肺耐药相关蛋白与白血病多药耐药

肺耐药相关蛋白(LRP)的本质是人类主穹窿蛋白。LRP可以在正常细胞和包括白血病在内的多种肿瘤细胞中表达，并诱导非P-糖蛋白介导的多药耐药。本文对LRP的分子生物学特征、耐药机制、不同耐药蛋白质间的异同及LRP与白血病多药耐药的关系等问题进行综述，以便找出干预或克服LRP引起多药耐药的对策。     

RT—PCR检测儿童急性白血病多药耐药基因表达

目的：研究儿童急性白血病细胞多药耐药基因mdrl表达与临床化职效及预后的关系。方法：应用半定量RT－PCR技术动态观察33例儿童急性白血病mdrl基因表达,以mdrl/β2M值评价mdrl表达水平。结果：难治复发组mdrl基因阳性表达率及表达水平明显高于初治组和缓解组。结论：mdrl基因表达水平的高低与白血病难治程度及复发有关。对临床选择化疗方案及判断预后有一定指导意义。     

耐药相关基因HA117、mdr1、mrp1、lrp、bcrp在儿童急性白血病中的表达及临床意义

目的 探讨HA117、mdr1、mrp1、lrp、bcrp基因在AL患儿骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达及其在AL治疗中的临床意义.方法 采用RT-PCR方法检测81例AL患儿BMMNC中耐药相关基因HA117、mdr1、mrp1、lrp、bcrp的表达;并以14例免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患儿作为对照组.结果 1.AL患儿HA117、mdr1、mrp1、lrp、bcrp阳性表达率均高于对照组,难治/复发组5种耐药相关基因的表达率均高于初诊组及缓解组.2.HA117、lrp阳性的首次完全缓解率(CR1)低于阴性的CR1率(P均＜0.05),mdr1、mrp1、bcrp阳性的CR1率与阴性的CR1率之间差异无统计学意义(P均＞0.05).3.直线相关分析显示,AL中HA117与mdr1、mrp1、lrp、bcrp表达无相关性(r=0.031、0.319、0.203、0.176、11.178,P均＞0.05);mdr1与mrp1、mdr1与bcrp、lrp与bcrp呈正相关(r=0.260、0.308、0.317,P均＜0.05).难治/复发组中,HA117与mdr1、mrp1、lrp及bcrp呈正相关.结论 HA117与mdr1、mrp1、lrp、bcrp可能共同参与了儿童AL耐药的产生,可作为评估化疗效果与预后的一个重要指标.HA117与lrp较mdr1、mrp1及bcrp可能更具有预测多药耐药的意义.     

急性淋巴细胞性白血病患儿WT1基因与肿瘤耐药基因表达的关系

目的　探讨儿童急性淋巴细胞性白血病 (ALL)WT1基因与肿瘤多药耐药基因 (mdr1)表达的关系 ,为临床判断预后、指导个体化治疗提供依据。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)对 33例ALL患儿的同一份标本进行WT1mRNA及mdr1mRNA检测 ,用GQS 96 0图像处理系统软件进行半定量分析。结果　 (1)初治组ALL的WT1及mdr1阳性率分别为 6 7%及 15 % ,完全缓解组分别为 2 2 %及 18% ,复发难治组分别为 92 %及 75 % ,初治组和复发难治组WT1阳性率及表达水平与完全缓解组相比 ,P均 <0 0 1,复发难治组中mdr1阳性率及表达水平与初治组和完全缓解组相比 ,P均 <0 0 1,差异均有极显著性 ;(2 )WT1与mdr1表达无明显相关关系 ,但复发难治组WT1与mdr1均阳性者多 ,占 6 7% ,均阴性的为 0 ;与初治组及完全缓解组比较差异有极显著性。结论　ALL患儿WT1基因表达的同时出现肿瘤多药耐药基因表达 ,是白血病难治及复发的重要因素 ,提示预后差。动态监测WT1及mdr1,可预测白血病难治及复发 ,指导个体化治疗 ,有利于清除微小残留白血病细胞     

肺耐药相关蛋白与白血病多药耐药

肺耐药相关蛋白(LRP)的本质是人类主穹窿蛋白。LRP可以在正常细胞和包括白血病在内的多种肿瘤细胞中表达,并诱导非P-糖蛋白介导的多药耐药。本文对LRP的分子生物学特征、耐药机制、不同耐药蛋白质间的异同及IRP与白血病多药耐药的关系等问题进行综述,以便找出干预或克服LRP,引起多药耐药的对策。     

