熊果酸诱导人胃癌BGC823细胞凋亡及其作用机制初探

背景与目的：熊果酸（ursolic acid,UA）广泛存在于夏枯草、白花蛇舌草等清热解毒药中,可抑制多种肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡,具有广泛生物学活性。本研究将UA作用于人胃癌BGC823细胞,观察其对细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：MTT法检测UA对BGC823细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期与凋亡的变化;Realtime-PCR检测细胞bax、bcl-2mRNA表达的变化。结果：UA呈时间-剂量依赖性抑制BGC823细胞增殖,分别作用24、48、72h后半数抑制浓度依次为36.88、34.72、32.18μmol/L;UA能诱导BGC823细胞凋亡,并阻滞细胞于G2/M期;此外,其还可上调BGC823细胞bax及下调bc1-2mRNA表达,且作用随剂量的增加而加强。结论：UA呈时间-剂量依赖性抑制BGC823细胞增殖,并诱导其凋亡,阻滞细胞于G2/M期;其凋亡机制可能与上调bax及下调bcl-2基因的表达有关。     

胃泌素及其受体拮抗剂对胃癌BGC—823细胞系p53基因蛋白表达的 …

胃泌素是胃肠道Ｇ细胞分泌折一种多肽激素，对胃肠道粘膜细胞及某些恶性肿瘤细胞有显著促生长作用。这种作用可被其受体拮抗剂Ｌ－３６５２６０所阻断。本实验用胃泌素－１７及其受体拮抗剂Ｌ－３６５２６０分别或单独对ＢＧＣ－８２３细胞系作用７２ｈ后，发现胃泌素对细胞Ｐ５３基因蛋白的表达普遍有促进作用，而Ｌ－３６５２６０对Ｐ５３的表达却表现为明显抑制。．     

MTT法检测C-FLIP反义寡核苷酸对BGC823细胞的抑制效果

目的探讨脂质体Lipofectamine2000介导下c-FLIP反义寡核苷酸对胃癌细胞系BGC823生长的抑制作用.方法 RT-PCR和Western Blot方法检测c-FLIPL/S的mRNA和蛋白的表达变化;原位末端标记法、流式细胞术检测细胞凋亡;MTT法检测细胞抑制率.结果 Western Blot可见c-FLIPL和c-FLIPS蛋白表达显著下降;反义寡核苷酸作用细胞36 h后,TUNEL检测可见明显阳性染色,流式细胞分析发现在G1峰前出现凋亡峰;MTT显示脂质体介导反义寡核苷酸可显著抑制BGC823细胞增殖.结论 c-FLIPL、c-FLIPS mRNA和蛋白在Hela、BGC823细胞中表达.脂质体介导c-FLIP反义寡核苷酸转染BGC823细胞后抑制目的蛋白表达,抑制细胞生长、促进凋亡,其作用呈剂量依赖性.研究靶向c-FLIP的反义基因治疗药物可能为胃癌的临床治疗提供新的方法和思路.     

人胃腺癌BGC823细胞Midkine高表达前后基因表达谱芯片分析

目的：用基因芯片技术分析、筛选Midkine高表达前后胃腺癌相关基因谱的差异表达。方法：建立Midkine高表达BGC823胃腺癌细胞系,提取细胞总RNA,逆转录Cy3、Cy5标记cDNA探针,应用晶芯唧表达谱芯片,分析差异表达的基因。结果：发现Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞有显著性表达差异的基因共有550个,其中上调基因407个,下调基因143个。对550条差异表达基因进行初步功能分类分析,结果表明这些基因与Midkine促进胃腺癌发病机制存在相关性。结论：Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞部分功能基因存在显著的表达差异,多数差异表达的基因参与细胞黏附、细胞骨架形成、细胞周期以及细胞代谢等过程。     

大蒜素对人胃癌细胞BGC823 cyclin D1和p27Kip1表达的影响

背景与目的：在研究大蒜素抑制人胃癌细胞BGC823恶性增殖,将其阻滞于G1期并诱导BGC823细胞凋亡的分子机制及其靶基因过程中,我们发现cvclin D1和p27^Kip1。蛋白在G1期阻滞中起重要作用。本实验从mRNA和蛋白水平探讨大蒜素对人胃癌细胞BGC823 cvclin D1和p27^Kip1表达水平的影响。方法：用25μg／ml大蒜素处理BGC823细胞,并分别提取对照组和大蒜素处理组的总RNA和总蛋白,然后采用RT-PCR和Western blot法检测大蒜素处理前后cvclin D1和p27^Kip1 mRNA和蛋白的变化。结果：经25μg／ml大蒜素处理BGC823细胞24h,cyclin D1蛋白表达下调,p27^Kip1蛋白表达上调,处理48h,上述变化更明显。而mRNA水平未见明显改变。结论：大蒜素可影响cyclin D1和p27^Kip1蛋白的表达,而不影响mRNA的转录。     

