慢性乙型肝炎患者血清TGF—β、MMP-1、TIMP-1水平及其与肝纤维化程度的研究

目的：检测慢性乙型肝炎患者血清转化生长因子-β（TGF—β）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制物-1（TIMP-1）水平及变化和肝纤维化程度及其变化，探讨其血清TGF—β、MMP-1、TIMP-1与肝纤维化及其进展的关系。方法：慢性乙型肝炎患者80例，行肝穿刺活检，病理组织进行纤维化程度半定量计分，6个月后复查；检测血清TGF-β、MMP-1、TIMP-1、Ⅳ型胶原（ⅣC）、层黏连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原N端肽（PⅢP）、透明质酸酶（HA）6个月后复查。结果：肝纤维化分级不同，血清TGF-β、TIMP-1、TIMP-1／MMP-1差异显著（P〈0．01），MMP-1差异不明显（P〉0．05）；TGF-β（r=0．745，P〈0．01）、TIMP-1（r=0．623，P〈0.01）、TIMP-1／MMP—1（r=0．336，P〈0．01）纤维化分级成正相关，MMP-1与纤维化分级成负相关（r=-0．465，P〈0．01），肝纤维化与血清PⅢP、HA显著正相关；61例纤维化程度及计分无显著增加，血清ⅣC、LN、PⅢP、HA无明显变化，血清TGF—β、MMP-1、TIMP-1较低且变化不明显（P〉0.05）；19例患者炎症活动度及纤维化程度计分增加，TGF-β、TIMP-1、TIMP-1／MMP-1比值较高（P〈0．01），且升高显著（P〈0．01），MMP—1无显著差别，变化也不明显。结论：血清TGF-β、TIMP-1、MMP-1、TIMP—1/MMP-1水平及动态变化可作评估肝纤维化程度及发展指标。     

TGF—β1和Smad3在子宫肌瘤组织中的表达及意义

目的检测转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF—β1）和Smad3在子宫肌瘤组织中的表达,探讨两者的相关性。方法采用RT—PCR法分别检测子宫肌瘤组织以及邻近正常子宫平滑肌组织中TGF—β1和Smad3的mRNA表达情况。结果①TGF—β1在子宫肌瘤组织和正常子宫平滑肌组织中都有表达,且肌瘤组中TGF—β1的mRNA的表达（1．51±0．34）明显高于正常组（1．29±0．35）,差异有统计学意义（t=5．73,P=0．000）;②Smad3在肌瘤组和正常组都有表达,且肌瘤组中Smad3表达（1．36±0．20）明显高于正常组（1．13±0．27）,差异有统计学意义（t=7．34,P=0．000）;③肌瘤组中TGF—β1和Smad3的mRNA的表达呈正相关（rs=0．769,P=0．000）。结论TGF—β1能诱导子宫肌瘤纤维化,信号蛋白Smad3在其中发挥了重要作用。     

TGF—β1及其Ⅱ型受体在卵巢肿瘤中的表达

目的：探讨TGF－β1及其Ⅱ受体（TGFβ R-Ⅱ）在卵巢肿瘤中的表达及其意义。方法：采用S－P免疫组化染色方法，对30例卵巢癌，30例卵良性上皮性肿瘤及30例正常卵巢组织中的TGF－β1，TGFβ R－Ⅱ的表达进行分析。结果：（1）卵巢癌组TGF－β1阳性率明显高于正常卵巢组（P＜0．01）且二的强阳性率之间亦存在极显差异（P＜0．01）；卵巢良性上皮性肿瘤中TGF－β1阳性率与正常卵巢组比较，二的阳性率，强阳性之间均无显差异（P＞0．05），与卵巢癌组比较，二的阳性率之间无显差异（P＞0．05），但强阳性率之间有显差异（P＜0．05）。（2）正常卵巢组织的TGFβR－Ⅱ阳性率高于卵巢癌组（P＜0．05），且二的强阳性率之间存在极显差异（P＜0．01），卵巢良性肿瘤中TGFβR－Ⅱ阳性率与正常卵巢组比较，二的阳性率，强阳性率之间均无显差异（P＞0．05）；与卵巢组比较，二的阳性率之间有显差异（P＜0．05），但强阳性率之间无显差异（P＞0．05）。结论：（1）在卵巢癌中TGF－β1呈过度表达，是由于癌细胞不能激活无活性的TGF－β1，TGF－β1自身结构及功能异常或TGF－β1通过其它的生物学作用而使得其抑制癌细胞生长的作用丧失。（2）在卵巢癌中TGFβR－Ⅱ失表达，使得TGF－β1的信号传导发生障碍或TGFβR－Ⅱ是抑癌基因，由于其丧失，使肿瘤细胞有效地逃避了机体的抑制，达到了“永生”的目的。     

