L1CAM基因分子遗传学研究进展

Ｌ１ＣＡＭ基因分子遗传学研究进展胡冬贵黎青黄艳仪自从１９９１年人类Ｌ１ＣＡＭ基因（Ｌ１－ｌｉｋｅａｄｈｅｓｉｏｎｃｅｌｍｏｌｅｃｕｌｅｇｅｎｅ，Ｌ１ＣＡＭ基因）完整的ｃＤＮＡ被克隆鉴定以来［１］，在短短的５年之内，分子遗传学的研究已证实Ｌ１ＣＡＭ基因...     

Bloom氏综合征分子遗传学研究进展

Ｂｌｏｏｍ氏综合征（ＢＳ）是一种常染色体隐性遗传的染色体不稳定性综合征。身材矮小，免疫功能低下，面部微血管扩张性红斑和易患肿瘤或白血病是其典型的临床特征。近年来，有关ＢＳ综合征细胞遗传学和分子遗传学的研究取得了长足的进展。Ｅｌｌｉｓ等克隆了ＢＳ综合征编码基因（ＢＬＭ基因）的全长ｃＤＮＡ，且发现ＢＬＭ基因的突变是ＢＳ综合征患者发病的分子遗传学基础，从而为ＢＳ综合征家族的遗传咨询和基因诊断及其产前基因     

性联免疫缺陷症的分子和遗传基础

本文介绍导致人类３种性联免疫缺陷症的特异性基因缺陷，其中无γ球蛋白血症（ＸＬＡ）由编码Ｂ细胞的特异性的酪氨酸激酶（ＢＴＫ）基因突变所致。高ＩｇＭ综合征（ＨＩＧＭ）系编码Ｔ细胞ＣＤ４０配体（ＣＤ４０Ｌ）基因突变引起，而严重联合免疫缺陷症（ＸＳＣＴＤ）则源自编码ＩＬ－２受体Ｖ链基因的突变，对这些患者分析所得的结果，既对遗传学诊断和处理该类疾病有所启迪，又是分析相关蛋白分子功能区和了解基因产物生理功能的     

性联免疫缺陷症的分子和遗传基础

本文介绍导致人类３种性联免疫缺陷症的特异性基因缺陷，其中无γ球蛋白血症（ＸＬＡ）由编码Ｂ细胞的特异性的酪氨酸激酶（ＢＴＫ）基因突变所致。高ＩｇＭ综合征（ＨＩＧＭ）系编码Ｔ细胞ＣＤ４０配体（ＣＤ４０Ｌ）基因突变引起，而严重联合免疫缺陷症（ＸＳＣＴＤ）则源自编码ＩＬ－２受体Ｖ链基因的突变，对这些患者分析所得的结果，既对遗传学诊断和处理该类疾病有所启迪，又是分析相关蛋白分子功能区和了解基因产物生理功能的重要资料。     

应用YAC探针进行荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病BCR基因重排

为检测慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）中ＢＣＲ基因重排，采用酵母人工染色体（ＹＡＣ）ＤＮＡ的Ｉｎ－ｔｅｒ－Ａｌｕ－ＰＣＲ产物为探针进行荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）研究了１０例ＣＭＬ，其中包括初诊患者２例，ＣＭＬ急变并接受化疗２例，α干扰素治疗２例，自体骨髓移植术（ＡＢＭＴ）后３例和Ｐｈ染色体阴性ＣＭＬ１例。同时进行细胞遗传学和ＲＴ－ＰＣＲ检测。结果：９例ＣＭＬ的４６％～１００％的可分析核型显示ｔ（９；２２）易位，其中携带ｔ（９；２２）细胞最少者为１例自体骨髓移植术后８个月的患者，其６４％的分裂相存在ｔ（９；２２），３６％为正常核型；１例Ｐｈ（－）ＣＭＬ未见ＢＣＲ基因易位，而ＲＴ－ＰＣＲ（＋），提示ＡＢＬ基因片段插入２２ｑ１１，造成隐匿性Ｐｈ染色体。结果表明：应用ＹＡＣ探针进行原位杂交的定位明确。ＦＩＳＨ检测微小残留病（ＭＲＤ）比常规细胞遗传学方法更敏感，而且可以完成ＰＣＲ方法不易进行的定量分析。     

