内皮细胞对小鼠粒系、红系和巨核系造血的调控作用

目的 了解内皮细胞对小鼠粒系、红系和巨核和造血功能的影响。为进一步研究血发生及其调控提供理论依据。方法 取剖腹产术后12小时以内的人脐静脉内皮细胞,按Jaffe法进行培养,建立内皮细胞体外细胞体外培养模型。而后收集原代培养的内皮细胞上清液,应用造血祖细胞体外培养方法进行体外粒-单系祖细胞克隆形成胞克隆形成单位（CFU-MK）单固体培养。结果 在有内皮细胞上清液存在的各培养体系中,集落形成良好,而在同样培养条件下,在无内皮细胞上清液存在的体系中,需加入外源性的GM-CSF、EPO和IL-3才能表现出对粒系、红系和巨核系造血的刺激作用。结论 （1）内皮细胞能够通过分泌造血生长因子,支持各系祖细胞的增殖与分化;（2）内皮细胞上清液可作为标准的生长因子来源,用于体外干细胞的扩增和某些血液病的治疗;（3）内皮细胞和造血干细胞/祖细胞的相互作用在体内的造血调控中也可能起了重要作用;（4）在内皮细胞上清液中可能含有尚未能证明的其他造血生长因子,这些因子单独或协同地发挥作用。支持了各系祖细胞的增殖。     

内皮细胞对小鼠粒系、红系和巨核系造血的调控作用

目的　了解内皮细胞对小鼠粒系、红系和巨核系造血功能的影响 ,为进一步研究血发生及其调控提供理论依据。方法　取剖腹产术后 12小时以内的人脐静脉内皮细胞 ,按 Jaffe法进行培养 ,建立内皮细胞体外培养模型。而后收集原代培养的内皮细胞上清液 ,应用造血祖细胞体外培养方法进行体外粒 -单系祖细胞克隆形成单位 ( CFU - GM)、早期红系祖细胞克隆形成单位 ( BFU - E)、晚期红系祖细胞克隆形成单位 ( CFU - E)和巨核系祖细胞克隆形成单位 ( CFU - MK)半固体培养。结果　在有内皮细胞上清液存在的各培养体系中 ,集落形成良好。而在同样培养条件下 ,在无内皮细胞上清液存在的体系中 ,需加入外源性的 GM- CSF、EPO和 IL - 3才能表现出对粒系、红系和巨核系造血的刺激作用。结论　 1内皮细胞能够通过分泌造血生长因子 ,支持各系祖细胞的增殖与分化 ;2内皮细胞上清液可作为标准的生长因子来源 ,用于体外干细胞的扩增和某些血液病的治疗 ;3内皮细胞和造血干细胞 /祖细胞的相互作用在体内的造血调控中也可能起了重要作用 ;4在内皮细胞上清液中可能含有尚未能证明的其他造血生长因子。这些因子单独或协同地发挥作用 ,支持了各系祖细胞的增殖     

体外半固体琼脂前红系祖细胞微量培养实验观察

采用半固体琼脂微量培养方法培养人骨髓红系造血祖细胞集落获得成功。培养体系中不需条件培养基和细胞生长刺激剂。显微镜下红、粒系集落区别明显,细胞形态清晰,方法简易,减少了所需细胞数量和节省了试剂,特别可节省促红细胞生成素。     

人骨髓红系、混合系造血祖细胞无EPO试剂体外培养

红系造血祖细胞(CFU-E、BFU-E)及混合造血祖细胞(CFU-Mix)培养技术对于某些血液病的发病机理的研究、造血细胞分化、增殖及调控方面的研究均有理论上和实践上的意义。红系及混合系祖细胞体外培养的集落形成依赖于红细胞生成素(EPO)的存在,在我     

不同部位的巨噬细胞培养上清液对小鼠红系血细胞发生的影响

目的:探讨腹腔、肺泡和肝脏的巨噬细胞培养上清液对小鼠早期红系造血祖细胞[用红系爆式集落形成单位(BFU-E)表示]和晚期红系造血祖细胞[用晚期红系集落形成单位(CFU-E)表示]发生的影响.方法:采用造血祖细胞体外培养技术观察3种不同部位的巨噬细胞培养上清液对BFU-E和CFU-E集落数的影响.结果与结论:3种培养上清液均能促进BFU-E和CFU-E的分化与增殖,而肺泡巨噬细胞培养上清液的上述作用更明显.     

脐血造血干细胞体外培养及其特性研究

应用造血祖细胞体外培养和流式细胞术(FCM),观察了脐血中粒-单系祖细胞(CFU-GM)和红系祖细胞(BFU-E)的数量和特性,并对其细胞增殖周期和骨髓及成人外周血做了比较.结果表明,脐血中含丰富的CFU-GM和BFU-E,其数量低于成人骨髓而大大超过外周血水平;脐血红系祖细胞对促红细胞生成素(EPO)和爆式促进活性(BPA)表现出更高的敏感性,而粒系祖细胞对集落刺激因子(CSF)的敏感性和骨髓比较似无明显差别;脐血S期、G_2+M期及S+G_2M期细胞数均明显低于骨髓,虽略高于外周血各期细胞数,但差别无显著性意义.提示脐血造血干细胞体外培养可以得活性较高的祖细胞.     