不同ACEI类药物对糖尿病大鼠心肌间质纤维化的影响

目的通过研究卡托普利、贝那普利、福辛普利对糖尿病大鼠心肌转化生长因子β1（TGF—β1）及基质金属蛋白酶（MMPs）的影响,探讨这3种药物对糖尿病大鼠心肌的抗纤维化作用。方法50只SD大鼠分为10只正常组,40只糖尿病组,糖尿病组链脲佐菌素注射建模。建模成功后将成功的糖尿病鼠（37只,未成功2只,死亡1只）随机分糖尿病组（n=9）、卡托普利治疗组（n=9）、贝拉普利治疗组（n=9）、福辛普利治疗组（n=10）,免疫组化法测Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,TGF-β1、基质金属蛋白酶特异性抑制物（TIMP—1）和MMP-1蛋白的表达。RT—PCR法测TIMP-1和MMP-1 mRNA的表达。结果糖尿病组心脏指数心室指数显著大于正常组（P〈0．05）,Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达也增加（P〈0．05）,存在着心肌间质纤维化,胶原Ⅰ、胶原Ⅲ、TGF—β1、TIMP-1蛋白及TIMP-1 mRNA的表达增高（P〈0．05）,MMP—1蛋白及mRNA的表达减少（P〈0．05）。经过卡托普利、福辛普利、贝那普利后,上述各异常指标均有所改善。结论3组药物通过对TGF-β1和MMPs的影响可明显改善糖尿病心肌间质纤维化。卡托普利的疗效比贝那普利与福辛普利稍差,贝那普利与福辛普利之间无差异。     

肝衰竭中血清转化生长因子-β1的检测及临床意义

目的：探讨血清转化生长因子β1（TGF-β1）对肝衰竭（LF）预后判断的意义。方法：选择LF患者135例,测定血清TGF-β1分析其水平变化与肝脏损伤程度的关系。结果：LF患者血清TGF-β1明显高于健康组,随着肝病基础之肝硬化、肝癌发展,TGF—β1水平逐渐下降（P〈0．05—0．0001）;慢性亚急性肝衰竭（SACLF）患者早中期TGF—β1水平低于晚期（P〈0．05）;死亡患者血清TGF-β1水平明显高于病情好转者（P〈0．005）。结论：LF患者血清TGF-β1的水平与疾病的严重程度及预后密切相关,它们在LF发生发展过程中可能起重要作用。     

