过表达klotho基因的脂肪干细胞对糖尿病肾病大鼠肾脏的修复作用

目的探讨过表达Klotho基因的脂肪干细胞(ADMSCs)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的修复治疗作用。方法原代培养SD大鼠ADMSCs,Klotho过表达载体慢病毒感染ADMSCs,嘌呤霉素筛选,获得ADMSCs(Kl+),检测干细胞抗原表达特性。将细胞经尾静脉注射入DN大鼠体内,移植6周检测指标:计算肌酐清除率和24 h尿蛋白量测定肾功,HE染色观察肾组织病理学变化,Western blotting检测肾脏Klotho及α-SMA,Vimentin,Collagen I纤维化蛋白的表达。结果ADMSCs(Kl+)具有间充质干细胞的形态和特性,注射入DN大鼠体内,肾脏功能明显改善,病理改变减轻,Klotho及α-SMA,Vimentin,Collagen I纤维化相关蛋白表达量明显下降,治疗效果明显优于单纯ADMSCs治疗组。结论过表达Klotho基因的ADMSCs对DN大鼠肾脏具有修复治疗作用,与下调纤维化相关蛋白表达相关。     

大鼠IgA肾病模型肾脏变化分析

目的探讨IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾小体、肾小囊、肾小球和近端肾小管病理变化。方法将20只SD雌性大鼠随机分成2组,即对照组和IgAN组(n=10)。用免疫荧光、HE染色和体视学方法,测出2组动物肾小体、肾小囊和肾小球体密度、球囊体积比、肾小体数密度、肾小体和肾小球长径、近端肾小管管腔和管壁面积及其比值,比较其差异。结果IgA免疫荧光染色,IgAN组皮质部见较强绿色荧光。与对照组比,IgAN组肾小体体密度增大,肾小囊体密度增大,肾小球体密度减小,球囊比减小,肾小体数密度变化差异无显著性,肾小体长径增大,肾小球长径减小,近端肾小管管腔面积减小,管壁面积增大,腔壁比减小。结论 IgAN大鼠肾小体和肾小囊增大,肾小球减小,近曲小管细胞体积增大,管腔变小。     

糖尿病肾病肾小球nephrin表达的变化

目的： 探讨糖尿病大鼠肾小球滤过屏障外层裂孔膜关键蛋白nephrin mRNA和蛋白表达的改变及其意义。 方法：建立糖尿病动物模型，测定血糖（BG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯(TG)、尿白蛋白排泄率（UAER）水平，并用RT-PCR和免疫组织化学方法检测肾小球nephrin mRNA和蛋白的表达。 结果：糖尿病组（D组）BG、TC显著高于正常对照组（N组），肾小球nephrin mRNA和蛋白表达明显低于N组，UAER显著高于N组（均P<0.05）。 结论：持续糖脂代谢紊乱显著抑制糖尿病大鼠肾小球nephrin mRNA和蛋白的表达，破坏肾小球滤过屏障结构完整性，增加UAER，这可能是糖尿病肾病发生发展的机制之一。     

平滑肌肌动蛋白在马兜铃酸肾病大鼠肾脏干细胞移植前后表达变化

目的 观察骨髓源性干细胞移植对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾脏中平滑肌肌动蛋白表达的影响,探讨干细胞对肾脏保护作用的可能机制.方法 雌性Wistar大鼠30只,随机分为3组:①移植组;②非移植组;③正常对照组,每组10只,移植组和非移植组经关木通水煎剂灌胃12周,制作慢性马兜铃酸肾病(CAAN)大鼠模型,第12周末,移植组经尾...     

姜黄素对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及可能机制

目的 探讨姜黄素对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及可能机制.方法 36只SD大鼠随机分为对照组(control组)、糖尿病肾病模型组(DN组)和姜黄素治疗组(Cur组),每组12只.于造模成功后第8周,生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐(Scr)与尿素氮(BUN)的含量;称量各组大鼠体重和肾重,测定肾指数;ELISA方法检测...     