脐血浆对正常骨髓造血刺激活性的研究

为探讨脐血浆中造血活性物质的作用,用半固体培养法对混合脐血浆、重组人造血生长因子及正常成人混合血清在体外对正常骨髓造血祖细胞集落形成的情况进行了比较.结果显示,成人混合血清对粒单祖细胞及红系祖细胞的集落形成无明显的刺激活性,而混合脐血浆对粒单祖细胞及红系祖细胞的集落形成具有较高水平的刺激活性,其作用与小牛血清加人重组GM-CSF相当(P>005,差异无显著性).以上结果提示脐血浆中含有较高水平的造血活性物质     

正常人骨髓基质祖细胞体外传代培养的实验研究

研究正常人骨髓基质祖细胞在体外传代培养过程中的功能变化,方法：采用体外液体单层和半固体培养法。结果：Ｆ１传代细胞对骨髓红系祖细胞集落形成单位和粒系祖细胞集落形成单位支持能力最显著,Ｆ２代对有核细胞粘附能力最显著。     

红系祖细胞体外培养获得成功

红系祖细胞(BFU-E、CFU-E)体外培养过去在国内尚未开展。1983年11月在泰安召开的全国造血、止血、血栓学术会上,成立了全国造血细胞培养技术协作组,哈医大是核心成员之一。为了填补国内此项空白,会议决定委托哈医大负责建立红系祖细胞体外培养技术,约定1984年再次开会进行交流推广。经过努力,红系祖细胞BFU-E 及CFU-E体外培养获得成功,细胞集落生长良好,提前完成了任务,并应用于临床测定正常人13例、白血病及其他血液病患者45例,操作过程由哈医大电教室编制了录像片。1984年10月在南昌召开了全国造血细胞培     

IL—1影响L—细胞造血调节作用的实验研究

目的：研究白细胞介素－１与Ｌ－细胞在造血调控中的可能关系,丰富造血调控理论。方法：在体外祖细胞培养中以不同浓度的ＩＬ－１诱导和未经诱导的Ｌ－细胞条件培养液替代造血生长因子,观察集落产率的变化,并与ＩＬ－１和ＬｃＣＭ共同作用后的集落产率作比较。结果：ＩＬ－１在１２．５￣１００ｕ／ｍｌ浓度范围内,ＬｃＣＭＩＬ－１作者后的粒－单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）,早期红系祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ）,晚期红系祖细胞（ＣＦ     

人多能造血祖细胞与前红系祖细胞体外培养的研究

本文以Messner培养体系为基础,并加以改良,在一个培养体系内培养出了人多能造血祖细胞(CFU-Mix)和前红系祖细胞(BFU-E),集落产率高于文献报道。同时,我们改进了细胞离心方法,使单个细胞集落形态完整,记数准确,为研究造血干细胞的分化提供了条件。     

维生素A缺乏对红系早期祖细胞增殖影响的研究

采用造血祖细胞体外培养。造血生长因子生物活性检测等实验血液学技术，研究维生素Ａ缺乏（ＶＡＤ）对大鼠红系早期祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ）增殖调控的影响。结果发现，与对照组比较，ＶＡＤ使ＢＦＵ－Ｅ集落增殖明显减少；用ＶＡＤ的脾及骨髓基质细胞培养上清液明显抑制ＢＦＵ－Ｅ集落增殖。结果提示，ＶＡＤ可能通过抑制造血生长因子白细胞介素３（ＩＬ－３）和粒单系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）等表达而影响红系造血。     

昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响

目的 研究昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响.方法 制备并体外培养大鼠骨髓造血干/祖细胞、巨噬细胞;制备昆布多糖作用后的骨髓巨噬细胞条件培养液,测定培养液中造血生长因子促红细胞生成素(EPO)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)表达及活性;测定昆布多糖条件培养液作用后造血祖细胞的集落产率.结果 经昆布多糖诱导的骨髓巨噬细胞培养上清液可显著提高骨髓造血祖细胞的集落产率;经昆布多糖诱导后,骨髓巨噬细胞的EPO、GM-CSF和IL-3的表达增高.结论 昆布多糖可刺激骨髓巨噬细胞造血因子表达增高,从而促进髓系多向性造血祖细胞(CFU-Mix)、红系祖细胞(CFU-E)、粒一单系造血祖细胞(CFU-GM)的增殖分化.     

