三氧化二砷抑制肝癌细胞RhoC基因表达对其侵袭转移行为的影响

目的 观察三氧化二砷(As2O3)抑制肝癌HepG2细胞侵袭转移的作用及对转移相关基因BhoC表达的影响.方法 分别采用AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡,噻唑蓝(MTT)比色法、TransweU法检测As2O3对HepG2细胞黏附、迁移、侵袭能力的影响.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测AS2O3作用后HepG2细胞中RhoC基因表达的变化.结果 As2O3作用后HepG2细胞的早期凋亡细胞明显增多(P＜0.05),黏附、迁移及侵袭穿膜细胞数较对照明显减少(P＜0.01).As2O3作用4、6.8d后RhoC基因表达水平下降(P＜0.05).结论 As2O3可通过下调RhoC基因的表达及诱导细胞凋亡而抑制肝癌细胞的侵袭转移.     

RNA干扰PLK1基因表达对肝癌细胞增殖的影响

目的探讨靶向PLK1基因在肝癌基因治疗中的可行性。方法采用PLK1小干扰核糖核酸分子(siRNA)转染人肝癌HepG2细胞,分别以荧光实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因和蛋白的表达水平,观察PLK1 siRNA转染对肝癌细胞体外增殖的影响。并于转染不同时间后收集细胞,分别采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测肝癌细胞的凋亡情况。结果 PLK1基因明显抑制癌细胞体外生长(P0.05)。肝癌HepG2细胞经siRNA转染处理后,PLK1 mRNA和蛋白表达水平明显下降(P0.05)。DNA电泳出现明显的梯度图谱;转染组癌细胞凋亡指数明显增加。结论 PLK1 siRNA转染可明显抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡有关。本结果为肝癌以PLK1基因治疗提供了一条新的思路。     

人甲胎蛋白增强子驱动自杀基因靶向杀伤肝癌细胞的实验研究

目的 探讨人AFP增强子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷自杀基因系统体内外靶向杀伤肝癌细胞的效应.方法 构建人AFP增强子驱动的pAFP-cDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒;利用脂质体将质粒转染入AFP阳性肝癌细胞株HcpG2和AFP阴性肝癌细胞株SMMC7721;采用RT-PCR和Western blot检测TK mRNA和蛋白表达;MTT检测细胞的存活率;观察丙氧鸟苷对肝癌细胞体外增殖、生长曲线和细胞凋亡的作用,以及丙氧鸟苷体内抑制肿瘤生长的效应.采用t检验分析相关数据.结果 成功构建pAFP-cDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒并转染入肝癌细胞;AFP阳性肝癌细胞株HepG2中能检测到TKmRNA和蛋白表达;丙氧鸟苷呈剂量和时间依赖性抑制转染后肝癌细胞株HepG2的生长并诱导其凋亡;AFP阴性肝癌细胞株SMMC7721中没有TKmRNA和蛋白表达,细胞增殖、生长曲线和凋亡均不受影响,两者比较,差异有统计学意义(t=2.58,2.73,3.12,P＜0.05).丙氧鸟苷可以特异性地抑制转染后肝癌细胞株HepG2治疗组中肿瘤的生长,肿瘤抑制率为46%,而在转染后肝癌细胞株SMMC7721治疗组中,对肿瘤生长无明显抑制作用,两者比较,差异有统计学意义(t=3.36,P＜0.05).结论 人AFP增强子驱动的HSV-TK/丙氧鸟苷自杀基因系统可以靶向杀伤AFP阳性肝癌细胞,抑制肿瘤生长.     

三氧化二砷对肝癌HepG2细胞株RhoC、CD44v6及Ezrin基因表达的影响

目的 观察三氧化二砷(As2O3)对肝癌HepG2细胞中RhoC、CD44v6和Ezrin表达的影响,探讨As2O3抑制肝癌细胞侵袭、转移的机制.方法 采用RT-PCR法检测As2O3作用后RhoC、CD44v6及Ezrin mRNA表达水平的变化.以Western blot方法检测RhoC基因蛋白表达.结果 0.25mg/L As2O3作用4、6、8d后HepG2细胞RhoC mRNA及蛋白、CD44v6 mRNA表达水平较药物作用前均有不同程度降低(P<0.05),Ezrin mRNA表达水平均无明显变化(P＞0.05).结论 As2O3并非通过单一靶点发挥抗肝癌侵袭转移作用,可能与下调RhoC及CD44v6基因的表达有关.     

