扇贝裙边糖胺聚糖体外抗I型单纯疱疹病毒实验研究

目的研究扇贝裙边糖胺聚糖(glycosaminoglycan from Scallop Skirt,SS-GAG)体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)的作用。方法运用单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-ⅠSM44株),并以非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)为宿主细胞,通过观察病毒感染后的细胞变性反应(cytopathic effect,CPE)和运用MTT比色法,检测不同浓度药物SS-GAG对Ⅰ型单纯疱疹病毒是否有直接的灭活作用、对HSV-Ⅰ感染复制的抑制活性以及对HSV-Ⅰ感染细胞的综合作用等,并观察药物对Vero细胞的毒性作用。结果与病毒对照组相比,SS-GAG各浓度组(100、50、25mg.L-1)能有效地保护经HSV-Ⅰ感染的Vero细胞,使细胞活性增强(P<0.01);并减弱HSV-Ⅰ导致的病变效应,抑制病毒的复制。此作用随着药物浓度的增加而增强。但是SS-GAG对HSV-Ⅰ没有直接的灭活作用;SS-GAG在50~1600mg.L-1浓度范围内对Vero细胞无明显的细胞毒性。结论SS-GAG在体外实验系统中显示出明显的保护宿主细胞抵抗HSV-Ⅰ病毒感染的活性作用。     

大青叶提取物抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的体外实验研究

目的 检测大青叶提取物体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-Ⅱ） 的作用. 方法 以Vero 细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,通过观察细胞病变效应（CPE）和改良MTT比色法来测定药物的细胞毒性、药物对HSV-Ⅱ的直接灭活作用,以及药物抗HSV-Ⅱ对细胞的吸附和对 HSV-Ⅱ在细胞内复制增殖的抑制,算出药物抗HSV-Ⅱ的治疗指数. 结果 大青叶提取物在体外对HSV-Ⅱ无直接灭活作用,也无抗HSV-Ⅱ吸附细胞的作用,但能抑制HSV-Ⅱ在细胞内的复制增殖,其治疗指数达3.56. 结论 大青叶提取物在体外有一定的抗HSV-Ⅱ感染效果,主要是通过抑制病毒在细胞内的复制增殖而发挥作用.     

牡蛎糖胺聚糖小鼠体内抗病毒作用的实验研究

目的 研究牡蛎糖胺聚糖(O-GAG)对I-型单纯疱疹病毒(HSV-1)感染小鼠的治疗作用以及对免疫功能的影响.方法 采用HSV-1感染小鼠模型和细胞培养的方法,通过观察小鼠的生存时间、死亡率、胸腺和脾指数以及巨噬细胞的吞噬功能,分析O-GAG的抗病毒作用.结果 O-GAG10～40mg·kg-1能显著降低HSV-1感染小鼠的死亡率,延长其存活时间,并明显提高病毒感染小鼠的胸腺指数和脾指数,增强巨噬细胞吞噬能力.结论 牡蛎糖胺聚糖对I-型单纯疱疹病毒感染小鼠有一定的治疗作用并能提高小鼠的免疫功能.     

纳米银对1型单纯疱疹病毒的抑制作用

 目的：探讨纳米银（nanosilver, Nano-Ag）对1型单纯疱疹病毒（herpes simplex virus-1, HSV-1）的抑制作用。方法：通过MTT分析法、倒置显微镜下观察细胞病变效应（cytopathic effect,CPE）、透射电镜观察细胞形态以及流式细胞仪检测细胞的凋亡,探讨Nano-Ag对HSV-1的抑制作用。结果：Nano-Ag溶液在人宫颈癌细胞（human cervical cancer cells, HeLa）中的最大无毒浓度（TD0）为50 μg?mL-1;HSV-1在HeLa细胞的半数感染浓度（50% tissue culture infectious dose,TCID50）为10-4.5?100 μL-1;100 μg?mL-1 Nano-Ag溶液和等体积的400 TCID50 HSV-1毒株在室温下充分混和作用2 h后感染HeLa细胞,CPE为阴性,细胞存活率为 (101.48±2.29)%,细胞凋亡率为 (8.47±1.96)%,电镜下细胞形态良好;而200 TCID50 HSV-1毒株感染HeLa细胞,细胞存活率仅为(17.13±2.20)%,CPE为+[KG-*3]+[KG-*3]+[KG-*3]+,细胞凋亡率为(25.72±1.37)%,二者比较具有显著的统计学差异（P<0.001）。结论: Nano-Ag对HSV-1具有明显的抑制作用。     