急性非淋巴细胞性白血病病程中骨髓正常和异常细胞克隆的变化

体外半固体造血祖细胞培养技术用于急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)的研究已有10多年的历史,但同时将白血病集落形成单位(L-CFU)、红系集落形成单位(CFU-E)及粒单系集落形成单位(CFU-GM)作为在祖细胞水平反     

小鼠颌下腺组织培养上清液影响红系造血的实验研究

为了研究颌下腺是否合成造血因子以及合成的造血因子的可能种类 ,进一步研究颌下腺对血发生的调控 ,采用造血祖细胞体外培养和流式细胞术检测细胞表面标记物。结果显示 ,小鼠颌下腺组织培养上清液(SGCM)在体外培养中 ,对早期和晚期红系造血祖细胞有促进增殖和分化的作用 ,实验组集落数远远高于阴性对照组 (P<0 .0 5 ) ;晚期红系祖细胞 (CFU- E)培养体系雄性小鼠颌下腺组织培养上清液组集落数明显高于雌性组 (P<0 .0 5 ) ,早期红系祖细胞 (BFU- E)培养体系没有明显差异 (P>0 .0 5 ) ,贫血模型小鼠颌下腺促进 BFU- E和 CFU- E增殖和分化的活性高于正常小鼠 (P<0 .0 5 ) ,IL- 3与 SGCM有协同刺激作用 ,说明小鼠颌下腺确能合成和分泌促进红系造血的细胞因子 ,雄性小鼠颌下腺促进 CFU- E增殖和分化细胞因子的活性高于雌性小鼠。本实验为进一步研究小鼠颌下腺合成造血因子和其与造血调控的关系提供了实验依据。     

肿瘤坏死因子α对红系造血的抑制作用

目的：探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）在红系祖细胞造血过程中的作用。方法：利用免疫磁珠法分离并纯化人类外周血CD34^ 细胞，在体外与TNF-α一起培养，测定红系、非红系细胞扩增倍数及集落形成能力；用流式细胞仪检测细胞表面标记。结果：TNF-α抑制暴式红系集落形成单位（BFU-E）的形成及血型糖蛋白A(GpA)的表达，增加红系集落形成单位（CFU-E）和非红系集落的数量；GpA^ 细胞缺乏TNFR Ⅰ表达，TNFα增加GpA^-细胞表达TNFRⅡ；这些TNFRⅡ^ 的GpA^-细胞具有树突状细胞（DC）相关的表达标记。结论：TNF-α抑制红系祖细胞的生长，选择性地发生在分化的早期阶段，与TNF-α诱导增加的DC有关。     

当归多糖对人红系造血祖细胞增殖的影响及其机理研究

采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物活性检测等实验血液学技术，研究当归多糖（AP）对人红系造血祖细胞（BFU-E，CFU-E）增殖调控的影响及其机理，结果表明，AP能显著促进BFU-E，CFU-E的集落形成/经AP诱导制备的脾细胞，胸腺细胞和骨髓基质细胞培养上清液能提高BFU-E的集落产率；AP能协同IL-3和红细胞生长素（Epo)促进BFU-E生长，研究提示，AP有可能直接刺激BFU-E，CFU-ZE增殖。亦可能通过促进机体产生红系造敌国生长因子和/或协同这些因子的作用等途径。进而促进机体的红系血发生。     

小鼠颌下腺组织培养上清液影响红系造血的实验研究

为了研究颌下腺是否合成造血因子以及合成的造血因子的可能种类,进一步研究颌下腺对血发生的调控,采用造血祖细胞体外培养和流式细胞术检测细胞表面标记物。结果显示,小鼠颌下腺组织培养上清液（ＳＧＣＭ）在体外培养中,对早期和晚期红系造血祖细胞有促进增殖和分化的作用,实验组集落数远远高于阴性对照组（Ｐ〈０．０５）;晚期红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ）培养体系雄性小鼠颌下腺组织培养上清液组集落数明显高于雄性组（Ｐ〈０．０５）,早期红系祖 细胞（ＢＦＵ－Ｅ）培养体系没有明显差异（Ｐ〉０．０５）,贫血模型小鼠颌下腺促进ＢＦＵ－Ｅ和ＣＰＵ－Ｅ增殖和分化的活性高于正常小鼠（Ｐ〈０．０５）,ＩＬ－３与ＳＧＣＭ有协同刺激作用,说明小鼠颌下腺确能合成和分泌促进红系造血的细胞因子,雄性小鼠颌下腺促进ＣＦＵ－Ｅ增殖和分化细胞因子的活性高于雌性小鼠。本     

白血病患者多向造血祖细胞培养后的透射电镜观察

本文运用透射电镜证明,所运用的极限稀释多向造血祖细胞(CFu—Mix)微量培养体系是体外研究造血细胞分化的重要方法。在加入一系列生长因子后,正常人骨髓细胞可向红、粒、巨核细胞系方向分化,而白血病细胞却不能,其集落细胞仍带有明显的白血病性质,提示白血病可能为多向造血祖细胞阶段的恶性变。     

人脐血造血祖细胞与脐血浆依赖性的研究

人脐带血与骨髓、外周血干祖细胞生物学特性虽基本相同,但同时也存在一些不同的特性。通过造血祖细胞体外半固体培养发现3种不同来源的粒系祖细胞(CFU—GM)体外生长所需条件不同。骨髓和外周血CFU—GM培养需要外源细胞生长因子GM—CSF存在。脐血CFU—GM培养仅需要脐血浆单独存在即可获得较高的集落产率。揭示了脐血浆中存在一种脐血祖细胞依赖的成分。它不同于GM—CSF,也可能不是GM—CSF协同因子,尚待进一步探讨。此外,提出了一个脐血粒系祖细胞体外培养简便易行的培养体系。