2型糖尿病大鼠肾脏病变中血小板CD62P的变化及意义

目的探讨血小板CD62P在2型糖尿病大鼠肾脏病变不同阶段的变化及意义.方法 Wis-tar大鼠给予高脂高糖饲料喂养4周形成胰岛索抵抗后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg·kg-1)诱导形成2型糖尿病模型,分别在胰岛素抵抗期、糖尿病成模12周、22周检测各组大鼠血小板CD62P的表达、尿白蛋白排泄率及肾脏形态学改变.结果①胰岛素抵抗期,血小板CD62P已有增高趋势,但是与正常对照组相比统计学上无显著差异(P＞0.05).此时肾脏形态学、尿白蛋白排泄率无明显变化;②糖尿病成模12周时,血小板CD62P的表达较对照组显著增高(P＜0.001),尿白蛋白排泄率无明显变化,光镜下肾小球系膜基质明显增多;③在糖尿病成模22周时,血小板CD62P的表达与对照组相比无明显差异(P＞0.05),此时尿白蛋白排泄率较对照组显著增高(P＜0.01),肾小球形态学改变表现为弥漫性硬化和纤维化.结论 2型糖尿病大鼠肾脏病变过程中,血小板CD62P的表达可能与病变的不同阶段有关.     

糖尿病大鼠肾脏nephrin表达的动态观察

目的从不同时间点动态观察足细胞相关分子nephrin在糖尿病大鼠肾组织中的表达,探讨nephrin在DN蛋白尿发生发展中的改变及意义。方法将SD大鼠分为健康对照组(C组)、糖尿病组(DM组)。SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素制成糖尿病模型,正常对照组注射等量枸橼酸缓冲液。分别于0、2、4、6、8、12周动态检测尿白蛋白(UA),血糖(BG)及肾功能,取肾组织行常规病理检查,免疫组化、Western blot分析技术检测肾脏nephrin的表达。结果 (1)与NC组相比,DM组随着病程的延长,尿白蛋白、BUN、Ccr均逐渐出现明显的变化,而白蛋白尿早于BUN、Ccr异常的出现;(2)与NC组相比,DM组足细胞相关分子nephrin蛋白于第2周出现表达下调,随着时间的进展,nephrin蛋白的表达进一步减少,直至第12周,各周间比较差异有显著性(P0.05);(3)相关分析显示:尿白蛋白排泄与足细胞相关分子nephrin呈负相关。结论糖尿病大鼠早期(2周)出现足细胞相关分子nephrin表达下调,是糖尿病肾病早期损伤指标,nephrin参与了糖尿病肾病大鼠蛋白尿的发生及发展。     

糖尿病大鼠肾脏组织氧化应激及其在糖尿病肾病发病中的意义

目的：观察糖尿病大鼠肾脏组织中氧化应激水平，探讨氧化应激在糖尿病肾病中的作用。 方法： 糖尿病模型鼠采用STZ诱导。36只大鼠随机分为正常对照组、糖尿病维持组、糖尿病治疗组。喂养至12周，测定各组血糖、血中胆固醇、甘油三酯、尿素氮、肌酐、糖化血红蛋白水平、尿肌酐水平和24 h尿蛋白含量。运用比色法测定肾脏皮质中抗氧化酶的活性,包括总超氧化物歧化酶（TSOD）、铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)、锰超氧化物歧化酶（Mn SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)以及丙二醛（MDA）的含量。逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）半定量测定肾脏组织中各抗氧化酶mRNA的表达水平。 结果： 糖尿病治疗组与正常对照组间各指标无显著差异。糖尿病维持组中血糖、胆固醇、甘油三酯、糖化血红蛋白明显高于糖尿病治疗组和正常对照组；抗氧化酶中，TSOD 、Cu-Zn SOD、CAT活性明显低于糖尿病治疗组和正常对照组，GSH-Px活性则高于糖尿病治疗组和正常对照组，Mn SOD活性在各组中无显著差异；而MDA水平则明显高于糖尿病治疗组和正常对照组。糖尿病维持组中GSH-Px、Cu-Zn SOD的mRNA表达水平高于其它组，而CAT mRNA的表达则低于其它组，Mn SOD的mRNA表达水平在各组无明显差异。糖尿病维持组尿蛋白含量明显高于其它组，而肌酐清除率则明显低于其它组。 结论： 高血糖可以影响大鼠肾脏组织中抗氧化酶的表达，升高糖尿病大鼠肾脏组织的氧化应激水平,在糖尿病肾病发病机制中起重要作用。     