维生素K2联合5-氟尿嘧啶对肝癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响

目的探讨维生素K2(VK2)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对肝癌细胞体外增殖、迁移和侵袭的影响。方法体外培养人肝癌PLC/RAF/5细胞,分别用VK2(100μmol/L)、5-FU(10μg/m L)及VK2与5-FU联合用药处理细胞24 h,另设置不加药的细胞作为对照组,分别采用CCK-8法、划痕试验、Matrigel侵袭小室法检测细胞增殖、迁移及侵袭情况。结果 VK2或5-FU单独作用细胞后,PLC/RAF/5细胞增殖、迁移和侵袭能力较对照组均明显降低(P0.05);而与任一单独用药比较,VK2与5-FU联合用药对细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用均进一步明显增强(P0.05)。结论 VK2与5-FU联合应用可能成为抑制肝癌细胞生长、迁移和侵袭的有效方法。     

细胞分化帮助剂提高低浓度As2O3对肝癌细胞凋亡作用的体外实验

目的 研究细胞分化帮助剂（CDA-Ⅱ）促进低浓度三氧化二砷（As2O3）对肝癌细胞株HepG-2，BEL-7402凋亡的协同效应。方法 用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测单用CDA-Ⅱ或As2O3和联用对肝癌细胞株HepG-2，BEL-7402生长及抑制率的影响；用乳酸脱氢酶（LDH）法检测药物对细胞膜的毒性反应；流式细胞仪（FCM）分析细胞周期和凋亡率变化。结果 单用CDA-Ⅱ和As2O3分别为3．0mg／ml和50μmol／L时，肝癌细胞株BEL-7402，HepG-2发生凋亡达到最大值，而联用5μmol／LAs2O3＋1mg／mlCDA-Ⅱ可达到同样效果；结果显示：该浓度下HepG2的抑制率可达88％；BEL-7402的抑制率在100％；LDH检测表明联用比单用As2O310μmol／L更安全。流式细胞仪结果显示凋亡率联合组为40．2％，明显高于单用组As2O3（11．3％）或CDA-Ⅱ（8．7％）。结论 细胞分化帮助剂1mg／mlCDA-Ⅱ联用5μmol／LAs2O3可促进肝癌细胞株HepG-2，BEL-7402凋亡，可以明显降低As2O3的使用浓度，减少对正常细胞的毒副作用。二者联用具有协同作用。     

三氧化二砷对原发性肝癌的作用及其机理研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞系BEL-7402的影响及其作用机理,并观察不同应用途径对原发性肝癌患者的治疗效果。方法 观察As2O3作用后肝癌细胞的形态学改变、并通过流式细胞仪和DNA梯状电泳观察细胞凋亡的情况,应用逆转录聚合酶链式反应和荧光分光光度计检测半胱氨酸蛋白酶-3的变化情况。观察其对裸鼠移植瘤生长抑制的效果。并分别通过静脉滴注和动脉持续灌注观察其对原发性肝癌患者的治疗效果。结果 不同浓度的As2O3作用于肝癌细胞有明显的时间和剂量依赖性,发生作用后细胞生长明显受抑制,有明显的凋亡特征性改变;流式细胞仪分析存在G2／M期阻滞,在G1峰前出现明显的凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳出现明显的凋亡特征性梯状条带。随着As2O3作用时间的延长,半胱氨酸蛋白酶-3的mRNA无明显变化,而半胱氨酸蛋白酶-3蛋白质的活性逐渐增高。不同浓度的As2O3对于裸鼠肝癌移植模型有明显的抑制生长作用。对28例患者的静脉输注治疗可明显改善患者的生存质量,并且具有毒副作用小的特点。43例动脉灌注治疗患者中,30例肿瘤体积缩小或不变,有效率为69．8％,19例甲胎蛋白下降或降至正常。结论 As2O3可明显抑制肝癌细胞的生长,其机理主要是诱导肝癌细胞凋亡;凋亡的可能机理是通过半胱氨酸蛋白酶-3起作用,作用位点是在酶的前体水平;应用As2O3连续区域化疗对原发性肝癌有很好的治疗效果。     

