^99Tc-Sandostatin诊断高表达生长抑素受体的胰腺癌的实验研究

胰腺癌发病率在全身各恶性肿瘤中仅次于肺癌、肠癌和乳腺癌,占第4位.胰腺癌早期诊断困难,常用的影像学检查改变不明显.本研究自制99mTc-Sandostatin对荷胰腺癌裸鼠模型行SSR显像,探讨99mTc-Sandostatin显像诊断胰腺癌的可能性及与肿瘤组织SSR表达水平的关系.     

99mTc-Sandostatin诊断高表达生长抑素受体的胰腺癌的实验研究

胰腺癌发病率在全身各恶性肿瘤中仅次于肺癌、肠癌和乳腺癌,占第4位.胰腺癌早期诊断困难,常用的影像学检查改变不明显.本研究自制99mTc-Sandostatin对荷胰腺癌裸鼠模型行SSR显像,探讨99mTc-Sandostatin显像诊断胰腺癌的可能性及与肿瘤组织SSR表达水平的关系.     

生长抑素类似物介导靶向显像及治疗的研究现状和进展

放射性核素标记生长抑素类似物对神经内分泌肿瘤进行靶向诊断和靶向治疗已得到临床广泛认可.大多数生长抑素类似物仅对生长抑素受体2具有较高的亲和力,限制了其在临床中的应用.新一代生长抑素类似物如:1,4,7,10-四氮杂环十二烷-N,N',N",N'"-四乙酸-1-萘丙氨酸-奥曲肽(DOTA-NOC)等,可与更多亚型的生长抑素受体结合且具有更高的亲和力,可由发射不同射线的多种核素标记,已引起广泛重视.该文在介绍常规生长抑素类似物的基础上,着重讨论新的生长抑素类似物、新的螯合剂、新的标记核素及其新的组合,展望生长抑素受体介导肿瘤显像及治疗的前景.     

含末端半胱氨酸人表皮生长因子受体2亲和体的68Ga标记和显像

目的 在含末端半胱氨酸的人表皮生长因子受体2(HER2)亲和体的羧基末端甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-半胱氨酸(GGGC)的半胱氨酸残基标记68Ga,探讨该标记物用于乳腺癌模型小鼠的HER2显像.方法 通过基因工程制备含末端半胱氨酸的HER2亲和体,应用1,4,7,10-四氮环十二烷-1,4,7-三乙酸-10-马来酰亚胺乙基乙酰胺(MMA-DOTA)在半胱氨酸巯基上耦联DOTA.新洗脱的68Ga液和DOTA-HER2亲和体在90℃下反应,完成标记.标记产物经过C18柱纯化、乙醇洗脱后用于细胞结合分析和microPET显像.细胞结合分析采用表达HER2的乳腺癌细胞MBA-MD-361,动物模型采用该乳腺癌细胞接种的BALB/c裸鼠模型.于4只荷乳腺癌小鼠尾静脉注射3.7 MBq68Ga标记亲和体,分别于注射后20、60 min进行micmPET显像,随即将动物处死,取出心脏、肿瘤、肌肉、骨骼测质量,并用γ计数仪测量放射性,计算肿瘤与肝脏、肌肉、骨骼、心脏的放射性比值.结果 HER2亲和体纯度在95％以上,68Ga标记亲和体的放化纯为97％.应用HER2阳性细胞测出亲和体的亲和力KD值为1.5 nmoL/L.MicroPET显像示,68Ga标记亲和体进入荷瘤鼠血液循环系统后,很快结合于HER2阳性肿瘤,主要从泌尿系统清除.注射68Ga标记亲和体后,肿瘤与肝脏、肌肉、骨骼、心脏的放射性比值分别为17.4±1.0、35.1±10.9、20.7±6.2和20.9±4.0.结论 68Ga亲和体标记成功,适用于HER2阳性肿瘤的PET显像.     