转化生长因子β1对人脐静脉血管内皮细胞活性的影响

目的观察转化生长因子β1（TGF—β1）刺激增生性瘢痕成纤维细胞上清液对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖和趋化能力的影响。方法以增生性瘢痕成纤维细胞为实验组,正常皮肤为对照组,添加TGF—β1（10μg/L）为TGF—β1组,向TGF—β1组内添加丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（Akt）阻断剂Tricirlbine（5Ixmol／L）为Akt阻断剂组,二者皆未添加的瘢痕成纤维细胞为非干扰组,利用各组细胞上清液（条件培养基）培养HUVEC,使用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察各条件培养基对HUVEC增殖的影响,并利用细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验对HUVEC的趋化情况进行评估。结果对照组吸光度值为0．91±0．34,非干扰组1．75±0．15,TGF—B,组3．26±0．58,Akt阻断剂组1．14±0．81。非干扰组吸光度值与对照组和TGF-β1组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．01）;而Akt阻断剂组成纤维细胞增殖吸光度值明显低于TGF—β1组（P〈0．01）。细胞划痕24h后,TGF—β1组促使HUVEC划痕的闭合率较非干扰组高（P〈0．01）;而Akt阻断剂组则明显减弱HUVEC划痕闭合的速度（P〈0．01）。Transwell细胞迁移实验中,TGF—β1组迁移的细胞较非干扰组多[TGF—β1组细胞迁移数目：（1718±15）个,非干扰组：（829±2）个,P〈0．01];而Akt阻断剂组阳性细胞迁移率又明显降低[Akt阻断剂组：（935±11）个,P〈0．01]。对照组血管内皮生长因子（VEGF）（65．2±0．3）ng／L,非干扰组（87．0±0．5）ng／L,TGF—β1组（132．7±0．4）ng／L,Akt阻断剂组（70．5±0．6）ng／L。非干扰组与对照组、TGF-β1组与非干扰组、Akt阻断剂组与TGF—β1组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论TGF—β1可以通过刺激增生性瘢痕成纤维细胞旁分泌VEGF等细胞因子对血管内皮细胞增殖、趋化等能力产生影响。     

雌二醇对CCl4诱导的肝纤维化大鼠转化生长因子β1及其受体的影响

目的：通过雌二醇对CCl4诱导的肝纤维化大鼠转化生长因子β1（TGF-β1）及其Ⅰ型受体（Tβ3R Ⅰ）影响,探讨雌二醇对肝纤维化的抑制作用机理。方法：应用放免和免疫组化方法。以CCl4诱导大鼠肝纤维化动物模型,观察雌二醇对大鼠肝纤维化形成过程中TGF—β1、TβRⅠ型受体影响。结果：雌二醇可以明显降低TGF—β1的表达（P〈0．05）,对TβRⅠ型受体无明显影响（P〉0．05）。结论：雌二醇通过下调TGF—β1的表达,抑制肝纤维化形成;雌二醇可以作为一种预防肝纤维化的药物。     

缺血大鼠脑中转化生长因子-β1的表达

目的 观察大鼠脑缺血时脑内转化生长因子-β1(TGF-β)的表达及其在缺血性脑保护中的作用。方法 采用四血管短暂前脑动脉缺血(FV—TFI)模型通过免疫组化染色观察大鼠脑在缺血后1d至两周TGF—β1于不同部位的动态表达情况及缺血程度与TGF—β表达量之间的关系。结果 FGF—β1的表达呈现一动态变化过程，且不同部位的表达存在差异，表达水平与缺血损伤程度呈负相关性(r=-0．962)。结论 TGF—β1与脑缺血损伤的整个过程密切相关，并在其中起重要作用。     

白介素-1β对膀胱癌MMP9表达的影响及其信号传导通路的研究

目的：研究白介素-1β(IL-1β)对膀胱癌细胞基质金属蛋白酶9(MMP9)表达的影响及其信号传导途径。方法：明胶电泳酶谱分析法检测IL-1β对膀胱癌T24细胞MMP9表达的影响；蛋白印迹分析T24细胞丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和磷酸肌醇3羟基激酶(P13K)传导通路在1L-1β作用下的磷酸化状态；用MAPK和P13K传导通路的特异性抑制剂，对IL-1β调控膀胱癌细胞MMP9表达的阻断研究。结果：IL-1β对膀胱癌T24细胞的MMP9表达有剂量依赖性调节作用；IL-1β介导P13K下游转录因子NF-κB时间依赖性激活；P13K传导通路抑制剂Wortmannin阻断IL-1β对MMP9表达上调作用。结论：P13K传导通路的激活介导IL-1β对膀胱癌T24细胞MMP9表达的上调作用。     

