老龄肾阳虚证的差异表达基因谱分析

目的 采用基因表达谱芯片技术,分析老龄肾阳虚证的发生与基因表达异常间的联系.方法 筛选肾阳虚证患者3名和正常对照者3名,采用美国Affymetrix公司的HG-u133Plus 2.0基因表达谱芯片,通过组间比较,筛选出老龄肾阳虚患者差异表达基因.结果 芯片数据组间比较分析后获得34条差异表达基因,聚类分析得到6条有特征性地差异表达基因,主要涉及细胞周期和凋亡,肿瘤发生以及免疫.结论 老龄肾阳虚证的发生涉及一系列免疫紊乱的复杂的过程,可能与个体的衰老存在密切关联.     

老龄肾阳虚证差异表达基因的筛选与鉴定

目的:筛选并鉴定与老龄肾阳虚证相关的差异表达基因。方法:从前期基因表达谱芯片初步获得的差异表达基因中筛选出25个基因,选取18例肾阳虚证患者和6例正常对照者,采用半定量RT-PCR检测其血液中这25个基因的表达情况,从中鉴定出与老龄肾阳虚证相关的差异表达基因。结果:有8个基因在18例老龄肾阳虚证患者和6例正常人间的表达水平存在明显差异,这8个基因主要涉及细胞周期和凋亡,肿瘤发生以及免疫。结论:老龄肾阳虚证的发生涉及一系列免疫紊乱的复杂过程,推测肾阳虚可能与肿瘤的发生存在某种程度的关联。     

肾阳虚证免疫功能相关基因筛选及其表达分析

目的以基因芯片技术从基因表达角度分析肾阳虚证与免疫功能的关联性。方法筛选出符合中医肾阳虚证诊断标准的患者4例,健康对照4例,提取mRNA,经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图像的采集与数据分析等过程,获得基因表达数据,通过SAM芯片数据分析软件筛选肾阳虚证显著表达基因。结果筛选到70条显著表达基因,其中与免疫相关的有18条。结论肾阳虚证患者存在免疫功能异常,免疫功能基因的异常表达是肾阳虚证发生的分子基础之一。     

肾阳虚证发生与免疫功能类基因的关联性研究

目的：利用基因表达谱芯片技术探讨肾阳虚证的发生与免疫功能类基因的关联性。方法：筛选肾阳虚证患者2名和正常对照2名,采用美国Affymetrix公司的HG—u133Plus 2．0基因表达谱芯片,筛选肾阳虚患者差异表达基因。结果：芯片数据两两比较分析后获得20条共同基因,基因功能注释后3个GO（基因本体）术语具有显著性,最富显著性的为GO：0002504（经由MHC-Ⅱ类分子的肽或多糖抗原的加工及提呈）。2条基因HLA—DQA1和HLA—DRB4被注释到其中的2个GO类。结论：免疫系统反应特别是MHC-Ⅱ类分子介导的抗原加工及提呈过程的异常可能是肾阳虚证发生的主要免疫机制。     

肾阳虚证患者外周血差异表达microRNAs筛选及功能预测

目的利用microRNA(miRNA)芯片筛选肾阳虚证差异表达的miRNAs。方法选择肾阳虚证患者14例作为肾阳虚证组,健康对照者14例作为正常对照组,分别抽取2组受检者外周静脉血5 m L,提取总RNA分离miRNA,应用miRCURYTM LNA Array(v.18.0)(Exiqon)芯片技术筛选2组间差异表达的miRNAs并进行分析,应用Gene ontology(GO)分析差异miRNA生物功能。结果共筛选出48条有统计学意义的差异表达miRNAs,其中29条表达上调,19条表达下调,这些差异miRNAs主要参与了免疫、信号通路、蛋白翻译合成等调节。结论肾阳虚证患者和健康对照者存在差异表达的miRNAs。     

冠心病心阳虚证相关差异表达基因分析

目的　通过基因表达谱分析冠心病心阳虚证的差异表达基因 ,探寻心阳虚证的特征性基因表达谱。方法　筛选出符合西医冠心病和中医心阳虚证诊断标准的患者 5例 ,选择同年龄段正常人 5例 ,分别取外周血 ,提取总RNA ,作基因芯片。 5例患者中经温阳通痹法治疗显效的典型病例 1例 ,治疗前后分别取外周血 ,提取总RNA ,作基因芯片。结果　患者与正常人的基因芯片差异表达谱与典型病例患者治疗前后的基因芯片差异表达谱中有 39条基因差异表达一致。结论　此 39条基因的差异表达可能是冠心病心阳虚证发生的分子生物学基础 ,对基因功能的分析 ,部分阐释了冠心病心阳虚证的病理机制。     

