EGF和TGF-α影响大鼠舌背黏膜上皮细胞周期和凋亡的比较研究

目的:探讨表皮生长因子(EGF)和转化生长因子α(TGF-α)影响舌苔形成的细胞生物学机制。方法:DispaseⅡ和胰蛋白酶处理分离舌背黏膜上皮细胞,利用含血清培养基模拟舌背黏膜上皮细胞损伤修复环境,不同浓度EGF和TGF-α作用后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果:与空白对照组相比,随时间推移,EGF和TGF-α能够促进细胞增殖活性,但无剂量依赖性。EGF能够诱导和解除S期和G1/G0期阻滞,TGF-α主要通过诱导和解除S期阻滞,调控细胞周期和凋亡。EGF和TGF-α的差异表现为高浓度(10μg/L)对S期细胞比例影响差异显著(P<0.05),而低浓度(1μg/L)对G2/M期细胞比例影响差异显著(P<0.05)。结论:EGF和TGF-α具有相同细胞表面受体,对大鼠舌背黏膜上皮细胞周期和凋亡影响不同,提示它们在舌苔形成中的功能不同。     

舌苔形成相关蛋白的研究进展

舌苔是人体的重要生理产物,舌诊亦是中医四诊中的关键环节,正逐步受到中西医学者广泛关注。在中医理论中,舌苔由胃气而生;而现代医学研究中,舌苔的差异性与舌上皮细胞的增殖与凋亡相关、与蛋白的表达调控同样相关。目前关注较多的五种舌苔调节蛋白,分别是表皮生长因子(EGF)、上皮型钙黏蛋白(E-cad)、转化生长因子-α(TGF-α)、凋亡相关基因bax、fas、TGF-β3和细胞间黏附分子-1(CD54或ICAM-1),文章综述了它们对于舌苔厚薄以及颜色的影响,以及舌苔形成相关调节蛋白的未来前景展望。     

TGF-α基因表达水平与常见舌苔形成的关系

目的:研究TGF-α基因在常见舌苔中的表达水平与舌苔形成的关系。方法:运用基因芯片和实时荧光定量RT-PCR技术检测TGF-αmRNA在常见舌苔中的表达水平。结果:基因芯片检测TGF-αmRNA在常见舌苔中表达水平具有显著性差异,TGF-αmRNA的表达水平从高到低依次为:黄厚苔>薄白苔>黄薄苔>剥苔>白厚苔>胎儿薄白苔。结论:TGF-α基因的表达水平可能是黄厚苔、黄薄苔和剥苔形成的重要因子,或者还有其他因素参与白厚苔和薄白苔的形成。     

结肠康泰对表皮生长因子受体及其配体在结肠炎大鼠肠黏膜修复中表达的影响

目的观察结肠康泰对表皮生长因子受体(EGFR)及其配体表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGF-α)在结肠炎大鼠肠黏膜修复中表达的影响。方法雌性SD大鼠60只,随机分为4组,分别为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组及结肠康泰组,以5%三硝基苯磺酸(TNBs)诱导大鼠形成结肠炎模型,免疫组化法观察EGFR、EGF、TGF-α的表达。结果结肠炎大鼠肠黏膜细胞EGFR表达代偿性增多,经灌服结肠康泰后,EGFR、EGF、TGF-α表达显著增多,与模型组比较有显著性差异(P均<0.05)。结论上调EGFR及其配体EGF、TGF-α的表达是结肠康泰修复结肠黏膜损伤的愈合机制之一。     

芦荟粗多糖对人表皮细胞体外分泌细胞因子的影响

目的:观察芦荟粗多糖对体外培养表皮细胞分泌生长因子(EGF,TGF-α,TGF-β₁)、白细胞介素(IL-1β,IL-6,IL-8)及肿瘤坏死因子(TNF)的影响。方法:用不同剂量(75,150,300,600,1 200 mg.L^-1)芦荟粗多糖作用于表皮细胞,采用ELISA和放射免疫法(RIA)测定细胞培养上清液中EGF,TGF-α,TGF-β₁,IL-1β,IL-6,IL-8,TNF的水平,并以等体积的细胞培养液处理为对照组。结果:经芦荟粗多糖作用后,表皮细胞培养液中EGF,TGF-α,TGF-β₁,IL-1β,IL-6,IL-8,TNF水平呈不同程度升高,其中EGF,TGF-α,IL-1β,IL-6,IL-8水平与对照组比较其差异具有显著性意义(P<0.05,P<0.01),且呈一定的量效关系。结论:芦荟粗多糖对表皮细胞分泌EGF,TGF-α,IL-1β,IL-6,IL-8具有促进作用。     

