经前期综合征肝气逆、郁病证结合模型大鼠外周血和不同脑区性激素及其调节激素含量变化的实验研究

目的:借助前期研制成功的PMS肝气逆、郁两证大鼠模型检测其血清与不同脑区中E2、P、PRL含量,探索"肝失疏泄"的微观机制.方法:挑出动情周期非接受期大鼠40只,随机分为5组:正常对照组、PMS肝气逆证造模组、PMS肝气郁证造模组、PMS肝气逆证造模给药组、PMS肝气郁证造模给药组.肝气逆证大鼠模型以情志刺激为主多因素复合造模法制备,肝气郁证大鼠模型以慢性束缚应激法制备,模型复制成功后肝气逆大鼠模型用经前平颗粒干预,肝气郁证大鼠模型用经前舒颗粒干预.放射免疫法测定血清及中枢中E2、P、PRL含量,比较各组差异并进行分析.结果:旷场实验中,与正常对照组比较,大鼠造模后逆模组水平得分、垂直得分及可旷场实验总分均显著增加(P＜0.05),而郁模组大鼠则显著减少(P＜0.05),用药后这一趋势得到明显纠正(P＜0.05).肝气逆证模型大鼠症状呈现其血清中E2和P含量均呈下降趋势,肝气郁证模型大鼠血清中E2和P含量亦较正常对照组明显降低.中枢内激素变化与血清中相反.结论:PMS两证症状产生可能与体内性激素及其调节激素异常波动有关,经前平、经前舒颗粒可分别对外周血及中枢上述指标的异常变化起到调节作用.     

经前舒对大鼠海马神经元细胞ERβ蛋白和基因表达的影响

目的 观察经前舒颗粒对大鼠海马神经元ERβ蛋白和基因表达的影响,探讨经前舒颗粒治疗经前期综合征(PMS)肝气郁证的作用机制.方法 以束缚造模法复制PMS肝气郁证大鼠模型,给药组给予调肝方药经前舒颗粒,模型组给予灭菌饮用水,并设不造模正常组,取各处理组血清,对体外培养大鼠海马神经元细胞进行干预;采用蛋白质印迹技术(Western blot,WB)和半定量RT-PCR技术分别对各组细胞ERβ蛋白和基因表达变化进行检测.结果 模型组血清能显著升高大鼠海马神经元ERβ蛋白和基因表达水平,western blot 和RT-PCR检测结果均显示经前舒颗粒含药血清能显著改善PMS肝气郁证模型血清干预的大鼠海马神经元ERβ蛋白和基因表达水平异常升高的状况.结论 大鼠海马神经元中的ERβ是调肝方药经前舒颗粒的作用靶点之一,经前舒颗粒可能通过降低ERβ蛋白和基因的表达水平而发挥治疗作用.     

经前期综合征肝气逆、郁病证结合模型大鼠外周血和不同脑区性激素及其调节激素含量变化的实验研究

目的:借助前期研制成功的PMS肝气逆、郁两证大鼠模型检测其血清与不同脑区中E2、P、PRL含量,探索"肝失疏泄"的微观机制.方法:挑出动情周期非接受期大鼠40只,随机分为5组:正常对照组、PMS肝气逆证造模组、PMS肝气郁证造模组、PMS肝气逆证造模给药组、PMS肝气郁证造模给药组.肝气逆证大鼠模型以情志刺激为主多因素复合造模法制备,肝气郁证大鼠模型以慢性束缚应激法制备,模型复制成功后肝气逆大鼠模型用经前平颗粒干预,肝气郁证大鼠模型用经前舒颗粒干预.放射免疫法测定血清及中枢中E2、P、PRL含量,比较各组差异并进行分析.结果:旷场实验中,与正常对照组比较,大鼠造模后逆模组水平得分、垂直得分及可旷场实验总分均显著增加(P＜0.05),而郁模组大鼠则显著减少(P＜0.05),用药后这一趋势得到明显纠正(P＜0.05).肝气逆证模型大鼠症状呈现其血清中E2和P含量均呈下降趋势,肝气郁证模型大鼠血清中E2和P含量亦较正常对照组明显降低.中枢内激素变化与血清中相反.结论:PMS两证症状产生可能与体内性激素及其调节激素异常波动有关,经前平、经前舒颗粒可分别对外周血及中枢上述指标的异常变化起到调节作用.     