消渴颗粒剂对糖尿病肾病大鼠血糖、血脂含量的影响

目的:观察糖尿病肾病大鼠血糖、胆固醇、甘油三脂含量的变化以及消渴颗粒剂对其的影响。方法:采用3/4肾切除,腹腔一次性注射STZ复制大鼠糖尿病肾病模型。将动物分为模型组、消渴颗粒剂治疗组、阳性药对照组和假手术组。每组大鼠于注射STZ后1、2、3、4、5周尾尖取血测定空腹血糖、血清肌酐、血清胆固醇和血清甘油三脂含量。各组大鼠于注射STZ后6周杀检,进行肾脏形态学观察。结果:注射STZ后6周,模型组大鼠有不同程度的肾小球硬化。中药治疗组上述病变明显轻于病理组。注射STZ后第1、2、3、4、5周,模型组血清肌酐明显高于假手术组(P＜0.05),治疗组则明显低于模型组和阳性对照组。注射STZ后1、2、3、4、5周模型组空腹血糖、血清胆固醇明显高于假手术组(P＜0.05),血清甘油三脂在注射STZ后1、2、3、5周明显高于假手术组(P＜0.05);消渴颗粒剂治疗组和阳性对照药组与模型组同期比较病变明显减轻。空腹血糖和血清胆固醇、甘油三脂含量呈正相关。结论:采用此方法成功地复制了大鼠糖尿病肾病模型,糖尿病肾病大鼠血糖增高可能引起血脂增高,消渴颗粒剂治疗糖尿病肾病的途径之一是降低大鼠血糖、血清胆固醇、血清甘油三脂含量,从而改善肾小球病变。     

2型糖尿病并发肾病大鼠模型的制备

糖尿病肾病 (ＤＮ)是糖尿病 (ＤＭ)的主要慢性并发症 ,因其导致尿毒症死亡者约占糖尿病病人的 2 7%～ 31% [1 ] 。糖尿病肾病的动物模型一般采用大剂量ＳＴＺ腹腔注射的方法 ,但与 2型糖尿病肾病的病理变化仍存在一定差距。本文用小剂量ＳＴＺ腹腔注射 ,饲以高脂饲料 ,单侧肾切除相结合的方法收到较为满意的结果。1　材料与方法1 1　材料 :健康Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠 ,体重 180～ 2 30ｇ ,由湖南中医学院实验动物中心提供 ;ＳＴＺ(Ｓｉｇｍａ公司 )、高脂饲料 (基础饲料加蔗糖、炼猪油、鲜鸡蛋等混合而成 ,比例为 6∶0 5∶2 5∶1)、血糖仪…     

高糖条件下Tensin在人肾脏系膜细胞上的表达

目的: 探讨在高糖刺激的条件下,Tensin在人类肾脏系膜细胞上的表达及变化.方法: 体外培养系膜细胞,用含不同浓度的葡萄糖(5 mmol/L,30 mmol/L)刺激细胞48 h、 72 h和5 d.用免疫荧光法观察tensin在人类肾脏系膜细胞上表达及变化,ELISA法检测上清液中纤连蛋白含量.结果: 高糖刺激下系膜细胞tensin的表达随着培养时间的延长逐渐增多,且纤连蛋白的分泌也随培养时间的延长而增加.结论: 高糖刺激下tensin在人类肾脏系膜细胞的细胞膜上表达增加,在细胞外基质增多的发生机制中起重要作用.     

黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制

 目的:观察黄芪甲苷 (AS-IV)对糖尿病肾病(DN)肾脏的保护作用及其机制。方法:38只清洁级雄性SD 大鼠分成正常组（10只）、模型组（14只）和AS-IV 干预组（14只）,用链脲佐菌素造模,成功后1 周开始治疗,期间每 4周动态观测血糖及尿微量白蛋白,治疗12周后处死大鼠取材及采血,取肾皮质行 HE 和Masson染色观察,并检测β 1整合素、整合素连接激酶(ILK)和α-actinin-4的蛋白表达水平。结果:干预8周末AS-IV 组血糖水平较模型组明显降低（P<0.01）。干预12周末AS-IV 组与模型组相比,尿微量白蛋白明显下降（P<001）,并使因造模引起的β 1整合素、ILK 和α-actinin-4 表达水平的变化产生逆变（P<0.05）。与正常组比较,模型组的β 1整合素、ILK 和α-actinin-4 表达水平均有明显差异（P<0.05）。结论:AS-IV 对DN 肾脏有明显保护作用,能降低血糖和尿白蛋白排泄量,改善足细胞黏附功能,从而延缓DN 的进展。     

