中药影响骨代谢分子机制研究进展

骨代谢动态平衡是维持正常骨组织功能的重要因素之一,当平衡被打破,即造成骨损伤甚至骨代谢疾病。但目前骨代谢的机制尚不完全明确,影响骨代谢的信号通路复杂,疾病的治疗也尚在研究中。中医药对骨代谢的影响得到了越来越多的关注,探索中药影响骨代谢的机制成为治疗骨代谢疾病研究的新方向。目前在骨代谢中常见的机制有OPG/RANKL/RANK信号通路、Wnt/β-catenin信号通路、TGF-β/BMP/Smad信号通路及NF-κB信号通路等,综述中药对以上几种通路作用的研究进展,为进一步探索中药治疗骨代谢疾病提供参考。     

右归丸干预相关疾病的分子信号通路研究进展

右归丸具有调节免疫功能、骨代谢、神经系统等多方面作用,在临床上治疗膝骨关节炎、卵巢早衰、骨质疏松等疾病方面效果显著。信号通路是细胞信息传递及其功能发挥的基本途径,研究发现,右归丸对疾病的治疗作用也与其对信号通路的调控作用密切相关。本文梳理了近年来右归丸治疗相关疾病所涉及的分子通路,从核转录因子相关信号通路、WNT/β-Catenin经典信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、雷帕霉素靶蛋白信号通路和转化生长因子-β信号通路对右归丸对疾病的调控作用做一综述,为右归丸的进一步临床推广应用和疗效机制研究提供参考。     

中药干预哮喘的作用机制及调控信号通路研究进展

哮喘是由多种因素引起,多种细胞及细胞组分参与的慢性气道炎症,常伴随引起气道高反应性、气道重塑。目前,哮喘已经成为一种常见的慢性呼吸系统疾病。哮喘的发生发展及药物治疗与机体信号通路调节具有密切的联系。目前研究较多的哮喘通路有MAPK通路、PI3K/Akt通路、NF-κB通路、TGF-β通路、Notch通路以及Wnt通路等。中药较化学药在治疗哮喘等慢性疾病方面具有一定的优势,为了进一步阐明中药对哮喘发病机制的干预优势及开发治疗哮喘的中药,对中药干预哮喘信号通路的作用研究进展进行综述。同时,结合文献对哮喘通路及发病机制(气道炎症、高反应性、气道重塑)的关系进行了总结。     

中医药调控相关信号通路治疗子宫内膜异位症的研究进展

子宫内膜异位症是一种慢性、进行性、雌激素依赖性疾病，可严重危害女性健康，降低生活质量。子宫内膜细胞经过免疫逃逸、存活、粘附、侵袭、血管生成等一系列过程，最终在异位位点发育和生长。NF-κB、MAPK、PI3K/Akt、Wnt/β-catenin、TGF-β/Smad、JAK/STAT等相关信号通路通过细胞膜将分子信号传递到细胞中，调控异位位点子宫内膜异位细胞的生长和发育，从而达到相应的治疗作用，因此，靶向药物的应用显得尤为重要。近年来，中医药在治疗子宫内膜异位症方面取得新的进展，研究发现，中医药可通过靶向信号分子发挥抗子宫内膜异位症活性。中医药调控相关信号通路治疗子宫内膜异位症已成为临床研究的热点。本文将中医药治疗子宫内膜异位症的作用机制及其相关信号通路的研究现状进行综述，以期为中医药治疗子宫内膜异位症的进一步研究提供参考。     

PI3K/Akt信号通路与胰岛素抵抗的研究进展

胰岛素信号转导在胰岛素生理作用的发挥中起着至关重要的作用,其减弱或受阻,使得胰岛素生理作用减弱,导致IR形成。本文概述了PI3K/Akt通路成员及功能,与IR关系及临床药物应用等研究进展。     