淫羊藿女贞子对激素干预撤停阶段大鼠哮喘模型 HPA轴及骨代谢的影响

目的:探索淫羊藿女贞子配伍对哮喘模型大鼠激素撤停阶段下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴及骨代谢的影响。方法:比较各组血清皮质醇(COR),及骨钙素(BGP),血浆促肾上腺皮质激素(ACTH),下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量的差异。结果:与激素干预哮喘模型组比较,淫羊藿女贞子合激素干预Ⅰ,Ⅱ组血浆ACTH含量显著降低,下丘脑CRH含量无明显差异;淫羊藿女贞子合激素干预Ⅱ组血清BGP,COR含量显著升高。结论:淫羊藿女贞子对激素干预哮喘模型有改善糖皮质激素(GC)类药物对内源性GC的抑制作用,改善骨代谢。     

背部循经推拿对亚健康模型大鼠HPA轴及下丘脑CRH蛋白表达的影响

目的:观察背部循经推拿手法对慢性束缚应激亚健康模型大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA与CRH蛋白表达及血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)的影响,探讨推拿调理亚健康的作用机制。方法:将60只wistar成年大鼠随机分为3组:正常组、模型组与推拿干预组,每组20只。模型组连续21 d造模干预,每天给予3 h的连续束缚以限制其活动。干预组于每日造模后1 h内给予背部循经推拿干预。正常组正常饲养,每天亦经过前两组同样的抓取、固定而非束缚等过程。造模干预结束后采用实时-荧光定量PCR (RT-PCR)方法检测下丘脑CRH mRNA含量,Western Blot法测CRH蛋白表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清ACTH与CORT。结果:(1)与正常组比较,模型组大鼠下丘脑CRH mRNA及其蛋白表达量升高(P0.05);与模型组比较,干预组大鼠下丘脑CRH mRNA及其蛋白表达量均明显下降(P0.05)。(2)模型组血清CORT浓度高于正常组(P0.05),干预组CORT浓度较模型组低(P0.05),与正常组比较差异无显著性(P0.05);模型组、干预组血清ACTH浓度均高于正常组(P0.05),但干预组ACTH浓度低于模型组,差异有显著性(P0.05)。结论:慢性应激致亚健康模型大鼠出现下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴功能亢进,推拿干预能够下调下丘脑的CRH mRNA表达从而下调血清CORT与ACTH含量,达到拮抗亚健康状态下HPA轴的功能亢进,改善亚健康状态身心症状,这是推拿调理亚健康的作用机制之一。     

经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证大鼠大脑皮层雌激素受体表达的影响

目的:研究经前舒颗粒对经前期综合征(Premenstrual Syndrome,PMS)肝气郁证大鼠大脑皮层雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达水平的影响。方法:束缚造模法复制PMS肝气郁证大鼠模型,旷场实验对模型评价,RT-PCR和Western blot方法分别检测大鼠大脑皮层ERα、ERβ的mRNA及蛋白的表达。结果:经前舒颗粒给药后大鼠旷场实验得分显著升高,大脑皮层中ERα、ERβ的mRNA和蛋白表达均显著降低。结论:大鼠大脑皮层中ER是经前舒颗粒的作用靶点之一,经前舒颗粒可能通过降低大脑皮层中ERα、ERβ的表达而发挥疗效。     

经前期综合征肝气郁证大鼠下丘脑ERβ的表达及配体受体结合活性的研究

目的 探讨经前期综合征(PMS)肝气郁证发病的微观分子机理和中药经前舒颗粒对PMS肝气郁证的干预机制。方法 雌性SD大鼠随机分为3组:正常对照组、模型组和经前舒组。慢性束缚应激法复制PMS肝气郁证大鼠模型,以经前舒颗粒进行药物干预。放射性配体受体结合技术测定下丘脑中雌激素受体β亚型(ERβ)的结合活性变化;Western blot技术检测下丘脑中ERβ蛋白的表达。结果 与正常对照组比较,PMS肝气郁证模型组大鼠下丘脑中ERβ的配体受体结合活性、蛋白表达显著升高(P < 0.05),而经前舒组可纠正其异常升高。结论 下丘脑中ERβ表达量、配体受体结合活性的升高可能是导致PMS肝气郁证的重要病因;经前舒颗粒对下丘脑中ERβ表达、配体受体结合活性的异常变化有纠正作用。     