地塞米松对哮喘模型大鼠肺组织病理变化和TGF-β表达的影响

目的：探讨哮喘时肺组织炎症、中性粒细胞（PMN）、肺泡Ⅱ型（AT-Ⅱ）细胞等的病理改变和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达及地塞米松对其的影响。方法：建立哮喘大鼠模型，支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞计数，光镜、电镜观察肺组织病理改变，免疫组化法检测肺组织TGF—β1的表达。结果：BALF中A组细胞总数、EOS计数显著性高于C组（P〈0．01），D组显著性高于C组但低于A组（均P〈0．01）。肺组织中A组PMN计数显著性高于C组（P〈0.01），D组显著性高于A组（P〈0．01）。A组AT-Ⅱ细胞变性、坏死、崩解、板层体空泡化现象。TGF．B1的表达水平在A组显著性高于C组（P〈0.01），D组显著性高于C组但低于A组（分另为P〈0．01，0．05）。结论：哮喘大鼠肺组织炎症细胞浸润、气道黏膜损伤、AT-Ⅱ细胞损伤、表达水平增加；地塞米松可减少上述病理改变，但对肺组织中PMN数目有增加作用，可能会加重对肺组织的损伤。     

TNFα、MMP-1及其抑制剂在肝纤维化组织中的表达及其相关性研究

目的研究肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis faetor-α，TNF—α）、基质金属蛋白酶1（Matrix metalloproteinase-1，MMP—1）及基匝金属蛋酶抑制剂1（Tissue inhibitor of metalloproteinase—1，TIMP—1）在肝纤维化发展的不同时期的表达情况及意义。方法采用免疫组化法，检测TNF—α、MMP-1和TIMP-1在52例肝纤维化发展不同时期的组织巾的表达情况，应用统计软件分析结果。结果①TNF—α、TIMP—1的阳性表达随肝组织炎症及纤维化程度增加而增强（P〈0．05）：MMP-1在各组间的表达无显著性差异（P〉0．05）。②MMP-1／TIMP-1比值与肝纤维化程度呈负相关；TNF—α的表达与MMP—1、TIMP—1的表达呈显著性正相天。结论①TNF-α对肝纤维化的形成有一定的促进作用；②MMP-1／TIMP-1系统在肝纤维化形成过程中起着重要的调控作用；③TNF-α能诱导MMP—1、TIMP—1的表达。     

TGF—β1对人牙周膜成纤维细胞合成胶原的影响

目的：观察不同浓度的转化生长因子β1对体外培养的人牙周膜成纤维细胞合成胶原的影响。方法：采用组织块培养技术进行人牙周膜成纤维细胞的体外培养,采用羟脯氨酸试剂盒来观察细胞合成胶原的情况。结果：0．1、1．0、10．0、50．0ng／ml的转化生成因子β1可以促进牙周膜成纤维细胞合成胶原,其中10ng／ml的TGF—β1在48h促胶原合成作用最明显,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：转化生长因子β1有促进人牙周膜成纤维细胞合成胶原的作用。     

HP1HSβ、肿瘤浸润/转移相关因子在乳腺癌组织中的表达

目的探讨异染色质相关蛋白1β(HP1HSβ)及5种主要的肿瘤浸润/转移相关因子纤溶酶原激活物(UPA)、纤溶酶原激活抑制物(PAI-1)、基质金属蛋白酶(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)和转化生长因子(TGFβ1)在乳腺癌组织中的表达及其与病人临床和病理特征的关系.方法采用链霉素-生物素(S-P)免疫组化法检测36例乳腺癌组织、20例正常或良性乳腺肿瘤组织中该6种因子的表达.结果HP1HSβ在正常乳腺细胞中的表达分布与乳腺肿瘤细胞大不一样.与正常和良性乳腺肿瘤组织比较,乳腺癌组织中HP1HSβ表达阳性率相似(P＞0.05),而UPA、PAI-1、MMP-9及TGFβ1均增高(P＜0.05),TIMP-1则降低(P＜0.05).在乳腺癌组织,UPA表达阳性率与肿瘤大小、组织学类型、分级、淋巴结转移呈正相关,PAI-1与肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移呈正相关,MMP-9和TGFβ1分别与肿瘤大小、淋巴结转移呈正相关,TIMP-1仅与淋巴结转移呈正相关(P均＜0.05).UPA、PAI-1与TGFβ1三者表达阳性率存在关联(P＜0.05).结论HP1HSβ异常表达可反映乳腺肿瘤存在;UPA、PAI-1、MMP-9、TIMP-1及TGFβ1均属乳腺癌浸润/转移相关指标,UPA、PAI-1、TGFβ1三者在乳腺癌浸润/转移中可能具有协同作用.     

