苍耳子水提液对过敏性鼻炎小鼠的治疗作用及机制研究

[目的] 探讨苍耳子(Xanthii Fructus，XF)水提液对过敏性鼻炎(allergic rhinitis，AR)小鼠的治疗作用及机制。[方法] 36只BALB/c小鼠随机分为正常对照(normal control，NC)组、AR组、低剂量XF水提液(low-dose XF，L-XF)组(4 mg·kg-1)、中剂量XF水提液(medium-dose XF，M-XF)组(8 mg·kg-1)、高剂量XF水提液(high-dose XF，H-XF)组(16 mg·kg-1)和地塞米松(dexamethasone group，DXM)组(5 mg·kg-1)，每组6只。除NC组外，余下各组小鼠均用卵清白蛋白(ovalbumin，OVA)致敏进行AR造模，随后治疗14 d。治疗结束后，记录小鼠搔鼻和喷嚏次数，并进行鼻炎症状评分；取小鼠鼻腔组织，行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色和糖原(periodic acid-schiff，PAS)染色观察小鼠鼻腔组织学形态变化并评分，中性红染色观察肥大细胞脱颗粒情况，并计算各组药物脱颗粒抑制率；酶联免疫吸附试验检测小鼠血清白三烯C4、组胺及β-氨基己糖苷酶A水平；免疫印迹法检测鼻腔组织T细胞激活连接蛋白(linker for activation of T cell，LAT)、磷酸化LAT(phospho-LAT，p-LAT)、磷脂酶Cγ1(phospholipase Cγ1，PLCγ1)、磷酸化PLCγ1(phospho-PLCγ1，p-PLCγ1)、蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)、磷酸化PKC(phospho-PKC，p-PKC)蛋白的表达。 [结果] 与NC组比较，AR组小鼠的搔鼻、打喷嚏次数显著增加，鼻炎评分显著升高，HE评分以及PAS评分均显著升高，血清白三烯C4、组胺、β-氨基己糖苷酶A水平显著升高，肥大细胞脱颗粒率显著升高，p-LAT/LAT、p-PLCγ1/PLCγ1、p-PKC/PKC的蛋白表达显著升高(P＜0.01)。与AR组比较，各组小鼠搔鼻、打喷嚏次数，以及肥大细胞脱颗粒率显著减少(P＜0.05，P＜0.01)；M-XF组、H-XF组、DXM组的鼻炎评分显著下降，HE评分以及PAS评分显著降低，血清白三烯C4、组胺、β-氨基己糖苷酶A水平显著下降(P＜0.05，P＜0.01)；M-XF组、H-XF组、DXM组的药物脱颗粒抑制率显著高于L-XF组(P＜0.05，P＜0.01)。免疫印迹显示，与AR组比较，各组小鼠鼻腔组织的p-PKC/PKC蛋白表达显著下降(P＜0.05，P＜0.01)，M-XF组、H-XF组、DXM组小鼠鼻腔组织的p-LAT/LAT、p-PLCγ1/PLCγ1的蛋白表达显著下降(P＜0.05，P＜0.01)。 [结论] XF水提液可能通过抑制LAT/PLCγ1/PKC信号通路的表达，抑制肥大细胞脱颗粒，从而改善小鼠AR症状。     

鼠李糖乳杆菌对过敏性鼻炎小鼠模型的免疫调节作用

目的 探讨鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus GG,LGG)对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠模型的免疫调节作用. 方法 6~8周龄BALB/c小鼠,随机分为阴性对照组、LGG组及AR组,每组各10只.采用Luminex法检测各组血清IL-4 、IL-10和IFN-γ水平.ELISA测血清OVA特异性IgE(OVA-sIgE)水平,采用流式细胞术检测脾细胞悬液中CD4+CD25+ T细胞比例.结果 与AR组比较,LGG可明显降低血清IL-4、IL-10及OVA-SIgE水平(P<0.05),提高脾细胞悬液中CD4+CD25+ T细胞比例( P<0.05);LGG组血清IFN-γ水平与AR组比较,差异无统计学意义(P=0.215).结论 LGG能通过抑制Th2细胞反应及增强CD4+CD25+ T细胞活性发挥抗过敏作用.     