生长抑素受体肿瘤显像的临床应用及研究进展

神经内分泌肿瘤及一些非神经内分泌肿瘤细胞表面均有生长抑素受体高表达。生长抑素类似物如奥曲肽等对生长抑素受体具有亲和力高、作用时间长等特点,并可被放射性核素标记进行肿瘤阳性显像,这对生长抑素受体阳性肿瘤的诊断、分期及预后评价具有较为重要的临床价值,也可作为常规影像学检查的一种有力补充。     

99Tcm-AE105的制备及荷胰腺癌裸鼠显像研究

目的 以99Tcm标记尿激酶型纤维蛋白酶原激活剂受体(uPAR)靶向多肽分子D-Cha-F-s-r-Y-L-W-S (AE105),探讨标记产物作为显像剂无创性评价肿瘤组织内uPAR表达的可行性.方法 采用三(羟甲基)甲基甘氨酸(Tricine)作为协同配体,SnCl2为还原剂,应用99Tcm标记AE105及阴性对照多肽D-Cha-F-s-r-Y-L-E-S(AE105mut).采用完全随机法将荷胰腺癌(bxpc-3细胞株)裸鼠模型分为2组,每组30只,分别注射18.5 MBq (0.2 ml)99Tcm-AE105与99Tcm-AE105mt,比较两者体内分布及γ显像结果.采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织内uPAR表达,并探讨其与标记物摄取的相关性.数据分析采用两样本t检验和Pearson直线相关分析.结果 99Tcm-AE105标记率达(94.64±0.72)％,放化纯达(97.72±1.73)％,且体外稳定性良好.注射99Tcm-AE105后2h,荷瘤鼠肿瘤显影,4、6h显影清晰;注射99Tcm-AE105mut组始终未见清晰显影.肿瘤组织中99Tcm-AE105的分布均明显高于99Tcm-AE105mut,注射后4h放射性摄取分别为(3.12±0.27) ％ID/g和(1.65±0.53) ％ID/g(t=4.496,P＜0.01);注射后6h放射性摄取分别为(2.98±0.15) ％ID/g和(1.41±0.38)％ID/g(t=6.787,P＜0.01).4～6h肿瘤组织内uPAR表达与99Tcm-AE105摄取呈正相关(r=0.791,P＜0.01),而99Tcm-AE105mut组两者之间无相关性(r=-0.415,P＞0.05).结论 99Tcm-AE105的标记过程简单易行,标记率高,稳定性好,具有良好的uPAR靶向性与特异性,有望应用于临床.     

靶向表皮生长因子受体单克隆抗体预定位免疫PET显像的实验研究

目的:采用预定位技术在表皮生长因子受体(EGFR)阳性/阴性荷瘤鼠中探索西妥昔单克隆抗体(简称单抗;Cetuximab)靶向EGFR免疫PET显像的可行性。方法:以反式环辛烯(TCO)- N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)修饰Cetuximab获得Cetuximab-TCO。以2,2′-((6-氨基-1-(4,7...     

^68Ga—DOTA—cNGR的制备及对荷肺腺癌裸鼠的显像研究

目的制备^68Ga-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸-环状NGR（DOTA-cNGR）,并评价其在正常小鼠体内的生物分布及对荷肺腺癌裸鼠的靶向显像能力。方法以羟乙基哌嗪乙硫磺酸（HEPES）为缓冲体系（pH值5．0）,水浴合成^68Ga—DOTA—cNGR,HPLC测定标记率及放化纯,观察其在人血清中的稳定性。进行^68Ga—DOTA—cNGR的正常小鼠体内生物分布和荷肺腺癌裸鼠活体microPET显像,对荷肺腺癌裸鼠的瘤组织进行病理及氨肽酶N（APN）的免疫组织化学分析。采用两样本t检验分析数据。结果^68Ga—DOTA—cNGR标记率为（99．8±0．1）％,性状稳定,在人血清中37℃保温2h后放化纯仍〉95％。正常小鼠体内生物分布结果表明,^68Ga—DOTA-cNGR主要经肾排泄,血液清除迅速,肝、胃肠道摄取较少;1h肾、血液、肝、胃、肠的放射性摄取分别为（1．61±0．22）、（0．19±0．07）、（0．25±0．24）、（0．16±0．04）、（0．12±0．05）％ID／g。荷肺腺癌裸鼠microPET显像可见肿瘤部位有放射性浓聚影,1h肿瘤与对侧正常肌肉T／NT高达7．61±0．47,经DOTA—cNGR特异性阻断后降至1．83±0．25,阻断前后差异有统计学意义（t=18．80,P〈0．05）。免疫组织化学检查证实APN特异性聚集于肿瘤新生血管表面。结论^68Ga-DOTA—cNGR易于制备,标记率和放化纯高,在人血清中的稳定性好,具有良好的代谢及肺腺瘤靶向特性,有望用于肺癌显像。     