大鼠心肾阳虚证动物模型实验研究

目的　心肾阳虚证是中医临床上一种常见的病证 ,本实验研究欲建立与临床相应的大鼠心肾阳虚证动物模型。方法　从对中医心肾阳虚证的模拟入手 ,依据相关中医理论及心肾阳虚证的症状、体征 ,将大鼠甲状腺切除并 ip阿霉素 ,从而造成大鼠心肾阳虚模型。结果　大鼠甲状腺切除并 ip阿霉素后 ,动物左心室功能明显减退且甲状腺功能显著性低下 ,以及伴畏寒、蜷缩、呼吸微弱等 ,出现了非常类似人类心肾阳虚证的主要症状 ,认为该方法可造成大鼠心肾阳虚模型。结论　大鼠甲状腺切除并 ip阿霉素后 ,动物的症状、体征能体现所模拟的心肾阳虚证型 ,可将该方法作为中医心肾阳虚证动物模型的制作方案     

骨关节炎肾阳虚证个案的温针疗效及基因表达谱研究

目的　观察温针治疗骨关节炎肾阳虚证患者的临床疗效 ,并以基因芯片研究温针疗效的基因表达谱。方法　筛选出符合西医骨关节炎和中医肾阳虚证诊断标准的患者 1例 ,温针治疗 2周 ,治疗前后取血、提取mRNA ,经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图像的采集与数据分析等过程 ,获得差异基因表达谱。结果　温针对此例患者的治疗作用达到显效 ,对基因表达的影响涉及免疫、基础代谢、肌肉运动、生长发育和信息传导等多个方面。结论　温针治疗肾阳虚型骨关节炎疗效确切 ;应用基因芯片技术能够同时半定量地研究数千条基因的表达状态 ,可以从微观基因水平研究针刺的整体机制 ,并从分子水平判定其疗效 ,为探讨针灸的作用机制开辟新途径。     

慢性乙型肝炎肝郁脾虚证和脾胃湿热证患者的差异表达基因研究初探

目的 探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)肝郁脾虚证与脾胃湿热证患者的差异表达基因。方法 采集正常健康者（26名）及肝郁脾虚证（35例）、脾胃湿热证（34例）患者空腹肘静脉血,按Trizol法提取总RNA。采用Aglient表达谱芯片进行基因芯片检测,利用随机方差模型筛选差异基因,通过GO、Pathway、Genbank、NCBI、Geneontology等数据库对差异基因进行分析。结果 两证型间获得差异基因125个（其中66个为上调基因,59个为下调基因）,主要表现的功能为跨膜运输、硒反应离子、钙离子依赖的胞吐作用等。参与的通路中较为重要的包括影响细胞黏附分子、钙离子信号通路、白细胞穿上皮迁移等。通过动态网络构建,寻找出共表达能力差异最显著的9个基因（即LOC340508、HIST2H2BE、MPL、FLJ22536、TUBA8、NT5M、EGFL7、PTPRF、TSPAN33）,其主要涉及免疫反应、细胞生长、DNA损伤、信号转导、炎症反应等生命过程。结论慢乙肝肝郁脾虚证和脾胃湿热证两个证型间存在差异表达基因,提示中医证候分类学具有基因表达谱依据,基因组学研究方法有望为中医辨证提供客观依据。     

大鼠心肾阳虚证动物模型实验研究

目的：心肾阳虚证是中医临床上一种常见的病证，本实验研究欲建立与临床相应的大鼠心肾阳虚证动物模型。方法：从对中医心肾阳虚证的模拟入手，依据相关中医理论及心肾阳虚证的症状、体征，将大鼠甲状腺切除并ip阿霉素，从而造成大鼠心肾阳虚模型。结果：大鼠甲状腺切除并ip阿霉素后，动物左心室功能明显减退且甲状腺功能显著性低下，以及伴畏寒、蜷缩、呼吸微弱等，出现了非常类似人类心肾阳虚证的主要症状，认为该方法可造成大鼠心肾阳虚模型。结论：大鼠甲状腺切除并ip阿霉素后，动物的症状、体征能体现所模拟的心肾阳虚证型，可将该方法作为中医心肾阳虚证动物模型的制作方案。     

冠心病血瘀证差异表达基因及其启动子甲基化状态的初步研究

目的 探讨冠心病血瘀证差异表达基因及其启动子甲基化的情况.方法 以家系冠心病血瘀证患者14例为观察对象,家系健康人7例为对照,采用表达谱芯片检测冠心病血瘀证差异表达基因.再收集冠心病血瘀证患者16例和健康人7例,选择其中2个差异基因进行启动子区甲基化特异性PCR(MS-PCR)研究,初步分析冠心病血瘀证差异表达基因及其启动子甲基化状态.结果 表达谱芯片结果通过倍数变化值(FC)＞3或FC＜1/3、Call=P筛选,共获取差异表达基因26个,选择KLF5和LRP12基因进行MS-PCR,冠心病血瘀证与健康人各启动子甲基化率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 冠心病血瘀证差异基因KLF5和LRP12的启动子甲基化状态和健康人比较无明显区别.     