EPA、DHA对脂多糖刺激大鼠系膜细胞表达MMPs、TIMPs及TGF-β1的影响

目的观察二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)对脂多糖(LPS)刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMC)表达基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1、TIMP-2以及转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法大鼠GMC与EPA、DHA(10,100μmol/L)作用48 h后,采用实时定量PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的mRNA表达,明胶酶谱法测定MMP-2、MMP-9活性,ELISA法测定TGF-β1含量。结果 EPA、DHA可以影响MMP、TIMP的表达,改善LPS诱导的MMP活力的降低,降低TGF-β1分泌。结论EPA、DHA可以通过改善MMP、TIMP失衡、减少TGF-β1分泌等机制,对损伤的GMC起保护作用。     

胰岛素样生长因子-1、TGF-β1与高血压病左室肥厚的关系

目的：探讨胰岛素样生长因子－1（IGF－1）、转化生长因子（TGF－β1）在高血压左室肥厚（LVH）中的诊断价值。方法：选择高血压病（EH）患者47例（LVH26例、NLVH21例），同步检测其血中IGF－1、TGF－β1、I型前胶原羧基端肽（PICP）、Ⅲ型前胶原氨基端肽（PⅢNP）水平，采用超声心动图仪测定并计算左室重量指数（LVMI）。并与正常对照组26例进行对比分析。结果：EH组血中IGF－1、TGF－β1、PICP、PⅢNP水平均较对照组显著增高，以LVH组为甚，差异有显著意义（P＜0．001）。相关分析表明：IGF－1、TGF－β1分别与PICP、PⅢNP呈正相关，IGF－1与TGF－β1呈正相关，血中各指标与LVMI亦呈正相关关系。结论：IGF－1与TGF－β1在高血压LVH中具有重要作用。     

贝那普利对肝纤维化大鼠TGF-β1和α-SMA影响的研究

目的研究贝那普利对大鼠肝纤维化程度及对肝纤维化大鼠TGF～β1和α-SMA表达的影响。方法建立40％CCL诱导的大鼠肝纤维化模型,42只大鼠分为对照组（n=10）、模型组（n=16）、观察组（n=16）。对3组大鼠肝组织进行HE染色、网状纤维染色、免疫组织化学染色,观察肝组织病理变化、纤维增生及TGF—β1和α-SMA的表达情况。结果模型组的肝纤维化程度、TGF—β1阳性表达、α-SMA阳性表达计分明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;观察组的肝纤维化程度、TGF—β1阳性表达、α-SMA阳性表达计分明显低于模型组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论贝那普利可有效降低肝组织TGF—β1和α—SMA的表达,从而抑制大鼠肝纤维化的进程。     

转化生长因子β1在心脏移植排斥反应中研究

目的研究转化生长因子-β1（TGF-1）在大鼠心脏移植排斥反应中的表达。方法以对照组（n=40）和新赛斯平组（CsA组，n=40）建立大鼠心脏移植模型，观察供心存活时间，于移植术后第1、3、5、7、9、11、14天分别取供心组织各5例，半定量RT—PCR的方法动态检测供心中TGF—1的表达情况。结果供心存活时间分别为：对照组（8．6±1．5）d，CsA组（20．4±5．1）d，两组间有显著差异（P〈0．01）。两组中TGF-1表达的时间变化趋势与供心存活时间有一致性，但在两组中的表达强度不同，对照组较CsA组弱，二者间有显著性差异（P〈0．01）。结论TGF-1的产生和表达可能因CsA的干预而增加，CsA的干预明显延长了供心的存活时间。     