FMR—1基因分子遗传学研究进展

ＦＭＲ－１基因（ＣＧＧ）ｎ结构的扩展是ＦＲＡＸＡ位点脆性现象出现和脆性Ｘ综合征患者发病分子遗传学基础，过去的几年中，ＦＭＲ－１基因的上述动态突变的研究已取得了长足的进展，已成为人类动态突变性疾病研究的范例；此外，ＦＭＲ－１基因的错义突变和缺失型突变也能导致脆性Ｘ综合征相同的临床表现，从而显示出表现为脆性Ｘ综合征临床征候的患者具有高度的遗传异质性，并使这些患者及其家系成员的基因诊断和产前基因诊断进一     

中国汉族乳腺癌中BRCA1基因的杂合性丢失和微卫星不稳定性

目的探讨中国汉族妇女乳腺癌与乳腺癌基因１的关系。方法对ＢＲＣＡ１区域内的４个微卫星多态位点，应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）－聚丙烯酰胺尿素凝胶电泳（ＰＡＵＧＥ）－ＤＮＡ银染方法，对上海市５０例乳腺癌患者进行了ＢＲＣＡ１有关微卫星的ＬＯＨ和ＭＳＩ研究。结果患者中ＬＯＨ的发生率为５８％，ＭＳＩ的发生率为４６％；对患者进行临床分组，发现病期越晚ＬＯＨ率越高，ＭＳＩ与临床分期的关系不很确定。结论提示中国汉族人的乳腺癌的发生同与ＢＲＣＡ１基因相连锁的微卫星ＤＮＡ有关，因而也可能与ＢＲＣＡ１基因的突变有关。     

骨肉瘤的分子遗传学研究进展

近年来骨肉瘤的分子遗传学研究有了显著的进展。除了对以往的抑癌基因ｐ５３，Ｒｂ进行了更深入的研究外，对其它基因在骨肉瘤中的作用也进行了广泛的研究。这包括ｐ１６抑癌基因的点突变，Ｃ－ｍｙｃ，ＭＤＭ２，ＳＡＳ，ＧＬＩ等癌基因扩增以及ｒａｓ，Ｃ－ｓｉｓ，Ｃ－ｒａｆ－１，Ｃ－ｆｏｓ等癌基因的改变。     

LFA—1／ICAM—1与T细胞发育

粘附分子ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１是发育期Ｔ细胞和胸腺基质细胞（ＴＳＣ）表重面要的膜分子之一，不同Ｔ细胞亚群和不同部位或类型的ＴＳＣ表面表达的水平各异，ＬＦＡ－１与配基ＩＣＡＭ－１的结合在介导Ｔ细胞与Ｔ细胞、Ｔ细胞与ＴＳＣ之间的相互作用（辅助信号传导）以及胸腺细胞克隆选择等过程中发挥重要作用。     

LFA－1／ICAM－1与T细胞发育

粘附分子ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１是发育期Ｔ细胞和胸腺基质细胞（ＴＳＣ）表重面要的膜分子之一，不同Ｔ细胞亚群和不同部位或类型的ＴＳＣ表面表达的水平各异，ＬＦＡ－１与配基ＩＣＡＭ－１的结合在介导Ｔ细胞与Ｔ细胞、Ｔ细胞与ＴＳＣ之间的相互作用（辅助信号传导）以及胸腺细胞克隆选择等过程中发挥重要作用。     