白血病儿童外周血及骨髓中WT1基因表达的临床意义

目的　比较外周血 (PB)和骨髓 (BM)标本中WT1基因的表达在儿童白血病微小残留病(MRD)检测中的意义。方法　采用筑巢式逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR) ,同步动态观察了 34例急性白血病 (AL)患儿的PB及BM单个核细胞WT1基因表达的相对水平。结果　 (1) 34例AL患儿的BM中WT1阳性表达为 2 7例 ,表达水平 0 784± 0 311;PB中为 2 6例 ,表达水平为 0 734± 0 2 95 ,两者的阳性率及表达水平差异无显著性。 (2 )完全缓解后PB与BM中WT1表达水平明显下降。PB中WT1表达阳性的 5例均复发 ,转阴的 13例中有 3例复发 ,P =0 0 0 6 5 ,差异有显著性 ;而BM标本中WT1表达阳性与转阴者之间差异无显著性。结论　动态观察儿童急性白血病WT1基因的改变 ,可监测MRD ,预测复发。而PB在MRD监测中比BM特异性更强 ,临床应用更方便。     

儿童急性白血病肺耐药相关蛋白表达及临床意义

目的探讨肺耐药相关蛋白(LRP)的表达与儿童白血病的关系及临床意义。 方法应用逆转录 聚合酶链反应法(RT PCR)测定52例不同类型儿童急性白血病及6名正常对照儿童的基因表达。 结果(1)23例初治儿童急性白血病患者中9例LRP基因表达阳性。6例正常对照LRP基因表达阴性。LRP基因表达阳性者完全缓解率低于表达阴性者。(2)52例儿童急性白血病患儿,32例ALL,LRP阳性8例;20例ANLL,LRP阳性17例。(3)52例儿童急性白血病患儿,初治组23例,LRP阳性9例;初次复发组16例,阳性7例;多次复发组13例,阳性9例。 结论LRP基因存在原发耐药,LRP是影响儿童白血病化疗结果及预后的重要因素之一。儿童急性白血病患儿ANLL相对于ALL缓解率低、预后差可能与LRP的表达有关。LRP的表达随着白血病患儿多次复发呈上升过程。     

急性白血病bcl—2蛋白表达的检测及临床意义

目的：检测小儿急性白血病（AL）bcl-2蛋白表达,探讨bcl-2基因在AL发生、诊治中的作用及对临床的指导意义。方法：采用免疫细胞化学法（ICC）测定AL骨髓标本中bcl-2蛋白表达,并分析其与影响白血病预后有关的临床参数的关系。结果：bcl-2表达在AL中显著增高,与年龄、性别、WBC数、肝、脾、淋巴结肿大、FAB分型间无显著相关。结论：抗凋亡基因bcl-2可能与白血病的发生有关,bcl-2蛋白表达的高低有望成类临床判断复发及制定治疗方案的参考指标之一。     

儿童急性白血病WT1基因表达的临床意义

目的 构建WT1质粒,建立实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)监测儿童白血病骨髓样本WT1基因的实验方法,初步研究WT1基因在儿童白血病中的表达特点及临床意义.方法 设计合成WT1基囚引物探针,利用分子克隆方法构建含有目的 基因WT1片段的质粒,并以此作为阳性对照检测儿童白血病骨髓样本.通过Taqman荧光探针RQ-PCR方法分别对WT1目的 基因及GAPDH内参基因进行检测,利用双标准曲线法对WT1基因的表达水平进行绝对定量,检测结果用WT1与GAPDH基因拷贝数比值(WT1/104·GAPDH)表示.实验结果应用SPSS 13.0软件进行统计学处理.结果 经酶切电泳和测序分析证实构建的质粒中成功插入了WT1基囚片段,作为RQ-PCR方法中的阳性对照;成功建立了WTl摹因的RQ-PCR检测方法.对儿童白血病标本的检测结果显示:初发AML患儿WT1基因表达水平(9.2331±37.6228)明显高于正常对照组(0.0482±0.0348),其次为BCR-ABL阳性的CML患儿(0.1080±0.0616),初发ALL患儿WT1基因表达水平(0.0605±1.6124)与正常组的差异无统计学意义.缓解中的AML患儿WT1基因表达水平(0.3150±0.7216)较初发时明显下降(P=0.000).结论 实验构建的WT1质粒及建立的RQ-PCR方法可用于儿美童白血病WT1基因检测.WT1基囚的表达水平在一定意义上可作为儿童AML治疗过程中肿瘤负荷的动态监测指标.     