miR-34a在过敏性鼻炎小鼠中表达及治疗的作用研究

目的 探讨miR-34a在过敏性鼻炎小鼠中表达及治疗作用。方法 选取10只小鼠作为空白对照组,30只小鼠采用卵清蛋白构建小鼠过敏性鼻炎模型,随机分为模型组、miR-34a抑制剂组及阴性对照组(NC组)各10例,分别给予100μl生理盐水、100μl阴性转染质粒、100μl miR-34a抑制剂载体混合溶液尾部静脉注射。干预1周后观察小鼠行为学变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中卵清蛋白特异性IgE水平;qRT-PCR检测小鼠血清中白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、IL-35,基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及血管细胞黏附分子(VCAM)-1 mRNA相对表达。流式细胞仪检测外周血CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞含量。结果 模型小鼠血清miR-34a mRNA水平较空白组增加(P<0.05),与阴性对照组相比,miR-34a抑制剂干预后小鼠行为学总分降低(P<0.05),血清中卵清蛋白特异性IgE浓度降低(P<0.05),同时IL-6、IL-8、IL-10、MMP-2、MMP-9及VCAM-1 mRNA下降(P<0.05)...     

山药水提物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的改善作用

目的：研究山药水提物（aqueousextract of Dioscoreabatatas，DA）对四氯化碳（CCl4）造成的小鼠急性肝损伤的改善作用。方法：60只昆明小鼠随机均分为6组：正常对照组、造模组、阳性对照组（联苯双酯组）、不同提取工艺的山药水提物A、B、C组，用四氯化碳造成小鼠急性肝损伤模型，测定血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量。肝组织常规HE染色观察。结果：各组肝损伤模型小鼠经山药水提物A、B、C及联苯双酯干预后，血清ALT、AST水平与造模组相比显著降低（P〈0．05），肝组织中SOD活性升高，MDA含量降低（P〈0．05），镜检观察山药水提物A、B、C及联苯双酯组小鼠肝组织病理切片，发现山药水提物A、B、C及联苯双酯组较造模组肝组织损伤坏死明显减轻，坏死灶减少，范围减小，粒细胞浸润减少，并且山药水提物A组较B、C2组干预肝损伤效果好。结论：山药水提物能明显改善CCl4所致急性肝损伤小鼠的肝功能状况，其作用可能与抗氧化清除自由基、和增强机体清除自由基的能力有关。     

大蒜水提物对小鼠腹泻治疗作用的实验研究

目的探讨大蒜水提物对腹泻的治疗作用。方法大肠杆菌菌液腹腔注射法制作小鼠腹泻模型，观察小鼠的一般状态和行为，记录大便次数、稀便数，计算腹泻率、稀便率及腹泻指数，研究大蒜水提物对小鼠腹泻的治疗作嗣。结果大蒜水提物可使腹泻小鼠大便次数减少、便质有稀转干、精神状态转好。与模型组比较，大蒜水提物高、中剂量组的腹泻指数低于模型组，组间比较有显著性差异（P〈0．05）。结论大蒜水提物对腹泻有治疗作用。     

韭菜子醇提物对去势小鼠性功能障碍的改善作用

目的:初步探讨韭菜子醇提物对去势小鼠性功能障碍的改善作用。方法:建立氢化可的松致肾阳虚雄性小鼠模型,观察韭菜子醇提物对肾阳虚小鼠肾上腺、免疫器官、性器官及附性器官重量的影响。观察韭菜子醇提物对幼年雄性小鼠性腺器官重量及去势小鼠附性器官重量的影响。结果:韭菜子醇提物高剂量组可明显增加幼年雄性小鼠体重,增加幼年雄性小鼠睾丸(附睾)、精囊腺、包皮腺的重量。韭菜子醇提物高剂量组可增加去势小鼠包皮的重量,高剂量组可增加去势小鼠精液囊的重量。结论:韭菜子对去势小鼠的性功能有一定的改善作用。     