加载补肾抗衰片治疗肾虚痰瘀型冠心病心绞痛的临床研究

目的观察补肾抗衰片治疗肾虚痰瘀型冠心病心绞痛的临床疗效。方法采用随机数字表法,将60例符合入选标准的患者分为对照组（30例）和治疗组（30例）。对照组采用常规西药治疗,治疗组在常规西药治疗基础上加用补肾抗衰片口服,观察2周。观察两组患者治疗前后胸痹心痛证候、心绞痛症状、心电图、血脂及血小板聚集率、血栓索（TXB2）及6-酮-前列腺素F,。水平的改变。结果胸痹心痛证候改善情况治疗组总有效率为93．33％,对照组为70．OO％（P（0．05）。心绞痛改善情况治疗组总有效率为83．33％,对照组为86．67％（P〉0．05）。心电图改善情况治疗组总有效率为73．33％,对照组为76．67％（P〉0．05）。血脂及血小板聚集率变化情况,治疗组在升高高密度脂蛋白（HDL-c）及降低血小板聚集率方面均明显优于对照组（P〈O．05）。血栓素TXB2及6-酮-前列腺素F1α水平两组比较无统计学意义。结论补肾抗衰片能够明显改善肾虚痰瘀型冠心病心绞痛患者胸痹心痛证候,并能升高HDL－C及降低血小板聚集率。     

骨关节炎肾阳虚证信号转导差异表达基因分析

目的:以基因芯片技术从差异基因表达角度分析骨关节炎肾阳虚证与信号转导相关差异表达基因。方法:先后筛选出符合西医膝骨关节炎和中医肾阳虚证诊断标准的患者两组,每组8例,与8例正常对照组比较。两组病人均取血、提取mRNA,经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图像的采集与数据分析等过程,分别混合与对照组杂交作两张基因芯片,最后对数据进行信息挖掘。结果:两张芯片各获得162和75条差异表达基因,其中与信号转导相关的分别为26条和11条;两张芯片共同差异表达基因6条,与信号相关的有3条,占总数的1/2。提示:信号转导是生命活动的一种最基本和最重要的方式。细胞间信号转导异常可能在肾阳虚证骨关节炎的发生、发展过程中起着重要作用。     

运用心肾相关理论浅析冠心病合并慢性肾脏病

临床上冠心病的患者常常伴有慢性肾脏病,而肾脏病患者亦往往合并高血压、冠心病等心血管疾病。冠心病与肾脏病的密切关系与中医的"心肾相关"理论不谋而合。文章以中医视角,运用"心肾相关"理论,阐述冠心病合并慢性肾脏病患者出现上述症状的生理机制、病理联系,并确立中医治疗大法。     

冠心病阳虚血瘀证动物模型研究进展

中医类的动物模型从无到有,从单纯因素刺激到多因素刺激,从个体上升到基因研究,从不可重复的模型到重复率较高的模型,结果表明中医因素与现代物理化学方法相结合所造的动物模型无疑是未来发展探索的主流。中医类的动物模型应以中医基础理论为根本,继承传统中医经典理论是发展中医的基础与关键,在继承的同时,也应充分吸收现代科技成果,创新思维,运用多学科交叉等更多科学的方法及手段开展研究,可使中医理论得到不断地充实与完善。所以在造模的同时,面临各种挑战:1证的不客观性,故积极探索中医领域中人类未发觉或是容易忽略的异常指标是很有必要的。2证的兼证很多,故要探索如何排除干扰,做针对性更强的动物模型。3少见考虑用内因,不内外因等中医因素作用于动物模型的制作上并且缺乏稳定、可靠、可重复的病证结合的动物模型。     

