁、β-细辛醚、α-细辛脑和去氢茯苓酸为指标性成分建立开心散多成分含量测定方法，以均值的70%～130%为界限设定各质量控制指标的量值波动范围。15批开心散基准样品的特征图谱共有22个特征峰，指认出8个色谱峰，相似度在0.992～0.999;15批基准样品中西伯利亚远志糖A5质量分数在0.34～0.55 mg·g^-1、西伯利亚远志糖A6 0.43～0.57 mg·g^-1、远志口山酮Ⅲ0.12～0.19 mg·g^-1、3,6′-二芥子酰基蔗糖1.08～1.78 mg·g^-1、人参皂苷Rb₁ 0.33～0.62 mg·g^-1、β-细辛醚2.34～3.72 mg·g^-1、α-细辛脑0.11～0.22 mg·g^...     

不同蜜炙方法对远志化学成分的影响

目的:比较3种蜜炙方法对远志化学成分的影响。方法:采用浸出物测定法测定生远志、制远志及3种蜜远志的70%乙醇浸出物;以远志提取物碱水解后所得细叶远志皂苷为指标,采用高效液相色谱法测定其总皂苷含量;采用高效液相色谱法测定其远志■酮Ⅲ和3,6′-二芥子酰基蔗糖含量。结果:3种蜜炙方法均增加了远志的醇溶性浸出物含量;细叶远志皂苷含量为生远志制远志≈蜜远志A蜜远志B蜜远志C;远志■酮Ⅲ和3,6′-二芥子酰基蔗糖含量均为生远志制远志蜜远志A蜜远志C蜜远志B。结论:3种蜜炙方法均增加了远志中醇溶性浸出物,减少了细叶远志皂苷、远志■酮Ⅲ和3,6′-二芥子酰基蔗糖含量。蜜炙方法C皂苷类含量减少最多。皂苷类成分的减少可能是远志蜜炙解毒的机制。     

开心散化学成分、药理作用的研究进展及质量标志物的预测分析

开心散为益气养心、安神定志的经典名方，具有改善学习记忆能力、抗氧化、抗衰老、促进神经细胞分化和再生等药理作用，现代临床多用于治疗健忘、抑郁、痴呆等症。该文对开心散的化学成分、药理作用研究进展进行整理综述，同时根据中药质量标志物(Q-marker)概念中的传递与溯源、特有性、有效性、可测性及复方配伍环境对开心散的质量标志物进行预测分析，提示西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、远志■酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷A、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、茯苓酸、β-细辛醚和α-细辛醚可作为开心散的质量标志物，为建立开心散复方制剂的质量控制体系和全过程质量溯源体系提供科学参考依据。     

开心散60Co-γ射线辐照灭菌工艺优化及不同灭菌方式对其质量影响研究

目的 优选开心散最佳⁶⁰Co-γ射线辐照灭菌工艺,并对比不同灭菌方式对开心散的灭菌效果及质量的影响。方法 以西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、远志(口山)酮Ⅲ、3,6’-二芥子酰基蔗糖、人参皂苷Rb₁、β-细辛醚、α-细辛醚、去氢茯苓酸的含量和灭菌率的综合评分为指标,采用层次分析(analytic hierarchy process,AHP)法确定各指标权重系数,考察开心散不同辐照剂量的灭菌效果,优化开心散辐照灭菌工艺参数;通过微生物限度检测、指标成分含量及特征图谱检测,并结合灭菌后的制剂性状,对比辐照灭菌、湿热灭菌、干热灭菌和乙醇灭菌的灭菌效果和对开心散质量的影响。结果 按照确定的权重系数进行综合评价,确定开心散最佳⁶⁰Co-γ射线辐照灭菌工艺条件为辐照剂量6 kGy;不同方式灭菌样品的微生物限度检查均符合药典规定;与未灭菌制剂相比,经辐照灭菌后样品中西伯利亚远志糖A6、3,6’-二芥子酰基蔗糖含量降低,人参皂苷Rb₁、β-细辛醚和α-细辛醚含量增加;与辐照灭菌相比,经干热灭菌后多种指标成分...     