针药结合对过敏性鼻炎症状改善的对照研究

目的：比较针药结合与单纯中药改善过敏性鼻炎症状的差别。方法：将合适的受试者随机分为治疗组（针刺加中药组）、对照组（单纯中药组）各30例,观察两组的症状改善情况。结果：治疗组在改善过敏性鼻炎喷嚏和鼻堵症状上与对照组比较差异有非常显著性（P〈0．01）,治疗组在改善过敏性鼻炎流涕症状上与对照组比较差异有显著性（P〈0．05）,治疗组在改善过敏性鼻炎鼻痒症状上与对照组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论：针刺加中药治疗治疗过敏性鼻炎优于单纯的中药治疗。     

马齿苋水提物对氧自由基清除作用的研究

采用连苯三酚在碱性溶液中自氧化反应产生超氧阴离子自由基,用邻二氮菲－Ｆｅ（Ⅱ）／Ｈ２Ｏ２体系产生羟自由基,用分光光度法监测鲜马齿苋水提物和经沸水处理后的马齿苋水提物对Ｏ＾－２和ＯＨ的作用。     

PD-L1对过敏性鼻炎小鼠Treg/Th17细胞免疫失衡调节作用研究

目的:探讨PD-L1对过敏性鼻炎小鼠Treg/Th17细胞免疫失衡的调节作用。方法:将30只BALB/c小鼠随机分三组,模型组和PD-L1重组蛋白干预组给予卵清蛋白(OVA)诱发过敏性鼻炎,PD-L1重组蛋白干预组给予PD-L1重组蛋白进行处理;正常对照组在相同时间点给予生理盐水。采用叠加量化记分法进行搔鼻、喷嚏及鼻溢症状评价;采用HE染色观察鼻黏膜组织的病理变化,采用免疫组化检测鼻黏膜组织PD-1和PD-L1的表达;Western blot检测鼻粘膜组织pAKT、、AKT、mTOR、p-mTOR的表达;RT-PCR检测鼻黏膜组织调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)重要转录因子Foxp3、RORγt表达;ELISA法检测血清IL-10、IL-17A、IL-6的水平。结果:正常对照组、模型组、PD-L1重组蛋白干预组行为学评分分别为0、(6.33±1.15)、(3.67±0.58)分,组间比较具有统一学意义(P<0.05)。与正常对照组相比较,模型组鼻粘膜组织损伤严重,鼻粘膜组织中PD-1、PD-L1和Foxp3的表达下降,RORγt、p-AKT、p-mTOR的表达增加,血清IL-10水平下降,血清中IL-17A、IL-6的水平升高,AKT、mTOR的表达无明显变化。与模型组相比较,PD-L1重组蛋白干预组鼻粘膜组织损伤减轻,鼻粘膜组织中PD-1和PD-L1和Foxp3的表达上升,RORγt、p-AKT、p-mTOR表达下降,血清IL-10水平升高,血清中IL-17A、IL-6的水平下降;组间比较差异显著(P<0.05);AKT、mTOR无明显变化。结论:PD-L1通过抑制AKT-mTOR信号进而促进Treg的分化抑制过敏性鼻炎的发生和发展。     