胃喜康煎剂对乙酸致胃溃疡大鼠细胞生长因子的影响

目的：观察胃喜康煎剂对乙酸致胃溃疡大鼠细胞生长因子的影响。方法：大鼠随机分为空白对照组（简称空白组）、模型组、雷尼替丁组、胃喜康低剂量组（简称低剂量组）、胃喜康高剂量组（简称高剂量组）5组,每组8只。造模、采集标本。放射免疫法测定表皮生长因子（EGF）、转化生长因子-α（TGF-α）含量。免疫组化检测EGF、TGF-α、表皮生长因子受体（EGFR）蛋白表达。结果：胃喜康低剂量组、高剂量组EGF、TGF-α含量增加（P〈0.05）;EGF、TGF-α、EGFR蛋白表达增加（P〈0.05）。结论：胃喜康可能通过激活EGF、TGF-α/EGFR系统而发挥抗溃疡作用。     

半四左方对大鼠慢性胃溃疡愈合质量的影响

目的:研究半四左方对慢性胃溃疡的愈合质量以及相关保护因子EGF和TGF-α的影响。方法:采用胃黏膜下醋酸注射法建立大鼠慢性胃溃疡模型。经半四左方治疗5周后,分别于第5周末和第15周末测定大鼠溃疡面积。并于第15周末取材切片观察测量再生黏膜厚度和炎细胞计数,测定胃黏膜愈合促进因子EGF和TGF-α含量。结果:在第5周末,半四左方两个剂量组大鼠溃疡面积与模型组比较均有显著减小(P0.01)。在第15周末,与阳性药物对照组比较,半四左方2个剂量组大鼠溃疡面积均有显著减小(P0.01),再生黏膜厚度明显提高,炎细胞数减少(P0.01)。半四左方可显著提高大鼠胃黏膜组织EGF和TGF-α含量(P0.01)。结论:半四左方对慢性胃溃疡愈合质量较高,有较好的抗复发作用。其机制与其提高胃黏膜愈合相关因子EGF和TGF-α的含量有关。     

枳壳健胃颗粒对乙醇致胃粘膜损伤大鼠细胞生长因子的影响

目的:探讨枳壳健胃颗粒对乙醇致胃粘膜损伤大鼠细胞生长因子的影响。方法:大鼠随机分为正常组、模型组、枳壳健胃颗粒低剂量组(2.7 g/kg)、枳壳健胃颗粒中剂量组(5.4 g/kg)、枳壳健胃颗粒高剂量组(10.8 g/kg)和雷尼替丁组(0.027 g/kg)。枳壳健胃颗粒组给予相对应的剂量,正常组与模型组给予等量的生理盐水,每天1次,连续灌胃15d。末次灌胃给药后1h,除正常组外,其余各组大鼠用75%乙醇制备大鼠胃粘膜损伤模型。放射免疫法测定胃粘膜组织中表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)、转化生长因子α(Transforming Growth Factor-α,TGF-α)的含量。实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测胃粘膜损伤周围组织中EGF、TGF-α以及表皮生长因子受体(Epithelial Growth Factor Receptor,EGFR)mRNA的表达。结果:与模型组相比较,枳壳健胃颗粒5.4g/kg和10.8g/kg能明显升高大鼠胃粘膜组织中的EGF、TGF-α含量;同时,使大鼠胃粘膜组织中的EGF、TGF-α以及EGFR mRNA表达增强。结论:枳壳健胃颗粒可能通过激活EGF、TGF-α/EGFR系统,促进胃粘膜上皮细胞增生达到修复胃粘膜组织的目的。     

大黄黄连泻心汤、理中丸对消炎痛型及水浸应激型胃溃疡寒热证模型大鼠胃组织EGF、TGF-α含量的影响

目的：探讨消炎痛型、水浸应激型胃溃疡中医寒热证模型的形成机制及寒热方剂对胃溃疡寒热证模型的基本作用机理和方证相应的客观规律。方法：采用寒热因素结合腹腔注射消炎痛和水浸应激法,分别建立大鼠胃溃疡寒、热证模型,用酶联免疫法检测大黄黄连泻心汤、理中丸对受试大鼠胃组织中EGF和TGF-α含量的影响。结果：各模型组大鼠胃组织EGF和TGF-α含量显著降低,与空白组比较具有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）;大黄黄连泻心汤可显著升高热性溃疡组大鼠胃组织EGF和TGF-α的含量,理中丸可显著升高寒性溃疡组大鼠胃组织EGF和TGF-α的含量（P〈0.05或P〈0.01）。结论：通过＂方证相应＂理论验证了＂病证结合＂的胃溃疡寒热模型复制成功,大黄黄连泻心汤可以治疗热性消炎痛型胃溃疡,预防热性水浸应激型胃溃疡的形成;理中丸可以治疗寒性消炎痛型胃溃疡,预防寒性水浸应激型胃溃疡的形成,均可通过升高大鼠胃组织中EGF和TGF-α的含量而实现。     