知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型体外活性研究

目的:对知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的活性进行研究.方法:采用MTT比色法测定知母宁对Vero细胞的毒性作用.采用中性红染色法,以阿昔洛韦为阳性对照药物,考察不同给药方式与不同药物处理时间下知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-ⅠSm44)的活性.结果:MTT法测得Vero细胞对知母宁的最大耐受浓度与半数中毒浓度(TC50)分别为0.29与3.66mg*ml-1.不同加药方式下,知母宁与阿昔洛韦均对HSV-ⅠSm44表现出综合抑制作用并能抑制病毒吸附后的复制增殖过程,这些作用总体上随药物浓度升高而增强,其中知母宁抗病毒有效率(ER%)最高达76.42%.知母宁预防HSV-Ⅰ病毒吸附的作用较弱,但其在高浓度(2.08mg*ml-1以上)对HSV-Ⅰ具强的直接杀伤作用,最高ER%值为98.86%.随药物处理时间延长,低浓度知母宁抗HSV-Ⅰ的ER%值递减,2.08mg*ml-1以上知母宁的ER%值变化小.在不同药物处理时间下,知母宁及阿昔洛韦组病毒的感染性均较平行设置的病毒对照组减弱,且知母宁组的感染力较阳性药物组更弱.知母宁组病毒感染力下降值△lgTCID50随处理时间增加而增加.结论:知母宁在体外从多个作用点较强地抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型活性.     

板蓝根多糖抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的实验研究

目的 研究板蓝根多糖抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用.方法 用MTT法和小鼠阴道HSV-Ⅱ感染模型分别进行体外和体内抗HSV-Ⅱ实验.结果 MTT法测得的板蓝根多糖LC50为3.97 mg· mL-1,EC50为0.05 mg· mL-1,治疗指数TI为79.4.与无环鸟苷相比,抑制HSV-Ⅱ的作用无显著差异;小鼠阴道HSV-Ⅱ感染模型研究表明:板蓝根多糖治疗组(1、0.5 mg·d-1)均明显降低小鼠的发病率、死亡率,延长其平均存活天数.小鼠外周血CD4+、CD8+细胞略有升高,但CD4+/CD8+比值维持在正常水平.结论 板蓝根多糖具有良好的抗HSV-Ⅱ感染的作用,可能通过调节机体免疫功能提高小鼠抗HSV-Ⅱ感染的能力.     

中药FESOL抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的实验研究

目的：研究中药FESOL抗HSV－Ⅱ的药效学。方法：用MTT法和小鼠阴道模型分别进行了体内和体外抗HSV－Ⅱ实验。结果：MTT法测得FESOL TC50为2.5mg.ml^-1,IC50为0.031mg.ml^-1，治疗指数为80．65。与ACV相比，抑制HSV－Ⅱ的作用无显著性差异。小鼠阴道模型研究结果，FESOL高剂量组（8．33、1．67g.kg.d^-1)均明显降低感染鼠的发病率，死亡率，延长期平均存活天数，延缓病变发展速度，减轻病变程度。结论：FESOL具有良好的抗HSV－Ⅱ药效学效果。     

马齿苋水煎液抗单纯疱疹病毒的实验研究

目的 测定马齿苋水煎液在细胞培养条件下抗单纯疱疹病毒Ⅰ(HSV-Ⅰ)的作用.方法 在人胚肺二倍体细胞系统中,采用对病毒所致细胞病变的抑制实验,观察马齿苋水煎液抗HSV-I的药效,加入细胞培养板内观察病毒致细胞病变作用,以能抑制最大病毒感染量的药物浓度为判断结果的标准.结果 马齿苋水煎液的半数抑制浓度(IC(50)为0.98 μg/ml;最小有效浓度(MIC)为1.95 μg/ml;治疗指数(TI)为128.结论 马齿苋水煎液有较显著的抗HSV-I作用,且对细胞毒性低.     

马齿苋水煎液抗单纯疱疹病毒的实验研究

目的测定马齿苋水煎液在细胞培养条件下抗单纯疱疹病毒I型（HSV-I）的作用。方法在人胚肺二倍体细胞系统中,采用对病毒所致细胞病变的抑制实验,观察马齿苋水煎液抗HSV-I的药效,加入细胞培养板内观察病毒致细胞病变作用,以能抑制最大病毒感染量的药物浓度为判断结果的标准。结果马齿苋水煎液的半数抑制浓度（IC50）为0.98μg/ml;最小有效浓度（MIC）为1.95μg/ml;治疗指数（TI）为128。结论马齿苋水煎液有较显著的抗HSV-I作用,且对细胞毒性低。     