远志HPLC多指标指纹图谱研究

目的:建立远志药材多指标成分的HPLC指纹图谱。方法:Kromasil 100-5 ODS-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为0.05%磷酸乙腈溶液-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速1.0 m L/min;检测波长为315 nm切换215 nm;柱温35℃。利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004 A版)"计算相似度,SPSS软件对10个对照指纹峰进行聚类分析。结果:方法精密度、稳定性、重复性良好,对照品对照指认西伯利亚远志糖脂A5、3,6'-二芥子酰基蔗糖、远志酮Ⅲ、远志皂苷B、远志皂苷元等10个共有峰;16批样品相似度大于0.91;3,6'-二芥子酰基蔗糖和远志酸为主差异成分。结论:该方法操作简便准确,多指标鉴别专属性强,建立的HPLC指纹图谱可为远志药材的质量评价提供支持。     

远志炮制过程中6种寡糖酯类成分转化机制

目的探讨远志Polygala tenuifolia Willd.炮制过程中6种寡糖酯类成分(3,6'-二芥子酰基蔗糖、西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、球腺糖A、远志蔗糖酯B、黄花远志素A)的转化机制。方法采用已知对照品模拟炮制技术,制备远志中6种寡糖酯类化合物的模拟炮制品;采用HPLC-TOF/MS技术,结合对照品定位、质谱数据、数据库匹配和文献参照,分析各化合物模拟炮制品的化学成分。结果 6种寡糖酯化合物模拟炮制品中检测到了其次级苷和(或)苷元或其异构体;西伯利亚远志糖A5模拟炮制品中检测出了阿魏酸;西伯利亚远志糖A6模拟炮制品中检测出了芥子酸;球腺糖A模拟炮制品中检测出了3,4,5-三甲氧基肉桂酸;远志蔗糖酯B模拟炮制品中检出了芥子酸和对羟基苯甲酸;3,6'-二芥子酰基蔗糖模拟炮制品中检测出了西伯利亚远志糖A6、黄花远志素C、芥子酸;黄花远志素A模拟炮制后检测出了黄花远志素B和阿魏酸。结论远志中寡糖酯类成分性质不稳定,在加水、加热的条件下,其分子结构中的酯键发生水解,生成其次级苷和(或)苷元。     

不同产地野生远志中5种主要成分的含量测定及质量分析

目的研究不同产地野生远志Polygala tenuifolia中5种主要成分的含量差异,为远志多成分质量评价体系提供基础。方法采用HPLC法测定20个产地野生远志中远志酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖、远志酸、远志皂苷元和细叶远志皂苷的含量,运用SPSS 20.0和SIMCA 11.5进行差异性、聚类、相关性和主成分分析。结果不同产地野生远志中5种主要成分的含量差异显著,聚类分析和主成分分析可将所有样品聚为2类,第Ⅰ类所含3,6′-二芥子酰基蔗糖、远志酮Ⅲ、远志皂苷元和细叶远志皂苷含量较高,来自陕西渭南、陕西咸阳和山西新绛,其余样品则聚为第Ⅱ类。结论陕西渭南、陕西咸阳和山西新绛所产野生远志中主要成分含量较高,与其他产地存在极显著性差异,可为远志质量评价、优良种质及栽培基地选择等提供依据。     

不同来源远志药材有效成分的定量分析

 目的 对不同来源远志药材中有效成分的含量进行分析,以阐明远志药材适宜的产地、栽培品和野生品的质量等同性及合理的采收期。方法 采用2010版《中国药典》远志项下的远志NFDE8酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖和细叶远志皂苷的含量测定方法,对不同来源的远志样品进行分析。结果 不同来源远志药材具有一定差别,其3,6′-二芥子酰基蔗糖含量的变化区间为0.237%~1.704%（n=54）,远志NFDE8酮Ⅲ为0.037%~0.857%（n=54）,细叶远志皂苷为1.44%~3.71%（n=53）。不同产地的远志药材样品以山西和陕西两地所产药材各有效成分含量为高;栽培品和野生品各有效成分的含量没有明显差异;不同采收月份的药材,以春秋两季采收药材有效成分含量为高,且春季稍高于秋季;2~3年生药材各有效成分的含量明显高于1年生样品。结论 采用多指标定量方法可以对远志药材质量进行更为客观和全面的评价。我们的实验结果产地以山西和陕西所产远志药材质量为佳,栽培品与野生品质量基本等同;合理的采收期应该在每年春季的3～5月份,种植年限应在2年以上。     