子午流注针法配合常规针刺对急性胃黏膜损伤家兔EGF、TGF-α的影响

目的:探讨子午流注针法配合常规针刺对急性胃黏膜损伤家兔胃黏膜的修复作用机制。方法:将40只雌雄各半的家兔随机分为5组,每组8只,正常组、模型组、常规针刺组、子午流注戌时取穴结合常规针刺组、子午流注辰时取穴结合常规针刺组。采用无水乙醇造模法制备家兔急性胃黏膜损伤模型,分组治疗7天后,剖腹取胃,ELISA法检测家兔胃黏膜表皮生长因子(EGF)、转化生长因子α(TGF-α)含量的变化。结果:与正常组比较,各造模组家兔胃黏膜EGF、TGF-α含量明显升高,(P0.01),辰时针刺组胃黏膜EGF、TGF-α含量最高,且高于常规针刺组和戌时针刺组,具有统计学差异(P0.05);常规针刺组和戌时针刺组胃黏膜EGF、TGF-α含量高于正常组和模型组。结论:常规针刺配合子午流注针法能够促进胃黏膜EGF和TGF-α的合成与分泌,对胃黏膜损伤起修复作用。     

半四左方对胃溃疡大鼠表皮细胞生长因子和转化生长因子的影响

目的根据半四左方对实验性胃溃疡大鼠胃粘膜组织EGF和TGF-α的影响,观察半四左方的抗溃疡作用并探讨其作用机制。方法采用束缚水浸应激法和醋酸法,建立大鼠胃溃疡模型。经半四左方干预后,测定大鼠溃疡指数、溃疡面积、胃粘膜组织EGF和TGF-α含量。结果半四左方可显著降低胃溃疡大鼠溃疡指数和溃疡面积(P0.01),可显著提高胃溃疡大鼠胃粘膜组织EGF和TGF-α水平(P0.01)。结论提高大鼠胃粘膜组织EGF和TGF-α含量水平可能是半四左方抗胃溃疡的作用机制之一。     

艾灸对胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子、转化生长因子-α及其受体的影响

目的:观察艾灸对应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGF-α)与表皮生长因子受体(EGFR)的影响,探讨艾灸修复胃黏膜损伤的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组12只。束缚冷应激法制作应激性胃黏膜损伤大鼠模型,在造模之前,艾灸组选取"足三里""中脘""脾俞""胃俞"行艾灸预处理8d。酶联免疫法检测胃黏膜组织中EGF、TGF-α的含量,免疫组化法检测胃黏膜EGFR蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜TGF-α的含量明显增加(P<0.05);与模型组比较,艾灸组大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论:预先艾灸"足三里""中脘""脾俞""胃俞"可上调应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR表达,可能与其对胃黏膜的保护作用有关。     

舌苔变化与凋亡相关基因分子机理的研究

目的:检测常见舌苔变化与舌上皮细胞凋亡情况及凋亡相关基因TGF-β3与fas mRNA和蛋白产物,探讨舌苔变化与舌上皮细胞凋亡、凋亡相关基因表达的关系.方法:运用TUNEL技术、原位杂交、免疫组化和图像分析技术.结果:与正常薄苔比较,剥苔fas基因过度表达伴随细胞凋亡增多,而厚苔TGF-β3基因低表达伴随细胞凋亡减少.舌苔上皮细胞中促凋基因fas、TGF-β3表达水平变化趋势与细胞凋亡水平变化趋势一致.结论:凋亡相关基因fas、TGF-β3表达水平的变化可能是影响舌苔上皮细胞凋亡并导致舌苔厚度变化的重要原因.     

厚苔形成与bax、TGF-β3基因表达及舌上皮细胞凋亡关系研究

目的:检测厚苔舌上皮细胞凋亡情况及凋亡相关基因bax、TGF-β3 mRNA和蛋白产物,以期从基因分子水平阐明厚苔的形成机理.方法:运用TUNEL技术、原位杂交、免疫组化和图像分析技术,进行定性和定量分析.结果:与正常薄苔比较,厚苔细胞凋亡减少,同时凋亡相关基因bax、TGF-β3表达水平降低.结论:促凋基因bax、TGF-β3低表达可能是引起舌苔上皮细胞凋亡减少从而导致厚苔形成的重要原因.     

常见舌苔舌上皮细胞凋亡及其相关基因表达研究

目的:检测常见舌苔舌上皮细胞凋亡情况及凋亡相关基因bax、fas、 TGF-β3 mRNA和蛋白产物,探讨舌苔厚度变化与舌上皮细胞凋亡、凋亡相关基因表达的关系.方法:运用TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记)技术、原位杂交、免疫组化和图像分析技术.结果:与正常薄苔比较,剥苔bax、fas基因过度表达伴随细胞凋亡增多,而厚苔bax、TGF-β3基因低表达伴随细胞凋亡减少.舌苔上皮细胞中促凋基因bax、fas、TGF-β3表达水平变化趋势与细胞凋亡水平变化趋势一致.结论:凋亡相关基因bax、fas、TGF-β3表达水平的变化可能是影响舌苔上皮细胞凋亡并导致舌苔厚度变化的重要原因.     