中药复方调控Wnt/β-catenin信号通路治疗多系统疾病的研究进展

Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路已经被证明与人体多系统疾病的发生和发展有关。近年来,寻找该信号通路的特异性调控药物,一直是研究热点。但有研究认为关键因子β-连环蛋白(β-catenin)对某些疾病是非成药靶点,不能与小分子化合物良好结合;且由于该通路调控的基因众多等原因,目前针对该通路的新药研发复杂而困难,国际上仍没有批准上市的靶向该通路的治疗药物。中药特别是中药复方具有长期的临床用药经验和多靶向性等特点,中药复方调控该通路治疗多系统疾病的研究近年来也在广泛开展。本文就近年来中药复方对该信号通路的调控研究进行文献综述,以期筛选出部分经典方剂或经验方,为下一步本课题组采用基于高通量基因测序技术的高通量基因筛查技术(HTS~2)研究和验证这些复方对该通路的调控机制和建立该通路的中药-细胞-基因数据库奠定基础。     

IRS1/PI3K信号通路在T2DM骨骼肌胰岛素抵抗中的相关研究进展

胰岛素抵抗(IR)主要发生于骨骼肌等胰岛素敏感组织,是2型糖尿病(T2DM)的关键病理环节与主要发病机制。PI3K信号通路作为胰岛素调控血糖主要途径在传导障碍时会引发IR,是T2DM相关研究的热点,且相关实验颇多,但其对IR发病与治疗的干预机制目前尚未被完全阐明。PI3K信号通路主要涉及胰岛素受体(INsR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)及葡萄糖转运体4(GLUT4)等调节因子,即IRS1/PI3K通路。从IRS1/PI3K通路干预骨骼肌IR的作用机制角度去探晰IR的发病机制,对临床探寻其防治靶点具有重要意义。文章对近年来IRS1/PI3K相关通路参与T2DM骨骼肌IR的相关研究进行了整理与归纳,以期为IR相关实验与临床防治提供文献理论参考与新思路。     

参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射阿尔茨海默病模型大鼠PI3K/AKT信号通路的影响

目的：探讨参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD模型大鼠PI3K/AKT信号通路的影响。方法：采用双侧海马注射Aβ1-42建立AD大鼠模型,参芪益智颗粒干预60天,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,HE 染色观察大鼠海马CA3 区病理形态变化,免疫组化检测海马PI3K,AKT 蛋白表达,RT-PCR 检测PI3KmRNA、AKT mRNA的相对表达。结果：与空白组相比,模型组动物逃避潜伏期明显延长、进入平台次数、穿越平台象限时间及百分比明显减少（P < 0.05）;同时海马CA3区椎体细胞排列紊乱,神经元出现明显病变;海马PI3K/AKT在蛋白及基因水平上均呈明显抑制状态（P < 0.05）。经参芪益智颗粒干预后,该模型大鼠逃避潜伏期明显缩短、进入平台次数、穿越平台象限时间明显增加（P < 0.05）。结论：参芪益智颗粒可改善Aβ1-42双侧海马注射AD模型大鼠学习认知功能,其机制可能与激活脑内PI3K/AKT信号通路有关。     

中医药调控Wnt/β-catenin信号通路防治肾间质纤维化研究进展

慢性肾脏病(CKD)已经成为世界范围内的公共健康问题,肾间质纤维化(RIF)是各种CKD重要病理特征和最终病理结果。因此,抗纤维化治疗对于延缓CKD进程,改善CKD患者预后具有重要的现实意义。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号传导途径是一种进化保守的发育信号传导途径,在胚胎发育过程中对器官形成,组织稳态和疾病进展发挥着至关重要的作用。越来越多的研究证实,Wnt/β-catenin信号通路是多种肾脏疾病的关键信号通路之一,该信号通路的激活与RIF密切相关,通过特异性调控下游靶基因的表达,如成纤维细胞、锌指转录因子1(Snail1),M2巨噬细胞,基质金属蛋白酶-7(MMP-7),纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1),肾素-血管紧张素系统(RAS)而促进肾纤维化,而靶向该信号通路,如Klotho,Dickkopf相关蛋白1(DKK1),分泌型卷曲相关蛋白1(Sfrp1),吲哚氰绿-001(ICG-001)可缓解RIF。此外,RIF中西医病理观不谋而合,中医药基于中医虚实夹杂的病因病机,以补虚、泄浊、解毒、祛瘀及标本兼治等法调控促纤维化介质,多靶点、多层次、多途径进行整体调节,抑制Wnt/β-catenin信号通路而发挥重要肾保护作用。该文综述了Wnt/β-catenin信号通路在RIF中的调控机制及靶向调控该信号通路对肾功能的保护作用,重点探讨了中医药延缓RIF进展的潜在作用,以期为防治RIF提供新靶点和新策略。     