11O例广东汉族人转化生长因子TGFβ1—509C／T基因多态性检测分析

目的了解广东转化生长因子TGFβ1—509C／T基因的分布特点。方法应用聚合酶链反应技术对110例正常人转化生长因子TGFβ1—509C/T基因进行扩增,以Ec081I进行限制性内切酶酶切图谱分析,并结合文献进行了不同地区问的分析比较。结果转化生长因子TGF131—509C／C、C／T、T／T表型频率分别为：0．15、0．44、0．45,转化生长因子TGFB1—509C、TGFB1—509C、T基因频率分别为：0．3545、0．6455。结论转化生长因子TGF81—509C/T基因多态性在不同地区间分布存在着明显的差异。     

降钙素对白介素-1β诱导的大鼠软骨细胞炎性反应的作用

目的：探讨降钙素对白介素-1β(IL-1β)诱导的大鼠骨关节炎(OA)中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Ⅱ型胶原、p38及P-p38表达的影响。方法分离SD大鼠关节软骨,消化、培养。采用甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞。将第2代软骨细胞分为空白对照组、IL-1β诱导组和IL-1β+降钙素治疗组,空白对照组和IL-1β诱导组分别给予完全培养基、含10 ng/ml IL-1β的完全培养基,IL-1β+降钙素治疗组先加入含10 ng/ml IL-1β的完全培养基15 min,再加入50 ng/ml降钙素,均培养24 h。用透射电镜观察细胞的超微结构,蛋白免疫印迹检测MMP-13、Ⅱ型胶原、p38、P-p38表达。实时荧光定量PCR检测MMP-13、Ⅱ型胶原 mRNA的表达。结果3组软骨细胞p38蛋白及mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0．05)。 IL-1β诱导组和IL-1β+降钙素治疗组P-p38、MMP-13蛋白及mRNA表达水平均高于空白对照组,但IL-1β+降钙素治疗组低于IL-1β诱导组( P<0．05);IL-1β诱导组和IL-1β+降钙素治疗组Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达水平低于空白对照组(P<0．05),IL-1β+降钙素治疗组高于IL-1β诱导组,但差异无统计学意义(P>0．05)。结论 IL-1β可以体外诱导大鼠软骨细胞形成OA病变。降钙素对IL-1β诱导的大鼠OA模型中软骨细胞损伤具有一定的改善作用,其机制之一可能是通过抑制p38信号通路的激活降低MMP-13的表达,减少Ⅱ型胶原的降解,从而延缓OA进程。     

TGF-β1基因多态性与糖尿病肾病患者易感性关系的探讨

目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）基因多态性与糖尿病肾病（DN）患者的关系,并分析其基因型及血清水平与DN的相关性。方法：应用聚合酶链反应一限制性片断长度多态性（PCR—RFLP）技术对52例糖尿病肾病（DN）患者、58例糖尿病（DM）患者以及30例正常成人进行TGF-β1基因＋869T／C（Leu10 Pro）多态性分析,并采用双抗体夹心ELISA法检测血浆总TGF-β1水平。结果：DN组基因型分布和等位基因频率与DM组和对照组相比,差异均有统计学意义（χ12～42=6．38、4．68、7．05、4．76,P均〈0．05）,DM组基因型分布和等位基因频率与对照组相比,差异无统计学意义（χ52～62=0．88、0．18,P均〉0．05）。基因型为TT型的人选病例血清总TGF—β1水平明显高于CC型和CT型（t2-3＝8．37、6．89,P均〈0．01）,CC型和CT型之间差异无统计学意义（t1=1．05,P〉0．05）。结论：TGF-β1基因＋869T／C（Leu10 Pro）突变可能与DN患者易感性有较密切的关系,且基因突变伴随血浆TGF—β1水平的升高。