槐耳清膏体外诱导人肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 观察槐耳清膏在体外对人肝癌细胞株HepG-2凋亡的影响,为槐耳清膏在临床上治疗肝肿瘤提供理论依据.方法 采用MTT法、TUNEL法及流式细胞术,观察不同浓度的槐耳清膏对体外培养的人肝癌细胞株HepG-2的生长活力、细胞凋亡、DNA合成能力的影响;琼脂糖凝胶电泳检测DNA-LADDER的形成.结果:槐耳清膏在体外能抑制人肝癌细胞HepG2的生长,并具有时间及剂量依赖性;发生作用后,细胞生长有明显的凋亡特征性改变;细胞DNA的合成能力下降.结论:槐耳清膏能有效地抑制体外肝癌细胞生长,其机制可能与抑制肝癌细胞DNA合成及诱导肝癌细胞凋亡有关.     

三氧化二砷诱导人胃癌MKN45细胞凋亡及其分子机制的初步研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)对人胃癌细胞的生物学效应及其作用机制。方法胃癌细胞经As2O3处理后,用台盼蓝方法检测As2O3的IC50,采用流式细胞仪、DAPI荧光染色、原位末端标记(TUNEL)及DNA电泳检测细胞凋亡。结果As2O3在一定浓度范围内以浓度依赖的方式抑制胃癌细胞生长,其IC50为(11.05±0.25)μmol/L。经1～10μmol/LAs2O3处理胃癌细胞后,流式细胞仪检测出凋亡峰,流式细胞光度计下可见明显的凋亡细胞形态特征,琼脂糖凝胶电泳出现DNA梯形条带。结论As2O3在体外可诱导胃癌细胞的凋亡,这是其对胃癌细胞产生生物学效应的基础。     

ω-3多不饱和脂肪酸对肝癌细胞生长抑制的作用及机制

目的 探讨ω-3多不饱和脂肪酸对肝癌细胞生长增殖的抑制作用及机制.方法 采用MTT法、生长曲线和PCNA免疫组织化学法观察ω-3多不饱和脂肪酸对肝癌细胞HepG2生长增殖的影响,并用荧光染色、透射电镜和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 DHA和EPA分别在15～75μg/mL浓度范围内呈剂量-时间依赖性方式抑制HepG2细胞的生长增殖.DHA和EPA(45μg/mL)作用48 h后,荧光染色与透射电镜可见部分HepG2细胞呈典型的凋亡形态学改变.流式细胞仪检测:与对照组比较,DHA和EPA分别在浓度45 μg/mL和60μg/mL作用48 h后,细胞凋亡率显著升高(P＜0.05).结论 ω-3多不饱和脂肪酸能显著抑制肝癌细胞生长,并诱导其凋亡.     

三氧化二砷抑制肝癌细胞侵袭转移的实验研究

目的了解三氧化二砷（As2O3）对肝癌HepG2细胞体外黏附、侵袭和迁移的抑制作用。方法采用MTT法观察As2O3对HepG2细胞黏附能力的影响,以Transwell检测As2O3对HepG2细胞迁移、侵袭能力的影响。结果As2O3作用后30、60、90、120min时的细胞黏附率较对照组均明显下降,不同时间组与对照组之间差异均有显著性（P〈0.05）;As2O3作用后游走及侵袭穿膜细胞数也较对照组明显下降（P〈0.01）。结论As2O3可明显抑制HepG2细胞细胞黏附、迁移和侵袭的能力。     

Novel combination of cyclooxygenase-2 and MEK inhibitors in human hepatocellular carcinoma provides a synergistic increase in apoptosis