香菇多糖联合多西他赛对胃癌BGC823细胞增殖的影响

目的：观察香菇多糖单药及联合多西他赛抑制胃癌细胞BGC823增殖的作用.方法：分别用不同浓度的香菇多糖、多西他赛和香菇多糖联合多西他赛处理胃癌细胞BGC823.香菇多糖终浓度分别为1.560μg/ml,3.125 μg/ml,6.250 μg/ml,12.500μg/ml.多西他赛终浓度分别为0.625 μg/ml,1.250μg/ml,2.500μg/nl,5.000 μg/ml.MTT法检测各组细胞增殖情况;同时用Annexin Ⅴ/PI法检测各组细胞的凋亡.结果：单药香菇多糖能抑制BCG823细胞的增殖,不同浓度（由高到低）对BGC823细胞的增殖抑制率分别为67.7％,56.0％、42.1％和23.2％,与阴性对照组比较有统计学意义（P＜0.05）.不同浓度香菇多糖联合多西他赛能增强多西他赛对BGC823细胞增殖的抑制作用.单药香菇多糖能增加BGC823细胞的细胞凋亡率,与多西他赛联用使细胞凋亡率明显增加（P＜0.05）.结论：香菇多糖能抑制胃癌BGC823细胞的增殖,并能显著增强多西他赛抑制胃癌细胞BGC823的增殖作用.     

MyD88＋介导卵巢癌紫杉醇化疗抵抗的研究进展

卵巢癌是妇科恶性肿瘤之一,其死亡率居妇科恶性肿瘤的首位。目前卵巢癌的治疗手段主要包括手术和化疗,大部分的卵巢癌患者对紫杉醇联合铂类的化疗敏感,但少数患者对此方案无反应。这可能是导致卵巢癌化疗失败的主要原因之一。大量的研究显示髓样分化因子（MyD88）信号通路介导了肿瘤形成并与肿瘤化疗抵抗有关,许多学者对其进行深入研究,发现MyD88可能通过不同的信号传导通路促进促炎症细胞因子、凋亡抑制蛋白Survivin、血管内皮生长因子的表达等介导了卵巢癌对紫杉醇抵抗。本文就MyD88的生物学特性及MyD88信号通路与卵巢癌紫杉醇抵抗的研究进展进行综述。     

吐温80对BGC—823细胞抑制作用及凋亡相关因子的影响

目的 观察吐温80对人胃癌细胞BGC－823的抑制作用及凋亡相关因子的影响。方法 采用MTT法,测定不同浓度（0．15％、0．1％、0．05％）的吐温80及其不同作用时间（2小时、18小时、34小时）条件下,对BGC－823细胞的抑制作用;运用免疫组化ABC法染色,观察0．1％吐温80％作用（2小时、18小时、34小时）后BGC－823细胞Hsp70、bcl-2、bax的表达。结果 （1）吐温80的抑制效应随作用浓度及时间增加而明显增高（P＜0．01）;（2）吐温80作用不同时间对细胞Hsp70表达及分布影响不明显,而bcl-2、bax随作用时间延长有表达增加趋势,作用34小时,bcl-2主要分布于胞浆,bax主要分布于胞核。结论 吐温80对肿瘤细胞具有较强抑制作用,吐温80对bcl-2、bax表达及分布影响可能与其抑制作用有关。     

水杨醛氨基酸Schiff碱铜三元配合物对人胃癌细胞株BGC823增殖的作用及机制

背景与目的:水杨醛氨基酸Schiff碱基本结构中含C=N键,当其与金属离子配位后生物活性增强,表现出一定的抗癌、抑菌等活性。本研究主要探讨4种水杨醛氨基酸Schiff碱铜配合物(6B、7B、6P、7P)对人胃癌细胞株BGC823增殖的影响,并初步探讨其作用机制。方法:取对数生长期的BGC823细胞传代培养,24h后加药,MTT法测定4种配合物对BDC823细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化;DNAladder试验检测DNA损伤;免疫细胞化学法检测P53蛋白表达水平。结果:MTT实验结果:不同种类的水杨醛氨基酸Schiff碱铜配合物对BGC823细胞的生长均有明显的抑制作用,并且随配合物浓度的增大抑制作用有增强的趋势。4种配合物对BGC823细胞的IC50分别为6B18.10μmol/L,7B27.50μmol/L,6P3.61μmol/L,7P3.45μmol/L。流式细胞仪检测表明4种铜配合物均可明显提高BGC823细胞凋亡率,DNAladder试验也证实这一点;流式细胞仪检测还揭示铜配合物引起S期细胞和G2期比率增加,G1期细胞减少;P53蛋白免疫细胞化学染色显示,4种配合物均能够下调BGC823细胞突变型P53蛋白的表达,提示细胞凋亡的发生与p53依赖的凋亡通路有关。结论:配合物6B、7B、6P、7P在体外均能明显抑制肿瘤细胞BGC823生长增殖,诱导细胞凋亡,并造成细胞周期分布的改变。其机制可能与p53依赖的凋亡通路有关。     