小檗碱对糖尿病肾病大鼠C反应蛋白的影响

目的:观察小檗碱对糖尿病肾病大鼠C反应蛋白的影响。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、小檗碱75、150及300mg.kg-1组、罗格列酮组六组,每组8只。除正常对照组外,其余各组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ,55mg.kg-1),成功造模后小檗碱各组及罗格列酮组分别灌胃给予75、150、300mg.kg-1小檗碱以及4mg.kg-1罗格列酮,连续6w后检测大鼠血糖、体重,HE染色检测肾脏病理改变,ELISA法检测C反应蛋白活性。结果:与正常对照组相比,糖尿病组血糖与C反应蛋白活性明显升高(P<0.05),与模型组比较,小檗碱各组血糖与C反应蛋白活性明显降低(P<0.05),有统计学意义。结论:小檗碱可降低糖尿病大鼠血糖和C反应蛋白,减轻糖尿病肾病。     

Alterations of glomerular matrix proteins in the pathogenesis of diabetic nephropathy

Summary Diabetic late complications are characterized by morphological and biochemical alterations of the extracellular matrix. In particular, longstanding diabetes causes quantitative and qualitative changes in basement membrane structure of retinal and renal capilleries. Immunohistochemical investigations of diabetic kidneys with diffuse glomerulosclerosis show increased collagen type IV deposition in the mesangial matrix and decreased heparan sulfate proteoglycan content in the mesangial matrix and glomerular basement membrane as well. In nodular glomerulosclerosis normal basement membrane components are decreased or absent while the occurrence of collagen type III in this stage has been interpreted as an irreversible alteration of the glomerular structure. These changes seem to be the underlying cause for the alterations in renal functions like persistent albuminuria and proteinuria. Increased intra- and extracellular levels of glucose and its derivatives are thought to be responsible for diabetic tissue dysfunction although there are reports on possible genetic defects causing increased susceptibility to develop diabetic nephropathy. Recent results, however, focuse on the role of glucose-induced cytokine secretion as mediator for altered metabolism of glomerular matrix proteins. In vitro studies with cultured kidney cells have shown that the glucose-induced dysregulation of the basement membrane synthesis may be mediated by a glucose dependent activation of protein kinase C. Alternatively or synergistically, the formation of AGE products formed after prolonged exposure of matrix proteins to elevated glucose may also lead to cytokine secretion subsequently inducing synthesis of extracellular matrix proteins. Studies in experimental animals confirm the diabetes induced dysregulation of the synthesis of extracellular matrix components on the molecular level.Abbreviations HSPG heparan sulfate proteoglycan - GBM glomerular basement membrane - ECM extracellular matrix - AGE advanced glucosylation end products - TNF tumor necrosis factor - bFGF basic fibroblast growth factor     

Effect of fosinopril on chemerin and VEGF expression in diabetic nephropathy rats

As the most common and severe complication of diabetes, diabetic nephropathy (DN) has been known to be related with angiotensin converting enzyme inhibitor (ACEI), which can reduce proteinuria and protect renal function. This study analyzed the effect of ACEI analog-fosinopril-on the expression of chemerin and vascular epithelial growth factor (VEGF), in an attempt to reveal the mechanism of ACEI analog on renal protection. A total of 45 SD rats were induced by sreptozotocin for diabetes and were given fosinopril via intragastric cannulation for 12 weeks. After sacrifice, serum and renal chemerin and VEGF contents were quantified by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and Western blot method, in addition to biochemical laboratory examinations. In diabetic model rats, blood glucose, creatinine, urea nitrogen, 24-hour urinary protein, chemerin and VEGF protein contents were all significantly elevated when compared to those in control group (P<0.05). After fosinopril treatment, blood creatinine, urea nitrogen, 24-hour urinary protein, Chemerin and VEGF protein concentrations were significantly depressed (P<0.05 compared to model group). Positive relationships existed between renal chemerin, VEGF and urea protein levels. Fosinopril may protect renal tissues in diabetes by suppressing chemerin and VEGF protein expression.     