Cyclooxygenase-2 (COX-2) and ERK-MAPK mitogenic signaling pathways are important in human hepatocellular carcinoma. We investigated the effect of COX-2 inhibition on ERK-MAPK signaling and the effect of combining MEK (MAPK kinase) and COX-2 inhibitors in human hepatocellular carcinoma in vitro. COX and ERK expression were determined by immunoblot in HepG2 and Hep3B cells. COX-2 and MEK activity were determined by prostaglandin E2 assay and phosphospecific immunoblot, respectively. Cell growth was determined by cell proliferation and cell counts. Apoptosis was determined by DNA fragmentation enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry. Cell cycle was determined by flow cytometry. HepG2 and Hep3B cells do not express COX-1 or COX-2. Correspondingly, basal and agonist (arachidonic acid, lipopolysaccharide)-stimulated COX-2 activity is undetectable. Treatment of HepG2 and Hep3B cells with NS398 resulted in an increase in ERK1/2 phosphorylation (MEK activity) in a concentration-dependent fashion (NS398, 1 to 100 μmol/L). Treatment with the COX-2 inhibitor NS398 in the presence of U0126 (MEK inhibitor) effectively suppressed ERK1/2 phosphorylation as determined by phosphospecific ERK1/2 immunoblot. Total ERK1/2 and COX-2 were unchanged with NS398 and U0126 treatments. In HepG2 cells, NS398 (1 to 100 μmol/L) decreased apoptosis as determined by DNA fragmentation enzyme-linked immunosorbent assay. Relative apoptosis was increased with U0126 alone or in combination with NS398 (9 to 10 times the control value), eliminating the anti-apoptotic effect of NS398. In Hep3B cells, apoptosis was unchanged with NS398 (1 to 50 μmol/L) or U0126 (1 to 10 μmol/L) alone. The combination of NS398 and U0126 in Hep3B cells resulted in a synergistic increase in apoptosis (10 times the control value). Relative apoptosis in both cell lines strongly correlated with changes in the expression of the antiapoptotic protein Bcl-xL. Cellular growth was assessed by colorimetric proliferation assay and cell counts. HepG2 and Hep3B cells had concentration-dependent inhibition of cell growth with NS398 or U0126 treatment alone. The combination of NS398 and U0126 resulted in complementary inhibitory effects on growth. Growth inhibitory effects in HepG2 and Hep3B cells with combination treatment appear to be, in part, secondary to the induction of G₀/G₁ and G₂/M cell cycle arrest, respectively, as determined by flow cytometry. Despite differential signaling in HepG2 and Hep3B cells, the sum effect of combining the COX-2 inhibitor NS398 and the MEK inhibitor U0126 results in enhanced antitumor actions. This novel combination may be useful for in vivo studies of hepatocellular carcinoma. Presented at the Forty-Fourth Annual Meeting of The Society for Surgery of the Alimentary Tract, Orlando, Florida, May 18–21, 2003. Supported by a grant from the Walther Oncology Center, Indianapolis, Indiana.     

三氧化二砷对肝癌细胞CD44v6、Ezrin基因表达的影响

目的 观察肝癌HepG2细胞转移相关基因CD44v6、Ezrin mRNA表达及三氧化二砷(As2O3)对其表达的影响.方法 以逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HepG2细胞中CIM4v6、Ezrin基因mRNA的表达及As2O3作用后其表达水平的变化.结果 HepG2细胞CD44v6及Ezrin mRNA均有表达.CD44v6-mRNA表达水平为1.57±0.47;经0.25 mg/L As2O3作用4、6、8 d后其表达水平分别下降到0.95±0.25、0.90±0.24和0.63±0.19(P<0.05),下降水平呈时间依赖;Ezrin-mRNA表达水平为0.70±0.18,加入0.25 mg/L的As2O3 4、6、8 d后,表达水平分别为0.70±0.21、0.75±0.22和0.71±0.20,各时间段Ezrin-mRNA的表达水平无明显变化(P>0.05).结论 As2O3可显著下调HepG2细胞CD44v6-mRNA的表达,对Ezrin-mRNA的表达可能无直接调节作用.     