氧化修饰的低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白对单核细胞MCP-1表达的影响

为了研究氧化修饰的低密度脂蛋白（ＯＸ┐ＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ┐ＶＬＤＬ）对单核细胞的单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ┐１）ｍＲＮＡ和蛋白表达的影响。在单核细胞的培养基中分别加入２５μｇ／ｍｌ的ＬＤＬ、ＯＸ┐ＬＤＬ、ＶＬＤＬ和ＯＸ┐ＶＬＤＬ，培养２４小时后分别收集单核细胞及其条件培养基。参照异硫氰酸胍法提取单核细胞总ＲＮＡ，并用γ３２Ｐ末端标记ＭＣＰ┐１寡核苷酸探针，进行ｓｌｏｔｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析。同时用夹心ＥＬＩＳＡ检测其条件培养基中ＭＣＰ┐１蛋白含量。结果显示单核细胞能表达ＭＣＰ┐１，ＯＸ┐ＬＤＬ和ＯＸ┐ＶＬＤＬ能明显增强单核细胞表达ＭＣＰ┐１。而ＬＤＬ和ＶＬＤＬ的作用却很轻微。说明单核细胞能通过表达ＭＣＰ┐１，从而进一步招引其它的单核细胞迁入内皮下间隙，而ＯＸ┐ＬＤＬ和ＯＸ┐ＶＬＤＬ能加强这种作用。     

基因免疫诱导9.1C3分子内影像类抗独特型抗体的产生

本文分别采用真核表达载体ｐＥＦ－ＢＯＳ及ｐＣＭＶ４构建含起始码和终止码的抗９．１Ｃ３分子单克隆抗体重链可变区基因重组表达质粒９．１Ｃ３ＶＨｐＥＦ－ＢＯＳ及９．１Ｃ３ＶＨｐＣＭＶ４，并将其分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫小鼠血清对Ｋ５６２细胞进行间接免疫染色和流式细胞仪分析表明，基因免疫小鼠体内可诱导９．１Ｃ３分子内影像类抗独特型抗体的产生。     

Epstein—Barr病毒潜伏膜蛋白2A重组痘苗病毒转染DC及特异性CTL的体外诱导

通过ＥＢ病毒ＬＭＰ２Ａ重组痘苗病毒转染的ＤＣＳ体外诱导ＬＭＰ２Ａ特异性ＣＴＬ,并通过ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－４和ＴＮＦ－ａ培养体系,我们诱导出了人外周血单核细胞来源的ＤＣ。同时选用在鼻咽癌患者中表达的ＥＢ病毒潜伏蛋白之一ＬＭＰ２Ａ作为靶基因,利用重组痘苗病毒转染诱导的ＤＣＳ。ＤＣＳ与自体ＰＢＭＣＳ混合培养,在ＩＬ－２的刺激作用下获得特异性ＣＴＬ。结果如下：１．人外周血单核细胞经ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－４、ＴＮＦ－ａ的混合培养,１０天可获得成熟的功能性ＤＣＳ。ＦＡＣＳ检测显示ＤＣ表面相对特异性标志ＣＤ８３…     

慢性粒细胞性白血病急变的相关分子研究进展

慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ）是由ｔ（９，２２）（ｑ３４，ｑ１１）易位引起的一种血液系统恶性疾病。该易位重排形成的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因及其所编码的Ｐ２１０蛋白在ＣＭＬ发生中的作用已被确认。近年研究表明ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因、抑瘤基因（如ｐ５３，Ｒｂ，ｐ１６等）及其它分子（如ＥＶＩ１，ｃｍｙｃ等）均与ＣＭＬ急变有关。分析这些相关分子对ＣＭＬ急变的直接或间接影响，对ＣＭＬ的分子病理学及其治疗研究均具指导意义。     

IL—2,IL—4基因转染后肿瘤细胞表面ICAM—1分子的表达及其作用

为了进一步研究细胞因子基因转染后肿瘤细胞体内致瘤原性、免疫原性变化的分子机制，将ＩＬ－２、ＩＬ－４基因转染入Ｂ１６黑色素瘤细胞，观察了其体内接种后致瘤原性变化，通过ＦＡＣＳ法检测了其细胞表面粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达水平，分析了其细胞表面ＩＣＡＭ－１表达水平以及它们与肿瘤细胞对ＬＡＫ、ＣＴＬ等免疫效应细胞杀伤敏感性变化的关系。结果表明，ＩＬ－２、ＩＬ－４基因转染后Ｂ１６细胞体内致瘤原性明显     

