老年肥胖和骨质疏松

<正>传统观念认为,超重和肥胖对骨具有保护作用,有利于抗骨质疏松,而低体质量则是骨量减少的危险因素[1]。肥胖者骨密度(BMD)比较高的原因包括:骨骼承受的机械负荷一方面通过Wnt/β-catenin信号通路,促进成骨细胞增殖分化,从而刺激成骨[2];另一方面通过调节核因子-κB(NF-κB)受体激活物配基(RANKL)/护骨素(OPG)系统,抑制     

Toll样受体4与代谢综合征

Toll样受体(TLR)4属于模式识别受体,是联系天然免疫和获得性免疫的桥梁.代谢综合征患者体内存在多种代谢紊乱.游离脂肪酸(FFA)、高血糖等可激活人体内的TLR4信号通路,使炎性细胞因子分泌增多,诱发胰岛素抵抗和胰岛β细胞凋亡、血管腔狭窄、血管功能紊乱,促进2型糖尿病、高血压和动脉粥样硬化等代谢综合征相关疾病的发生、发展.对TLR4信号通路进行调控有可能起到防治代谢综合征及其相关疾病的作用.     

基于Wnt/β-catenin信号通路的中医药调控骨代谢研究进展

骨组织生命活动周期包括骨吸收和骨形成,这一过程被称为骨重塑,其中间充质干细胞(MSCs)分化为成骨细胞起主导作用〔1,2〕,对维持人体骨量和体液中钙离子浓度十分重要。在骨重塑中,骨吸收与骨形成的协调失衡会导致骨质减少甚至骨质疏松,许多与骨代谢异常相关的疾病如骨质疏松、类风湿关节炎等的发生与骨质流失密切相关。Wnt/β-catenin通路是骨骼发育和骨骼内稳态的重要调节通路〔3~6〕,能调节Wnt途径相关因子的表达,激活细胞向成骨细胞分化或使正常骨细胞代谢受抑制。其调控骨细胞生命过程具有双面性,例如Wnt联合受体低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)5功能缺失使骨量下降,其激活突变则引起高骨量的发生;细胞厚体(DKK)1的高表达抑制骨形成,使用DKK1拮抗剂后可促进成骨分化。研究中医药调控Wnt/β-catenin信号通路与骨代谢相关机制已逐渐成为热点,已有较多学者取得了一定成果,这对于发挥中医药潜在治疗优势具有重要意义〔7~10〕。     

骨硬化蛋白:一个治疗骨质疏松的新靶点

高骨量疾病骨硬化症(sclerosteosis)和Van Buchem病由SOST基因表达缺失导致.由于SOST基因突变导致骨硬化蛋白不能表达或功能缺陷,可造成该病患者的过度骨形成,其作用机制与抑制Wnt信号转导通路相关.骨硬化蛋白通过与该通路共受体LRP5/6结合来阻断Wnt通路,进而对成骨细胞分化及矿化起抑制作用.由于骨硬化蛋白在抑制骨形成起关键作用且仅在骨组织表达,其单克隆抗体可用于治疗低骨量疾病如骨质疏松.     

TLR2/TLR4-NF-κB信号通路在痛风中的研究进展

［摘要］　痛风是由于血尿酸浓度升高，尿酸钠晶体在关节、肌腱和周围组织中沉积，从而导致炎症性关节炎间歇性发作。Toll样受体是先天免疫系统中模式识别受体的一种。痛风性关节炎是由于过饱和的尿酸钠晶体在血液中析出，并与巨噬细胞产生作用，导致中性粒细胞的趋化、聚集，从而激活TLR2/TLR4-NF-κB信号通路，释放IL-1β、IL-6、TNF-α等炎性因子和蛋白酶，导致痛风性关节炎的发生、发展。该文以痛风及TLR2/TLR4-NF-κB信号通路为主线，综述了TLR2/TLR4-NF-κB信号通路与痛风的相关性以及以该信号通路为靶点的治疗方法。     

Toll样受体4激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞增殖

目的探讨Toll样受体(TLR)4激活后调控Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖及其相关机制。方法体外培养BMSCs,应用流式细胞术鉴定BMSCs,用脂多糖(LPS)剌激BMSCs,应用CCK-8法检测BMSCs的增殖能力;采用Western印迹检测大鼠BMSCs中TLR4蛋白表达;实验分为对照组、LPS组、TLR4阻断剂+LPS组、Wnt通路经典抑制剂(DKK-1)+LPS组。应用实时荧光定量PCR法检测BMSCs中β-catenin、c-myc及细胞周期蛋白(cyclin)D1 mRNA表达,应用Western印迹检测蛋白表达。结果与对照组相比,LPS组BMSCs的细胞增殖能力明显增强,TLR4呈高表达(均P<0.01);LPS组β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著增加(P<0.01)。与LPS组相比,加入TLR4阻断剂后,β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著下调(P<0.05,P<0.01),加入DDK-1后,β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著降低(均P<0.01)。结论 TLR4促进BMSCs的增殖,其机制可能与调节Wnt/β-catenin信号通路有关。     