慢性萎缩性胃炎癌前病变中医证型与EGF、EGFR、TGF-α表达的相关性初探

目的探讨慢性萎缩性胃炎（CAG）癌前病变中医证型与表皮生长因子（EGF）、表皮生长因子受体（EGFR）、转化生长因子（TGF-α）表达的相关性。方法将内镜和病理检查确诊为CAG伴异型增生（Dys）和／或肠上皮化生（IM）的106例患者，辨证分型为3型，观察各型中度以上萎缩、肠化、异型增生情况及EGF、EGFR、TGF-α表达。结果各中医证型组中EGF、EGFR、TGF-α均有过度表达，血瘀热毒型、阴虚有热型EGF、TGF-α过度表达明显，气阴两虚型EGFR过度表达明显。采用善胃系列方干预治疗3个月后，EGF、EGFR、TGF-α表达明显降低。结论中医证型与EGF、EGFR、TGF-α表达存在一定的关系。     

艾灸对胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子、转化生长因子-α及其受体的影响

目的:观察艾灸对应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGF-α)与表皮生长因子受体(EGFR)的影响,探讨艾灸修复胃黏膜损伤的作用机制.方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组12只.束缚冷应激法制作应激性胃黏膜损伤大鼠模型,在造模之前,艾灸组选取“足三里”“中脘”“脾俞”“胃俞”行艾灸预处理8d.酶联免疫法检测胃黏膜组织中EGF、TGF-α的含量,免疫组化法检测胃黏膜EGFR蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜TGF-α的含量明显增加(P＜0.05);与模型组比较,艾灸组大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR蛋白表达明显上调(P＜0.05,P＜0.01).结论:预先艾灸“足三里”“中脘”“脾俞”“胃俞”可上调应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR表达,可能与其对胃黏膜的保护作用有关.     

原发性胃癌患者舌苔变化与转化生长因子α基因单核苷酸多态性位点分布的相关性

目的探讨原发性胃癌患者舌苔形成的分子遗传学机制。方法以原发性胃癌为基础病种,基于387例原发性胃癌患者和392例正常对照人群进行临床对照研究,记录受试者苔色和苔质,苔色包括白苔、黄苔和其他,苔质包括薄苔、厚苔、剥苔。利用连接酶检测反应检测受试者外周静脉血转化生长因子-α(TGF-α)基因8个单核苷酸多态性(SNP)位点分布情况,分析苔色、苔质与TGF-α基因SNP位点的相关性。结果仅携带SNP rs11466285 TC/TT基因型的原发性胃癌患者和正常对照人群苔色分布差异无统计学意义(P=0.122),其他各基因型苔色和苔质在两组受试者的分布差异均有统计学意义(P0.01)。SNP rs503314 GG基因型、rs3732253 TC/TT基因型和rs538118、rs2166975显著影响苔色变化(P0.05),SNP rs503314 GC/CC基因型和rs538118显著影响苔质变化(P0.05)。结论原发性胃癌患者舌苔形成可能与TGF-α基因多态性相关。     

表皮生长因子影响舌苔形成的机制研究进展

舌象是中医临床辨证论治的重要依据,舌苔是舌象重要组成部分。舌苔形成和变化的生理病理机制是一个重要的科学问题。近年来的研究表明,在舌苔形成过程中除了凋亡相关的基因,表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)同样发挥着重要的作用。本文从EGF影响舌苔形成的机制角度做一综述,以期为今后的研究提供思路与参考。     

不同舌苔舌上皮细胞的凋亡及相关基因分子机理研究

目的 探讨不同舌苔舌上皮细胞凋亡及其相关基因表达的关系.方法 运用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸缺口末端标记技术、原位杂交、免疫组化和图像分析技术,检测常见舌苔舌上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bax、fas、TGF-β3 mRNA和蛋白产物.结果 4种常见舌苔其舌上皮细胞均可见细胞凋亡发生,不同舌苔变化趋势与凋亡指数变化趋势相反.与正常及薄苔比较,剥苔bax、fas基因过度表达伴随细胞凋亡增多,而厚苔bax、TGF-β3 mRNA低表达伴随细胞凋亡减少.舌苔上皮细胞中促凋亡基因bax、fas、TGF-β3表达水平变化趋势与细胞凋亡水平变化趋势一致.结论 凋亡相关基因bax、fas、TGF-β3表达水平的变化可能是影响舌苔上皮细胞凋亡,并导致不同舌苔变化的重要原因.