生长抑素类似物介导靶向显像及治疗的研究现状和进展

放射性核素标记生长抑素类似物对神经内分泌肿瘤进行靶向诊断和靶向治疗已得到临床广泛认可。大多数生长抑素类似物仅对生长抑素受体2具有较高的亲和力,限制了其在临床中的应用。新一代生长抑素类似物如:1,4,7,10-四氮杂环十二烷-N,N',N,N'-四乙酸-1-萘丙氨酸-奥曲肽(DOTA-NOC)等,可与更多亚型的生长抑素受体结合且具有更高的亲和力,可由发射不同射线的多种核素标记,已引起广泛重视。该文在介绍常规生长抑素类似物的基础上,着重讨论新的生长抑素类似物、新的螯合剂、新的标记核素及其新的组合,展望生长抑素受体介导肿瘤显像及治疗的前景。     

99mTc-depreotide生长抑素受体显像的临床应用研究

生长抑素受体显像近年来研究较多，depreotide已成为其研究热点之一。Depreotide在诊断与鉴别诊断临床常见的孤立性肺结节方面有其独特优势；此外，^99mTc—depreotide生长抑素受体显像在乳腺癌、甲状腺癌、淋巴瘤等肿瘤及甲状腺相关性眼病等非肿瘤性疾病也有一定应用前景。     

99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（tricine）的制备及对胰腺癌荷瘤鼠显像研究

目的制备99Tcm-（联肼尼克酰胺-蛙皮素类似肽）（N-三羟甲基甘氨酸）（三苯基膦三间磺酸钠盐）[（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）]三重配位化合物,评价其在正常小鼠及胰腺癌荷瘤裸小鼠的生物分布。方法双功能螯合剂HYNIC与[Lys3]-BBS偶联（pH值9．0）,以SnCl2为还原剂,tricine和TPPTS为协同配体,进行99Tcm-标记,合成三重配位化合物99Tcm-（HYNIC-[Lys。]-BBS）（tricine）（TPPTS）。用Sep-PakC18cartridge和HPLC对其纯化和分析,测定其标记率和放化纯,研究其在人血清中的稳定性,并进行正常小鼠体内的生物分布研究以及胰腺癌荷瘤裸小鼠活体显像。结果99Tcm-（HYNIC_[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）标记率为（90±2）％,放化纯〉95％,在人血清中放置4h其放化纯仍大于85％。正常小鼠体内分布结果表明,99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）血液清除迅速,2h血液中放射性为（0．07±0．01）％ID／g,主要经。肾排泄,肝、胃肠道摄取较少,2h时肝放射性为（0．27±0．03）％ID／g,胃为（0．06±0．03）％ID／g,肠为（0．04±0．00）％ID／g。胰腺癌荷瘤裸小鼠吖显像可见肿瘤部位有放射性浓聚影,2h后肿瘤与对侧正常肌肉的T／NT比值最高达3．71±0．57。结论99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）三重配位化合物制备成功,所用标记方法可行,标记物稳定性较好,标记率和放化纯较高,生物分布特性良好,有望用于胰腺癌的显像研究。     