银杏酮酯对心肌细胞Toll样受体4/核转录因子кB及血管紧张素原、血管紧张素Ⅱ1型受体的抑制作用

目的 观察银杏酮酯50(GBE50)对脂多糖激活的心肌细胞Toll样受体4(TLR4)/核转录因子кB(NF-кB)信号及血管紧张素原(ATG)、血管紧张素Ⅱ 1型受体(AT1R)表达的影响,探讨GBE50防治左室重构的作用机制.方法 体外培养新生大鼠心肌细胞(NRVM),分4组:1)对照组:DMEM培养基中不加任何干预因素;2)脂多糖组:DMEM培养基中加入脂多糖1 mg/L;3)脂多糖 GBE50组:预先加入GBE50 80 mg/L,1 h后加入脂多糖1 mg/L;4)脂多糖 咖啡酸苯乙酯组:预先加入咖啡酸苯乙酯20 mg/L 30 min后加入脂多糖1 mg/L.干预24 h后免疫细胞化学方法 观察NF-кB p65核易位情况;RT-PCR检测TLR4、ATG及AT1R、心肌肌球蛋白重链β-MHC mRNA的表达情况,考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量.结果 LPS刺激下NRVM TLR4 mRNA明显升高(P<0.01),NF-кB p65核易位增多(P<0.01),ATG和AT1R、心肌肌球蛋白重链β-MHC mRNA表达以及细胞蛋白含量明显增高(P<0.01).GBE50与咖啡酸苯乙酯能明显抑制NF-кB p65核易位,同时抑制LPS诱导的TLR4、ATG和AT1Rβ-MHCmRNA表达上调以及细胞蛋白含量的增加(P<0.05).结论 GBE50可能通过抑制NF-кB活化,进而减弱TLR4/NF-KB信号从而抑制心肌RAS的激活,干预TLR4/NF-кB信号通路可能是银杏叶提取物防治心肌肥大的机制之一.     

Toll样受体4与2型糖尿病及其并发症

介导先天免疫和炎性反应的Toll样受体(TLR)4参与了炎性反应性疾病的发病.炎性反应在2型糖尿病(T2DM)及其并发症的发生、发展中具有重要作用.TLR4信号通路的激活与胰岛素抵抗(IR)有关,而IR是T2DM及其大血管病变的重要病理生理基础,TLR4信号通路激活后炎性反应因子释放增加,与糖尿病微血管病变及神经病变密切相关.抑制TLR4信号通路的激活可能会防治T2DM及其并发症的发生、发展.     

硫化氢通过抑制ROS-TLR4通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应

目的探讨外源性硫化氢(H2S)能否通过抑制活性氧(ROS)-Toll样受体4(TLR4)通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应。方法应用细胞计数盒(CCK-8)检测细胞存活率,用试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,ELISA检测细胞培养液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法测定凋亡细胞数量,Western blot测定TLR4和Cleaved Caspase 3蛋白的表达水平,双氯荧光素染色荧光显微镜照相法测定细胞内ROS水平,罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位(MMP)。结果应用35 mmol/L葡萄糖(高糖)作用H9c2心肌细胞24 h能上调TLR4的表达水平。在高糖作用前,应用1000μmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理60 min或400μmol/L硫氢化钠(Na HS)预处理30 min能明显减轻高糖对TLR4蛋白表达的上调作用。高糖作用心肌细胞24 h可引起心肌细胞损伤和炎症反应,使细胞存活率降低,LDH活性、凋亡细胞数量、Cleaved Caspase 3蛋白的表达、ROS生成、MMP丢失及IL-1β和TNF-α的分泌增加;400μmol/L Na HS预处理心肌细胞30 min后再予高糖作用24 h或30μmol/L TAK-242(TLR4抑制剂)和高糖共处理心肌细胞24 h能显著拮抗高糖引起的上述损伤和炎症反应。结论外源性H2S可通过抑制ROS-TLR4通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应。     

肠源性血清素对骨代谢的影响

血清素5羟色胺(5-HT)是一种古老的神经递质,表达于全身各组织,具有广泛而复杂的生理功能。近年研究发现,外周血清素可以介导低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5),参与动物骨量和骨形成调节。LRP5通过特异性抑制十二指肠嗜铬细胞合成血清素,降低血液血清素水平。血液中血清素可以通过成骨细胞上的5-HT1B型受体,经蛋白激酶A-环磷酸腺苷(PKA-cAMP)途径影响转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的磷酸化,抑制成骨细胞周期蛋白Cyclin D1、D2和E1的表达而抑制其增殖作用,进而抑制骨形成。以此通路的特异性分子为靶点的药物(如抑制血清素合成的药物)可以对骨形成进行调节,为骨质疏松等骨代谢性疾病的治疗提供新的研究方向。