过敏性鼻炎患者吸入物sIgE和食物sIgG检测的临床意义

目的探讨过敏性鼻炎患者吸入物sIgE及食物sIgG检测的临床意义。方法采集过敏性鼻炎患者静脉血,分离血清,ELISA法检测吸入物sIgE和食物sIgG。结果 116例过敏性鼻炎患者吸入物sIgE过敏原总阳性率43.90%,其中各指标阳性率由高到底依次为：尘螨/粉螨36.21%,屋尘12.93%,猫/狗毛皮屑9.48%,普通豚草/蒿属植物8.62%,点青霉/交链孢霉/黑根霉5.17%,蟑螂/蚊子4.31%,白桦/榆树/梧桐/桉树/桑树2.59%;食入物sIgG总阳性率82.93%,其中各指标阳性率由高到低依次为：蛋清/蛋黄60.34%,牛奶59.48%,鱼29.31%,虾12.07%,花生11.21%,牛肉5.17%,大豆4.31%。结论连云港地区过敏性鼻炎患者吸入物过敏原以尘螨/粉螨、屋尘、猫/狗毛皮屑为主,过敏性鼻炎患者存在食物不耐受现象,可能参与了过敏性鼻炎的发病机制。     

卷丹水提物活血化瘀药理作用及对小鼠耐力的影响

目的：研究卷丹水提物的活血化瘀药理作用，以及对小鼠耐力的影响。方法：大鼠随机分成5组：卷丹水提物高、低剂量组，华佗再造丸组（阳性对照），空白对照组。灌胃法给药15天。心脏取血．采用凝固比浊法对APTT、PT进行测定，用Derive法测定FIB；全自动血细胞计数仪测定血小板数。小鼠随机分成4组：卷丹水提物高、低剂量组，刺五加组（阳性对照），空白对照组。灌胃法给药15天。测定各组小鼠负重100,4体重游泳时间。结果：卷丹水提物高剂量组能显著延长AP订（P〈0．05），但对PT、FIB和血小板数无明显影响。卷丹水提物高、中剂量组能显著延长小鼠负荷游泳时间（P〈0．05）。结论：卷丹水提物具有活血化瘀的药理作用，表现为延长内源性凝血时间。卷丹水提物可增强小鼠的耐力。     

干姜水提物解热镇痛作用的实验研究

目的观察干姜水提物的解热和镇痛作用。方法采用大鼠干酵母致热法,观察干姜水提物的解热作用;应用小鼠醋酸扭体法和小鼠光辐射热甩尾法,观察干姜水提物的镇痛作用。结果干姜水提物低剂量组：随着时间的推移,体温有下降的趋势（F=7.21,P〈0.01）;干姜水提物高剂量组：大鼠在给药后第1小时体温显著降低（P〈0.05）,但给药后第2,3,4小时体温下降不明显（F=1.28,P〉0.05）;吲哚美辛组的大鼠在给药后的第1、2、3、4小时体温均明显降低（F=2.89,P〈0.05）。干姜水提物组明显减少发生醋酸扭体反应的鼠数（P〈0.05）,显著提高小鼠光辐射热甩尾反应的痛阈（P〈0.05）。结论干姜水提物具有解热镇痛作用。     

干姜水提物解热镇痛作用的实验研究

目的观察干姜水提物的解热和镇痛作用。方法采用大鼠干酵母致热法,观察干姜水提物的解热作用;应用小鼠醋酸扭体法和小鼠光辐射热甩尾法,观察干姜水提物的镇痛作用。结果干姜水提物低剂量组:随着时间的推移,体温有下降的趋势(F=7.21,P<0.01);干姜水提物高剂量组:大鼠在给药后第1小时体温显著降低(P<0.05),但给药后第2,3,4小时体温下降不明显(F=1.28,P>0.05);吲哚美辛组的大鼠在给药后的第1、2、3、4小时体温均明显降低(F=2.89,P<0.05)。干姜水提物组明显减少发生醋酸扭体反应的鼠数(P<0.05),显著提高小鼠光辐射热甩尾反应的痛阈(P<0.05)。结论干姜水提物具有解热镇痛作用。     

石菖蒲水提物对PC12细胞增殖及细胞突起的作用

目的研究石菖蒲水提物对PC12细胞增殖及细胞突起的作用,观察药物是否具有神经营养功能或促进细胞分化的功能。方法采用细胞计数试剂盒检测不同浓度的石菖蒲水提物对细胞活力的影响;采用Image J软件统计PC12细胞的梭型细胞率、细胞分化率、细胞突起长度及阳性细胞分化率,以评价石菖蒲水提物对细胞分化的影响。结果石菖蒲水提物在完全培养条件和低血清培养条件下对PC12细胞增殖有显著的促进作用,对细胞突起的长出、分支、延伸有明显的抑制作用。结论石菖蒲水提物具有一定的神经营养功能。     