3，6′-二芥子酰基蔗糖的稳定性研究

 目的 对影响化合物3,6′-二芥子酰基蔗糖稳定性的因素进行考察,寻找能够使其稳定存在的条件,为该化合物今后进一步研究及开发提供参考。方法 采用紫外分光光度法(UV)和高效液相色谱法（HPLC）,考察3,6′-二芥子酰基蔗糖在不同溶剂、不同pH、不同温度和光照条件下的稳定性,并采用高效液相-二极管阵列检测-质谱（HPLC-DAD-MS）联用技术对光照以及365 nm紫外灯下的转化产物进行分析。结果 UV和HPLC具有较好的相关性,二者的分析结果均表明溶剂的种类、pH值、温度和光照条件对3,6′-二芥子酰基蔗糖稳定性具有一定影响。转化产物的紫外和质谱数据分析结果表明,3,6′-二芥子酰基蔗糖光照及紫外灯下照射转化的主要产物是芥子酰基双键顺反异构化的产物。结论 UV可用于3,6′-二芥子酰基蔗糖稳定性的快速分析。在该化合物的分离纯化及其分析检测时,应采用醇为溶剂,在中性或酸性条件下,低温、避光操作。     

远志炮制前后5种寡糖酯类成分的变化规律

目的:比较远志不同炮制品中5种寡糖酯类成分的含量,探讨远志炮制前后寡糖酯类成分的变化规律。方法:采用HPLC同时测定远志不同炮制品中西伯利亚远志糖A5,西伯利亚远志糖A6,球腺糖A,tenuifoliside B及3,6'-二芥子酰基蔗糖的含量,流动相乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)梯度洗脱(0~5 min,10%~12%A;5~20 min,12%~25%A;20~25 min,25%A),检测波长330 nm。结果:远志根皮中5种寡糖酯类成分含量均明显高于木心。远志根皮中5个成分质量分数分别为0.173%,0.155%,0.071%,0.120%,0.648%,木心中5个成分质量分数分别为0.090%,0.053%,0.029%,0.018%,0.205%。蜜远志中西伯利亚远志糖A6和球腺糖A含量高于生品,而其他3种成分的含量则较生品降低。制远志中西伯利亚远志糖A5,西伯利亚远志糖A6,3,6'-二芥子酰基蔗糖和tenuifoliside B含量较生品显著降低,而球腺糖A含量则较生品升高。结论:远志木心与远志根皮中5种寡糖酯类成分含量相差较大,炮制对远志中寡糖酯类成分的含量具有一定影响,经甘草汁煮制后西伯利亚远志糖A5,西伯利亚远志糖A6,3,6'-二芥子酰基蔗糖及tenuifoliside B均产生了质变。     

附子相杀、相畏配伍减毒实验研究

目的:根据古代本草关于附子相杀、相畏的记载,研究与附子具有相杀、相畏配伍的中药对附子毒性的影响。方法:ICR小鼠,40μL.g-1体重灌胃给药,平行比较了附子分别配伍不同比例防风、黄芪、远志前后的急性毒性,测定其半数致死剂量(LD50);SD大鼠,十二指肠注射给药,20μL.g-1体重,平行比较了附子分别配伍不同比例防风、黄芪、远志前后的心脏毒性,测定其半数中毒剂量(TD50)。结果:附子配伍各药后可不同程度的提高附子的LD50和心脏毒性的TD50,减毒作用与药物的配伍比例有关。结论:相杀、相畏配伍是我国古代先贤在应用有毒中药过程中实践的总结,具有一定的科学性。     