中医药调控Wnt/β-catenin信号通路治疗激素性股骨头坏死的研究进展

激素性股骨头坏死（SNOFH）是临床上常见的一种骨科疾病，具有治愈难度大、临床预后差等特点。中国每年的SNOFH患者人数还在呈逐年上升的趋势，严重威胁人类的健康。长期不规范或短期大量使用激素（GC）是造成该病发生的重要原因，目前临床上对SNOFH多采取髋关节置换等手术治疗手段，其存在对患者伤害大、花费较高等局限性。近年来，随着对中医药研究的不断深入与创新，运用中医药方法治疗SNOFH在临床上被广泛应用。SNOFH发生的中医病机主要是肾虚血瘀，故临床多采取补肾活血类中药单体及复方对SNOFH进行治疗。且中医药具有治疗效果明显，不良反应小，花费少等优点。在此之前的研究大都从中医辨证的方向阐述中医药对SNOFH的影响，该文从分子生物及细胞生物学角度来阐述中医药对SNOFH的影响机制。分泌型糖蛋白/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路作为与骨骼密切相关的经典信号通路，其通过促进骨髓间充质干细胞更新、增强成骨细胞的活性并抑制其发生凋亡，从而调节骨组织的代谢平衡，增加骨密度，在骨形成的过程中发挥重要作用。近年来运用中药单体及复方调控Wnt/β-catenin信号通路治疗SNOFH已成...     

Electroacupuncture Promotes Neural Proliferation in Hippocampus of Perimenopausal Depression Rats via Wnt/β-Catenin Signaling Pathway

Background and ObjectivePerimenopausal depression is caused by the impaired function of the ovarium before menopause and with a series of symptoms. Electroacupuncture (EA) therapy has been demonstrated to improve clinically depression. However, the mechanism underlying its therapeutic activity remains unknown. This study aimed to investigat the effects of EA treatment on the hippocampal neural proliferation through Wnt signaling pathway.MethodsChronic unpredictable mild stress (CUMS) combined with bilateral ovariectomy (OVX) were used to establish a rat model of perimenopausal depression. The open field test (OFT) and sucrose preference test (SPT) were used to assess depression-like behaviors in rats. ELISAs were used to measure estrogen (E2), luteinizing hormone (LH) and gonadotropin-releasing hormone (GnRH) levels in the serum. RT-PCR and Western blot assay were utilized for measuring the mRNA expressions and protein expressions of GSK-3β/β-catenin.ResultsFour-week EA treatment at three points including “Shenshu” (BL23), “Baihui” (GV20) and “Sanyinjiao” (SP6) simultaneously ameliorated depression-like behaviors in rats with CUMS and OVX, whereas rescued the decreased serum level of E2 and prevented the increased serum levels of GnRH and LH. EA treatment ameliorated CUMS and OVX-induced alterations of glycogen synthase kinase-3β (GSK-3β) and β-catenin mRNA levels, β-catenin and phosphorylated β-catenin (p-β-catenin) protein levels.ConclusionsThe results showed that EA treatment promoted hippocampal neural proliferation in perimenopausal depression rats via activating the Wnt/β-catenin signaling pathway, indicating that EA may represent an efficacious therapy for perimenopausal depression.     