髓样分化因子88 L265P突变在B细胞增殖性肿瘤中的研究进展

髓样分化因子88(MYD88)是Toll样受体(TLR)信号通路中的一个关键接头分子,在肿瘤的发生、发展中起重要作用.近期研究发现在90％的华氏巨球蛋白血症和约40％的弥漫大B细胞淋巴瘤等B细胞增殖性肿瘤患者中存在功能活化的MYD88 L265P突变.由于B细胞增殖性肿瘤的不同类型都具有其独特的组织学形态、免疫组织化学、临床特点,因此MYD88 L265P在各类型B细胞增殖性肿瘤中的突变率也有所不同.文章就MYD88 L265P的突变在B细胞增殖性肿瘤中的研究进展进行综述.     

人胃腺癌BGC823细胞Midkine高表达前后基因表达谱芯片分析

目的:用基因芯片技术分析、筛选Midkine高表达前后胃腺癌相关基因谱的差异表达.方法:建立Midkine高表达BGC823胃腺癌细胞系,提取细胞总RNA,逆转录Cy3、Cy5 标记cDNA 探针,应用晶芯表达谱芯片,分析差异表达的基因.结果:发现Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞有显著性表达差异的基因共有550个,其中上调基因407个,下调基因143个.对550条差异表达基因进行初步功能分类分析,结果表明这些基因与Midkine促进胃腺癌发病机制存在相关性.结论: Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞部分功能基因存在显著的表达差异,多数差异表达的基因参与细胞黏附、细胞骨架形成、细胞周期以及细胞代谢等过程.     

奥曲肽对人胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡影响的研究

目的：研究生长抑素类似物奥曲肽（octreotide,OCT）对胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响及其可能的作用机制。方法：不同浓度的OCT作用于体外培养的人胃癌BGC-823细胞,以5～FU作为阳性对照,应用M1Tr法分析细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率,AO—EB染色观察细胞形态变化。结果：OCT对BGC-823细胞的生长、增殖产生抑制作用,该抑制作用具有量效、时效关系和饱和性;OCT作用后细胞呈典型的凋亡形态学改变,流式细胞仪检测的细胞凋亡率和AO—EB染色测得细胞凋亡率与对照组相比较差异有显著性（P〈0．05）;BGC-823细胞经OCT作用后,G1期细胞数明显增加,S细胞数明显减少,细胞被阻滞于G1／S期。结论：10^-5-10^-3g/L浓度的OCT能够抑制胃癌BGC-823细胞增殖,机制可能与其诱导肿瘤细胞的凋亡和出现G1／S期阻滞有关。     

DHA 联合葫芦素B对人胃癌BGC -823细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究二十二碳六烯酸（docosahexaenoicacid,DHA）联合葫芦素 B（cucurbitacin B）体外对人胃癌BGC -823细胞增殖及凋亡的影响。方法：利用 NADH 酶染色、吉姆萨染色显微镜下观察人胃癌 BGC -823细胞经 DHA 联合葫芦素 B 作用后细胞形态学上的变化。采用 MTT 法、流式细胞仪检测细胞增殖、周期及凋亡的情况。结果：根据 MTT 法 DHA 联合葫芦素 B 作用于胃癌细胞比分别利用 DHA、葫芦素 B 直接作用细胞增殖抑制更为明显,更有效降低细胞的存活率,且在相同时间随着药物浓度的提高,作用效果也随之提高。NADH 酶染色法、吉姆萨染色法在显微镜下明显可见细胞凋亡现象。流式细胞仪检测肿瘤细胞,药物联合干预 G0/ G1期细胞明显增多,G2/ M 期和 S 期细胞明显减少。结论：DHA 联合葫芦素 B 可抑制人胃癌 BGC -823细胞增殖、诱导细胞凋亡,其联合具有协同作用。     