APOBEC3G基因对HepG2.2.15细胞生物学行为的影响

目的 观察HepG2.2.15细胞在高表达APOBEC3G后,APOBEC3G对细胞生长迁移能力、细胞周期和凋亡现象等生物学行为的影响.方法 将真核表达载体pcDNA3.1-APOBEC3G转染入HepG2.2.15细胞中,应用有限稀释法筛选高表达APOBEC3G的HepG2.2.15细胞,并通过Western blot鉴定.应用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;应用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞株生长能力;应用划痕法观察细胞迁徙运动能力.结果 HepG2.2.15-APOBEC3G细胞(pcDNA3.1-APOBEC3G转染)和HepG2.2.15-pcDNA3.1细胞(空载体转染),与HepG2.2.15细胞(空白对照)比较,细胞周期无明显变化[各期细胞所占比例分别为:G0/G1:(64.27±1.26)%比(64.18±1.24)%比(64.09±1.30)%,P＞0.05;S:(23.16±1.38)%比(22.67±1.41)%比(23.27±1.43)%,P＞0.05;G2/M:(11.36±1.26)%比(11.84±1.31)%比(11.37±1.22)%,P＞0.05],未见细胞凋亡现象,细胞的生长增殖无明显变化(P＞0.05),细胞迁徙运动能力无明显变化[24h及48 h细胞迁移抑制率分别为:(7.5±3.7)%比(10.2±5.5)%,P＞0.05;(13.4±6.5)%比(17.8±9.2)%,P＞0.05].结论 高表达APOBEC3G对HepG2.2.15细胞生物学行为无明显影响.     

三氧化二砷诱导肝癌细胞株凋亡的实验研究

目的明确三氧化二砷对人肝癌细胞体外生长的影响，并探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝法、^3H-TdR掺入法、TUNEL法、透射电镜观察及流式细胞术，观察不同浓度的三氧化二砷对体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721的生长活力、细胞凋亡、DNA合成能力的影响。结果三氧化二砷能显著地抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长，并且具有时间和剂量依赖性；发生作用后，细胞生长有明显的凋亡特征性改变；细胞DNA合成能力下降。结论三氧化二砷能有效地抑制体外肝癌细胞生长，其机制可能与抑制肝癌细胞DNA合成及诱导肝癌细胞凋亡有关。     

含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽白细胞介素-24突变体蛋白对肝癌细胞抑制作用

目的 观察含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽模体的白细胞介素(IL)-24突变体蛋白(RGD-IL-24)对肝癌细胞的抑制作用.方法 肝癌HepG2细胞分别加入各10μl的RGD-IL-24(8 mg/L)、IL-24(8 mg/L)和磷酸盐缓冲液(PBS),噻唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞生长抑制作用;DAPI染色检测HepG2细胞凋亡;免疫印迹法检测HepG2细胞bax、bcl-2及Caspase-3蛋白表达;黏附实验检测与HepG2细胞的靶向黏附.结果 RGD-IL-24、IL-24治疗4 d后HepG2细胞存活率分别为(0.219±0.015)、(0.397±0.009),与对照组(0.823±0.013)比较差异有统计学意义(P<0.01).RGD-IL-24、IL-24治疗组细胞凋亡率分别为(0.631±0.027)、(0.472±0.031),与对照组(0.082±0.013)比较差异有统计学意义(P<0.01).RGD-IL-24抑制HepG2细胞生长、诱导凋亡效果均比IL-24显著增强(P<0.05).与IL-24治疗组比较,RGD-IL-24治疗组HepG2细胞促凋亡蛋白bax增加、抗凋亡蛋白bcl-2减少、活化Caspase-3蛋白量增加.黏附实验证实RGD-IL-24与HepG2细胞的靶向结合作用增强.结论 含RGD肽模体的IL-24蛋白能通过与肝癌HepG2细胞的靶向结合增强其凋亡诱导作用.     

绿脓杆菌菌毛株对肝癌细胞Hep-2生长的抑制作用

目的 观察绿脓杆菌菌毛株菌苗(PA-MSHA)对人肝细胞癌细胞株HepG-2的抑制作用及机制.方法 噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制情况.原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况;透射电镜观察细胞超微结构.Western blot法检测bcl-2、bax、Caspase-3蛋白表达;裸鼠移植瘤内及瘤周药物注射观察不同药物浓度及作用时间的体内抑瘤作用.结果 肿瘤细胞的抑制率与药物浓度和作用时间成正比;高、低浓度实验组和对照组凋亡率差异有统计学意义(P＜0.01);电镜观察可见经PA-MSHA作用后的HepG2细胞呈现典型的凋亡表现;PA-MSHA作用后可引起bax、Caspase-3蛋白表达上调,bcl-2蛋白表达下调;高浓度PA-MSHA可明显抑制裸鼠移植瘤的生长,17 d抑瘤率为60%.结论 PA-MSHA可明显抑制HepG-2细胞的生长,诱导凋亡是其另外一个作用机制.     