厄贝沙坦对早期糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin表达的影响

目的： 观察nephrin在糖尿病肾病（DN）大鼠肾小球足细胞中的表达，探讨厄贝沙坦对DN肾脏保护作用的机制。方法： 应用链脲佐菌素建立大鼠DN模型，将DN模型大鼠随机分为2组：厄贝沙坦治疗组、模型对照组；另设正常对照组。各组分别干预8周后，观察大鼠体重、肾重、相对肾重、24 h尿蛋白定量、血糖、血清尿素氮、肌酐、总胆固醇、甘油三酯变化，利用光镜、电镜观察肾脏病理改变，应用免疫组化技术观察nephrin表达情况。结果： 应用厄贝沙坦干预后，DN大鼠24 h尿蛋白定量明显减少、肾功能改善、肾脏病理改变显著减轻、足细胞nephrin表达量明显减少。结论： 厄贝沙坦对DN肾脏的保护作用可能与其抑制足细胞nephrin表达有关。     

糖尿病大鼠肾脏细胞因子基因表达初步研究

目的:研究糖尿病大鼠肾脏细胞因子mRNA的表达。方法:大鼠随机分成2组:单肾切组、糖尿病组。实验第8周,应用RT-PCR技术检测大鼠肾皮质转化生长因子-β₁ (TGF-β₁)、血小板衍化生长因子-B(PDGF-B)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及Ⅳ型胶原mRNA的表达。 结果: 糖尿病组大鼠肾皮质TGF-β₁ (P＜0.01)、 PDGF-B(P＜0.01)、TNF-α(P＜0.01)及Ⅳ型胶原(P＜0.01)mRNA的表达显著高于单肾切组大鼠。结论: 在实验性大鼠糖尿病肾皮质TGF-β₁、PDGF-B 、TNF-α和Ⅳ型胶原mRNAs表达显著增加。     

大豆异黄酮保护糖尿病肾病大鼠肾脏炎症及氧化应激损伤的研究

目的研究大豆异黄酮(SI)保护糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏炎症及氧化应激损伤的研究。方法用链脲佐菌素腹腔内注射建立大鼠DN模型,并随机分为对照组、DN组和SI组,每组20只。模型构建8周后处死大鼠,肾脏称重计算肾体比,HE法检测各组肾脏病理改变;采用化学比色法检测血清和肾脏超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和晚期氧化蛋白产物(AOPPs)水平;ELISA法测定血清和肾脏TNF-α、IL-Iβ、IL-6水平。结果苏木素-伊红(HE)染色观察到,SI可以有效缓解肾小管损伤、肾小球系膜和基底膜的增生情况,减轻肾小管上皮水肿。与DN组相比,SI组SOD活性和T-AOC水平显著升高,MDA、血清AOPPs水平降低;血清TNF-α、IL-Iβ和IL-6含量显著降低(P<0.05)。结论大豆异黄酮具有抗炎抗氧化的作用,能够有效保护糖尿病肾病大鼠的肾脏中氧化应激及炎症反应。     

白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及可能机制

目的 观察白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及能机制.方法 36只SD大鼠随机分为对照组(control组)、糖尿病肾病模型组(DN组)和白藜芦醇治疗组(Res组),每组12只,采用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.于造模成功后第8周,ELISA法检测各组大鼠尿液中24 h尿蛋白(24hT...     

实验性糖尿病大鼠肾脏自由基防御机能的改变及其意义

观察了链脲佐菌素诱导的糖尿病于发病后４、６、１２和１６周肾脏自由基防御机能的变化。结果表明，在各观察时点，糖尿病大鼠肾脏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性明显低于对照组，肾脏脂质过氧化物水平显著升高，ＳＯＤ／ＬＰＯ和ＣＡＴ／ＬＰＯ明显降低，随着病程延长，这些改变更趋明显。