HOXA10基因在儿童急性白血病中的表达及意义

目的探讨急性白血病患儿同源盒(HOX)A10基因的表达及其临床意义。方法选择50例初治急性白血病患儿,其中急性髓系白血病(AML)25例、急性淋巴细胞白血病(ALL)25例,以及13例对照儿童,分离其骨髓单个核细胞,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨髓单个核细胞HOXA10 mRNA;检测急性白血病患儿外周血白细胞计数(WBC),分析不同类型急性白血病患儿HOXA10基因表达之间的关系。结果对照儿童HOXA10基因的阳性表达率为23.08%,ALL患儿为40%,AML患儿为100%;平均表达灰度比值(ODR)分别为对照儿童0.022±0.001,AML患儿0.373±0.113,ALL患儿0.151±0.006,三组间阳性表达率及表达水平差异均有统计学意义(P<0.01),其中尤以AML患儿最高。HOXA10基因在各型AML中均有表达,其表达水平依次为M1和(或)M2型、M3型、M4和(或)M5型,差异有统计学意义(P<0.01)。WBC≥30×109/L的急性白血病患儿的HOXA10基因阳性表达率显著增高;高危组急性白血病患儿的HOXA10基因的阳性表达率也明显高于中危组和低危组。结论 HOXA10基因的高表达与儿童急性白血病,尤其是与AML明显相关,并且随着AML白血病细胞分化成熟表达逐渐下降;HOXA10基因的阳性表达率与儿童急性白血病危险程度呈正相关,有望成为儿童急性白血病诊断、治疗及判断预后的一个靶点。     

急性白血病细胞的遗传学改变及其临床意义

目的 探讨小儿急性白血病（ＡＬ）细胞的遗传学改变及其临床意义。方法 采用细胞遗传学技术对８７例小儿ＡＬ进行染色体检查和临床治疗观察。结果 ８７例ＡＬ细胞核型异常检出率为６２％（５４／８７）,结果异常与白血病类型有特殊的对应关系,核型正常组缓解率高于核型异常组（Ｐ〈０．０５）,核型正常,超二倍体及ｔ（１５;１７）易位者疗效较好,而伴ｔ（９;２２）、ｔ（４;１１）及ｔ（８;２１）易位者疗效较差;缓解期     

儿童急性淋巴细胞白血病免疫分型特征及其临床意义

目的：探讨急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿的免疫分型及其与临床特征的关系。方法：139例ALL患儿为研究对象,取肝素抗凝的骨髓或静脉血2~3 mL,利用流式细胞仪进行免疫分型分析。结果：139例ALL患儿中,B-ALL 103例（74.1 %）,T-ALL 24例（17.3 %）,T/B双表型ALL 12例（8.6 %）。B-ALL主要表达的抗原有CD19（90.3%）、CD10（83.5%）、CD20（27.2%)。T-ALL主要表达的抗原有CD3（79.2%）、CD7（66.7%）、CD5（33.3%）。B/T-ALL主要表达的T系抗原有CD7（50.0%）、CD5（41.7%）;B系抗原有CD19（50.0%）、CD10（33.3%）。139例ALL患儿中,32例伴髓系抗原表达（My+）,主要表达的抗原有CD13、CD33、CD14、MPO等。139例ALL患儿中,31例表达CD34;而My+ ALL中CD34阳性表达（15.6%）明显低于My- ALL（24.3%）。139例ALL患儿中,82例表达HLA-DR。CD10、CD34、HLA-DR在标危、中危、高危型ALL中的表达差异有统计学意义。My+ ALL组性别、出血发生率与My- ALL组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：免疫分型可正确区分儿童ALL的来源。CD10、CD34、HLA-DR抗原表达与ALL的临床分型有关。     

儿童急性淋巴细胞白血病常见融合基因的检测及意义

目的建立逆转录-巢式PCR检测融合基因的方法,检测4种常见融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病中阳性率,并对阳性患儿进行初步临床资料分析。方法对收治的92例初发的急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿,于化疗开始前抽取骨髓标本1.5～2.0 ml,采用巢式RT-PCR方法检测最常见的4种融合基因:TEL/AML1、E2A/PBX1、m-BCR/ABL和AF4/MLL。结果92例ALL患儿中TEL/AML1阳性21例,阳性率22.8%,占B细胞性ALL的24.7%(20/81例);6例E2A/PBX1阳性(6.5%),在前B细胞性ALL中占20.0%(3/15例);2例AF4/MLL阳性(2.2%),在婴儿ALL中占33.3%(2/6例);仅检测到1例m-BCR/ABL阳性(1.1%)。结论巢式RT-PCR方法是检测融合基因有效、敏感的方法。TEL/AML1在儿童ALL中阳性率最高,尤其是在B细胞性ALL中,该融合基因阳性的患儿病情较轻。     

p73mRNA在急性淋巴细胞白血病细胞中的表达及其临床意义

p73基因是p53基因家族的一个新成员，所编码蛋白质结构和功能上都与p53相似。已有研究表明，p73基因在原发性急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia．ALL)存在较高的阴性表达。我们采用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了p73mRNA在小儿ALL骨髓单个核细胞中的表达及其与影响预后的高危临床特征的相关性。     