复方补肾活血颗粒对人骨髓间充质干细胞增殖及Wnt/PI3K-AKT信号通路相关蛋白表达的影响

目的 观察复方补肾活血颗粒药物血清对人骨髓间充质干细胞(HBMSCs)增殖的影响,探讨其干预骨质疏松症(OP)的作用机制.方法 从OP患者骨髓中分离培养HBMSCs,流式细胞仪检测HBMSCs表型和细胞周期;将HBMSCs分为正常组、2％空白血清组、2％药物血清组、5％空白血清组、5％药物血清组、8％空白血清组和8％药...     

定痫丸对急性期癫痫小鼠海马组织Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白及神经元凋亡的影响

目的研究定痫丸对急性期癫痫小鼠海马组织Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白及神经元凋亡的影响,探讨其可能的疗效机制。方法取100只8~10周龄SPF级雄性小鼠,其中20只用于模型失败备用小鼠,将80只小鼠随机分为4组,分别为模型组(A)、生理盐水组(B)、卡马西平组(C)、定痫丸组(D),每组20只,采用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品的方法制作急性期癫痫小鼠模型,A组不予干预,B组实验全程均给予生理盐水,C组予卡马西平混悬液灌胃,D组予定痫丸混悬液灌胃,应用免疫组化和Western Blot分别检测海马组织内β-Catenin(β-连环蛋白),Cyclin D1(细胞周期蛋白D1)和Wnt3a的蛋白表达水平,运用Tunel法检测神经元的凋亡情况。结果与生理盐水组比较,模型组海马组织中的β-Catenin、Wnt3a的蛋白表达明显上调(P<0.05),在海马CA1区和CA3区的凋亡阳性细胞增多(P<0.05);与模型组比较,定痫丸组中的β-Catenin、Wnt3a的蛋白表达下调(P<0.05),在海马CA1区和CA3区的凋亡阳性细胞减少(P<0.05);在4组海马组织中均未检测到Cyclin D1蛋白的表达。结论定痫丸可能是通过下调Wnt/β-Catenin信号通路上的β-Catenin、Wnt3a的蛋白的表达,抑制了海马神经元的凋亡,达到治疗癫痫的作用。     

双硫仑靶向 Wnt 和 AKT 信号通路降低卵巢癌 细胞的恶性程度及对顺铂的耐受性

〔摘 要〕 目的：探究双硫仑（DSF）对人卵巢癌细胞恶性程度及其对化疗药物敏感性的影响及相关机制。方法： 使用不同浓度 DSF（0.1 μmol·L-1 、1 μmol·L-1 、5 μmol·L-1）处理卵巢癌细胞 SK–OV–3 和 A278,四甲基偶氮唑盐 微量酶反应比色法（MTT）测定细胞活性。选取 DSF 有效浓度（5 μmol·L-1）处理细胞,通过软琼脂糖克隆形成实验、 微球形成实验检测干细胞特性,Transwell 实验检测细胞迁移,实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测 Wnt 靶基 因的信使核糖核酸（mRNA）表达,双荧光素酶法检测 Wnt 通路的转录活性,免疫印迹实验检测 PI3K/AKT/mTOR 和 RAF/MEK/ERK 的激活情况。采用 DSF（5 μmol·L-1）和顺铂联合处理 SK–OV–3 和 A2780 细胞,并使用 MTT 实 验、软琼脂糖克隆形成实验和微球形成实验检测 DSF 对顺铂药物敏感性的影响。结果：与对照组相比,DSF 处理能 够显著降低卵巢癌细胞的增殖能力（P ＜ 0.01）,降低软琼脂糖中癌细胞克隆形成能力（P ＜ 0.01）,抑制卵巢癌细 胞在悬浮培养下的微球形成（P ＜ 0.01）以及细胞的迁移能力（P ＜ 0.01）,从而降低卵巢癌细胞的恶性程度。在与 顺铂药物联合使用情况下,DSF 联合用药显著增强卵巢癌细胞对顺铂药物的敏感性（P ＜ 0.01）。机制方面的研究 表明 DSF 处理显著降低卵巢癌细胞中 Wnt 信号通路活性,同时显著抑制卵巢癌细胞中 RAF/MEK/ERK 和 PI3K/AKT/ mTOR 通路的激活。结论：DSF 处理可显著降低卵巢癌细胞的恶性程度,同时增强其对传统化疗药物顺铂的敏感性。 DSF 抑癌作用可能是通过抑制 Wnt、RAF/MEK/ERK 和 PI3K/AKT/mTOR 等癌症促进信号通路的活性来实现的。     