基于切伦科夫效应的裸鼠甲状腺131I多模态显像

目的 采用切伦科夫发光断层成像(CLT)和γ显像进行裸鼠甲状腺摄取131I的多模态成像,探索CLT与γ显像之间的相关性.方法 先对4只裸鼠[体质量(21±3)g]尾静脉注射1.67×107 Bq 131I,在注药后0.5、3、12及24h均分别行CLT和γ显像.采用基于漫射方程(DE)的切伦科夫光源重建方法重建裸鼠体内131I的生物分布及在不同采集时间点甲状腺摄取131I的切伦科夫光的功率.对采集的γ显像图像勾画ROI,获得γ计数的平均值,对CLT 1311的切伦科夫光的功率和γ显像获取的γ计数行直线相关分析.结果 甲状腺摄取131I的切伦科夫光的功率在0.5、3、12和24h分别为7.80×10-3、1.62×10-12、2.20×10 - 12和2.68×10-12 W.甲状腺摄取131I的切伦科夫光的功率随放射性药物注射时间的延长而逐渐增加.γ显像结果表明131I在裸鼠腹部的摄取逐渐降低,而在甲状腺的摄取越来越高,CLT与γ显像结果具有较好的相关性(r2 =0.7620,P＜O.05).结论 CLT具有临床甲状腺成像、甲状腺疾病诊断和疗效判断的潜力.     

67Ga-枸橼酸显像与CT(MRI)诊断口腔颌面部肿瘤的比较

目的 探讨^67Ga－枸橼酸（Cit）显像和CT（MRI）检查对口腔颌面部肿瘤的诊断价值。方法 71例口腔颌面部肿瘤患者，术前分别行^67Ga－Cit显像和CT（MRI）检查，术后与病理检查结果对照，并分别比较两组结果。结果 ^67Ga－Cit显像，36例良性肿瘤患者中28例阴性，占77．8％，假阳性8例，占22．2％；35例恶性肿瘤患者中33例阳性，占94．3％，假阴性2例，占5．7％。CT（MRI）诊断24例良性肿瘤患者4例符合，占16．7％，20例不符合，占83．3％；24例恶性肿瘤患者6例符合，占25．0％，18例不符合，占75．0％。诊断肿瘤良恶性的结果两者分别比较，差异均有极显著性（x^2＝21．60和19．91，P均＜0．01）。对判断不同大小的肿瘤，2种方法比较差异无显著性（x^2＝1．28、0．26和1．76，P均＞0．05）。结论 ^67Ga－Cit显像对诊断和鉴别诊断口腔颌面部良恶性肿瘤有较高的准确性，明显优于CT（MRI）检查。     

131I-NGR γ显像及切伦科夫光学显像用于肿瘤显像的实验研究

目的 比较肿瘤131 I-NGR γ显像及切伦科夫光学显像(CLI)的特征与差异,探讨肿瘤多模态显像的有效方法.方法 检测并比较小鼠腹腔注射不同活度(0、740 kBq及7.4 MBq)131I时,体表185 kBq及1.85 MBq131I的γ显像与CLI信号;γ显像及CLI检测不同活度(0、231、463、925和1850 kBq) 131I-NGR与CD13表达阳性的HT1080细胞及表达阴性的HP29细胞的结合情况;对荷瘤裸鼠在尾静脉注射18.5 MBq131I-NGR后2、4、8及12 h进行动态γ显像与CLI,12 h后切除体表肿瘤并移植至腹腔,再次进行γ显像与CLI.结果 γ显像及CLI均能清晰显示体表185 kBq及1.85 MBq的131I;但随腹腔注射131I的增加,γ显像显示的体表131I信号逐步减弱.当腹腔注射7.4 MBq埒131I时,体表185 kBq 131I难以显示,而体表1.85 MBq 131I则仍可显示,但信号明显减低;CLI对体表131I的检测则几乎不受腹腔131I的影响,腹腔注射7.4 MBq 131I仍可清晰显示体表131 I.γ显像及CLI均显示CD13受体表达阳性的HT10180细胞与131 I-NGR特异结合,而阴性表达的HP29细胞不与131I-NGR结合,且HT10180细胞与131I-NGR的结合随131I-NGR的增加而增加.荷瘤裸鼠注射18.5 MBq 131I-NGR后2h CLI可清晰显示肿瘤,12hγ显像显示肿瘤;12 h切除肿瘤移植至腹腔,γ显像清晰显示肿瘤,但CLI却无显示.结论 CLI与γ显像对肿瘤的显像存在差异.CLI对体表肿瘤的早期检测较好,而核素显像对深部肿瘤的检测较好,两者联合的多模态显像有助于提高对肿瘤的检测.     