黄芩与五味子配伍对黄芩苷、五味子酯甲代谢动力学的影响

目的: 研究黄芩与五味子配伍对黄芩苷和五味子酯甲的大鼠药代动力学规律的影响。方法: 大鼠灌胃黄芩提取物2.5 g ·kg^-1﹑五味子提取物2.5 g ·kg^-1和黄芩提取物加五味子提取物各2.5 g ·kg^-1,分别于0.25,1,2,4,8,12,24 h取血分离血浆,采用HPLC测定其黄芩苷﹑五味子酯甲的含量,结果运用DAS 3.0计算其药动学参数。结果: 测定黄芩组黄芩苷的药动学参数分别为t1/2=(6.203±3.324)h,AUC=(41.868±28.254)μg ·L^-1 ·h^-1,C_max=(2.883±0.684) μg ·L^-1,MRT=(11.697±4.108) h,V_d=(568 112.69±81 364.658)L ·kg^-1,CL=(98 526.569±93 774.892)L ·h^-1 ·kg^-1;黄芩+五味子组黄芩苷的药动学参数分别为t1/2=(10.686±1.533)h,AUC=(53.064±30.047) μg ·L^-1 ·h^-1,C_max=(3.168±1.312) μg ·L^-1,MRT=(16.147±1.79) h,V_d=(2 240 724.1±1 824 718.9)L ·kg^-1,CL=(139 855.27±107 995.59)L ·h^-1 ·kg^-1;黄芩+五味子组五味子酯甲的药动学参数分别为t_1/2=(21.544±14.611)h,AUC=(11.554±5.516) μg ·L^-1 ·h^-1,Cmax=(0.311±0.074) μg ·L^-1,MRT=(34.139±18.532) h,V_d=(12 153 917±5 806 489.8)L ·kg^-1,CL=(564 758.71±384 128.86)L ·h^-1 ·kg^-1;五味子组五味子酯甲的药动学参数分别为t1/2=(4.926±5.371)h,AUC=(4.988±3.029) μg ·L^-1 ·h^-1,C_max=(0.287±0.071) μg ·L^-1,MRT=(12.002±6.854) h,V_d=(3 091.656±1 585.602)L ·kg^-1,CL=(615.571±250.643)L ·h^-1 ·kg^-1。结论: 黄芩与五味子配伍,可以促进黄芩苷和五味子酯甲在血液中的吸收,并可延长这两种成分的半衰期,使其血药浓度维持在较高水平,达到协同增效的目的。     

远志中西伯利亚远志糖A5和西伯利亚远志糖A6的含量测定方法研究

目的:建立高效液相色谱法同时测定远志中西伯利亚远志糖A5和西伯利亚远志糖A6含量的方法。方法:艾杰尔Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90)等度洗脱,检测波长330 nm,流速1mL.min-1,柱温30℃。结果:西伯利亚远志糖A5和西伯利亚远志糖A6分别在0.008 7～0.069 4 g.L-1(r=0.999 3),0.009 0～0.072 3 g.L-1(r=0.999 1)时线性关系良好,平均加样回收率依次为101.7%,97.8%,RSD为1.7%,1.6%。结论:该方法操作简便、快速、准确、可靠,适用于远志中西伯利亚远志糖A5和西伯利亚远志糖A6的含量测定和远志药材的质量控制。     

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??OBJECTIVE To develop a method of quantitative analysis of multicomponents by singlemarker (QAMS) for simultaneous determination of six oligosaccharide esters in Polygalae Radix. METHODS 3,6??-Disinapoyl sucrose (DISS) was used as the internal reference substance. The relative correlation factors (RCF) of sibiricose A5, sibiricose A6, tenuifoliside B, tenuifoliside A, and tenuifoliside C to DISS were calculated. The contents of the six oligosaccharide esters in 20 different batches of Polygalae Radix were determined by both external standard method and QAMS. The assay results were compared to evaluate the accuracy of QAMS method. RESULTS The RCF of sibiricose A5, sibiricose A6, tenuifoiside B, tenuifoliside A, and tenuifoiside C to DISS were 1.23, 1.16, 1.56, 1.79, and 0.92, respectively. Under different experimental conditions, the RCF had good reproducibility, and there was no significant difference in the quantitative analysis results between the external standard method and QAMS method. CONCLUSION The QAMS method is feasible and credible, and can be used for the quality control of oligosaccharide esters in Polygalae Radix.
     