三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型HPA轴功能的影响

目的：观察三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型HPA轴功能的影响。方法：将SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、激素干预组、三步序贯组、第一步方组、第二步方组、第三步方组、普米克令舒组。制备激素干预后哮喘大鼠模型，于第3周起开始撤减激素用量，按照每周地塞米松0．1mg／kg速度递减，直至第7周完全撤除。放免法检测各组大鼠不同时段血浆促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质酮（COR）含量的变化。结果：与哮喘模型组比较，经过激素（地塞米松）长期干预后，激素干预组、第一、二、三步方组以及普米克令舒组在第7、9周末，其血浆CRH、ACTH和COR含量呈普遍下降，其中尤以激素干预组下降最为显著（P均〈0．01）。与激素干预组比较，三步序贯组在第7、9周末其血浆CRH、ACTH和COR含量明显升高（P〈0．05，P〈0．01），与哮喘模型组比较，二者之间均无显著性差异（P均〉0．05）。结论：三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型HPA轴功能具有明显的恢复作用。     

经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证 大鼠海马和下丘脑5-羟色胺转运体表达的影响

目的:研究经前舒颗粒对经前期综合征(PMS)肝气郁证大鼠海马、下丘脑5-羟色胺转运体(5-HTT)表达的影响,从分子水平探讨经前舒颗粒的作用机制。方法:雌性SD大鼠随机分为正常对照组、肝郁模型组、经前舒颗粒给药组(10 g.kg-1)和氟西汀给药组(0.002 5 g.kg-1),束缚造模法复制PMS肝气郁证大鼠模型,给药组大鼠ig给药5 d后,旷场实验、糖水偏好实验对模型进行评价,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)技术分别检测大鼠海马和下丘脑5-HTT的mRNA及蛋白的表达。结果:与肝郁模型组相比经前舒和氟西汀给药组大鼠糖水偏好指数及旷场实验得分均显著升高(P<0.05,P<0.01);经前舒和氟西汀给药均能显著上调海马和下丘脑中5-HTT的mRNA和蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),两给药组间无显著性差异。结论:经前舒颗粒的作用机制可能是通过调节海马、下丘脑中5-HTT的表达而发挥作用。     

针刺对胃溃疡模型大鼠CRH、ACTH的影响

目的观察针刺对胃溃疡模型大鼠血清、脑组织中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、肾上腺皮质激素(ACTH)的影响,并探讨其机制。方法雄性SD大鼠28只,随机分为模型组、空白组、针刺组、药物组,每组7只。空白组不予造模,其余3组均采取束缚-浸水(RWIS)造模法造应激性胃溃疡(SU)大鼠模型,首次造模后第3日,除空白组外各组重复上述造模过程再次造模。造模后第1日进行干预,针刺组针刺中脘、足三里穴,连续5d。药物组每日给予奥美拉唑肠溶片溶液2m L灌胃,连续5d。5d后测定大鼠血清、脑组织中CRH、ACTH水平,Guth法计算胃黏膜损伤指数。结果模型组大鼠胃黏膜充血明显,有斑点状糜烂、出血,损伤程度明显;针刺组和药物组损伤指数较模型组明显降低(P0.05)。模型组大鼠血清、脑组织中CRH、ACTH水平与空白组相比显著升高(均为P0.01),与模型组相比针刺组血清CRH、ACTH、下丘脑CRH水平显著降低(均为P0.01),垂体ACTH水平有明显下降趋势,与模型组相比药物组大鼠下丘脑CRH水平下降(P0.05),血清中CRH、ACTH、垂体ACTH水平明显有下降趋势。结论应激性胃溃疡的形成与CRH、ACTH水平升高有关。针刺可以有效进行干预,而且效果优于奥美拉唑药物。其机制可能是通过降低中枢和外周CRH、ACTH的水平,使下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴得到调节,降低机体应激反应,从而治疗应激性胃溃疡。     