三氧化二砷与阿霉素对人肝癌细胞株HepG2中survivin表达的影响

目的探讨三氧化二砷与阿霉素诱导肝癌细胞凋亡的可能机制。方法用不同浓度的As2O3或／和ADM干预人肝癌细胞株HepG2不同时间，以免疫细胞化学和RT—PCR方法检测HepG2细胞中survivin表达的改变。结果(1)未加药物干预之前，HepG2细胞中可见survivin强烈表达；(2)不同浓度的As2O3或ADM均可降低HepG2细胞survivin表达程度，并且随药物浓度的增加或作用时相的延长，降低程度更明显；浓度与时相之间存在交互作用；(3)ADM降低HepG2细胞survivin表达的作用比As2O3更明显，两者联用后，作用进一步增强。结论(1)单用As2O3或ADM均可降低HepG2细胞中survivin表达，并呈浓度和时间依赖性；(2)相同浓度下，ADM对HepG2细胞中survivin表达的减弱作用较As2O3更强，但两者的联用较单用者能更显著降低survivin表达；(3)As2O3和ADM可能通过下调survivin表达而参与诱导癌细胞凋亡，从而发挥其抗癌作用；两者联用有叠加抗癌作用，从而可降低各自的临床使用剂量。     

乙型肝炎病毒x蛋白对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨乙型肝炎病毒x蛋白 (hepatitisBvirusxprotein ,HBx)在体内外对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将携带HBx基因的表达质粒 pHA HBx转染HepG2细胞 ,通过检测细胞生长曲线、倍增时间和3 H TdR掺入率观察HBx对细胞增殖活性的影响 ;将整合HBx基因的HepG2细胞接种裸鼠 ,建立表达HBx的人肝癌裸鼠模型 ,用阿霉素进行裸鼠腹腔化学药物治疗 ,观察肝癌组织的生长状况 ;用TUNEL方法检测切除的裸鼠癌标本中凋亡细胞的比例。结果转染HBx基因的HepG2细胞倍增时间为 2 8 5h ,对照组为 32 5h ;3 H TdR掺入率 :转染HBx基因组为 (10 2 1± 78)cpm ,对照组为 (85 9± 6 9)cpm ,转染组细胞明显高于对照组细胞 (t =2 5 4 ,P <0 0 1) ;转染HBx基因的细胞在裸鼠体内形成的癌重量为 (3 10± 0 39) g ,对照组癌重量为 (2 6 1± 0 2 8) g ,两组之间差异有显著意义 (t=2 0 3,P <0 0 5 ) ;裸鼠腹腔化学药物治疗后 ,转染组的癌细胞凋亡为 3 5±0 75 ,对照组为 2 2 5± 6 5 ,转染HBx基因的细胞凋亡明显减少 (χ2 =6 6 9,P <0 0 1)。结论HBx可以提高HepG2细胞的增殖活性 ,促进裸鼠体内肝癌生长 ,对阿霉素诱导的肝癌细胞凋亡具有抑制作用。     

槐耳清膏联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对肝癌细胞生长的影响

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）联合中药槐耳清膏对肝癌细胞株HepG2及肝癌耐阿霉素（ADM）细胞株（HepG,．ADM）的作用。方法通过培养液中ADM的浓度梯度递增法筛选培养,建立肝癌细胞HepG2-ADM耐药细胞株;TRAIL,TRAIL＋ADM,TRAIL＋槐耳清膏分别处理肝癌细胞株HepG2、HepG,-ADM及正常肝细胞株L02,噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果联合用TRAIL（100ng／L）和槐耳清膏（1．0g／L）处理肝癌细胞株HepG2-ADM及肝细胞株L02,MTT显示对前者增殖有明显抑制作用,而对后者无明显作用;流式细胞仪检测TRAIL联合槐耳清膏处理HepG2、HepG2-ADM,可诱导细胞凋亡,与其他组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论槐耳清膏可显著增强TRAIL对HepG2及HepG2-ADM的杀伤作用,而对正常胎肝细胞株L02杀伤作用轻微,TRAIL和槐耳清膏联合应用可望克服肿瘤细胞中存在的化学治疗药物耐药和TRAIL耐受问题。