^99Tc^m-精氨酸-谷氨酸-苏氨酸在荷人肺癌H1299裸鼠体内分布和显像

目的通过研究^99Tc^m-精氨酸-谷氨酸-苏氨酸（RET）在荷人肺癌H1299裸鼠体内的分布及显像,探讨其用于肺癌显像的可行性。方法采用^99Tc^m-直接法标记RET,再行^99Tc^m-RET与NSCLC细胞H1299的结合实验。荷人肺癌H1299裸鼠尾静脉注射^99Tc^m-RET后,行不同时间（15、30min,1、2．4、8、24、48h组各4只鼠）体内分布实验,分别测定组织放射性摄取（％ID／g）;另取荷瘤鼠3只,注射4．81MBq^99Tc^m-RET后于0．5、1、2、4．5、5、6h行γ显像。结果^99Tc^m-直接标记RET的标记率为（93．15±2．02）％,与H1299细胞的最高结合率为（3．56±0．37）％。荷瘤裸鼠尾静脉注射^99Tc^m-RET后4h肿瘤放射性摄取达（4．96±1．05）％ID／g,肝脏、脾脏有较多放射性摄取[（15．89±1．84）％ID／g和（10．83±1．66）％ID／g];而心脏和血液的放射性摄取较少,相应的T／NT分别为5．70±0．21和12．40±0．11。注射^99Tc^m-RET后4．5～6．0h肿瘤显影清晰。结论^99Tc^m-RET具有亲肺癌的特性,有可能成为一种亲肺癌显像剂。     

188Re—k—ras—AGPNA诱导胰腺癌细胞凋亡及在荷瘤裸鼠体内的生物分布

目的研究胰腺癌k-ras点突变基因的反基因肽核酸（AGPNA）生物活性和”。Re—k—ras—AGPNA诱导人胰腺癌细胞凋亡及在荷瘤裸鼠体内的生物分布。方法（1）用RT—PCR检测转染k—ras．AGPNA后胰腺癌细胞k-ras癌基因的mRNA表达水平。（2）用流式细胞仪检测转染后胰腺癌细胞的k-ras蛋白表达水平。（3）给予188Re-k-ras-AGPNA和188ReO4-3～5d后,用流式细胞仪检测胰腺癌细胞凋亡率。（4）58只荷人胰腺癌裸鼠分为188Re—k—ras—AGPNA和188ReO4-2组,采取瘤内注射给药方式,在不同时间点（2组分别为15min,1h,4h,1d,3d,5d,7d与15min,1h,2h,4h,24h）显像后处死裸鼠,计算各组织的％ID／g,并计算各组织的吸收剂量（mGy／MBq）。对数据行单因素方差分析。结果（1）转染1nmol／mlk-ras—AGPNA组细胞的k-ras突变基因mRNA的灰度比和k-ras蛋白表达率分别为1．00±0．39和（15．05±5．07）％,比未给药的肿瘤细胞对照组[分别为1．86±0．07和（24．38±5．40）％]低（F=2．545,5．329,P均〈0．05）。（2）给药后4,5d,188Re-k-ras-AGPNA组漂浮细胞的凋亡率分别为（26．30±7．45）％和（27．90±10．38）％,比188ReO4组[分别为（8．75±3．11）％和（16．87±5．85）％]高（F=9．376,P均〈0．05）。（3）瘤内注射188Re—k—ra8-AGPNA后1h和1,7d肿瘤内放射性摄取分别为（37．47＋21．31）、（35．96±7．80）和（15．46±4．93）％ID／g。肿瘤内吸收剂量为15569mGy／MBq。结论k-ras．AGPNA能抑制k-ras基因在mRNA和蛋白水平的表达。188Re—k—ra,s—AGPNA能诱导胰腺癌细胞凋亡且瘤内注射后肿瘤部位摄取高、滞留时间长。     