中药提取物调控肝纤维化信号通路研究进展

肝纤维化是由各种慢性肝脏疾病引起的共同病理过程,涉及多条细胞内外信号通路,通过干预肝纤维化信号通路来终止和逆转肝纤维化病理过程对肝纤维化的治疗有重要意义。中药在防治肝纤维化方面有着显著的优势,近年来从中药中提取出有效活性成分,干预肝纤维化信号通路已成为研究热点,中药提取物白芍总苷、橙皮苷、川芎嗪、青蒿琥酯、槲皮黄酮、熊果酸等能分别干预(TGF-β)/Smad、Wnt、NF-κB、PPAR等信号通路,为进一步研究中药抗肝纤维化的作用机制,寻找中药治疗肝纤维化的新靶点,探索中医药防治肝纤维化提供新思路。参考文献44篇。     

肉桂酸对db/db小鼠肝脏PI3K/AKT/FoxO1信号通路的影响＊

目的 通过研究肉桂酸对db/db小鼠肝脏PI3K/AKT/FoxO1信号通路的影响，探讨其在肝脏胰岛素抵抗方面的作用机制。方法 连续两日同一时间测空腹血糖，并参考体重用随机分层抽样法将18只db/db小鼠分为模型组、吡格列酮组和肉桂酸组，正常组为同周龄db/m + 小鼠，每组6只，分别给予肉桂酸溶液与等量DMSO灌胃4周。Elisa法检测血清胰岛素水平，全自动生化分析仪检测血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和游离脂肪酸（FFA），Western blot法检测肝脏组织PI3K、AKT、FoxO1的蛋白表达。结果 肉桂酸可降低db/db小鼠空腹血糖水平及血清ALT、AST、TG、TC和FFA的水平；其亦可上调肝脏组织PI3K、p-FoxO1、p-AKT蛋白表达水平，下调FoxO1蛋白表达水平。结论 肉桂酸可以改善db/db小鼠的空腹葡萄糖水平，调节血脂及改善胰岛素抵抗，其作用机制可能是通过激活PI3K/AKT/FoxO1信号通路来实现的。     

芪术颗粒对肝纤维化形成过程中磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸蛋白激酶信号传导通路的影响

目的观察芪术颗粒在肝纤维化形成过程中对磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号传导通路的影响,进一步阐明其抗肝纤维化的作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、实验对照组和芪术颗粒组,采用四氯化碳复制肝纤维化模型,造模同日即给予相应治疗,芪术颗粒组2 g/(kg?d)灌胃,体积为1.0 mL/100 g体质量,实验对照组、模型组给予等体积无菌水,正常组正常喂养。分别于造模后第1、2、4周处理、取材,Western blot免疫印迹法检测p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、Bad(Ser136)、Caspase9蛋白表达。结果与正常组比较,模型组、芪术颗粒组各时间点p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、Bad(Ser136)、Caspase9蛋白表达均升高(P0.05)。与模型组比较,第1、2、4周时芪术颗粒组p-Akt(Ser473)表达显著降低,第1、4周Caspase9表达显著降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);p-Akt(Thr308)、Bad(Ser136)表达低于模型组,但差异无统计学意义(P0.05)。结论芪术颗粒对PI3K/Akt信号传导通路的激活有调控作用,从而抑制肝纤维化的发生和发展。     