电针对慢性应激抑郁模型大鼠的影响

目的:观察电针对慢性应激抑郁模型大鼠血清皮质酮(Cortisol,CORT)和促肾上腺皮质激素(Adrenocorticotropic Hormone,ACTH)的影响,探究针刺治疗抑郁症的作用机制.方法:将32只雄性SD大鼠随机分为4组,即电针组、埋线组、正常组、模型组,每组各8只.按照慢性轻度不可预见性应激刺激结合孤养的方法造模,共接受21d各种不同的刺激,于造模第ld、第14d、第21d分别称量体重,记录24 h糖水消耗量,并采用Open-field法对大鼠进行行为学评分.电针组、埋线组分别给予百会穴电针、埋线干预.应用放射免疫分析法检测大鼠血清CORT和ACTH的含量变化.结果:与正常组大鼠比较,模型组大鼠体重及糖水消耗量明显下降,行为学评分明显降低.与模型组大鼠相比,电针组大鼠的体重及糖水消耗量明显增加,行为学评分显著提高(P＜0.01),血清CORT和ACTH含量显著降低(P＜0.01).埋线组大鼠糖水消耗量及行为学垂直运动得分显著增加(P＜0.01),血清ACTH也明显降低(P＜0.01),但是CORT含量无显著性差异.结论:电针与埋线干预均可改善抑郁大鼠的行为学异常,并下调血清ACTH含量;电针还能下调血清CORT含量.提示该作用可能是其抗抑郁的重要机制.     

GBS急性期湿热证与垂体-肾上腺皮质轴的关系研究

目的:探讨吉兰-巴雷综合征(GBS)急性期湿热证与垂体-肾上腺皮质轴的关系。方法:对GBS患者进行中医辨证,分为湿热证组和非湿热证组。对两组分别进行皮质醇(COR)和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量的测定,并与正常对照组进行比较。结果:GBS急性期湿热证组COR含量高于非湿热证组和正常对照组(P<0.05),湿热证组ACTH含量低于正常对照组(P<0.05),与非湿热证组比较无统计学差异。结论:GBS急性期湿热证患者的垂体-肾上腺皮质轴功能表现为ACTH下降COR升高的非ACTH依赖性肾上腺皮质激素分泌。     

穴位贴敷对慢性疲劳综合征疲劳及内分泌功能的影响

目的观察加味四逆散穴位贴敷五脏背俞穴对肝郁脾虚型慢性疲劳综合征(CFS)患者疲劳症状及内分泌功能的影响。方法将60例符合纳入标准的患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组采用五脏背俞穴行针刺配合穴位贴敷治疗,对照组采用五脏背俞穴行单纯针刺治疗,对比治疗前后患者疲劳量表-14(FS-14)、自拟肝郁脾虚型CFS症状分级量表的积分及血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、血清总皮质醇(CORT)的变化。结果两组治疗后FS-14评分、症状分级量表评分、血清ACTH及CORT含量与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。治疗组治疗前后FS-14评分、症状分级量表评分、血清ACTH及CORT含量差值与对照组比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。治疗组总有效率为85.2%,对照组为60.7%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论加味四逆散贴敷五脏背俞穴能够有效地改善肝郁脾虚型CFS患者的疲劳症状,并改善患者的内分泌功能。     

苓桂术甘汤对心肌梗死后心室重构模型大鼠AngⅡ、Ald和AT1R的影响

目的:观察苓桂术甘汤对心室重构模型大鼠AngⅡ、Ald及AT1R的影响,探讨其干预心室重构的机制。方法:冠脉结扎法复制大鼠模型2周后,各组连续给药4周,采用ELISA法检测血清AngⅡ、Ald含量,采用Western blot法检测心肌组织AT1R表达。结果:模型组与假手术组比较AngⅡ、Ald含量显著升高,AT1R表达显著增加(P<0.01);苓桂术甘汤各剂量组与模型组比较AngⅡ、Ald含量显著降低,AT1R表达显著抑制(P<0.01)。结论:苓桂术甘汤干预心室重构的机制与调控RAAS相关因子有关。     

地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠血浆HPA轴及脑组织HSP70表达的干预效应研究

目的探讨地黄饮子加减方对大脑中动脉线栓(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠血浆下丘脑—垂体—肾上腺轴(HPA轴)含量及其脑组织热休克蛋白70(heatshock protein 70,HSP70)表达的干预效应。方法 MCAO法制作SD大鼠脑缺血模型,造模成功后第二天开始给予地黄饮子加减方浓缩煎剂灌胃,对照组灌胃等量的生理盐水,连续7天,于最后一次灌胃后1小时取材,放射免疫法检测血浆HPA轴含量,免疫组化法检测脑组织HSP70表达。结果经地黄饮子治疗后:MCAO模型大鼠血浆皮质醇(COR)含量明显低于正常组、模型组,差异有统计学意义(P0.01),促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量均明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);地黄饮子组较模型组脑组织的HSP70表达更为明显,差异有统计学意义(P0.01);模型组COR含量与脑组织HSP70表达存在显著的正相关关系,CRH、ACTH含量则与HSP70表达无明显相关性,地黄饮子组HPA轴各指标与脑组织HSP70表达无明显相关性。结论地黄饮子加减方可能通过纠正HPA轴的紊乱状态、提高大鼠脑组织HSP70表达等途径在脑缺血急性期发挥神经保护作用。     