131I标记抗NRP-1单克隆抗体A6在荷瘤裸鼠体内分布和显像研究

目的制备131I标记的抗神经纤毛蛋白-1（NRP-1）单克隆抗体A6（131I-A6）,探讨其作为NRP-1靶向显像新型分子探针的可行性。方法（1）采用Iodogen法对A6进行131I标记,检测其标记率、放化纯和体外稳定性。（2）以人胶质瘤细胞株U87MG为实验细胞进行体外实验,测定131I—A6生物学活性、结合率及其与受体的亲和力。（3）将荷U87MG胶质瘤模型裸鼠采用随机抽样法分为5组,每组5只,分别于注射1．2MBq 131I-A6后24、48、72、96和120h处死,计算各脏器放射性摄取（％ID／g）、肿瘤／血液（T／B）和肿瘤／肌肉（T／M）比值。（4）取6只荷瘤裸鼠,以随机抽样法分为未阻断组和竞争阻断组,前组注射3．7MBq 131I-A6;后组注射3．7MBq 131I-A6和未标记的700仙gA6,均分别于注射后24、48、72、96和120h行SPECT／CT显像。采用两样本t检验对实验数据进行统计学分析。结果（1）131I—A6标记率为（95．46±3．34）％,放化纯〉95％;131I—A6在室温下PBS溶液中放置至96h,其放化纯仍〉85％。（2） 131I-A6与U87MG胶质瘤细胞特异性结合率1h达到最高值,为（15．80±1．30）％,在加入未标记的抗体A6时,U87MG细胞对131I-A6明显受抑制（t=2．862,P〈0．05）;与细胞表面抗原的亲和力（kd）为（1．67±0．14）nmol／L。（3）24h时131I—A6在荷瘤裸鼠血液放射性最高,为（8．00±1．42）％ID／g;其次是肝脏和肿瘤组织,分别为（7．68±1．56）和（6．00±1．24）％ID／g;脑、骨、肌肉组织放射性计数较低。给药后24h,T／B和T／M分别为0．78±0．10和3．20±0．30,随时间延长比值逐渐增高,在120h达到最高,分别为1．87±0．50和7．13±0．24。（4）体内显像示,注射 131I-A6后24h肿瘤略显影,随时间延长变清晰,120h显影为最清晰,阻断后未见肿瘤显影。结论 131I-A6的标记方法简单易行,标记率高,产物稳定性好,?     

99Tcm-sandostatin生长抑素受体显像用于诊断肺癌

目的　探讨99Tcm sandostatin生长抑素受体显像对肺癌的诊断价值。方法　 35例肺部肿瘤患者静脉注射99Tcm sandostatin (991 6± 187 5 9)MBq后行平面及胸部断层SPECT显像 ,重建后获得发射 透射图像及融合图像。勾画感兴趣区 ,计算肿瘤和对侧正常肺组织的放射性比值 (T N)。所有病灶均经病理检查及 (或 )其他检查证实。 5例孤立性肺结节 (SPN)行1 8F 脱氧葡萄糖 (FDG)符合线路显像 ,1例小细胞肺癌 (SCLC)治疗前后均行99Tcm sandostatin显像。 15例受检者于99Tcm sandostatin显像后 1周内行全身骨显像。结果　99Tcm sandostatin显像诊断肺癌的灵敏度、特异性和准确性分别为 93 3%、5 5例和 94 3%。 2例鳞癌99Tcm sandostatin显像假阴性。 4例SCLC99Tcm sandostatin显像发现胸膜异常放射性浓聚区 ,病理检查证实为胸膜转移。15例骨显像中 12例发现骨转移 ,99Tcm san dostatin仅发现 5例骨转移。SCLC、非小细胞肺癌 (NSCLC)T N分别为 3 4 3± 0 6 6、2 2 4± 0 31,差异有显著性 (t=4 0 72 ,P <0 0 0 1)。SCLC对99Tcm sandostatin的摄取明显高于NSCLC。结论　99Tcm san dostatin生长抑素受体显像无创、安全、经济 ,对肺癌有较好的诊断价值。