Studies on the antiviral activity of 5′-amino-2′,5′-dideoxy-5-iodouridine (AIU) against herpes viruses in vivo and in vitro

5′-Amino-2′,5′-dideoxy-5-iodouridine (AIU) is known to have antiviral activity against herpes simplex virus type 1 (HSV-1) in cell cultures but is less potent than the parent compound 5-iodo-2′-deoxyuridine (IDU). Studies on its activity in vivo are limited. AIU showed antiviral effects in BHK cells against wild-type HSV-1 but not a thymidine kinase-negative (TK^?) mutant, indicating the importance of phosphorylation of the compound by HSV-1-induced thymidine kinase for antiviral effects. When cells were coinfected with the TK^? mutant and a wild-type TK⁺ strain, both strains were inhibited by AIU, suggesting that the failure to phosphorylate AIU accounts for the resistance of the TK^? strain alone. AIU failed to limit death after systemic HSV-1 infection of mice when the drug was administered parenterally or orally, although IDU in similar treatment regimens was effective. Tested for efficacy in a local HSV-1 skin infection of mice, topical AIU in a petrolatum ointment or dimethyl sulphoxide (DMSO) did not reduce titres of virus in the skin or modify the clinical course of infection, whereas topical application of IDU in DMSO caused a significant reduction in the titres of virus in the skin and reduced both the occurrence and the severity of lesions. When administered subcutaneously or orally AIU had a slight antiviral effect against HSV-1 infection in the skin of mice. Moreover, intraperitoneally (i.p.) administered AIU limited HSV-1 replication in peritoneal cells of i.p. infected mice, indicating that AIU is inherently antiviral in vivo. The poor antiviral activity of AIU in vivo compared with IDU is attributed to its lower antiviral potency as judged by its activity in cell cultures and its inability to enter neural tissue.     

朱砂七总蒽醌体外抗单纯疱疹病毒的研究

目的研究朱砂七总蒽醌(ZSQ)体外对单纯疱疹病毒的抑制作用。方法运用单纯疱疹病毒I型(HSV-Ⅰ)和Ⅱ型(HSV-Ⅱ),以非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)为宿主细胞,通过观察感染病毒后的细胞变性反应(CPE)和MTI比色法,检测ZSQ对单纯疱疹病毒的抑制作用。结果与病毒对照组相比,朱砂七总蒽醌各质量浓度组均能有效地保护感染HSV-I和HSV-Ⅱ病毒的Vero细胞,抑制单纯疱疹病毒的复制,使病毒导致的细胞病变减弱。ZSQ抗HSV-I病毒作用IC50为0.004 7g.L-1,抗病毒有效率达90.83%,治疗指数(TI)为16.62;总蒽醌抗HSV-Ⅱ病毒作用IC50为0.006 7g.L-1,抗病毒有效率达90.06%,治疗指数(TI)为11.66。结论 ZSQ在体外显示出明显的保护宿主细胞、抵抗单纯疱疹病毒感染的活性。     

玉足海参酸性多糖的研究

干燥玉足海参体壁经碱法消化、钾盐和季铵盐分级,可获得两种含岩藻糖的酸性多糖HL-P和HL-S。两者经电泳、凝胶过滤及超离心分析均证明为纯一成分。理化分析表明,HL-S系聚岩藻糖硫酸酯,此类多糖在多种海参中存在;HL-P系一硫酸粘多糖,其组成中,氨基半乳糖:葡萄糖醛酸:岩藻糖:硫酸基的分子比值为1:0.94:0.84:3.60。本文报告了两种多糖的比旋度、特性粘度、沉降系数及分子量。生物活性测定表明,HL-P对牛凝血酶有较强抑制作用(体外),同时抑制多种小鼠移植瘤的生长。     

钝顶螺旋藻多糖抗病毒作用的实验研究

目的探讨钝顶螺旋藻多糖(polysaccharide fromSpirulina platensis,PSP)抗单纯疱疹病毒及乙型肝炎病毒的作用及可能机制,为进一步开发该药提供理论依据。方法以不同剂量的PSP分别作用于HSV-1及HSV-2病毒复制周期的各个环节,以病毒半数感染量(TCID50),细胞病变效应(CPE),蚀斑形成单位(PFU),MTT法作为评价指标,判断PSP的抗病毒效果;ELISA法定量检测PSP对HepG2 2.2.15细胞HbsAg,HBeAg分泌的影响;FQ-PCR检测PSP对HBV-DNA合成的影响。结果PSP对Vero细胞及HepG2 2.2.15细胞毒性极低,对HSV-1及HSV-2均无直接灭活作用,可阻滞HSV-1及HSV-2病毒的吸附并抑制感染细胞内病毒的复制,但不影响病毒的释放。在HepG2 2.2.15细胞培养中PSP可显著抑制HB-sAg、HBeAg的分泌以及HBV-DNA的合成,并具有量效和时效关系。结论PSP抗HSV-1及HSV-2病毒作用的机制与抑制病毒吸附和感染细胞内病毒的生物合成有关,而PSP抗HBV作用的机制则与抑制HBV抗原分泌及病毒DNA复制有关。     