厚朴醇提物与远志醇提物配伍对大鼠粪便代谢物的影响

目的:考察厚朴醇提物、远志醇提物及二者配伍对大鼠粪便代谢物的影响,分析其潜在的代谢通路,为探索厚朴缓解远志所致胃肠动力障碍的机制提供实验依据。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为空白组,厚朴醇提物组(3. 50 g·kg~(-1)),远志醇提物组(1. 75 g·kg~(-1)),配伍组(3. 50 g·kg~(-1)+1. 75 g·kg~(-1)),连续灌胃给药3 d,收集大鼠末次给药24 h内的粪便,采用UPLC-Q-TOF-MS采集粪便代谢物数据,流动相乙腈(A)-0. 1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～0. 5 min,3%A;0. 5～12. 5 min,3%～70%A; 12. 5～13 min,70%～90%A; 13～16 min,90%～97%A; 16～17 min,97%～100%A; 17～22 min,100%A; 22～23 min,100%～3%A),电喷雾离子源,正、负离子模式数据采集范围m/z 50～1 200;借助Progenesis QI v2. 0,SIMCA-P 14. 0,SPSS 20. 0,MetaboAnalyst 4. 0等软件进行多元分析,筛选特征代谢标志物并分析其相关代谢通路。结果:共筛选出5-亚胺甲基四氢叶酸,L-3-羟基犬尿氨酸,7,8-二氢蝶酸等17个特征代谢标志物,其相关代谢通路为不饱和脂肪酸的生物合成、亚油酸代谢、维生素B_6代谢、叶酸生物合成等。结论:厚朴缓解远志所致胃肠动力障碍的作用机制可能与嘌呤代谢、叶酸生物合成、色氨酸代谢、初级胆汁酸生物合成有关。     

远志UPLC多指标成分的测定及指纹图谱研究

目的 建立远志超高效液相色谱(UPLC)多成分测定方法及指纹图谱方法。方法 采用UPLC法,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,体积流量0.4 m L/min,检测波长320 nm,测定24批远志药材中sibiricose A5、sibiricose A6、sibiricaxanthone B、glomeratose A、polygalaxanthone III、3,6′-disinapoyl sucrose 6种成分的量,并建立远志药材指纹图谱,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS~E)指认共有峰。结果 不同产地远志中3,6′-disinapoyl sucrose与sibiricose A6量差异较大;建立的药材UPLC指纹图谱共标定37个共有峰,指认出其中33个峰,24批样品相似度在0.756~0.997。成分量及相似度综合分析结果表明不同地区远志药材质量存在一定差异。结论 建立的测定结合指纹图谱分析方法可有效、全面地用于远志药材的质量评价。     

远志水提取物对小鼠学习记忆及血液学指标的影响

目的:观察远志水提取物对小鼠学习记忆及力竭运动后血液学指标的影响.方法:将84只小鼠随机分为学习记忆组和运动组.学习记忆组小鼠48只,又分为对照组和远志高、中、低剂量组,分别给予远志水提取物13.00,6.50,3.25 g·kg-1 ·d-1灌胃21 d后,利用Morris水迷宫观察小鼠的学习记忆能力,同时测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA).运动组小鼠36只,再分为对照组,游泳组和远志组.除对照组外,游泳组和远志组小鼠进行3周的游泳训练,最后一次力竭游泳后心脏采血,测定红细胞计数(RBC)和血红蛋白(Hb).结果:学习记忆组小鼠灌胃远志水提取物后,远志水提取物中剂量组和高剂量组找到站台的潜伏期明显缩短(P＜0.05),穿越站台次数明显增加(P＜0.05).中剂量组和高剂量组小鼠脑组织SOD活性明显增高,MDA含量明显减少,与对照组相比有统计学意义(p＜0.05).低剂量组各指标与高剂量组比较均有统计学意义(P＜0.05).运动组中,灌胃远志后小鼠负重游泳力竭时间与对照组相比明显延长(P＜0.01).血液学指标显示,对照组小鼠RBC和Hb均低于没有进行游泳训练的空白对照组(P＜0.05).而远志组小鼠RBC和Hb与空白对照组比较无明显差异,与对照组比较明显增加(P＜0.05).结论:远志水提取物可增强小鼠的学习记忆能力,增加脑组织SOD活性,降低MDA含量;远志水提取物可增强小鼠的运动能力,并能有效抑制大强度运动引起的RBC和Hb改变.