干扰LASP1基因表达对胃癌细胞BGC823增殖、迁移及侵袭能力的影响

背景与目的：LASP1是一种新的肌动蛋白结合蛋白,参与细胞骨架的重组调控及细胞迁移,在多种恶性肿瘤中高表达,并与肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关。但目前LASP1在胃癌发生、发展中的作用少见报道。该研究旨在探讨LASP1在胃癌增殖和侵袭中的作用及分子机制。方法：利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白［质］印迹法(Western blot)检测LASP1在不同胃癌细胞系中的表达,应用RNA干扰技术抑制BGC823细胞中LASP1的表达,采用RTFQ-PCR和Western blot检测转染后LASP1的表达,应用体外增殖、迁移和侵袭实验检测转染后细胞的增殖、迁移和侵袭能力,通过F-actin聚合实验检测细胞的F-actin的聚合能力,采用Western blot检测转染前后BGC823细胞中Akt的磷酸化情况。结果：LASP1在胃癌BGC823细胞中高表达。RNA干扰技术沉默LASP1基因后,干扰组与对照组相比,LASP1的mRNA和蛋白表达水平均明显下降。细胞增殖实验显示,干扰组细胞的增殖率低于对照组(P<0.05);Transwell迁移和侵袭实验发现,与对照组相比,干扰组细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(P<0.05);在干扰组细胞内的F-actin聚合量比对照组减少(P<0.05);在干扰组细胞内Akt磷酸化受到抑制。结论：LASP1的表达降低可以抑制胃癌BGC823细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力,LASP1通过调节F-actin的聚合和Akt磷酸化从而影响胃癌细胞的侵袭、转移。     

PKM2对人胃癌细胞HMGB1释放的影响

目的:探讨M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)对胃癌细胞高迁移率族蛋白B-1(high mobility group box 1,HMGB1)释放的作用。方法:通过siRNA干扰抑制人胃癌BGC823细胞PKM2的表达,Western blot检测各组细胞PKM2蛋白的表达,以评价PKM2 siRNA的转染效率;CCK-8法检测各组细胞活力,分析干扰PKM2的表达对胃癌BGC823细胞增殖的影响;Western blot检测各组细胞HMGB1的表达以及ELISA检测各组细胞培养液HMGB1的水平,分析PKM2对胃癌BGC823细胞HMGB1的作用。结果:与空载体pU6组相比,PKM2 siRNA 组PKM2的表达显著降低(P＜0.01),表明siRNA有效地抑制胃癌BGC823细胞PKM2的表达;CCK-8结果显示,PKM2 siRNA 组细胞活力明显低于空载体pU6组(P＜0.001),表明干扰PKM2抑制胃癌BGC823细胞增殖;此外,PKM2 siRNA 组HMGB1的表达以及细胞外HMGB1的水平显著降低(P＜0.01),表明干扰PKM2抑制人胃癌BGC823细胞HMGB1的释放。结论:PKM2促进人胃癌BGC823细胞HMGB1的释放。     

菝葜皂苷元对胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡影响的实验研究

目的：观察不同浓度菝葜皂苷元对体外培养胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡的影响.方法：BGC-823细胞经不同浓度菝葜皂苷元处理后,采用MTT法检测细胞的生长活性,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果：随菝葜皂苷元浓度的增加,胃癌BGC-823细胞增殖抑制率、凋亡率亦升高.结论：菝葜皂苷元对胃癌BGC-823细胞的增殖有抑制作用,并可诱导细胞凋亡.     

Prohibitin Induces Apoptosis in BGC823 Gastric Cancer Cells Through the Mitochondrial Pathway

Prohibitin (PHB), an evolutionarily-conserved protein, has been found to be over-expressed in gastriccancer and be closely related with tumor malignancy. In this study, to investigate the relationship between PHBexpression and cell apoptosis in the BGC823 gastric cancer cell line, low and high expression PHB in BGC823cells was accomplished using RNA interference technology and gene transfer techniques. Cell proliferation, cellcycling, apoptosis, Bax, Bcl-2 and Cyt.c protein expression and the activation of Caspase-3,9 were assessed after48h. Over-expression of PHB gene in BGC823 cells resulted in slow cell growth, cell arrest in G2 phase, and anincreased apoptosis ratio while the opposite was found for PHB under-expressing cells. In PHB over-expressingcells, the expression of Bax gene was increased, the expression of Bcl-2 was decreased, the activation level ofCaspase-3, 9 was increased, but the activation level of Caspase-8 demonstrated no change. These results indicatethat PHB induced apoptosis through the mitochondrial pathway.