辛夷鼻炎湿巾改善过敏性鼻炎模型大鼠鼻部继发症状的实验研究

目的:探讨辛夷鼻炎湿巾对过敏性鼻炎模型大鼠鼻部继发红肿、瘙痒、流涕等症状的改善情况。方法:70只大鼠随机分为正常组和造模组,参照文献方法建立相关大鼠鼻炎模型,造模成功后,随机分为空白对照组、辛夷高剂量组、辛夷中剂量组、辛夷低剂量组、生理盐水组和干燥纸巾组,分别给予辛夷高、中、低剂量湿巾和生理盐水湿巾、干燥纸巾进行擦拭,观察大鼠打喷嚏,鼻部红肿和挠鼻情况。结果:与空白对照组相比,辛夷高剂量和中剂量湿巾均能有效缓解大鼠鼻部红肿症状,与干燥纸巾组比较,辛夷高剂量能够改善大鼠的挠鼻症状(P0.05),但各组对大鼠喷嚏症状的改善较差。结论:辛夷鼻炎高剂量湿巾组能够有效缓解过敏性鼻炎大鼠鼻部继发红肿和瘙痒症状。     

龙胆草水提物的抗炎解热作用研究

目的：观察龙胆草水提物的抗炎、解热作用。方法：采用大鼠足趾肿胀法和小鼠耳廓肿胀法观察龙胆草水提物的抗炎作用,采用2,4-二硝基苯酚致大鼠发热法观察龙胆草水提物的解热作用。结果：龙胆草水提物能显著抑制角又菜胶所致的大鼠足趾肿胀,给药30分钟后,阳性对照组和龙胆草高低剂量组的肿胀抑制率分别为65．67％、59．70％、64．18％;对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀的抑制率,阳性对照组和龙胆草水提物高、中、低剂量组分别为27．16％、43．19％、40．53％、47．61％。对2,4-二硝基苯酚所致大鼠发热亦有显著的抑制作用,阿司匹林组、龙胆草水提物高、低剂量组动物在各时点体温明显低于空白对照组。结论：龙胆草水提物具有明显的抗炎、解热作用。     

徐长卿水提物抗肝癌作用初探

目的 探讨徐长卿水提物抗肝癌的作用。方法 以徐长卿水提物作用于体外培养的HepG-2细胞株，观察其对HepG-2细胞生长曲线的影响及评价其抗肝癌作用。结果 徐长卿水提物浓度为60g／L和30g,／L时，能使HepG-2细胞的生长受到抑制，15g／L和7．5g／h时对细胞增殖没有明显的抑制作用。结论 徐长卿水提物浓度为60g／L和30g／L时，在体外细胞培养中对HepG-2细胞增殖有较好的抑制作用。     

西替立嗪对组胺诱发过敏性鼻炎的拮抗作用

本实验主要了解西替立嗪局部应用时的抗组胺作用，为开拓该药的应用范围提供依据。１材料与方法１．１主要药品西替立嗪滴鼻液：河南医科大学药物研究所配制；磷酸组胺：中国科学院上海生物化学研究所；盐酸苯海拉明（２０ｇ·Ｌ－１）：上海中国信谊药厂，批号９０１１０...     

荷叶水提物清除自由基的ESR研究

目的研究了荷叶水提物(LLE)对羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2)的清除效果.方法采用电子自旋共振法自旋捕集技术.结果26.95μg/mL的LLE对次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生O2的清除率达65.6%,LLE浓度大于8.98 mg/mL时可以全部清除由Fenten反应体系产生的·OH.结论LLE对·OH和O2有很强的清除能力.