同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病中的表达及其临床意义

目的：研究同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病（AL）患儿骨髓单个核细胞中的表达,并探讨其临床意义。方法：采用RT-PCR方法检测46例不同时期AL患儿HOXA9 mRNA的表达水平,以15例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿作为对照。结果：46例AL患儿（52份骨髓标本）HOXA9基因阳性表达率为63%,其中急性髓细胞白血病(AML)组阳性表达率（86%）明显高于急性淋巴细胞白血病（ALL）组（35%）及对照组（13%）（P<0.05）; AML组HOXA9 mRNA表达水平明显高于ALL组及对照组（P<0.05）。HOXA9在各型儿童AML中表达不同,mRNA相对表达水平依次为：M5型＞M4型＞M1和（或）M2型,而在M3型中未检测到表达。HOXA9在AML患儿高危组中的阳性表达水平较高。AML患儿初治组HOXA9基因阳性表达率及mRNA水平明显高于缓解组和对照组（P<0.05）,而缓解组与对照组比较差异无统计学意义;未缓解组HOXA9基因表达显著高于缓解组和对照组（P<0.05）。结论：HOXA9基因高表达与AL的发生相关;AML患儿HOXA9基因表达水平明显高于ALL患儿。HOXA9基因高表达者与白血病危险程度有关,且提示预后不良。因此,HOXA9基因有望成为儿童AL诊断、治疗及判断预后的一个靶点。     

TRAF1在儿童急性淋巴细胞白血病化疗中的诱导表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子1(TRAF1)蛋白在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗不同阶段中的表达情况及临床意义。方法SABC免疫组化技术分别检测40例ALL患儿化疗前、后骨髓细胞中TRAF1蛋白,RT-PCR技术检测儿童ALL Molt-4细胞于化疗药物作用前后TRAF1 mRNA表达的变化。结果40例ALL患儿化疗前有3例TRAF1蛋白阳性表达(7.5%),经化疗诱导缓解后,TRAF1蛋白阳性表达22例(55%),两者差异具有统计学意义(P<0.01)。临床随访40例患儿中,并发脑膜白血病、耐药或复发患儿共10例,TRAF1阳性表达率为80%(8/10例),表达强度为 4例, 4例,与其余30例患儿相比差异具有统计学意义(P<0.05),TRAF1蛋白诱导表达阳性率及强度与化疗效应具有相关性。Molt-4细胞经化疗药物作用后,TRAF1 mRNA表达上调。结论化疗可以诱导ALL细胞TRAF1的表达,可能为以后耐药复发的内在因素。     

儿童急性淋巴细胞性白血病E2A/PBX1融合基因的检测及临床意义

白血病是儿童期最常见的恶性肿瘤,其中急性淋巴细胞性白血病(ALL)约占70%.t(1;19)(q23;p13)是小儿ALL较常见的染色体易位之一,大约可在3%～5%的B细胞ALL患儿中发生,此易位涉及1号染色体上的前B白血病1(pre-B leukemia 1,PBX1)基因和第19号染色体上的免疫球蛋白增强子结合因子(immunoglobulin enhancer binding factor,E2A)基因,在衍生19号染色体上形成E2A/PBX1融合基因.我们利用巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究我院ALL患儿中此易位的发生率,并初步探讨患儿 的临床特征.     

急性白血病细胞中CD19的表达及其意义

目的 观察CD19在儿童急性白血病(AL)中的表达与分布,为白血病的诊断、鉴别以及导向治疗提供依据。方法 采用27个荧光直标单克隆抗体(简称单抗)及CD45／SSC双参数设门多色流式细胞术对210例儿童AL细胞进行免疫诊断和分型,并对CD19在各种类型AL细胞中的表达情况进行分析。结果在93例急性淋巴细胞性白血病(ALL)病例中,CD19的阳性率(99％,92／93)明显高于B细胞系其他相关抗原的阳性率,如CD10(88％,82／93,P=0．003)、CD20)(25％,23／93,P=0．001)和CD22(60％,56／93,P=0．001);CD19在9例含B系成分的杂合型白血病(hybrid acuteleukemia,HAL)中全部表达,而在24例T细胞系ALL和5例T／My(髓)HAL上均无表达;在79例急性髓系白血病(AML)中,仅5例(6％)CD19阳性,明显低于它在B系ALL中的阳性率(99%,P=0．001)。结论 CD19对B系ALL细胞的特异性较好,敏感性高,在B细胞系各个分化阶段持续稳定表达,是诊断B系ALL较为可靠的表面标记,也可作为导向治疗B系ALL的理想靶点。