退热解毒灵抑制甲型H_1N_1流感病毒的体外实验

目的:观察退热解毒灵水煎剂抑制2009年新型甲型H1N1流感病毒的效果。方法:采用MTT法及细胞病变抑制实验,以利巴韦林为阳性对照,检测退热解毒灵水煎剂对H1N1流感病毒的抑制作用。结果:退热解毒灵水煎剂对体外试验中H1N1流感病毒有一定的抑制作用,其半数中毒质量浓度为8 954.3mg.L-1,抑制H1N1流感病毒的半数有效质量浓度为520.6mg.L-1,治疗指数为17.2。结论:退热解毒灵水煎剂在体外实验中,对H1N1流感病毒有抑制作用。     

重组蓝藻抗病毒蛋白N的纯化复性及其抗单纯疱疹病毒1型活性的研究

目的 纯化复性重组蓝藻抗病毒蛋白N(cyanovirin-N,CV-N)并研究其抗病毒活性.方法 将诱导表达的重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化并以稀释法复性,在Vero细胞中进行CV-N抗单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)活性的研究.通过观察细胞病变效应(CPE)及MTT比色法检测细胞活性,以判断CV-N的抗病毒效应.结果 重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化后,SDS-PAGE显示11KDa处清晰的单一条带,复性的重组CV-N对Vero细胞毒性极低,对HSV-1无直接灭活作用,CV-N对病毒的吸附及生物合成均有抑制作用,且强于阳性对照药物阿昔洛韦.结论 经纯化复性的CV-N具有良好的抗HSV-1活性,值得进一步研究和开发.     

抗病毒无菌粉针剂抗病毒作用的研究

目的为明确抗病毒粉针剂体内外抗病毒谱及作用机制。方法采用组织细胞培养法、MTT染色法 ,检测抗病毒粉针剂对不同病毒株的作用 ,通过改变给药时间、途径 ,探讨抗病毒粉针剂抗病毒作用环节。通过建立病毒性流感动物模型 ,采用组织病理学检查法 ,观察抗病毒粉针剂对感染动物的保护作用。结果抗病毒粉针剂具有明显的抗流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒的作用 ,抗病毒作用是多途径的。结论抗病毒粉针剂是一个较广谱的抗呼吸道病毒针剂     

Preclinical assessment of topical treatments of herpes simplex virus infection: 5% (E)-5-(2-bromovinyl)-2'-deoxyuridine cream

The potential efficacy of topical therapy with (E)-5-w-bromovinyl)-2'-deoxyuridine (BVDU) for cutaneous herpesvirus infection was evaluated in vitro and in guinea pigs. Drug sensitivity testing against herpes simplex virus type 1 strain E115 revealed an ID50 of 0.008 microgram/ml for BVDU and 0.19 microgram/ml for acyclovir (ACV). In vitro drug diffusion studies showed poor penetration of guinea pig skin by BVDU from the cream compared to BVDU from dimethylsulfoxide (DMSO) (0.04 vs. 1.5 microgram/cm2 per h). 5% BVDU cream, 5% BVDU/DMSO, and 5% ACV in polyethylene glycol (PEG) were then compared in the treatment of experimental dorsal cutaneous HSV-1 infection in guinea pigs. Lesion number, total lesion area and virus titer were reduced by all three formulations compared to control sites treated with the corresponding drug vehicles (P less than or equal to 0.01). BVDU cream effected a greater reduction in lesion number (20+ vs. 13%) and total lesion area (40% vs. 28%) than did ACV/PEG and a significantly greater decrease in virus titer (990% vs. 55%, P less than 0.002). BVDU/DMSO was clinically twice as effective as BVDU cream (P less than or equal to 0.01) and reduced lesion virus titers to a similar degree. The results of these studies show that BVDU is a more potent virus-inhibitory agent than ACV in vitro and is superior to topical ACV in vivo when formulated in a simple aqueous cream. The marked efficacy of BVDU/DMSO in the animal model demonstrates the potential of this antiviral if drug delivery is improved.