舒郁散对慢性应激抑郁血清肾上腺皮质激素水平的影响

目的观察舒郁散对慢性应激抑郁大鼠行为的变化及对大鼠血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）含量的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、百忧解组、小剂量舒郁散组、大剂量舒郁散组。对大鼠进行21 d的慢性不可预见性应激刺激建立慢性应激抑郁大鼠的模型,采用open-field方法观察治疗前、后各组大鼠2 min内行走路线及格子交叉点数的变化,了解行为改变,用放射免疫法检测血清中CRH、ACTH和CORT含量。结果模型组大鼠水平运动与垂直运动次数明显少于对照组,说明造模成功。百忧解组、大剂量舒郁散组大鼠水平运动与垂直运动次数明显多于模型组。模型组大鼠的CRH、ACTH、CORT含量比正常组明显增加。大剂量舒郁散组ACTH,CORT与模型组比含量明显减少。结论舒郁散可以改善慢性应激抑郁大鼠行为,下调慢性应激抑郁大鼠血清CORT和ACTH含量,这可能是其抗抑郁的作用机制之一。     

地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠血清HPA轴及其脑组织细胞凋亡表达的干预效应研究

目的探讨地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠血清HPA轴含量及其脑组织细胞凋亡表达的干预效应。方法MCAO法制作sD大鼠脑缺血模型,造模成功后第二天开始给予地黄饮子加减方浓缩煎剂灌胃,对照组灌胃等量的生理盐水,连续7天,于最后一次灌胃后1小时取材,放射免疫法检测血清HPA轴含量,TUNEL免疫组化法检测脑组织细胞凋亡表达。结果经地黄饮子治疗后：MCAO模型大鼠血清COR含量明显低于正常组、模型组,差异有显著统计学意义（P〈0．01）,ACTH、CRH含量均明显高于模型组,差异有显著统计学意义（P〈0．05）,缺血侧脑组织细胞凋亡表达较模型组明显减少,差异有显著统计学意义（P〈0．01）。结论地黄饮子加减方能够通过纠正HPA轴的紊乱状态、抑制脑组织细胞凋亡表达等作用机制在脑缺血急性期发挥减轻脑损伤、改善预后的作用。     

虚寒状态大鼠cAMP变化机制的实验研究

目的观察虚寒状态下大鼠血浆第二信使环磷酸腺苷(cAMP)含量变化,探讨其可能机制。方法将大鼠随机分为正常组和虚寒模型组,虚寒组每日肌肉注射氢化可的松注射液,正常组每日肌肉注射等量生理盐水,持续14d;处死动物,检测甲状腺激素三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、反三碘甲腺原氨酸(rT3)、肾上腺皮质激素皮质醇(COR)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、腺苷酸环化酶(AC)、三磷酸腺苷(ATP)。结果虚寒状态内分泌激素T3、T4、rT3、COR水平降低,cAMP水平、AC活性降低,ATP含量升高。结论虚寒状态下甲状腺、肾上腺皮质功能降低,内分泌激素作用于AC,对AC活化降低,第二信使cAMP生成减少,其介导的生物学效应相应降低,故虚寒机体表现出抑制的状态。     

电针对去势大鼠外周血淋巴细胞雌激素受体影响的研究

目的　从生殖内分泌 -免疫网络角度探讨电针治疗围绝经期综合征的作用机制。方法　以去势大鼠为实验对象 ,取双侧三阴交、太溪、后三里穴 ,采用放射免疫法和流式细胞分析技术 ,观察电针治疗对去势大鼠血清雌激素 (E2 )、促黄体生成素 (LH)、促卵泡生成素(FSH)及外周血淋巴细胞内雌激素受体 (ER)水平的影响。结果　电针可使去势大鼠血清E2 明显升高 ,LH及FSH明显下降 ,外周血淋巴细胞内ER明显升高 ,与造模组比较有显著性差异。结论　电针可明显改善去势大鼠的生殖内分泌功能 ,并能调节免疫细胞的雌激素受体表达。