通络生骨胶囊对骨关节炎的治疗作用及其分子机制研究

目的:利用碘乙酸诱的SD大鼠骨关节炎模型,研究通络生骨胶囊对骨关节炎(OA)的治疗作用;利用IL-1β诱导的人软骨细胞(SW1353)损伤模型,研究通络生骨胶囊对软骨细胞保护作用的分子机制。方法:SD大鼠膝关节注射碘乙酸(3 mg/只)诱导形成OA模型,造模3 d后分为对照组、模型组和不同浓度的通络生骨溶液组(0.5、1、2 g/kg)。给药3周后检测血清中IL-1β的含量,膝关节软骨细胞中MMP-13的mRNA表达水平以及c-Fos蛋白表达水平。检测经通络生骨胶囊(1、5、10、50、100μg/mL)处理48 h后的IL-1β(20 ng/mL)损伤SW1353细胞8 h后的细胞活率;荧光定量PCR法检测Wnt4a、β-catenin、GSK-3β、MMP-13、ADAMTS4、Nrf2、GCLC和NQO-1的mRNA表达水平,Western-Blot的方法检测β-catenin和MMP-13的蛋白含量。结果:不同浓度(0.5、1、2 g/kg)的通络生骨胶囊溶液均可以有效降低碘乙酸诱导的IL-1β含量,抑制软骨细胞中的MMP-13和c-Fos的表达,呈剂量效应关系。在IL-1β刺激的SW1353损伤模型中,不同浓度(10、50、100μg/mL)的通络生骨胶囊溶液均能显著增强细胞活率,抑制IL-1β诱导的Wnt4a、β-catenin、MMP-13、ADAMTS4和GSK-3β的mRNA表达水平上调作用,增强IL-1β抑制的Nrf2、GCLC和NQO-1的mRNA表达水平。结论:通络生骨胶囊可以通过降低IL-1β等炎症因子的分泌,抑制IL-1β诱导的Wnt/β-catenin信号通路的活化、降低MMP-13、ADAMTS4等基质金属蛋白酶的分泌,增强Nrf2/HO-1信号通路,并从多方面提高软骨组织的抗损伤能力。     

七厘散治疗兔膝骨关节炎及其相关分子机制研究

目的:探讨七厘散对膝骨关节炎(KOA)兔的治疗作用及与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法:将清洁级新西兰兔20只随机分为对照组和七厘散组(n=10),雌雄各取5只。七厘散组采取2%木瓜蛋白酶溶液关节腔注射及复合强迫屈曲位法构建兔膝关节骨性关节炎(KOA)模型; 造模结束后七厘散组兔进行灌胃七厘散(0.25 g/kg),对照组兔给予相同体积的生理盐水,连续14 d。治疗前后对所有兔行右后肢X线拍摄,采用免疫组化法检测家兔软骨组织中Wnt4a的表达情况; 取5只幼龄SD大鼠骨膜通过密度梯度离心法分离纯化制备骨膜间质干细胞(BMSC),再取另外5只灌胃七厘散后6 h取血制备含药血清,制备所得的七厘散含药血清用于给药。实验分为正常组,七厘散血清组,DKK-1组(0.1 μg/kg),DKK-1组(0.2 μg/kg); 在第1、2、3、7、14天时,通过MTT法检测细胞增殖情况,利用RT-PCR法检测Runx2,Osteocalcin,β-catenin,Wnt4a基因的表达。结果:七厘散治疗后,七厘散组兔膝关节表面恢复光滑,少数软骨下骨出行高密度影; 七厘散含药血清组促进了BMSCs增殖,增加Runx2、Osteocalcin、β-catenin,Wnt4a基因的表达; 免疫组织化学染色观察显示,与治疗前相比,七厘散治疗后Wnt4a表达量明显增加。结论:七厘散能够通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间质干细胞的增殖从而改善兔膝骨关节炎。