坎离颗粒对冠心病心肾阳虚证患者动脉弹性影响及机制探讨

目的:研究益气温阳、活血利水中药坎离颗粒在改善冠心病心肾阳虚证患者心功能,及对动脉功能、结构的影响及其可能机制。方法:收集冠心病心肾阳虚证患者62例,随机分为西药组、坎离颗粒组。治疗前后测定心功能,同时检测动脉弹性指标,包括心脏脚踝血管指数(CAVI),踝臂指数(ABI),观察主动脉血流剪切率(SRs),动脉重构情况(颈动脉内中膜厚度等),测定血清内皮功能相关指标,包括一氧化氮(NO),内皮素-1(ET-1)等,胶原代谢相关指标为Ⅰ型胶原代谢产物氨基末端前肽(PINP)和羧基末端肽(ICTP),通过观察血流介导的内皮功能和动脉壁结构改变两方面探讨坎离颗粒对动脉影响的可能机制。结果:坎离颗粒加载治疗后,与治疗前比较,冠心病心肾阳虚证患者左室射血分数明显升高(P0.05),坎离颗粒组动脉弹性指标ABI明显提高(P0.05),与西药组比较ABI提高更显著(P0.05)。与治疗前比较,治疗后西药组SRs,一氧化氮合酶(iNOS)明显降低(P0.05)。结论:坎离颗粒加载治疗可改善冠心病心肾阳虚证患者左室收缩功能,其机制可能是由于左室收缩功能改善,动脉内血流加速,使内皮细胞表面SRs增加,从而稳定内皮功能所致。     

冠心病气阴两虚型房颤病人动态心电图分析

目的 分析冠心病气阴两虚型房颤病人动态心电图分布特征.方法 收集中国中医科学院广安门医院2006年-2010年45例住院冠心病气阴两虚型病人进行动态心电图检查,按不同时间段探讨发生长RR间期的例数与睡眠的关系,最长RR间期的持续时间,以每小时为单位统计平均心室率等,并对其进行统计分析.结果 气阴两虚型心房颤动合并长RR间期与睡眠有一定相关性,但比例不是太高;在22：00点到晨起06：00点之间,平均最慢心室率均在50次/min以下.结论心房颤动合并长RR间期与睡眠相关的为非病理性房室阻滞,而与睡眠无关时应视为病理性房室阻滞;建议中医中药服用时间在临睡前加服一次,以改善夜间自主神经功能失衡情况.     

促甲状腺激素与冠心病心气虚证的相关研究

目的探讨促甲状腺激素(TSH)与冠心病心气虚证的相关关系。方法对60例冠心病患者和20例正常人均用放射免疫分析技术检测血浆中TSH的变化。结果冠心病心气虚证组与非心气虚证组及正常组比较,血浆TSH无显著差异(P>0.05)。非心气虚组和正常对照组比较,血浆TSH亦无显著差异(P>0.05)。结论TSH与冠心病心气虚证之间具有相关性。     

冠心病心力衰竭气虚血瘀证严重程度与生物学指标的相关性

目的 探讨冠心病心力衰竭气虚血瘀证严重程度与心功能指标、能量代谢指标、凝血功能指标、炎性因子指标之间的相关性,为冠心病心力衰竭气虚血瘀证的生物学基础研究提供科学依据。方法 连续收集200例冠心病心力衰竭气虚血瘀证患者作为研究组,根据气虚血瘀证评分划为轻、中、重3组,并纳入40例同期健康体检者作为对照组,完成各组心功能指标、能量代谢指标、凝血相关指标及炎性因子等生物学指标的采集。比较各组指标,采用Spearman分析差异指标与气虚血瘀证严重程度的相关性,同时使用有序Logistic回归分析气虚血瘀证严重程度的风险因素。结果 冠心病心力衰竭气虚血瘀证患者存在能量代谢、凝血功能、炎性因子及心功能相关指标的差异,气虚血瘀证轻、中、重3组间N末端B型利钠肽原（NT-ProBNP）,6分钟步行试验（6MWT）,心肌型-脂肪酸结合蛋白（H-FABP）,凝血酶原时间（PT）,活化部分凝血活酶时间（APTT）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,一氧化氮（NO）水平差异具有统计学意义（P<0.05）;气虚血瘀证严重程度与NT-proBNP（r=0.144）,PT（r=0.173）,APTT（r=0.144）水平呈正相关,与6MWT（r=-0.287）水平呈负相关;6MWT［比值比（OR）=0.995,95%置信区间（CI）0.991~0.998）,P<0.01］,APTT（OR=1.088,95%CI 1.021~1.157,P<0.01）指标是冠心病心力衰竭气虚血瘀证严重程度的独立影响因素。结论 冠心病心力衰竭气虚血瘀证严重程度与NT-ProBNP,6MWT,H-FABP,PT,APTT,TNF-α,NO指标密切相关,且6MWT,APTT指标可作为独立影响因素,用于评估冠心病心力衰竭气虚血瘀证患者的严重程度。