hGM—CSF基因转导的人胃癌,肝癌细胞研究

ｈＧＭ－ＣＳＦ是一种细胞因子，能通过多种机制激活机体免疫功能。为了研究ｈＧＭ－ＣＳＦ修饰的人肝癌、胃癌细胞的免疫功能的变化，将含该基因的逆转录病毒载体ＬＸＳＮ转染ＰＡ３１７包装细胞，经Ｇ４１８筛选较高滴度病毒分泌株（滴度为１．５×１０４ＣＦＵ／ｍｌ），用病毒上清感染肝癌（ＨＨＣＬ）和胃癌（ＭＫＮ４５），筛选后测ｈＧＭ－ＣＳＦ活性，最高分别为２７１Ｕ／１０６细胞·２４小时和２４３．８０Ｕ／１０６细胞·２４小时。ｈＧＭ－ＣＳＦ基因在肝、胃癌细胞中整合，未发生重排。ＭＨＣ分子测定结果显示经修饰的肝癌ＨＨＣＬ细胞ＭＨＣ分子的表达无改变，而修饰后胃癌细胞ＭＫＮ４５的ＭＨＣⅠ类分子表达明显增加。本实验为今后瘤苗研制提供了资料。     

遗传性非息肉病性大肠癌分子病理学研究进展

遗传性非息肉病性大肠癌（ＨＮＰＣＣ）综合征是一种显性遗传性疾病，约１５％的大肠癌与该综合征相关，最近研究发现ＤＮＡ错配修复基因ｈＭＬＨ１和ｈＭＳＨ２突变与ＨＮＰＣＣ综合征发生有关，并认为ｈＭＬＨ１和ｈＭＳＨ２就是ＨＮＰＣＣ综合征基因。本文就此方面的研究进行综述。     

干燥综合征与粘膜相关型淋巴瘤临床病理分析

目的：探讨干燥综合征（ＳＳ）病理分析对诊断ＳＳ的意义、Ｍｉｋｕｌｉｃｚ病与粘膜相关淋巴组织（ＭＡＬＴ）型淋巴瘤的关系。方法：回顾性分析１５９例经病理证实的ＳＳ,对疑为ＭＡＬＴ型淋巴瘤的６例用免疫组化ＡＢＣ法标记,使用抗体ＬＣＡＬ－１、Ｌ２６及免疫球蛋白ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ和к、λ。结果：６例可疑病例中有４例发生ＭＡＬＴ型淋巴组化ＬＣＡ、Ｌ２６、ｂｃｌ－２、ＩｇＭ、к和ＩｇＭ、λ呈     

应用YAC探针进行荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病BCR…

为检测慢性粒细胞白血病中ＢＣＲ基因重排，采用酵母人工染色体ＤＮＡ的Ｉｎｔｅｒ－Ａｌｕ－ＰＣＲ产物为探针进行荧光原位杂交研究了１０例ＣＭＬ，其中包括初诊患者２例，ＣＭＬ急变并接受化疗２例，α干扰素治疗２例，自体骨髓移植术后３例和Ｐｈ染色体阴性ＣＭＬ１例，同时进行了细胞遗传学和ＲＴ－ＰＣＲ检测。     

PCR法检测EB病毒BNLF1基因

目前已建立分子杂交和ＰＣＲ检测ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｒ病毒（ＥＢＶ）ＤＮＡ的方法。近年来研究发现ＥＢＶ致癌作用与ＬＭＰ１蛋白的表达密切相关〔１〕。为此,我们针对ＥＢＶ表达ＬＭＰ１蛋白的ＢＮＬＦ１基因片段建立ＰＣＲ检测方法。１　材料与方法１１　标准病毒和对照病毒　含有ＥＢＶ的Ｒａｊｉ细胞系和带有ＰＧＥＭＩＢＮＬＦ１的菌种有美国国立卫生研究院（ＮＩＨ）Ｊａｃｋｓｏｎ博士赠送。ＨＣＭＶＡＤ１６９、ＨＳＶⅠ、ＶＺＶ购自于上海第二医科大学。１２　主要试剂与仪器　限制性内切酶ＳｔｙＩ,Ｍａｒｋｅｒ购…